检索结果-南通市图书馆

猪囊胚体外持续发育培养体系主要影响因素的研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧杂志 2023年第3期59卷 189-195页

作者：刘东松柴壮齐子成刘佳慧金君学刘忠华东北农业大学黑龙江省动物细胞与遗传工程重点实验室黑龙江哈尔滨150030

本研究旨在探索猪囊胚体外持续发育的关键影响因素,为构建支持猪胚胎体外发育至三胚层分化阶段的培养体系奠定基础。采用孤雌激活后6 d的猪囊胚进行体外持续培养,通过检测分析发育至8 d的猪孤雌囊胚的形态学特征和基因表达情况,系统评价... 详细信息

本研究旨在探索猪囊胚体外持续发育的关键影响因素,为构建支持猪胚胎体外发育至三胚层分化阶段的培养体系奠定基础。采用孤雌激活后6 d的猪囊胚进行体外持续培养,通过检测分析发育至8 d的猪孤雌囊胚的形态学特征和基因表达情况,系统评价PZM-3、Advanced DMEM/F12和KnockOutTMDMEM/F12基础培养体系,以及胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)、血清替代物(Knockout Serum Replacement,KSR)、L-谷氨酰胺(L-Glutamine)和胰岛素-转铁蛋白-硒-氨基乙醇(Insulin-Transferrin-Selenium-X,ITS-X)等成份对猪囊胚体外持续发育的作用,建立猪囊胚体外持续发育培养体系;通过TUNEL和免疫荧光方法检测该体系对猪囊胚的影响。结果表明:AKGI(Advanced DMEM/F12组合添加5%KSR、4 mmol/L L-Glutamine和1×ITS-X)为猪囊胚体外持续发育最适培养体系,可增加囊胚直径和囊胚细胞数(P<0.05),降低凋亡细胞比例(P<0.01),增加内细胞团(Inner Cell Mass,ICM)细胞数(P<0.05),促使NANOG在猪囊胚ICM中特异性表达。结果证明,AKGI培养体系是猪囊胚体外持续发育最佳体系,支持猪囊胚在体外发育至8 d,为建立猪孵化后胚胎体外持续发育培养体系奠定了基础。

关键词：猪囊胚持续发育体外培养

维普期刊数据库博看期刊

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生产转基因五指山小型猪重构胚条件优化

东北农业大学学报 2013年第3期44卷 39-45,F0002页

作者：鲁月康锦丹李所王伟朱海瑛金君学洪禹尹熙俊延边大学农学院吉林延吉133002

利用体细胞核移植技术是得到具有优良特征及抗病性五指山小型猪快速有效方法,因此将外源基因安全高效导入到供核细胞至关重要。利用不同转染试剂、转染方法对转染效率进行研究,确定G418筛选浓度。同时利用体细胞核移植技术生产转单体红... 详细信息

利用体细胞核移植技术是得到具有优良特征及抗病性五指山小型猪快速有效方法,因此将外源基因安全高效导入到供核细胞至关重要。利用不同转染试剂、转染方法对转染效率进行研究,确定G418筛选浓度。同时利用体细胞核移植技术生产转单体红色荧光蛋白重构胚。结果表明,使用U-023细胞核电转程序能有效介导质粒pCX-mRFP1转染猪耳成纤维细胞,转染率可达到83.33%。确定G418最佳筛选浓度为200μ***-1。利用转基因细胞作为核供体生产重构胚卵裂率是83.08%(221/266),囊胚率是11.65%(31/266)。研究结果为生产表达单体红色荧光蛋白五指山小型猪提供参考,从而为人类疾病发病机理研究以及生产人类疾病模型动物奠定了基础。

关键词：单体红色荧光蛋白五指山小型猪转基因体细胞核移植

Mito-Tempo修复过氧化氢诱导的猪卵母细胞线粒体损伤机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

东北农业大学学报 2023年第6期54卷 28-34页

作者：金君学綦新月刘子瑜张吉龙马祥钧孙婧陶东北农业大学生命科学学院黑龙江省动物细胞与遗传工程重点实验室哈尔滨150030

本研究探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对过氧化氢诱导猪卵母细胞线粒体损伤修复的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中添加10 mmol·L^(-1)过氧化氢或过氧化氢+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo,检测卵丘细胞扩散、卵母细胞成熟及线粒体功... 详细信息

本研究探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对过氧化氢诱导猪卵母细胞线粒体损伤修复的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中添加10 mmol·L^(-1)过氧化氢或过氧化氢+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo,检测卵丘细胞扩散、卵母细胞成熟及线粒体功能相关因子,观察孤雌胚胎发育情况。结果表明,与过氧化氢组相比,添加Mito-Tempo可显著提高卵丘细胞扩散指数,显著降低Mito SOX水平,提高膜电位及线粒体功能基因表达水平,显著改善猪卵母细胞体外成熟率及孤雌胚胎发育能力(P<0.05)。证明Mito-Tempo对过氧化氢诱导的猪卵母细胞线粒体损伤具有修复功能。

关键词：猪卵母细胞线粒体过氧化氢 Mito-Tempo

雷美替胺对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧杂志 2020年第4期56卷 83-86,198页

作者：孙婧陶郝耘初张文涵朱彦龙王张钰金君学东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030

本实验旨在研究雷美替胺(Ramelteon)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟42 h培养过程中添加10-11、10-9、10-7、10-5mol/L的雷美替胺,不添加雷美替胺组作为对照组。通过卵丘细胞扩散指数对猪卵丘细胞的扩... 详细信息

本实验旨在研究雷美替胺(Ramelteon)对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响。在猪卵母细胞体外成熟42 h培养过程中添加10-11、10-9、10-7、10-5mol/L的雷美替胺,不添加雷美替胺组作为对照组。通过卵丘细胞扩散指数对猪卵丘细胞的扩散程度进行判定,并统计猪卵母细胞体外成熟率及孤雌胚胎发育能力;进一步检测猪卵母细胞内谷胱甘肽和活性氧水平及孤雌胚胎发育相关基因的表达情况。结果表明:与对照组相比,添加10-11mol/L的雷美替胺能显著提高卵丘细胞扩散指数,显著提高谷胱甘肽水平,显著降低活性氧水平,调控与胚胎发育相关的POU5F1、NANOG和SOX2基因表达量。综上所知,在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加10-11 mol/L雷美替胺可显著提高猪卵母细胞质量和后续胚胎发育潜力。

关键词：雷美替胺猪卵丘细胞卵母细胞胚胎发育

外源褪黑素对猪卵母细胞体外成熟及多精受精的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧杂志 2022年第4期58卷 184-187,194页

作者：刘佳慧姜希卿张琪王博琳张吉龙金君学孙婧陶东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省动物细胞与遗传工程重点实验室黑龙江哈尔滨150030

本研究旨在探讨褪黑素对猪卵母细胞体外成熟及多精受精的影响。在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加1 nmol/L褪黑素或1 nmol/L褪黑素+1 nmol/L Luzindole作为试验组,不添加褪黑素及Luzindole作为对照组,检测卵母细胞核成熟率、多精受精率... 详细信息

本研究旨在探讨褪黑素对猪卵母细胞体外成熟及多精受精的影响。在猪卵母细胞体外成熟培养基中添加1 nmol/L褪黑素或1 nmol/L褪黑素+1 nmol/L Luzindole作为试验组,不添加褪黑素及Luzindole作为对照组,检测卵母细胞核成熟率、多精受精率,并观察体外受精胚胎的发育能力及与多精受精相关的细胞器分布情况。结果表明:各组间卵母细胞核成熟率及体外受精胚胎的卵裂率无显著差异;褪黑素组的猪卵母细胞多精受精发生率较其他2组降低(P<0.05),囊胚形成率提高(P<0.05),同时猪卵母细胞皮质颗粒及高尔基体的正常分布情况得到显著改善。结果证明,在猪卵母细胞体外成熟培养液中添加1 nmol/L褪黑素可显著改善卵母细胞成熟质量,抑制多精受精的发生。

关键词：褪黑素猪体外受精卵母细胞多精受精

维普期刊数据库博看期刊

不同温度对犬卵母细胞体外卵丘扩散及核成熟的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧杂志 2014年第3期50卷 35-38页

作者：李所康锦丹金君学洪禹朱海瑛金龙郭庆尹熙俊延边大学农学院动物科学系吉林延吉133002

目前犬体外胚胎生产及克隆等技术由于受到卵母细胞体外成熟率低的影响而受到限制,实验旨在探索不同温度对犬卵母细胞体外卵丘扩散及核成熟的影响。从不同时期犬卵巢收集卵丘卵母细胞复合体(COCs),随机分成4组,置于TCM-199(Earle’s salt... 详细信息

目前犬体外胚胎生产及克隆等技术由于受到卵母细胞体外成熟率低的影响而受到限制,实验旨在探索不同温度对犬卵母细胞体外卵丘扩散及核成熟的影响。从不同时期犬卵巢收集卵丘卵母细胞复合体(COCs),随机分成4组,置于TCM-199(Earle’s salts)+25 mmol/L HEPES+10%(v/v)FBS+10 ng/mL EGF+1 mg/mL L-半胱氨酸+1%青–链霉素成熟培养液中,分别在37.0、38.5、40.0℃条件下培养48 h,测定不同温度培养前后卵丘扩散及核成熟情况。结果表明:不同温度下,培养前后卵丘均显著性扩散(211.40μmvs359.64、377.25、373.23μm),但各处理组间无显著差异,不同温度下对犬卵母细胞核体外成熟率(10.73%、10.025%、14.35%)没有显著差异。说明培养温度只要在犬正常体温变动范围内,则温度对其卵母细胞卵丘扩散及体外培养成熟率均无显著影响。

关键词：卵母细胞温度体外成熟犬

雷美替胺对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

雷美替胺对猪卵母细胞体外成熟和孤雌胚胎发育的影响

单宁酸对猪卵母细胞体外成熟及胚胎发育能力的影响

中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第二十次学术研讨会

作者：孙婧陶翁晓刚金君学刘忠华东北农业大学生命科学学院

引言胚胎体外生产（In Vtro Production,IVP）需要大量高质量的卵母细胞。相较体内环境而言,体外发育的卵母细胞及早期胚胎发育能力更易受到影响,这很可能是活性氧（ROS）引起的氧化应激造成了胚胎细胞凋亡或永久性发育阻滞。为提高卵...

引言胚胎体外生产（In Vtro Production,IVP）需要大量高质量的卵母细胞。相较体内环境而言,体外发育的卵母细胞及早期胚胎发育能力更易受到影响,这很可能是活性氧（ROS）引起的氧化应激造成了胚胎细胞凋亡或永久性发育阻滞。为提高卵母细胞体外成熟率和胚胎体外发育率,研究者在卵母细胞体外成熟体系中添加包括褪黑素在内的多种抗氧化剂。

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧兽医 2021年第10期48卷 3708-3714页

作者：孙婧陶姜超前刘佳慧张弛王传玥边雅姜希卿张琪金君学东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 黑龙江省动物细胞与遗传工程重点实验室哈尔滨150030

研究旨在探讨单宁酸对猪卵母细胞体外成熟质量及其胚胎发育能力的影响。在猪卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外成熟培养液中添加不同浓度(0、1、10、100μg/mL)单宁酸培养42 h后,检测COCs的扩散程度和卵丘细胞扩散指数,统计COCs的体外成熟率... 详细信息

研究旨在探讨单宁酸对猪卵母细胞体外成熟质量及其胚胎发育能力的影响。在猪卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外成熟培养液中添加不同浓度(0、1、10、100μg/mL)单宁酸培养42 h后,检测COCs的扩散程度和卵丘细胞扩散指数,统计COCs的体外成熟率,检测成熟卵母细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)的水平,并统计孤雌激活及体外受精胚胎48和168 h的卵裂率、囊胚率及囊胚总细胞数。结果显示,与对照组相比,10μg/mL单宁酸组卵丘细胞扩散指数显著提高(P0.05),100μg/mL单宁酸组卵母细胞成熟率显著降低(P0.05),10μg/mL单宁酸组孤雌胚胎囊胚率及体外受精胚胎囊胚率显著提高(P<0.05),100μg/mL单宁酸组孤雌胚胎囊胚细胞数及体外受精胚胎囊胚细胞数均显著低于其他各组(P<0.05)。以上结果表明,10μg/mL单宁酸可通过提高卵丘细胞扩散能力及GSH和GDF9水平、降低卵母细胞内ROS水平,改善猪卵母细胞成熟质量,提高孤雌胚胎及体外受精胚胎的发育能力。

关键词：单宁酸猪卵丘细胞卵母细胞胚胎发育

转录因子OCT4在猪早期胚胎的表达模式及其在滋养层中的生物学功能

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业生物技术学报 2021年第10期29卷 1855-1868页

作者：齐子成柴壮崔洪帝张宇霆刘龑伟人悦徐倩倩金君学刘忠华黑龙江省动物细胞与遗传工程重点实验室/东北农业大学生命科学学院

八聚体结合转录因子4 (octamer-binding transcription factor 4, OCT4)属于POU (Pit-Oct-Unc)家族转录因子,在早期胚胎、胚胎干细胞及生殖细胞中特异性表达。研究OCT4在猪(Sus scrofa)早期胚胎发育中的表达规律和功能,对于解析早期发... 详细信息

八聚体结合转录因子4 (octamer-binding transcription factor 4, OCT4)属于POU (Pit-Oct-Unc)家族转录因子,在早期胚胎、胚胎干细胞及生殖细胞中特异性表达。研究OCT4在猪(Sus scrofa)早期胚胎发育中的表达规律和功能,对于解析早期发育机制和多能性调控具有重要意义。本研究通过免疫荧光和qPCR技术对OCT4在猪早期胚胎中的分布和表达模式进行检测。结果显示,在孤雌激活胚胎、体外受精胚胎和体细胞核移植胚胎中,OCT4蛋白在体外培养的胚胎2-细胞期到桑葚期的卵裂球中广泛表达,在囊胚期的内细胞团和滋养层同时表达;OCT4在孤雌激活胚胎和体外受精胚胎中的基因表达呈现相似模式,均在2-细胞期开始下降、在8-细胞期开始升高,在囊胚的滋养层中表达;在滋养层中特异性过表达OCT4,胚胎的细胞数和直径均显著增加,滋养层发育相关基因E74样因子5 (E74-like factor 5, ELF5)下调表达、EOMES (eomesodermin)显著上调表达,成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)信号通路相关基因显著下调,极化基因PKCα(protein kinase Cα)和ERZIN显著下调,甲基化基因TET1显著上调、DNA甲基转移酶3B (DNA methyltransferases 3B, DNMT3b)显著下调。上述结果表明,OCT4在第一次谱系分化后的滋养层中持续表达,可能对滋养层增殖具有调控功能。本研究为深入探讨猪早期胚胎发育机制及猪胚胎干细胞的建立提供基础资料。

关键词：八聚体结合转录因子4(OCT4) 表达模式早期胚胎滋养层猪