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基于指纹图谱定性、多指标成分定量与化学计量学的枳壳质量评价

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中国实验方剂学杂志 2022年第4期28卷 138-145页

作者：钟民勇乔日发罗涛杨林杨武亮袁金斌江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004 南昌大学第一附属医院南昌330006

目的:建立枳壳色谱指纹图谱定性、多组分定量与化学计量学的整合分析方法,评价不同产区、不同基原枳壳药材的质量属性与差异。方法:采用COSMOSIL 5C_(18)-MS-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱(0~4 min,... 详细信息

目的:建立枳壳色谱指纹图谱定性、多组分定量与化学计量学的整合分析方法,评价不同产区、不同基原枳壳药材的质量属性与差异。方法:采用COSMOSIL 5C_(18)-MS-Ⅱ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱(0~4 min,19%A;4~5 min,19%~21%A;5~18 min,21%A;18~19 min,21%~28%A;19~27 min,28%A;27~28 min,28%~40%A;28~36 min,40%A;36~37 min,40%~50%A;37~42 min,50%~60%A;42~46 min,60%~95%A;46~55 min,95%~100%A),流速1 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长320 nm,进样量10μL。建立不同产地、不同基原枳壳的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,结合聚类分析(CA),主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对26批枳壳进行质量评价。开发并验证了12个组分的含量测定分析方法,并基于样品含量差异对不同产地、不同基原的枳壳进行热图聚类分析。结果:指纹图谱及含量测定的方法学验证均良好,12批枳壳的指纹图谱相似度处于0.85~0.996,标定了20个共有峰,并归属了其中14个色谱峰;定量分析的12个成分分离度、线性关系均良好,加样回收率99.2%~101.0%,RSD均≤2.0%;CA,PCA与OPLS-DA显示,不同产地枳壳的区分度较大,不同品种间也存在差异。结论:基于同一色谱条件的指纹图谱定性与多指标成分定量分析操作方便、准确可靠,结合化学计量学手段可实现对不同产地、不同基原枳壳的判别归属与质量分析,可为其整体质量控制和评价提供参考。

关键词：枳壳质量评价高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱聚类分析主成分分析产区基原

UPLC-Q-TOF/MS鉴定大鼠灌服枳壳提取物后的入血成分及其代谢产物

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中国实验方剂学杂志 2020年第21期26卷 161-172页

作者：魏飞亭程昊乔日发张敏钟民勇杨武亮袁金斌江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室基础医学院南昌330004

目的:对枳壳进行血清药物化学研究,探讨枳壳提取物在大鼠体内的药效物质基础。方法:利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术,通过比较在相同检测条件下枳壳提取物、空白血浆以及给药血浆的图谱差异,根据相对保... 详细信息

目的:对枳壳进行血清药物化学研究,探讨枳壳提取物在大鼠体内的药效物质基础。方法:利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术,通过比较在相同检测条件下枳壳提取物、空白血浆以及给药血浆的图谱差异,根据相对保留时间、精确相对分子质量、二级质谱裂解碎片及代谢产物的中性丢失等鉴定和推测大鼠灌胃给予枳壳提取物后的血中移行成分及其代谢产物。结果:枳壳提取物口服给药后,从血浆中鉴定和表征了74个入血成分,其中49个为原型成分(包括二氢黄酮类、多甲氧基黄酮、柠檬苦素类、香豆素类及生物碱类),25个为代谢产物(包括黄酮苷类和多甲氧基黄酮类化合物的葡萄糖醛酸结合物、硫酸结合物、羟基化产物,以及葡糖醛酸化与硫酸化产物)。结论:入血成分及其代谢产物可能为枳壳体内直接作用的药效成分,其中生物碱、多甲氧基黄酮和香豆素类化合物主要以原型入血并发挥作用,而指标成分柚皮苷和新橙皮苷等主要通过水解成苷元而发挥功效。

关键词：枳壳血清药物化学超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF/MS) 原型成分代谢产物二氢黄酮类多甲氧基黄酮

枳壳不同提取部位对正常小鼠与胃肠动力障碍大鼠的燥性比较及谱燥关系研究

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中国中药杂志 2021年第20期46卷 5291-5303页

作者：乔日发钟民勇张敏杨林杜习勤庹福临袁金斌江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室江西南昌330004 南昌市食品药品检验所南昌市中药质控与安全性评价重点实验室江西南昌330004 江西中医药大学药学院江西南昌330004

枳壳为常用理气中药。传统中医药理论与现代实验研究均表明枳壳具有燥性作用,但其燥性物质基础尚不明确。近年来,谱效关系研究已经被广泛运用于中药药效物质研究,其具体研究思路与方法也在不断完善。基于谱效学研究思路,该文以枳壳不同... 详细信息

枳壳为常用理气中药。传统中医药理论与现代实验研究均表明枳壳具有燥性作用,但其燥性物质基础尚不明确。近年来,谱效关系研究已经被广泛运用于中药药效物质研究,其具体研究思路与方法也在不断完善。基于谱效学研究思路,该文以枳壳不同提取部位为研究对象,首先建立其超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF-MS)指纹图谱并进行全成分分析,接着系统比较其对正常小鼠和胃肠动力障碍(GMD)大鼠的燥性作用,最后整合主成分分析(PCA)、皮尔逊双变量相关性分析和正交偏最小二乘分析(OPLS)等3种化学计量学手段,关联谱-燥,基本明确枳壳燥性成分。结果表明芸香柚皮苷、柚皮苷、柚皮素、枸橘苷、氧化前胡素和圣草酚-7-O-葡糖苷对肾脏水通道蛋白2(AQP2)、结肠水通道蛋白3(AQP3)和颌下腺水通道蛋白5(AQP5)的表达有较显著的相关性和贡献度,为枳壳中主要的燥性成分。

关键词：枳壳燥性谱-燥关系物质基础水通道蛋白胃肠动力障碍

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枳壳理气质量标志物的有效性验证

中药新药与临床药理 2022年第3期33卷 281-286页

作者：钟民勇庹福临乔日发杨林杨武亮袁金斌江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室江西南昌330004 江西中医药大学药学院中药学科研实践班江西南昌330006

目的验证枳壳理气质量标志物(Q-marker)的有效性。方法采用离体肠肌实验,应用BL-420N信息化生物信号采集与分析系统,观察记录枳壳醇提物、水提物和Q-marker混合溶液对正常小鼠离体小肠平滑肌收缩活动的影响。在体实验将KM小鼠50只随机分... 详细信息

目的验证枳壳理气质量标志物(Q-marker)的有效性。方法采用离体肠肌实验,应用BL-420N信息化生物信号采集与分析系统,观察记录枳壳醇提物、水提物和Q-marker混合溶液对正常小鼠离体小肠平滑肌收缩活动的影响。在体实验将KM小鼠50只随机分为5组,即空白组、阳性药组、枳壳醇提物组、枳壳水提物组、Q-marker混合溶液组,分别按25 mL·kg^(-1)灌胃给药,连续7 d,采用炭末推进法,测定小肠推进率和胃排空率来评价各组的药效。结果离体实验中,枳壳醇提物组、枳壳水提物组和Q-marker混合溶液组在累积给药体积为50μL和150μL时,对正常小鼠离体小肠平滑肌收缩活动均呈现促进作用,而在累积给药体积350μL时,则呈现抑制作用。在体实验中,枳壳醇提物组、枳壳水提物组与Q-marker混合溶液组对正常小鼠胃排空和小肠推进均具有显著的促进作用(P<0.01),且枳壳醇提物组、枳壳水提物组与Q-marker混合溶液组之间无显著性差异。结论枳壳Q-marker混合溶液与提取物的理气作用无显著性差异,提示该研究确定的15个枳壳理气质量标志物能够整体上代表枳壳的质量属性。

关键词：枳壳理气质量标志物有效性药效学在体实验离体实验

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吴茱萸含量测定标准的改进

江西中医药 2023年第3期54卷 64-69页

作者：袁金斌王惠鹃钟民勇张敏周立分杨林杜习勤江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004 南昌市食品药品检验所/南昌市中药质控与安全性评价重点实验室南昌330015 江西中医药大学药学院南昌330004

目的:建立以去氢吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸碱为指标成分的吴茱萸含量测定标准。方法:基于文献与前期基础,确定去氢吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸碱为吴茱萸的质控指标。对去氢吴茱萸碱的化学结构与存在型体进行系统分析,优选盐酸作... 详细信息

目的:建立以去氢吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸碱为指标成分的吴茱萸含量测定标准。方法:基于文献与前期基础,确定去氢吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸碱为吴茱萸的质控指标。对去氢吴茱萸碱的化学结构与存在型体进行系统分析,优选盐酸作为流动相添加剂,改善其色谱峰的对称性。优化流动相pH值、组成及梯度条件,建立并验证基于上述3个指标成分的HPLC分析方法。对主产区主流品种的吴茱萸进行含量分析,初步拟定其含量限度值。结果:流动相pH=1时,去氢吴茱萸碱色谱峰的对称性符合药典要求。优化的色谱条件下,各化合物分离良好,色谱峰对称因子均在0.95~1.05,柱分离效能与分析时间均优于现行药典方法。经25批次样品的分析验证,本法与药典方法无显著性差异。初步拟定含量限度值为:吴茱萸碱和吴茱萸次碱的总量不低于0.15%,去氢吴茱萸碱0.30%,。结论:解决了去氢吴茱萸碱的色谱峰拖尾问题;所建立的含量测定方法简单、快速、准确、可靠;建议的含量测定标准具有更好的专属性、可测性与可行性,可为新版药典中吴茱萸质量标准的提升提供依据与参考。

关键词：吴茱萸含量测定高效液相色谱法质量标准去氢吴茱萸碱吴茱萸次碱吴茱萸碱

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吴茱萸炮制的历史沿革、研究现状与展望

华西药学杂志 2021年第2期36卷 228-232页

作者：张敏乔日发钟民勇杨武亮袁金斌江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室江西南昌330004 南昌市食品药品检验所南昌市中药质控与安全性评价重点实验室江西南昌330015

吴茱萸有小毒,炮制可以降低其毒性。文章通过对历代古籍和现代文献的整理分析,梳理了吴茱萸炮制的历史沿革,总结了炮制对吴茱萸毒性、药效及化学成分的影响,展望了未来的研究方向和趋势。应加强对吴茱萸炮制减毒的物质基础与作用机制的... 详细信息

吴茱萸有小毒,炮制可以降低其毒性。文章通过对历代古籍和现代文献的整理分析,梳理了吴茱萸炮制的历史沿革,总结了炮制对吴茱萸毒性、药效及化学成分的影响,展望了未来的研究方向和趋势。应加强对吴茱萸炮制减毒的物质基础与作用机制的研究,以期为吴茱萸的安全应用提供更好的解决方案。

关键词：吴茱萸炮制综述本草考证历史沿革研究现状展望机制减毒

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枳壳、枳实胃肠动力作用及其机制的研究概况

江西中医药 2021年第12期52卷 68-71页

作者：钟民勇乔日发魏飞亭张敏杨武亮袁金斌江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室南昌330004

枳壳、枳实是临床上经常使用的理气药。临床上枳壳用于理气宽中、行滞消胀,枳实则用于破气消积、化痰散痞。现代药理学研究显示,它们均具有升高血压、强心、调节胃肠道和心血管等药理效应。现对近年来枳实、枳壳的胃肠动力作用及其机制... 详细信息

枳壳、枳实是临床上经常使用的理气药。临床上枳壳用于理气宽中、行滞消胀,枳实则用于破气消积、化痰散痞。现代药理学研究显示,它们均具有升高血压、强心、调节胃肠道和心血管等药理效应。现对近年来枳实、枳壳的胃肠动力作用及其机制进行综述,以期为枳实、枳壳进一步的开发应用提供参考。

关键词：枳实枳壳胃肠动力作用综述

中国华东汉族人群细胞色素酶CYP3A4新基因型的发现与序列分析

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中国临床药理学与治疗学 2008年第10期13卷 1154-1157页

作者：张评浒张娟高逸湘钟民尚靖张陆勇中国药科大学江苏省新药筛选中心江苏省人民医院麻醉科皖南医学院附属弋矶山医院安徽省药物临床评价中心

目的:探讨中国华东地区汉族人群细胞色素P4503A4基因的基因型差异。方法:采用RT-PCR与DNA测序技术相结合的方法对来自华东地区的6份汉族成人肝组织P4503A4基因的cD-NA进行了扩增与序列分析。结果:本研究从6份汉族人肝组织中首次检测到... 详细信息

目的:探讨中国华东地区汉族人群细胞色素P4503A4基因的基因型差异。方法:采用RT-PCR与DNA测序技术相结合的方法对来自华东地区的6份汉族成人肝组织P4503A4基因的cD-NA进行了扩增与序列分析。结果:本研究从6份汉族人肝组织中首次检测到了一种新的基因型,该基因型存在三处氨基酸突变和一处核苷酸缺失,即第71位氨基酸发生V(GTG)→A(GCG)突变;第225位氨基酸发生V(GTC)→I(AIC)的突变;第393位氨基酸发生W(TGG)→V(GTG)突变;第671～673位核苷酸CAG发生缺失。结论:本研究首次发现中国华东地区汉族人群存在一种CYP3A4新基因型。

关键词： P450 CYP3A4 突变基因型