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桑蚕丝胶/柞蚕丝素/明胶基共混抗菌膜的制备及表征

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丝绸 2022年第12期59卷 22-31页

作者：陈文凯王新冼俊思钟杨生陈芳艳华南农业大学动物科学学院广州510642

为了制备出安全、抗菌性能优的生物膜,文章以桑蚕丝胶、柞蚕丝素和明胶为生物基材,聚乙二醇200作为交联剂,制备桑蚕丝胶/柞蚕丝素/明胶基(BS-TSF-GEL)共混膜。通过设计单因素试验和正交试验优化BS-TSF-GEL共混膜的制备工艺,对膜的结构... 详细信息

为了制备出安全、抗菌性能优的生物膜,文章以桑蚕丝胶、柞蚕丝素和明胶为生物基材,聚乙二醇200作为交联剂,制备桑蚕丝胶/柞蚕丝素/明胶基(BS-TSF-GEL)共混膜。通过设计单因素试验和正交试验优化BS-TSF-GEL共混膜的制备工艺,对膜的结构与性能进行表征,并利用吸附的方式载入抗菌肽,获得抗菌生物膜。研究结果表明,BS-TSF-GEL共混膜优化后的配方为体积比2︰1的桑蚕丝胶(4.50μg/mL)/柞蚕丝素(27.5 mg/mL)混合液,聚乙二醇200和明胶溶液(360 mg/mL),它们在总体系中占比分别为35%、40%和25%。所制备的BS-TSF-GEL共混膜溶失率为34.62%,断裂伸长率为34.15%,断裂强度为578.8 kPa。傅里叶红外光谱及X-射线衍射结果表明,BS-TSF-GEL共混膜以SilkⅡ为主,并伴有少量的SilkⅠ结构;BS-TSF-GEL共混膜呈淡黄色,表面含有微孔,负载抗菌肽的共混膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有良好的抑制作用,有望在伤口敷料等一次性使用的生物医用材料领域得到应用。

关键词：桑蚕丝胶柞蚕丝素明胶聚乙二醇共混膜抗菌性能

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桑叶粉的润肠通便作用

蚕业科学 2023年第3期49卷 277-282页

作者：韩伟林冼俊思李容娣杨玉莲钟杨生陈芳艳华南农业大学动物科学学院广州510642

为了研究桑叶粉的润肠通便作用,文中对便秘模型小鼠给食低、中、高剂量桑叶粉(饲料中分别添加5%、10%、15%桑叶粉),通过测定小鼠采食量、体重增加、粪便数、粪便含水率、血清乙酰胆碱(acetylcholine, Ach)含量、胃动素(motilin, MTL)含... 详细信息

为了研究桑叶粉的润肠通便作用,文中对便秘模型小鼠给食低、中、高剂量桑叶粉(饲料中分别添加5%、10%、15%桑叶粉),通过测定小鼠采食量、体重增加、粪便数、粪便含水率、血清乙酰胆碱(acetylcholine, Ach)含量、胃动素(motilin, MTL)含量、一氧化氮(NO)含量,研究桑叶粉的润肠通便作用。结果表明,3个剂量组的粪便数和粪便含水率均显著高于便秘模型组(P<0.05),且3个剂量组的粪便数均达到或超过正常对照组的水平;低、中剂量桑叶粉组血清Ach和MTL含量显著高于便秘模型组(P<0.05),达到正常对照组水平,同时NO含量显著降低(P<0.05);添加桑叶粉对小鼠的采食量无影响,但会影响小鼠体重。本研究可为桑叶润肠通便功能产品的开发利用提供参考。

关键词：桑叶粉便秘模型小鼠盐酸洛哌丁胺润肠通便

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基于近红外漫透射光谱信息的蚕茧雌雄检测

农业机械学报 2015年第12期46卷 280-284页

作者：代芬吴玲叶观艳钟杨生洪添胜黄晓燕南方农业机械与装备关键技术教育部重点实验室广州510642 华南农业大学工程学院广州510642 华南农业大学动物科学学院广州510642

采用Maya2000pro型近红外光谱分析仪,以3个品种共491粒蚕茧为实验对象,进行了450~1 050 nm波段内的漫反射和漫透射光谱采集和比较。随后对漫透射光谱数据进行了均值中心和一阶求导预处理,并分别对3个品种以及全部样本通过偏最小二乘判... 详细信息

采用Maya2000pro型近红外光谱分析仪,以3个品种共491粒蚕茧为实验对象,进行了450~1 050 nm波段内的漫反射和漫透射光谱采集和比较。随后对漫透射光谱数据进行了均值中心和一阶求导预处理,并分别对3个品种以及全部样本通过偏最小二乘判别法（PLSDA）进行了判性预测分析。结果表明：相对于漫反射光谱,漫透射光谱更能反映出雌雄蚕蛹组分特性的不同;基于漫透射光谱的PLSDA预测结果显示,分别针对3个品种的鉴别结果（试东A·华3x C·7532判性真雌性率、真雄性率和精确度分别为89.796%、92.424%和90.854%;化中2·华3x C·7532判性真雌性率、真雄性率和精确度分别为96.250%、94.253%和95.210%;9·芙x7·湘判性真雌性率、真雄性率和精确度分别为97.260%、91.954%和94.375%）和全部样本混在一起的雌雄鉴别结果（真雌性率、真雄性率和精确度分别为94.024%、92.917%和93.483%）都较好。

关键词：蚕茧雌雄检测近红外光谱偏最小二乘判别法漫反射漫透射

酸、碱和盐处理对柞蚕丝素短纤维制备率和形貌特征的影响

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广东农业科学 2022年第3期49卷 143-150页

作者：陈文凯王新林碧敏钟杨生林健荣陈芳艳华南农业大学动物科学学院广东广州510642 华南农业大学公共基础课实验教学中心广东广州510642

【目的】筛选适宜方法制备柞蚕丝素短纤维,为开发新型生物材料提供更多选择。【方法】利用HCl、NaOH、FeCl_(3)溶剂水解柞蚕丝素,探究溶剂浓度、水解时间、水解温度对短纤维制备率的影响,通过倒置显微镜观察短纤维的形貌和结构特征。【... 详细信息

【目的】筛选适宜方法制备柞蚕丝素短纤维,为开发新型生物材料提供更多选择。【方法】利用HCl、NaOH、FeCl_(3)溶剂水解柞蚕丝素,探究溶剂浓度、水解时间、水解温度对短纤维制备率的影响,通过倒置显微镜观察短纤维的形貌和结构特征。【结果】HCl、NaOH和FeCl_(3)溶剂制备的柞蚕丝素短纤维得率分别为26.5%、23.56%和21.8%,3种方法所得短纤维制备率相近;观察3种柞蚕丝素短纤维的形态特征,FeCl_(3)水解法制备的短纤维颜色较深,呈细长短杆状,长短不一,两端切口为平面或斜面;NaOH水解法制备的短纤维颜色较浅且透明,呈无规则片状;HCl水解法制备的短纤维表观形貌较优,呈细长短杆状,颜色较浅,表面较为光滑,两端切口平整,长度较整齐,主要分布在50~125μm之间(占比52.68%)。【结论】HCl水解法制备柞蚕丝素短纤维的工艺条件为:HCl浓度3 mol/L、水解时间40 min、水解温度90℃,水解条件较为温和,所得短纤维较为理想,可为开发生物材料提供一种新的载体。

关键词：柞蚕丝素短纤维酸水解制备率形貌结构

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转抗菌肽基因辣椒蛋白质检测技术研究

卫生研究 2003年第2期32卷 134-137页

作者：刘建军邓平建房师松赵锦钟杨生廖富苹深圳市疾病预防控制中心深圳518020 华南农业大学蚕桑系

以转抗菌肽BD基因辣椒为材料 ,研究建立转基因食品中外源目的蛋白的检测技术 ,并建立对其忠实表达状况和安全性进行评价的模式。以柞蚕蛹免疫血淋巴作为标准 ,对照检测转抗菌肽辣椒目的蛋白表达的忠实性 ,采用针对转基因食品技术特点而... 详细信息

以转抗菌肽BD基因辣椒为材料 ,研究建立转基因食品中外源目的蛋白的检测技术 ,并建立对其忠实表达状况和安全性进行评价的模式。以柞蚕蛹免疫血淋巴作为标准 ,对照检测转抗菌肽辣椒目的蛋白表达的忠实性 ,采用针对转基因食品技术特点而预先设计的技术路线进行分析检测。研究和检测步骤为 :目的蛋白经粗提 ,达到初步纯化。再用两次CM Sepharose FF离子交换柱层析进行中度纯化。纯化产物通过测定抗菌活性、电泳及生物自显影、质谱进行鉴定。系统的检测结果表明 ,以抗菌肽目的基因构建的重组体在导入辣椒后 ,所表达的外源目的蛋白与对照标准蛋白的理化性质、抗菌活性、分子量一致 ,说明在该转基因辣椒中抗菌肽目的基因的表达是忠实的 ,与期望值相符。本研究建立了目的蛋白抗菌肽D的分离纯化及鉴定技术 ,建立了转基因辣椒外源目的蛋白的鉴定方法。

关键词：转基因食品抗菌肽D 转基因辣椒鉴定

SVM自助重加权采样的蚕茧雌雄特征波长选择

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光谱学与光谱分析 2022年第4期42卷 1173-1178页

作者：陈楚汉钟杨生王先燕赵懿琨代芬华南农业大学电子工程学院广东广州510642 华南农业大学动物科学学院广东广州510642 广东省蚕业技术推广中心广东广州510640

使用近红外光谱鉴别蚕茧雌雄设备成本较高,挑选有用特征可以减少成本。雌雄蚕茧的近红外光谱存在着共线性的关系,因此提出了一种包裹式的特征选择方法,基于支持向量机的自助重加权采样(BRS-SVM)的特征选择方法。使用NirQuest512近红外... 详细信息

使用近红外光谱鉴别蚕茧雌雄设备成本较高,挑选有用特征可以减少成本。雌雄蚕茧的近红外光谱存在着共线性的关系,因此提出了一种包裹式的特征选择方法,基于支持向量机的自助重加权采样(BRS-SVM)的特征选择方法。使用NirQuest512近红外光谱仪采集了蚕茧的漫透射近红外光谱。用试验集的全波段建模得到特征重要度热图,并通过热图得到重要特征波段的范围。然后在重要特征波段范围内,分别用BRS-SVM、基于SVM的特征排序方法(MBR-SVM)、基于逻辑回归的特征排序方法(MBR-LR)、递归特征消除法(RFE)、连续投影算法(SPA)和遗传算法(GA)挑选单波段特征和连续波段面积特征,再分别用支持向量机(SVM)和逻辑回归(LR)建立雌雄分类模型。通过特征重要性热力图发现,蚕茧雌雄分类重要区域在900~1 399 nm内,用此波段范围建立SVM模型,试验集准确率为99.40%。用BRS-SVM挑选5个单波段特征,然后再用SVM建模,验证集准确率为93.88%,高出其他特征选择方法5%~12%,测试集准确率为89.56%,测试集准确率高出其他特征选择方法2%~4%。用BRS-SVM挑选27个单波段特征,建立SVM雌雄分类模型测试集准确率为94.97%,准确率达到生产条件要求。用BRS-SVM挑选的14个连续波段面积特征,再用SVM建模,测试集准确率为94.43%。在挑选少量特征情况下,我们提出的BRS-SVM要优于其他方法。用BRS-SVM挑选少量的特征,可以建立性能良好的蚕茧雌雄分类模型,有效减少了成本,具有重要的现实意义。

关键词：蚕茧近红外光谱特征选择

甘蔗渣提取物结合淀粉基抗氧化保鲜膜的制备及对牛肉保鲜效果的研究

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甘蔗渣提取物结合淀粉基抗氧化保鲜膜的制备及对牛肉保鲜效果的研...

作者：钟杨成都大学

学位级别：硕士

预制菜为当今忙碌的社会生活提供了便利,随着政府政策的倾斜,预制菜行业飞速发展。但预制菜原材料和储存条件要求较高,在加工和贮藏过程易受到微生物代谢和脂肪氧化的因素影响。这些影响因素可以通过食品包装进行改善,但市面上现有保鲜... 详细信息

预制菜为当今忙碌的社会生活提供了便利,随着政府政策的倾斜,预制菜行业飞速发展。但预制菜原材料和储存条件要求较高,在加工和贮藏过程易受到微生物代谢和脂肪氧化的因素影响。这些影响因素可以通过食品包装进行改善,但市面上现有保鲜膜对食品抗氧化能力弱且多为石油基材料,对环境存在威胁,“限塑令”的颁布意味着可降解材料进入研究视线。甘蔗渣作为一种富有的农产品副产物具有可生物降解性,丰富的酚酸含量使其抗氧化能力强,但提取方法和提取物成分不明确。因此本文以甘蔗渣为原材料,采用酸碱提取法进行酚酸提取并使用UPLC进行成分定量研究,再以流延法制备了掺含甘蔗渣提取物的淀粉基抗氧化保鲜膜,对保鲜膜结构、抑菌性能、抗氧化能力和细胞毒性进行表征。将保鲜膜应用于牛肉保鲜贮藏研究,对牛肉贮藏期内基础品质、营养成分、质构特性和挥发性风味物质进行比较。主要内容和结果如下:（1）不同提取方法对甘蔗渣提取物中酚酸含量的影响。采用碱提取法和酸提取法提取甘蔗渣的酚酸,并采用UPLC定性、定量分析提取物中酚酸种类及含量。结果显示,两种提取物中均有19种酚酸,主要为对香豆酸、阿魏酸、丁香酸、香草醛、香草酸和4-羟基苯甲酸。酸提取物酚酸含量显著高于碱提取物（p<0.05）,其中对香豆酸含量分别为2710.74±11.27μg/g、2505.16±10.59μg/g。对两种提取物多酚、黄酮含量进行检测发现提取物中含量显著高于原样（p<0.05）,其中酸提取物总多酚含量为206.13±0.76μg/m L,总黄酮含量为260.33±1.66μg/m L。为保证提取物作为有效抗氧化成分,对两种提取物进行体外抗氧化能力实验,结果显示:酸提取物80μL/m L时对于DPPH的清除率趋于稳定,在6μL/m L后对ABTS的清除率无显著性变化,3 m L能有效清除羟自由基70%以上,仅1μL/m L能清除超阴离子自由基80%。（2）掺含甘蔗渣提取物的淀粉基抗氧化保鲜膜制备与表征。研究结果表明,利用1:1的淀粉和PVA能形成性能良好的基膜。将提取物掺入壳聚糖形成抗氧化层,二者结合形成复合膜,通过红外、XRD、扫描电镜的检测发现,复合膜具有完全的双层结构,但并未出现分离,在双层结构下形成了紧密的联系。随着提取液浓度的增加CO透过率逐渐降低,从0.42 g/（m.h）降低至0.24 g/（m.h）,O透过率极低,易形成“高CO,低O”环境,利于食品保鲜。通过抑菌能力和抗氧能力分析对比,随着浓度的增加抑菌效果越强,CS-2/ST膜抑制大肠杆菌的抑菌圈为28.0 mm,金黄色葡萄球菌的抑菌圈为15.0mm;成膜后DPPH自由基清除率增加至49.31±1.48%,ABTS自由基清除率增长至56.01±2.76%。细胞毒性检测中细胞的相对生长率随着时间的延长而呈现略微下降的趋势,但所有复合膜的细胞存活率均高于90%,具有良好的生物相容性。（3）甘蔗渣提取物-淀粉基抗氧化保鲜膜较市售保鲜膜对熟牛肉保鲜效果的影响。贮藏15 d周期内,K1和K2实验组水分活度一直处于较高水平,p H均处于鲜肉范围;贮藏后期,牛肉红度值无显著降低,保持了牛肉食用口感。在抗氧化成分作用下,菌落总数显著低于保鲜膜实验组K1于第12 d菌落总数超过5.01 lg CFU/g,K2在第12 d时为4.85±0.12 lg CFU/g,第15 d为5.17±0.14 lg CFU/g。牛肉中氨基酸含量检测对比后发现,复合膜实验组中K0.5和K2组氨基酸含量均出现显著降低,K1组明显增加。在脂肪酸方面,棕榈酸和油酸含量最高,复合膜中K1组表现最佳,能有效保护牛肉在贮藏过程中脂肪酸含量降低。挥发性风味物质共检测出105种,主要为28种醇类,22种醛类,22种烷类。经过主成分分析发现,PC2上K2实验组受醇类、醛类、酮类和烷类的影响,K2组醇类含量高于K0.5和K1组,但同时PC3上K1更接近于未贮藏的初始组,K2组含量低于K1组,受醚、醛、酸、酮类的影响,主要为牛肉腐败变质产生的气味,说明K2组风味保持更优于其他复合膜实验组。

关键词：甘蔗渣淀粉抗氧化膜熟牛肉保鲜效果

家蚕细胞周期蛋白基因BmCcnl1的克隆及表达分析

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昆虫学报 2010年第12期53卷 1325-1332页

作者：范兰芬钟杨生林健荣华南农业大学动物科学学院广州510642

家蚕Bombyxmori由受精卵到完成胚胎发育孵化的过程中,细胞进行大量的分裂和分化,然而滞育性卵的胚胎细胞分化至G2期便停滞在此阶段。为了探索这一发育阶段细胞内的分子调控,本研究以人Homo sapiens的细胞周期蛋白基因cyclin L1为模板,... 详细信息

家蚕Bombyxmori由受精卵到完成胚胎发育孵化的过程中,细胞进行大量的分裂和分化,然而滞育性卵的胚胎细胞分化至G2期便停滞在此阶段。为了探索这一发育阶段细胞内的分子调控,本研究以人Homo sapiens的细胞周期蛋白基因cyclin L1为模板,成功克隆了家蚕同源基因BmCcnl1(GenBank登录号:FJ889988)。BmCcnl1基因开放阅读框(open reading frame,ORF)全长1254bp,编码417个氨基酸。利用Protean软件分析得出BmCcnl1蛋白预测分子量为49kDa,等电点为9.84。利用DNA重组技术构建了BmCcnl1基因的重组表达载体pET-21d-BmCcnl1,对其进行原核表达,其表达的蛋白以包涵体形式存在。利用RT-PCR技术分析了BmCcnl1基因在胚胎发育过程中的转录水平,BmCcnl1基因在非滞育性卵的胚胎发育阶段基本保持相对稳定的转录表达,而滞育性卵从蛾体产下经过72h后已经检测不到BmCcnl1基因的转录。结果提示,BmCcnl1基因与胚胎期滞育及非滞育性卵的发育调控相关。对该基因的克隆和表达分析为今后研究家蚕胚胎发育及细胞周期调控奠定了基础。

关键词：家蚕细胞周期蛋白克隆表达滞育

家蚕滞育卵与非滞育卵中几种关键酶活性的比较

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昆虫学报 2011年第11期54卷 1258-1263页

作者：范兰芬钟杨生林健荣华南农业大学动物科学学院广州510642

家蚕Bombyxmori是卵滞育的昆虫,在滞育期间无形态变化,也不存在器官发育和组织分化,然而其生理代谢过程仍在进行。为进一步研究家蚕滞育的机制,本研究测定了家蚕滞育卵、即时浸酸处理的滞育卵及非滞育卵在胚胎发育过程中的超氧化物歧化... 详细信息

家蚕Bombyxmori是卵滞育的昆虫,在滞育期间无形态变化,也不存在器官发育和组织分化,然而其生理代谢过程仍在进行。为进一步研究家蚕滞育的机制,本研究测定了家蚕滞育卵、即时浸酸处理的滞育卵及非滞育卵在胚胎发育过程中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD,EC1.***.1.1)、过氧化氢酶(catalase,CAT,EC1.***.1.6)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK,EC2.***.1.40)、乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,AchE,EC3.***.1.7)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH,EC1.***.1.28)的活性变化。结果表明:处理后1-7d,即时浸酸处理的滞育卵,SOD活性由56517.00U/g提高到81986.94U/g,CAT活性由14.98U/g提高到106.90U/g,PK活性由25.19U/g提高到181.70U/g,AChE活性由17.88U/g提高到287.86U/g,而LDH活性由169.96U/g下降到122.82U/g。而在非滞育卵中,SOD活性由86417.99U/g下降到66024.19U/g,LDH活性由169.07U/g下降到135.02U/g;CAT活性由1.47U/g提高到44.37U/g,PK活性由20.56U/g提高到92.09U/g,AChE活性由21.40U/g提高到99.17U/g。在滞育卵中,SOD和AChE活性较稳定;CAT活性随发育上升,而LDH活性随发育而下降;PK活性在胚胎发育的前4d呈上升趋势,随后基本保持稳定。通过了解家蚕滞育卵、非滞育卵与即时浸酸卵的相关酶活性在胚胎发育过程中存在的变化,有助于进一步揭示家蚕滞育的机理。

关键词：家蚕滞育滞育卵非滞育卵即时浸酸处理酶活性