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作者：钟亨任海南大学

学位级别：硕士

致病菌在世界各地的医疗卫生中给人类带来了巨大的困扰,根据美国疾病控制中心的的统计数据,美国每年有超过200万由细菌引起的感染患者,而且由于传统抗生素在世界各地无节制的使用,耐药病源菌不断出现,以上病例中就有2.3万例由耐药性致... 详细信息

致病菌在世界各地的医疗卫生中给人类带来了巨大的困扰,根据美国疾病控制中心的的统计数据,美国每年有超过200万由细菌引起的感染患者,而且由于传统抗生素在世界各地无节制的使用,耐药病源菌不断出现,以上病例中就有2.3万例由耐药性致病菌引起。因此如何攻克耐药菌出现的难题已然成为现代医学所面临的一项重要挑战。抗菌肽(AMPs)是体液先天免疫系统的基础效应分子,广泛存在于动物体内,是抵御病原体的第一道防线。这些长度为7至50个氨基酸的生物活性肽也参与细胞过程的调节,如细胞凋亡,以及内分泌和神经内分泌系统的调节。本课题组从海南沼蛙的皮肤组织中克隆得到Temporin-GHc(以下简称GHc)、Temporin-GHd(以下简称GHd)和Brevinin-GR23(以下简称GR23),化学合成后对三种抗菌肽进行抗菌活性分析。经螺旋轮和3D结构预测分析,GHc和GHd呈α-螺旋结构,亲水性氨基酸和疏水性氨基酸规则的排列两侧,具有完美的两亲性。圆二色谱结果显示GHc和GHd在生理环境下(0.9%NaCl)主要以无规则卷曲结构为主,而在疏水环境下(30 mM SDS和50%TFE)则以α-螺旋结构为主。平板打孔法显示GHc和GHd对变异链球菌(Streptococcus mutans)具有抑制活性,其最低抑制浓度(MIC)分别为12.6μM和13.1μM。GHc和GHd经过不同的理化因素(UV照射、NaCl浓度、加热温度和酸碱度等)处理后,仍然能保持对&mutans的抑制活性,表明其具有良好的热稳定性和结构稳定性。激光共聚焦显微镜和核酸泄露实验结果表明GHc和GHd能改变***细胞膜的通透性,导致细菌细胞内的大分子物质外泄而死亡。凝胶阻滞实验表明GHc和GHd能与细菌体外DNA结合,形成大分子复合物并降低其迁移率。当GHc或GHd与细菌孵育后,细菌DNA合成减少,可能是抗菌肽作用于细菌体内DNA后干扰其合成造成的,但也有可能是通过改变细胞膜造成大分子物质外流而引起的。结晶紫染色法和MTT法测定生物被膜的结果显示,2×MIC的GHc(25.2 μM)和GHd(26.2 μM)时对***细菌起始贴附的抑制率均超过90%;对已生成6 h的***生物被膜抑制率为61.6-67.2%;当***的生物被膜生长24 h后,对生物被膜的破坏率下降至20%左右。结果表明GHc与GHd能较好地抑制***生物被膜形成初始阶段的贴附作用,对早期形成的生物被膜也有一定的破坏作用,但随生物被膜生成时间的延长,对已生成生物被膜的破坏率下降明显。GHc和GHd均能抑制 *** 胞外多糖(EPS)的产生,在 1×MIC 时,GHc(12.6 μM)和 GHd(13.1μM)对S mutans合成水溶性胞外多糖和非水溶性胞外多糖的抑制率分别是49.6%和17.2%,42.6%和23.9%。实时荧光定量PCR结果表明GHc和GHd能够下调***生物合成胞外多糖基因,葡萄糖基转移酶(glucosyltransferase,Gtfs)的表达,从而干扰了 ***生物被膜的生成。GHc和GHd对人红细胞具有一定溶血活性,50%的溶血率分别为100 μM和50 μM。但在***存在的情况时对人红细胞的溶血毒活性下降,表明GHc和GHd对细菌的选择性更高。在200 μM的浓度的范围内,GHc和GHd对人口腔上皮细胞无毒性。实验结果表明,GHc和GHd能抑制口腔致病菌***及其生物被膜的形成,对人口腔上皮细胞无毒性,为其进一步的开发设计成为抗龋齿药物提供依据。经过平板打孔法和吸光值法检测GR23对金黄色葡萄球菌(Staphylococcu aureus)有抑制活性,最低抑制浓度为16.6 μM。GR23的螺旋轮和3D结构的预测显示其具有两亲性,呈α-螺旋结构。在亲水性环境下(PBS)主要以无规则卷曲结构存在,而在疏水性环境中则以α-螺旋结构为主。经过不同理化因素处理后的GR23仍然能保持抑制***的活性,稳定性好。GR23作用于***时,能改变细菌细胞膜的通透性,造成细菌内容物外泄。经凝胶阻滞实验表明,GR23能与***的DNA体外结合。结晶紫和MTT法测定GR23对***初始细胞附着的抑制率在16.6 μM以上时均超过90%,对***生物被膜生长6 h的抑制率分别为68%和41%,而对生长24 h后的生物被膜抑制率降低至20%。GR23还能抑制浮游生长的S aureus胞外多糖的产生,对水溶性胞外多糖和非水溶性胞外多糖的抑制率分别71.8%和52.2%。GR23(终浓度为200 μM)对健康人血红细胞没有显著的溶血毒性。实验结果显示,GR23具有抑

关键词：抑菌活性生物被膜 DNA结合活性胞外多糖细胞毒性

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补阳还五汤治疗心脏骤停心肺复苏后脑损伤的效果

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时珍国医国药 2022年第8期33卷 1917-1919页

作者：余洪刘德浪钟亨任海南省中医院海南海口570203

目的观察补阳还五汤治疗心脏骤停心肺复苏后脑损伤的效果。方法采用随机数字表法将2018年1月至2021年1月医院收治的120例心脏骤停心肺复苏后脑损伤患者分为对照组与观察组,各60例,其中观察组采用补阳还五汤+常规治疗,对照组采用常规治疗... 详细信息

目的观察补阳还五汤治疗心脏骤停心肺复苏后脑损伤的效果。方法采用随机数字表法将2018年1月至2021年1月医院收治的120例心脏骤停心肺复苏后脑损伤患者分为对照组与观察组,各60例,其中观察组采用补阳还五汤+常规治疗,对照组采用常规治疗,均连续治疗28d。于治疗28d时评估两组治疗效果,比较两组治疗前、治疗28d时的神经功能[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分]、日常生活活动能力[Barthel指数(BI)]、认知功能[简易智力状态检查量表(MMSE)评分];治疗期间,记录两组不良反应发生情况。结果观察组治疗28d时整体治疗效果优于对照组,且治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论心脏骤停心肺复苏后脑损伤患者采用补阳还五汤治疗效果显著、安全性好,可有效改善患者的神经功能、认知功能及日常生活活动能力。

关键词：心脏骤停心肺复苏脑损伤补阳还五汤神经功能不良反应

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补阳还五汤联合心肺复苏治疗心脏骤停疗效研究

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中国药业 2021年第13期30卷 44-46页

作者：余洪刘德浪钟亨任海南省中医院心血管内科海南海口570203

目的探讨补阳还五汤联合心肺复苏治疗心脏骤停的疗效,以及对患者血清缺血修饰白蛋白(IMA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的影响。方法选取医院2017年6月至2020年6月收治的心脏骤停患者120例,随机分为观察组和对照组,各60例。两组患... 详细信息

目的探讨补阳还五汤联合心肺复苏治疗心脏骤停的疗效,以及对患者血清缺血修饰白蛋白(IMA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平的影响。方法选取医院2017年6月至2020年6月收治的心脏骤停患者120例,随机分为观察组和对照组,各60例。两组患者均予以心肺复苏,观察组患者加用补阳还五汤,均连续治疗4周。结果观察组患者的总有效率为91.67%,显著高于对照组的73.33%(P0.05)。结论补阳还五汤联合心肺复苏治疗心脏骤停疗效良好,能改善患者的自主意识、心律、呼吸、血气指标,降低心肌损伤程度,且治疗安全性较好。

关键词：补阳还五汤心肺复苏心脏骤停临床疗效血气指标心肌损伤

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抗菌肽Lc-NKlysin-1a抗氧化活性及其稳定性

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食品科技 2018年第10期43卷 8-14页

作者：罗文杰钟亨任唐梨纯宋彦廷满初日嘎张英霞海南大学热带生物资源教育部重点实验室海南大学海洋学院海口570228 海南大学动物科技学院海口570228

为研究海洋抗菌肽Lc-NKlysin-1a的抗氧化活性,通过分光光度法测定Lc-NKlysin-1a对DPPH自由基、羟基自由基的清除作用和还原力,以及不同因素对DPPH自由基清除率的影响,并通过MTT法研究其对H_2O_2诱导293FT细胞损伤的保护作用。结果表明:L... 详细信息

为研究海洋抗菌肽Lc-NKlysin-1a的抗氧化活性,通过分光光度法测定Lc-NKlysin-1a对DPPH自由基、羟基自由基的清除作用和还原力,以及不同因素对DPPH自由基清除率的影响,并通过MTT法研究其对H_2O_2诱导293FT细胞损伤的保护作用。结果表明:Lc-NKlysin-1a不仅具有还原力,而且对DPPH自由基和羟基自由基具有清除作用,对DPPH自由基清除的IC_(50)为0.6396mg/mL;在不同温度、pH、盐浓度、食品辅料和金属离子影响下,Lc-NKlysin-1a对DPPH自由基的清除作用稳定;在浓度为(1～100)μg/mL时,Lc-NKlysin-1a对293FT细胞几乎无毒性,在用(1～100)μg/mL Lc-NKlysin-1a和400μmol/L的H_2O_2同时处理293FT细胞时,细胞存活率均大于400μmol/L的H_2O_2处理的细胞存活率,且用100μg/mL Lc-NKlysin-1a和H_2O_2同时处理细胞时,存活率比用H_2O_2单独处理时高出20%。Lc-NKlysin-1a在(1～100)μg/mL时对H_2O_2诱导的细胞损伤具有保护作用。研究结果为Lc-NK-lysin-1a在食品、化妆品、保健品和医药等领域的应用提供了一定的理论依据。

关键词：抗菌肽大黄鱼抗氧化活性稳定性 293FT细胞

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“黄芪-川芎”药对减轻脑缺血再灌注大鼠多糖包被与血脑屏障损伤

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湖北医药学院学报 2022年第1期41卷 16-20页

作者：翁国虎刘卫花钟亨任海南省中医院脑病科海南省中医脑病临床医学中心海南省中医院临床研究中心海南省中医治未病临床医学研究中心海南海口570203

目的:研究"黄芪-川芎"药对减轻脑缺血大鼠的血管内皮多糖包被和血脑屏障(blood brain barrier,BBB)损伤的作用。方法:50只SD大鼠行大脑中动脉梗塞(MCAO)模型后随机分为5组:假手术组、模型组、黄芪给药组、川芎给药组、黄芪-川芎给药组;... 详细信息

目的:研究"黄芪-川芎"药对减轻脑缺血大鼠的血管内皮多糖包被和血脑屏障(blood brain barrier,BBB)损伤的作用。方法:50只SD大鼠行大脑中动脉梗塞(MCAO)模型后随机分为5组:假手术组、模型组、黄芪给药组、川芎给药组、黄芪-川芎给药组;给药3 d后观察各组大鼠神经功能评分,伊文思蓝渗漏实验检测BBB通透性,ELISA检测血清多糖包被降解产物和白介素IL-1β的水平。结果:各给药组的BBB通透性均比模型组降低、血清多糖包被降解产物及IL-1β含量减少,其中黄芪-川芎给药组的BBB及多糖包被损伤减轻作用最为显著。结论:黄芪-川芎药对可明显减轻脑缺血再灌注大鼠的多糖包被和血脑屏障损伤,发挥脑梗死血管保护作用。

关键词：药对黄芪川芎缺血再灌注血脑屏障多糖包被脑梗死

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海南产沼蛙皮肤temporin家族抗菌肽抗菌活性及稳定性研究

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海南大学学报（自然科学版） 2016年第3期34卷 250-256页

作者：董柱钟亨任罗文杰宋彦亭邓世明张英霞海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室海南海口570228

用化学合成法合成了4种抗菌肽,并测定了其抗菌活性及温度、热处理时间和p H值等不同因素对抑菌活性的影响,结果表明:temporin-GHa^GHd对革兰氏阳性菌:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-res... 详细信息

用化学合成法合成了4种抗菌肽,并测定了其抗菌活性及温度、热处理时间和p H值等不同因素对抑菌活性的影响,结果表明:temporin-GHa^GHd对革兰氏阳性菌:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant ***,MRSA);革兰氏阴性菌:大肠杆菌(Escherichia coli,D 31);真菌:白色念珠菌(Monilia albican)均具有抗菌活性.对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度最低,分别为6.8,6.8,12.9和12.7μmol·L-1.除temporin-GHb对温度稍敏感外,temporin-GHa,temporin-GHc和temporin-GHd在25~100℃范围内,均具有较强的热稳定性,即使在80℃加热80 min,100℃加热20 min,其抗菌活性仍基本保持不变.4种抗菌肽在p H 2~10范围内稳定,即使在极端p H条件下(p H 2~3或9~10),其抗菌活性仍变化不大.

关键词：沼蛙抗菌肽抗菌活性稳定性

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抗菌肽Lc-NKlysin-1a的抗菌稳定性及其抗菌机理

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海南大学学报（自然科学版） 2017年第4期35卷 345-351页

作者：罗文杰钟亨任何露露邵佳琪宋彦廷张英霞海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室海南海口570228

Lc-NKlysin-1是从海洋鱼类——大黄鱼(Larimichthys crocea)中获得的抗菌肽,为进一步优化该抗菌肽和研究其结构与功能的关系,本文截取了其N末端的12个氨基酸残基,设计并合成了抗菌肽Lc-NKlysin-1a,同时,通过琼脂板打孔法,对其抗菌活性,... 详细信息

Lc-NKlysin-1是从海洋鱼类——大黄鱼(Larimichthys crocea)中获得的抗菌肽,为进一步优化该抗菌肽和研究其结构与功能的关系,本文截取了其N末端的12个氨基酸残基,设计并合成了抗菌肽Lc-NKlysin-1a,同时,通过琼脂板打孔法,对其抗菌活性,不同温度、pH值、盐浓度等对其抗菌活性的影响,其溶血活性,最低抑菌质量浓度,其抗菌特征等进行了研究,并在扫描电镜下观察了其对细菌形态结构的影响.结果表明:抗菌肽LcNKlysin-1a对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)和革兰氏阴性菌(大肠杆菌、副溶血弧菌、铜绿假单胞菌、抗链霉素大肠杆菌)均具有抗菌活性;但对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和抗链霉素大肠杆菌的抗菌活性最好,其最低抑菌质量浓度(MIC)在15.62531.25μg·mL^(-1)之间;相对于Lc-NKlysin-1,Lc-NKlysin-1a的抗菌活性明显增强;Lc-NKlysin-1a在15.62531.25μg·mL^(-1)时,其溶血率为3.80%7.37%,溶血活性较低;Lc-NKlysin-1a对温度、pH和盐等具有良好的耐受性,且稳定性高.此外,通过扫描电镜还观察到,抗菌肽Lc-NKlysin-1a作用于细菌后细菌的形态发生了明显改变,其细胞膜出现了褶皱和塌陷的现象,最终导致了内溶物外泻而死亡.改造后的抗菌肽其相对分子质量小,活性高,稳定性强,更易于被开发成抗菌肽类药物.

关键词：抗菌肽大黄鱼抗菌活性稳定性机理

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抗菌肽Brevinin-GR23抗金黄色葡萄球菌作用机制的初步研究

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海南大学学报（自然科学版） 2018年第4期36卷 360-367页

作者：钟亨任谢志鹏魏涵淇张淑霞何佩兰宋彦廷张英霞热带生物资源教育部重点实验室海南大学海洋学院海南海口570228

Brevinin-2GHe是从海南沼蛙(Hylarana guentheri)皮肤中获得的抗菌肽,为进一步优化该抗菌肽和分析其结构与生物学活性之间的关系,本研究去除了Brevinin-2GHe的7个C-末端氨基酸,并通过固相合成获得了含有23个氨基酸的brevinin-GR23;同时... 详细信息

Brevinin-2GHe是从海南沼蛙(Hylarana guentheri)皮肤中获得的抗菌肽,为进一步优化该抗菌肽和分析其结构与生物学活性之间的关系,本研究去除了Brevinin-2GHe的7个C-末端氨基酸,并通过固相合成获得了含有23个氨基酸的brevinin-GR23;同时,检测了抗菌肽brevinin-GR23的抗菌活性和最低抑制浓度以及brevinin-GR23的时间杀菌曲线;判断了brevinin-GR23对细菌细胞膜完整性的影响;分析了brevinin-GR23对细菌体内DNA的作用;测定了其对兔红细胞的毒性作用;检测了brevinin-GR23在不同溶液环境中的二级结构,并通过在线软件分析了其3D结构.结果表明:抗菌肽brevinin-GR23对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抗菌活性最好,最低抑制浓度为16. 6μmol/L;在120 min时,其抑制细菌的效率最高,但对兔红细胞的溶血活性却较低.核酸泄露的实验结果显示,brevinin-GR23不仅能增加S. aureus的细胞膜渗透性,而且它还能与细菌DNA结合,干扰金黄色葡萄球菌DNA的复制,从而发挥抑菌作用.二级结构分析表明:brevinin-GR23在PBS溶液中以不规则结构为主,而在膜模拟溶液中其却能转变成α螺旋结构,这有利于其与细菌细胞膜的结合,因而致使细菌细胞膜的完整性发生了改变.在线软件的分析显示:其3D结构为α螺旋,经改造后的brevinin-GR23,其分子量更小,且活性强、毒性小、化学合成成本较低,这更有利于进一步的开发与应用.

关键词：抗菌肽核酸泄露 DNA结合活性抗菌机制圆二色谱

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地方债的稳就业效应：来自中小银行专项债的证据

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数量经济技术经济研究 2025年

作者：毛捷任占尚

就业是最大的民生工程。地方政府专项债作为落实积极财政政策的重要抓手，对于带动有效投资、稳定就业具有重要意义。本文从财政金融协同联动的视角切入，基于中小银行专项债项目数据和新三板中小企业数据，采用交叠双重差分法实证检验... 详细信息

就业是最大的民生工程。地方政府专项债作为落实积极财政政策的重要抓手，对于带动有效投资、稳定就业具有重要意义。本文从财政金融协同联动的视角切入，基于中小银行专项债项目数据和新三板中小企业数据，采用交叠双重差分法实证检验了中小银行专项债对企业劳动雇佣规模的影响。研究发现，中小银行专项债具有显著的就业促进效应。机制分析结果表明，中小银行专项债可以通过缓解企业面临的融资约束、改善市场主体预期促进就业。拓展分析结果表明，中小银行专项债对中小企业，特别是专精特新中小企业的人力资本结构优化起到了积极作用；投向分析表明，支持农村金融机构的专项债在促进就业方面相较于支持城市商业银行的专项债发挥了更明显的效应。本文研究结论为财政金融协同防范化解重大风险、稳市场主体保就业提供了参考。

关键词：中小银行专项债就业融资约束财政金融协同

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生物高分子聚合物生态固沙效果初探

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岩土工程学报 2025年第1期47卷 144-152页

作者：童小东慈祥孙任运东南大学土木工程学院江苏南京211189 东南大学混凝土及预应力混凝土结构教育部重点实验室江苏南京211189 上海市政工程设计研究总院(集团)有限公司上海200092

沙漠化治理是一个全球性的难题。相较于传统的沙漠固沙技术,作为环境友好型固化材料的生物高分子聚合物,不仅能有效胶结沙漠砂以抵抗风蚀作用,还能提高沙漠砂的促生性能以促进植物生长,最终达到利用植被实现永久固沙的效果。基于前述设... 详细信息

沙漠化治理是一个全球性的难题。相较于传统的沙漠固沙技术,作为环境友好型固化材料的生物高分子聚合物,不仅能有效胶结沙漠砂以抵抗风蚀作用,还能提高沙漠砂的促生性能以促进植物生长,最终达到利用植被实现永久固沙的效果。基于前述设想,通过表面硬度试验、保水性能试验和植物生长试验研究了黄原胶(XG)、瓜尔胶(GG)以及二者的等质量混合胶(MG)生态固沙的效果。表面硬度试验表明生物高分子聚合物能有效胶结沙漠砂颗粒,质量分数为0.1%的XG、GG和MG溶液分别将沙漠砂的表面压力强度提高了9.4倍、5.3倍和8.0倍;保水性能试验表明生物高分子聚合物对沙漠砂保水性能的提升效果随溶液质量分数的增大而增大,在40℃高温养护条件下,生物高分子聚合物保水性能的比较结果为:XG>MG>GG;植物生长试验表明,在室内条件下,生物高分子聚合物能缩短植物出苗时间、提升植物的出苗率和幼苗高度,明显提高沙漠砂的促生性能。本文的研究初步表明,采用生物高分子聚合物实现生态固沙具备理论上的可行性。

关键词：生物高分子聚合物生态固沙表面硬度保水性能

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