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目的本课题通过高糖高胰岛素诱导Hep G2细胞建立胰岛素抵抗模型,探究海普诺(HPN)对胰岛素抵抗Hep G2细胞葡萄糖消耗量的影响,和对胰岛素抵抗Hep G2细胞内蛋白水平及磷酸化水平改善作用,并初步探讨可能的分子生物学机制,为HPN的进一步的开发利用提供实验依据。方法1.用Cell Counting K it-8(CCK-8)法研究不同浓度的HPN对肝癌细胞株(Hep G2)细胞活性的影响。体外培养Hep G2细胞,CCK-8法检测浓度为(1×10-7～1×10-4mol/L)的HPN作用Hep G2细胞后24 h,36 h和48 h的存活率。以及在倒置显微镜下观看各个浓度的HPN作用Hep G2细胞48 h细胞形态的变化。2.胰岛素抵抗Hep G2细胞模型的建立。实验设立对照组和模型组,将含有胰岛素培养液中培养的Hep G2细胞作为模型组,不含胰岛素的培养液中培养的Hep G2细胞为正常对照组。以浓度为30 mmol/L D-葡萄糖和不同浓度的胰岛素(1×10-7～5×10-6 mol/L)的培养基培养Hep G2细胞72 h,后换正常的培养基持续6 h后检测细胞上清液中葡萄糖消耗量,以确定高糖高胰岛素诱发的Hep G2细胞胰岛素抵抗造模最佳胰岛素浓度。3.胰岛素抵抗模型建立以后,用不同浓度的HPN作用胰岛素抵抗Hep G2细胞6h,用多功能自动生化仪葡萄糖-己糖激酶法检测不同浓度的HPN对Hep G2细胞上清液中的葡萄糖消耗量的影响。4.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HPN处理的胰岛素抵抗Hep G2细胞6 h后细胞内PTP-1B,IRS-1,Akt蛋白的蛋白水平以及IRS-1(Tyr612)酪氨酸磷酸化,Akt(Ser473)丝氨酸磷酸化水平。结果1.CCK-8结果显示在低浓度时HPN促进Hep G2细胞增殖的作用,细胞活性与HPN浓度的呈负相关,并对时间的依赖性不明显;倒置显微镜下观看细胞形态及数量有明显改变,尤其在HPN浓度为1×10-4 mol/L时。2.高糖和高糖高胰岛素均能诱导Hep G2细胞胰岛素抵抗模型的建立,诱发Hep G2细胞胰岛素抵抗造模最佳胰岛素浓度为1×10-6 mol/L,D-葡萄糖浓度为30mmol/L。3.在胰岛素抵抗Hep G2细胞中,在HPN浓度为5×10-8～1×10-7 mol/L时都能促进胰岛素抵抗Hep G2细胞葡萄糖消耗(P<0.05),尤其当HPN浓度为1×10-7 mol/L时,能显著促进胰岛素抵抗Hep G2细胞葡萄糖消耗(P<0.01)。4.经Western Blot结果检测显示,经HPN处理的胰岛素抵抗Hep G2细胞中较模型组PTP-1B蛋白表达水平有明显的下降,IRS-1蛋白表达水平有明显升高,而IRS-1(Tyr612)的酪氨酸磷酸化;虽其下游PI3K/Akt信号通路中Akt蛋白没有明显变化,但能引起Akt(Ser473)的丝氨酸的磷酸化水平有明显升高,故HPN促进胰岛素信号通路下传,增强胰岛素刺激的葡萄糖摄取。结论HPN能明显促进胰岛素抵抗Hep G2细胞的葡萄糖摄取和增强胰岛素信号下传,可能通过抑制细胞内PTP-1B蛋白水平的表达,增强胰岛素信号中IRS-1蛋白表达,提高IRS-1(Tyr612)酪氨酸磷酸化,和影响其下游PI3K/Akt信号通路中Akt(Ser473)丝氨酸磷酸化水平,提高对胰岛素敏感性,从而达到改善胰岛素抵抗的目的。

关键词：海普诺胰岛素抵抗 HepG2细胞高糖高胰岛素

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意蜂多王群的组建与应用

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中国畜牧业 2015年第14期 64-66页

作者：金水华浙江省平湖市畜牧兽医局浙江省平湖市农业经济局浙江省平湖市种蜂场

蜜蜂是社会性昆虫，蜂王是蜂群中惟一生殖器官发育完全的雌性蜂，其主要职能是产卵。由于在自然状态下，同一蜂巢内不能长期存在两只健壮蜂王，为了提高蜂群繁殖速度，培养和维持强群，在生产上只能通过闸板或隔王板将蜂箱分隔成蜂王不... 详细信息

蜜蜂是社会性昆虫，蜂王是蜂群中惟一生殖器官发育完全的雌性蜂，其主要职能是产卵。由于在自然状态下，同一蜂巢内不能长期存在两只健壮蜂王，为了提高蜂群繁殖速度，培养和维持强群，在生产上只能通过闸板或隔王板将蜂箱分隔成蜂王不能互相通过的两区进行饲养（双王群饲养）。那么，能否人为将2只以上的蜂王饲养在同一群内呢？实践证明，采用生物诱导与环境诱导相结合的技术方法，能够人工组成多只蜂王长期在同一产卵区自由活动、正常产卵的意蜂多王群。

关键词：意蜂双王群饲养应用生殖器官发育社会性昆虫自然状态繁殖速度环境诱导

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意蜂多王群的组建与饲养管理

意蜂多王群的组建与饲养管理

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中国养蜂学会蜜蜂饲养管理专业委员会第十三次学术研讨会

作者：金水华浙江省平湖市农业经济局

＜正＞蜜蜂是社会性昆虫,蜂王是蜂群中唯一生殖器官发育完全的雌性蜂,其主要职能是产卵。蜂王通过其产卵力和分泌信息素直接影响蜂群的生殖力和生产力。在蜂王诸多生物学特性中有一个奇特的现象,那就是性好妒,敌视别的蜂王。她不能容忍... 详细信息

＜正＞蜜蜂是社会性昆虫,蜂王是蜂群中唯一生殖器官发育完全的雌性蜂,其主要职能是产卵。蜂王通过其产卵力和分泌信息素直接影响蜂群的生殖力和生产力。在蜂王诸多生物学特性中有一个奇特的现象,那就是性好妒,敌视别的蜂王。她不能容忍蜂群内有其他蜂王存在,如果出现2只以上的蜂王相遇,则互相咬杀。蜂王咬斗时,先用上颚钳住对方,通过其产卵器特化成的

关键词：意蜂多王群组建饲养管理同巢越冬

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意蜂多王群的组建与应用手册

意蜂多王群的组建与应用手册

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2015年全国蜂产品市场信息交流会暨中国（广州）蜂业博...

作者：金水华浙江省平湖市畜牧兽医局浙江省平湖市农业经济局浙江省平湖市种蜂埸

＜正＞导言蜜蜂是社会性昆虫,蜂王是蜂群中唯一生殖器官发育完全的雌性蜂,其主要职能是产卵。由于在自然状态下,同一蜂巢内不能长期存在两只健壮蜂王,为了提高蜂群繁殖速度,培养和维持强群,在生产上只能通过闸板或隔王板将蜂箱分隔成蜂...

＜正＞导言蜜蜂是社会性昆虫,蜂王是蜂群中唯一生殖器官发育完全的雌性蜂,其主要职能是产卵。由于在自然状态下,同一蜂巢内不能长期存在两只健壮蜂王,为了提高蜂群繁殖速度,培养和维持强群,在生产上只能通过闸板或隔王板将蜂箱分隔成蜂王不能互相通过的两区进行饲养（双王群饲养）。那么,能否通过人为的办法将2只以上的蜂王饲养在同一群内呢?实践证明,采用"生物诱导"与"环境诱导"相结合的技术方法,能够人工组成多只蜂王长期在同一产卵区自由活动、正常产卵的多王群。

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意蜂多王群的组建与饲养管理

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中国蜂业 2013年第12期64卷 14-16页

作者：金水华浙江平湖市农业经济局 314200

蜜蜂是社会性昆虫，蜂王是蜂群中唯一生殖器官发育完全的雌性蜂，其主要职能是产卵。蜂王通过其产卵力和分泌信息素直接影响蜂群的生殖力和生产力。在蜂王诸多生物学特性中有一个奇特的现象，那就是生性好妒，敌视别的蜂王。不能容忍蜂... 详细信息

蜜蜂是社会性昆虫，蜂王是蜂群中唯一生殖器官发育完全的雌性蜂，其主要职能是产卵。蜂王通过其产卵力和分泌信息素直接影响蜂群的生殖力和生产力。在蜂王诸多生物学特性中有一个奇特的现象，那就是生性好妒，敌视别的蜂王。不能容忍蜂群内有其他蜂王存在，

关键词：饲养管理意蜂生殖器官发育社会性昆虫生物学特性产卵力蜂王蜂群

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狄氏瓦螨（Varroa destructor）生物诱杀器的制作与设伏方法

狄氏瓦螨（Varroa destructor）生物诱杀器的制作与设伏方法

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中国蜂业博览会（江西·南昌）暨2018全国蜂产品市场信...

作者：金水华

＜正＞～～

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