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作者：金俊彦南京农业大学

学位级别：硕士

昆虫在长期的进化过程中,形成了以触角为主的极为发达的嗅觉系统,藉此识别环境中大量的化学信息,从而做出相应的生理和行为反应,如寻找配偶、食物源、栖息和产卵场所、逃避天敌等。鳞翅目昆虫为全变态昆虫,其中蛾类昆虫的成虫为夜行性,... 详细信息

昆虫在长期的进化过程中,形成了以触角为主的极为发达的嗅觉系统,藉此识别环境中大量的化学信息,从而做出相应的生理和行为反应,如寻找配偶、食物源、栖息和产卵场所、逃避天敌等。鳞翅目昆虫为全变态昆虫,其中蛾类昆虫的成虫为夜行性,需要更为灵敏的嗅觉系统,以适应夜间对异性个体、寄主植物等的嗅觉定向。气味结合蛋白(Odorant binding protein, OBP)是高浓度存在于昆虫触角感器腔内的一类水溶性小分子蛋白,具有对进入到触角内的脂溶性气味物质进行结合并运送到感受神经元受体部位的作用,因此被认为是昆虫嗅觉的第一个生化步骤。大螟(Sesamia inferens)属鳞翅目、夜蛾科,自2000年以来,大螟逐渐上升为我国重要的水稻害虫,基于嗅觉的行为调控技术在很多害虫的防治中已经得到应用,深入研究OBP等嗅觉相关基因及其功能,对于开发高效的大螟行为调控技术具有重要意义。本研究利用大螟转录组数据,通过生物信息学和分子生物学相结合的方法,从大螟中克隆了3个性信息素结合蛋白(Pheromone binding protein, PBP)基因和2个一般气味结合蛋白(General odorant binding protein, GOBP)基因,测定了它们的组织表达谱,并利用荧光竞争结合实验初步探索了它们的生理功能。主要结果如下： 1大螟OBP的基因克隆及序列分析通过设计简并引物,结合转录组数据分析并利用RACE技术,克隆了大螟3个PBP和2个GOBP基因的全长cDNA序列。5个基因分别命名为SinfPBP1、SinfPBP2, SinfPBP3、SinfGOBP1和SinfGOBP2,3个PBP的全长cDNA序列的GenBank登录号分别为JF927621、JN984058、JF927622、KC887506和KF150178。序列分析表明,所有OBP均具有典型OBP的序列特征,其中包括6个保守的半胱氨酸位点。SinfPBP1、 SinfPBP2、SinfPBP3、SinfGOBP1和SinfGOBP2的氨基酸序列与其它鳞翅目昆虫,尤其是夜蛾科昆虫OBP具有很高的相似性,分别达94%、88%、85%、91%和87%。进化树分析显示,这5个OBP分属于PBP和GOBP两个亚类,不同基因间的距离与昆虫间的亲缘关系一致。 2大螟OBP基因在雌雄成虫不同组织及不同日龄触角的表达量组织表达谱分析及雌雄间差异比较是了解OBP基因功能的重要途经。为了明确SinfOBP基因的组织分布情况,首先利用RT-PCR技术检测了这5个基因在雌雄成虫不同组织的表达量。结果表明,5个OBP均主要触角中表达,其他组织几乎不表达。进一步通过qPCR技术,定量比较了5个OBP在雌雄触角中不同日龄的表达动态及性别差异。结果发现,5个SinfOBP在雌雄触角中的表达量均在4日龄达到最高值;雌雄比较而言,PBP1和PBP2在雄虫中的表达量显著高于雌虫,而PBP3则在雌虫中的表达量略高于雄虫,以4日龄为例3个PBP表达量的雄雌比分别为11：1、6：1和1：1.6。2个GOBP基因的表达量在雌雄间均无显著差异。 3大螟PBP的体外表达及纯化为了研究PBP的嗅觉功能,进一步对这大螟3个PBP基因进行了体外大量表达和纯化。首先将3个基因构建到pGEX-4T-1(PBP1、PBP2)和pET-30a(+)(PBP3)表达载体中,然后在大肠杆菌Escherichia coli中经IPTG诱导表达。诱导产物的SDS-PAGE分析表明,pGEX/SinfPBP1、pGEX/SinfPBP2和pET/SinfPBP3分别在约42kDa、42kDa和22kDa处有一明显加粗条带,和预期大小一致;3个外源表达的PBP中,PBP1和PBP2以可溶性形式存在,而PBP3以包涵体形式存在。重组蛋白经亲和层析、酶切表达标签等步骤纯化后,冷冻干燥用于后续功能分析。 4大螟PBP的配体结合能力分析利用荧光竞争结合实验测定了3个SinfPBP对包括大螟性信息素及水稻挥发物在内共30种气味物质的结合能力,发现SinfPBP1对3个性信息素组分Z9-16：Ald、Z9-16:OH和Z9-16:Ac都有很强的结合能力,Ki值分别为0.72、1.00和1.60;SinfPBP2对醇类和醛类性信息素组分及其类似物也表现出很强的结合能力,Ki值分别为0.78和1.71,但对酯类组分却没有结合能力;SinfPBP3对大螟的3种性信息素组分均无明显结合能力。与性信息素组分相比较,3个PBP与植物挥发物的结合能力普遍较差。综合分析认为,在大螟雄蛾对雌雄性信息素的感受中,PBP1起主要作用,PBP2具有识别醇类和醛类组分的功能,而PBP3的作用很小或有其他功能。

关键词：大螟气味结合蛋白基因克隆组织表达谱原核表达荧光竞争结合实验

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大螟2个普通气味结合蛋白基因的分子克隆及表达动态分析

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南京农业大学学报 2014年第1期37卷 87-93页

作者：金俊彦张亚楠杨科高建清董双林南京农业大学植物保护学院/农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室江苏南京210095 江苏省宿迁出入境检验检疫局江苏宿迁223800 南京农业大学图书馆江苏南京210095

针对重要农业害虫大螟,通过序列相似性分析从转录组数据获得2个普通气味结合蛋白(general odorant-binding protein,GOBP)基因cDNA片段,利用RACE技术进一步得到cDNA全长,分别命名为SinfGOBP1和SinfGOBP2。2个基因编码的氨基酸序列和已... 详细信息

针对重要农业害虫大螟,通过序列相似性分析从转录组数据获得2个普通气味结合蛋白(general odorant-binding protein,GOBP)基因cDNA片段,利用RACE技术进一步得到cDNA全长,分别命名为SinfGOBP1和SinfGOBP2。2个基因编码的氨基酸序列和已报道的昆虫同源序列具有较高的相似性,其中SinfGOBP1和黄地老虎、小地老虎的相似性最高,分别为91%和90%;SinfGOBP2和谷实夜蛾、甘蓝夜蛾的相似性最高,均为87%。进化分析表明,不同昆虫GOBP被明显分为GOBP1和GOBP2两个亚组,暗示2个亚组GOBP在功能上的分化;此外,相同亚组内GOBP基因间的距离与昆虫间的亲缘关系一致。进一步利用荧光定量PCR,测定了2个基因表达的雌雄差异及时间动态,发现2个基因的表达量在雌雄间均无显著差异;随昆虫日龄的增加,2个GOBP基因的表达量在雌虫中呈上升趋势,但雄虫只在4日龄较高。并讨论了GOBP表达动态与大螟成虫求偶及寻找寄主植物产卵行为的关系。

关键词：大螟普通气味结合蛋白基因克隆荧光定量PCR 表达动态

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越医文化与针灸发展历程浅析

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中医药管理杂志 2020年第6期28卷 15-16页

作者：金俊彦浙江中医药大学浙江杭州310053

绍兴针灸是越医文化的一部分,经历了源流阶段、萌芽阶段、发展阶段、兴盛阶段、受阻阶段、继承发扬阶段,其发展历程是越医文化形成的重要组成部分,两者相互促进,不断创新,共同推动着绍兴中医药事业的发展,最后总结绍兴针灸的发展特点。

关键词：越医文化针灸历程

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以全流程AI服务拥抱泛安防时代的新机遇

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中国公共安全 2020年第5期 44-45页

作者：金利平金俊彦张洋杭州海康威视数字技术股份有限公司

AI产业发展趋势:从专业AI到普惠AI近些年,在数据和计算能力指数级增长的支持下,人工智能算法也取得了重大突破。持续了半个多世纪的人工智能产业又一次迎来革命性的突破,人工智能的研究和应用进入了全新的发展阶段。在本次人工智能浪潮...

AI产业发展趋势:从专业AI到普惠AI近些年,在数据和计算能力指数级增长的支持下,人工智能算法也取得了重大突破。持续了半个多世纪的人工智能产业又一次迎来革命性的突破,人工智能的研究和应用进入了全新的发展阶段。在本次人工智能浪潮掀起初期,AI应用落地需要经过漫长而专业的开发过程,包含数据的收集标注、算法设计、训练到集成等核心环节,技术门槛极高。加之高昂的研究投入成本,使得该类技术只掌握在少数

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濒危植物单性木兰群落优势种群生态位研究

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广西植物 2013年第3期33卷 300-305页

作者：金俊彦覃文更罗柳娟谭卫宁覃国乐贵州师范大学生命科学学院贵阳550001 广西木论国家级自然保护区管理局广西环江547100 河池学院广西宜州546300

以分布样地类型作为一维资源位,应用Levins、Hurlbert生态位宽度公式和Pianka生态位重叠以及生态位相似比例公式对单性木兰乔木层14个群落优势种群的生态位特征分析。结果表明:(1)单性木兰具有最大位宽度,对环境资源的利用具有明显优势... 详细信息

以分布样地类型作为一维资源位,应用Levins、Hurlbert生态位宽度公式和Pianka生态位重叠以及生态位相似比例公式对单性木兰乔木层14个群落优势种群的生态位特征分析。结果表明:(1)单性木兰具有最大位宽度,对环境资源的利用具有明显优势,是群落中的建群种;(2)生态位宽的种群可能产生较小的生态位重叠,生态位较窄的种群间也会产生较大的生态位重叠,这主要取决于物种的生物学特性和对环境资源的需求;(3)单性木兰分布地的坡向、基岩裸露度、坡度等因子是影响单性木兰分布的重要因子。

关键词：濒危植物单性木兰生态位木论

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《景岳全书》对肿瘤及其类证的辨治思路

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云南中医学院学报 2020年第1期43卷 98-102页

作者：张馨尹金俊彦潘宇霜王睿浙江中医药大学第三临床医学院浙江杭州310053 浙江中医药大学附属广兴医院浙江杭州310007

《景岳全书》为展现张景岳学术思想的代表作,其中单独设有专篇《心集·杂证谟·积聚》和《人集·妇人规·癥瘕类》,涵盖了当今诸多肿瘤疾病。张景岳在肿瘤类疾病辨治过程中,博采众家之长而成一家之言,注重探求病源,治病求本,认为饮食、... 详细信息

《景岳全书》为展现张景岳学术思想的代表作,其中单独设有专篇《心集·杂证谟·积聚》和《人集·妇人规·癥瘕类》,涵盖了当今诸多肿瘤疾病。张景岳在肿瘤类疾病辨治过程中,博采众家之长而成一家之言,注重探求病源,治病求本,认为饮食、风寒、情志、气血、脏腑所伤皆可致病,脏腑虚衰为其根本。辨证论治以虚实之变为首,攻补兼施,治疗方法上针药结合,各法互参,陈列了大量有效方剂及针灸法,具有点兵八阵、用药精当、选穴精巧、内外兼施等特色。所形成的辨治思路体系为后世运用中医针药诊治肿瘤及相关类证提供了宝贵的经验,值得深入研习和借鉴。

关键词：《景岳全书》积聚癥瘕肿瘤综述

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濒危植物单性木兰群落主要种群种间联结性研究

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西部林业科学 2013年第3期42卷 86-94页

作者：金俊彦覃文更谭卫宁罗柳娟覃国乐贵州师范大学生命科学学院贵州贵阳550001 广西木论国家级自然保护区管理局广西环江547100 河池学院广西宜州546300

在濒危植物单性木兰主要分布区广西木论国家级自然保护区设置60块乔木样地,30个灌木样方,150个草本样方,对其乔、灌、草进行调查,并基于2×2联列表,应用χ2检验、W检验、联结系数AC和共同出现百分率PC等方法对广西木论国家级自然保护区... 详细信息

在濒危植物单性木兰主要分布区广西木论国家级自然保护区设置60块乔木样地,30个灌木样方,150个草本样方,对其乔、灌、草进行调查,并基于2×2联列表,应用χ2检验、W检验、联结系数AC和共同出现百分率PC等方法对广西木论国家级自然保护区单性木兰群落乔木层21种主要种群、灌木层15种主要种群和草本层13种主要种群的种间联结的显著性和关联强度进行了定量测定,以揭示单性木兰群落不同结构层次中主要植物种群的种间关系。结果显示:(1)单性木兰群落乔木层主要种群总体关联度呈正相关,灌木层和草本层呈负相关。(2)乔木层中翻白叶树和檵木、野山楂,檵木和栓叶安息香、野山楂之间存在极显著的正联结性。翻白叶树和鸭脚木、栓叶安息香,以及檵木和鸭脚木,栓叶安息香和野山楂之间存在显著的正联结性。粗糠柴和润楠种间存在极显著的负联结性,翻白叶树和小叶山柿,栓叶安息香和润楠,野山楂和小叶山柿,粗糠柴和虎皮楠之间存在显著的负联结性。(3)灌木层种群中显著关联的只有翻白叶树和檵木。其余为不显著关联,正关联为49个,负关联为47个。(4)草本层友水龙骨和狭叶沿阶草、砂仁和蔓生莠竹达到极显著正相关,其余为不显著关联,正关联为25个,负关联为43个。

关键词：濒危植物单性木兰群落种群种间联结

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《神灸经纶》灸法治疗肿瘤学术思想初探

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新中医 2021年第8期53卷 115-117页

作者：潘宇霜张馨尹金俊彦王睿浙江中医药大学浙江杭州310053 杭州市中医院浙江杭州310007

《神灸经纶》为清代吴亦鼎所著灸法专书。本文对书中涉及肿瘤及其类证相关内容进行总结,以归纳其灸法学术思想,包含辨证施灸,灸有补泻;因人因时施灸;灸后养生等内容。基于中医学"带瘤生存"治疗理念,分析了《神灸经纶》中治疗肿瘤的灸法... 详细信息

《神灸经纶》为清代吴亦鼎所著灸法专书。本文对书中涉及肿瘤及其类证相关内容进行总结,以归纳其灸法学术思想,包含辨证施灸,灸有补泻;因人因时施灸;灸后养生等内容。基于中医学"带瘤生存"治疗理念,分析了《神灸经纶》中治疗肿瘤的灸法思想,为灸法直接调节肿瘤免疫抑制状态或微环境的相关研究提供新思路。

关键词：《神灸经纶》灸法肿瘤类证文献研究

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从《针灸逢源》初探肿瘤类证针灸诊治思想

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上海针灸杂志 2020年第6期39卷 801-804页

作者：金俊彦潘宇霜张馨尹王睿浙江中医药大学杭州310053 杭州市中医院杭州310007

《针灸逢源》是清代针灸名医李学川所编写的综合性针灸学专著,其中论述肿瘤及其类证的篇章主要为卷五和卷六。李学川认为五脏六腑功能失常皆可成瘤,发生病机虽有不同,但正气不固是其基本病因;故针灸治疗多以补气调气为原则,选用任脉和... 详细信息

《针灸逢源》是清代针灸名医李学川所编写的综合性针灸学专著,其中论述肿瘤及其类证的篇章主要为卷五和卷六。李学川认为五脏六腑功能失常皆可成瘤,发生病机虽有不同,但正气不固是其基本病因;故针灸治疗多以补气调气为原则,选用任脉和足厥阴肝经腧穴较多,注重脏腑辨证以行俞募配穴法,巧配内关调气顺气,兼加灸法补阳,以护正气。该文通过对相关内容进行重点研习,以期为现代针灸调节肿瘤免疫抑制状态及微环境等研究提供治疗思路和理论支持。

关键词：针灸逢源李学川针灸疗法肿瘤肿瘤相关疾病文献研究

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“过度敏感化”的时代

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读书 2025年第2期 49-57页

作者：方俊彦

“敏感”在汉语里往往带有负面色彩，但在西方，它成了进步的代名词。德国哲学家斯文娅·弗拉斯珀勒（Svenja Fla?p?hler）在其新著《敏感与自我》的开篇，勾勒了一位生活在十一世纪的男性形象。这位男性是冷酷无情的骑士，在战场上通...

“敏感”在汉语里往往带有负面色彩，但在西方，它成了进步的代名词。德国哲学家斯文娅·弗拉斯珀勒（Svenja Fla?p?hler）在其新著《敏感与自我》的开篇，勾勒了一位生活在十一世纪的男性形象。这位男性是冷酷无情的骑士，在战场上通过血腥的杀戮追求荣誉，日常生活中则以致命的决斗作为消遣。

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