检索结果-南通市图书馆

作者：鄢晓媛中国医科大学

学位级别：硕士

目的:寻找氧化石墨烯量子点(Graphene Oxide Quantum Dots,GOQDs)促进牙髓干细胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)成骨分化的安全浓度,检验以GOQDs为生物活性因子、DPSCs为种子细胞、水凝胶为支架的复合物修复骨缺损的效果,以期为GOQDs... 详细信息

目的:寻找氧化石墨烯量子点(Graphene Oxide Quantum Dots,GOQDs)促进牙髓干细胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)成骨分化的安全浓度,检验以GOQDs为生物活性因子、DPSCs为种子细胞、水凝胶为支架的复合物修复骨缺损的效果,以期为GOQDs在颌面骨缺损修复的应用进一步提供理论依据。研究方法:分离培养人原代DPSCs,分别进行成骨、成脂与成软骨分化诱导以检验其是否具有多向分化的能力,并通过流式细胞术检测其表面分子的表达情况以检验其是否为间充质干细胞。通过CCK-8检测GOQDs对DPSCs增殖能力的影响,通过在成骨分化培养基(Osteogenic medium,OM)内加入不同浓度的GOQDs后分别进行碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红S(Alizarin red S,ARS)染色、Western blot检测GOQDs对DPSCs成骨分化的影响,根据上述实验结果确定GOQDs促进成骨分化且不影响增殖的最佳浓度,将含有该浓度的OM记为OM+GOQDs。以甲基丙烯酰化明胶(Gelatin Methacryloyl,Gel MA)水凝胶为支架,构建DPSCs/水凝胶复合物(DPSCs/Gel),将其培养于含或不含凋亡诱导药物的培养基中,通过Calcein AM/PI染色观察细胞在水凝胶内的生长状态。为了检测细胞在水凝胶内是否仍有良好的成骨分化能力,根据培养液与水凝胶内是否含有GOQDs分为DPSCs/Gel组与GOQDs/DPSCs/Gel组,8天后对比两组的ALP染色。最后在体内实验中检验GOQDs的成骨活性,动物实验分为DPSCs/Gel组和GOQDs/DPSCs/Gel组,相应的细胞/水凝胶复合物在体外诱导8天后植入大鼠颅骨缺损,3周后取出颅骨,通过micro-CT、石蜡切片的HE染色、Masson染色和免疫组化染色对比分析两组大鼠颅骨缺损的修复效果。结果:ALP染色、ARS染色结果表明本研究所分离培养的DPSCs具有成骨分化能力,油红O染色证明其具有成脂分化能力,阿利辛蓝染色结果证明其具有成软骨分化能力。流式细胞术结果表明DPSCs高表达间充质干细胞表面标记分子CD29、CD105、CD146,而低表达造血干细胞表面标记分子CD14、CD45。以上结果证明本研究分离培养得到的DPSCs为具有多向分化潜能的间充质干细胞。CCK-8结果显示0.5、1、5μg/m L GOQDs对DPSCs增殖的影响无统计学差异,而10、20μg/m L GOQDs抑制DPSCs的增殖。ALP染色、ALP活性测定、ARS染色及矿化结节定量、Western blot结果显示,5、10μg/m L GOQDs均显著促进DPSCs成骨向分化。综合上述结果,5μg/m L GOQDs能够在不影响DPSCs增殖的情况下促进成骨分化,因此选择用该浓度GOQDs作为生物活性因子构建细胞/水凝胶复合物并用于骨缺损修复实验。细胞/水凝胶复合物的Calcein AM/PI染色可见对照组细胞在水凝胶中生长形态良好,而在实验组中,培养基内的凋亡诱导药物成功促进水凝胶内的细胞发生凋亡,提示培养液中的营养物质或药物可以有效作用于水凝胶内的细胞。细胞/水凝胶复合物的ALP染色结果可见GOQDs/DPSCs/Gel组的ALP表达量高于DPSCs/Gel组,表明在培养环境中加入的GOQDs促进了水凝胶内DPSCs的成骨分化,这一结果与二维培养细胞所得实验结果相符。上述两个实验证明本研究采用的水凝胶制备方法可使细胞在水凝胶中良好地生长与分化。动物实验的Micro-CT结果表明GOQDs/DPSCs/Gel组的新生骨体积较对照组显著增多;HE染色、Masson染色可见GOQDs/DPSCs/Gel组的骨缺损造模区域有大量新生骨形成;免疫组化染色可见GOQDs/DPSCs/Gel组的造模区域内表达成骨分化标志蛋白Osterix、Runx2、Col-1和OPN的细胞明显多于对照组。以上结果提示与DPSCs/Gel相比,GOQDs/DPSCs/Gel更有效的修复了大鼠的颅骨缺损。结论:5μg/m L的GOQDs能够有效促进DPSCs成骨分化,且对DPSCs没有明显的细胞毒性。使用GOQDs作为生物活性因子、DPSCs作为种子细胞、水凝胶作为支架构建的骨组织工程复合物GOQDs/DPSCs/Gel显著促进大鼠颅骨缺损的修复。

关键词：氧化石墨烯量子点牙髓干细胞成骨分化骨修复

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miR-138-5p促进牙髓干细胞成牙本质向分化

miR-138-5p促进牙髓干细胞成牙本质向分化

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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第十四次全国牙体牙...

作者：鄢晓媛尉鹏功郭佳杰仇丽鸿中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科

目的:通过检测miR-138-5p在牙髓干细胞(Dental Pulp Stem Cells,DPSCs)成牙本质向分化过程中表达量的变化以及敲减miR-138-5p对成牙分化标志物表达量的影响,探讨miR-138-5p在DPSCs成牙本质向分化中的作用,以期为临床中牙本质缺损的治疗...

目的:通过检测miR-138-5p在牙髓干细胞(Dental Pulp Stem Cells,DPSCs)成牙本质向分化过程中表达量的变化以及敲减miR-138-5p对成牙分化标志物表达量的影响,探讨miR-138-5p在DPSCs成牙本质向分化中的作用,以期为临床中牙本质缺损的治疗与修复提供参考。方法:使用成牙本质分化诱导培养液诱导DPSCs分化,检测诱导不同时长组(0、3、5、7、10、14天)的DSPP、DMP1、ALP mRNA表达量以确认诱导效果后,检测miR-138-5p表达量变化。转染敲减miR-138-5p以后,检测miR-138-5p表达量以验证转染效果,转染后分化诱导7天时检测DSPP、DMP1与ALP的mRNA表达量。结果:随着诱导时长增加,DPSCs的DSPP、DMP1与ALP表达量显著增高,证明DPSCs成牙本质向分化诱导成功。在DPSCs成牙本质向分化过程中,miR-138-5p表达量显著提高。转染组的miR-138-5p表达量较对照组显著降低,证明敲减成功。敲减miR-138-5p以后,DSPP、DMP1与ALP的mRNA表达量较未敲减组显著降低。结论:miR-138-5p对DPSCs成牙本质向分化具有促进作用。

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口腔卟啉单胞菌属外膜囊泡以非RANKL依赖方式促进破骨细胞分化

口腔卟啉单胞菌属外膜囊泡以非RANKL依赖方式促进破骨细胞分化

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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第十四次全国牙体牙...

作者：邱秋劲鄢晓媛郭佳杰仇丽鸿中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科

目的:牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)和牙周卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是牙周病及根尖周病的主要致病菌。本文主要研究Pe和Pg的外膜囊泡(Outer membrane vesicles,OMVs)对破骨细胞分化的促进作用及分子机制。方法:厌氧培养牙髓卟啉单胞菌和牙周卟啉单胞菌,分离纯化获取,并行透射电子显微镜检测OMVs的形态及直径。Pe OMV和Pg OMV连同或不连同核因子κB受体活化因子配体(RANKL)作用于小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7) 5日,行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色统计破骨细胞(Osteoclast,OC)数(细胞核数≥3);利用罗丹明标记的鬼笔环肽对OC进行F-actin染色,荧光显微镜下观察OC形成的伪足小体;利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测OC分化标志基因NFATc1、OSCAR、Cathepsin K及TRAP的表达。RANKL、Pe OMV和Pg OMV连同或不连同可溶性骨保护素(OPG)作用RAW264.7细胞5日,行TRAP染色和F-Actin环荧光染色检测OC生成。Pe OMV和Pg OMV作用RAW264.7细胞24、48 h,RT-PCR检测巨噬细胞M1向极化标志基因IL-1β、IL-6、TNF-α和胞内模式识别受体NOD2的基因表达。结果:Pe、Pg OMV连同或不连同RANKL作用RAW264.7细胞5日,TRAP染色显示Pe、Pg OMV促进RANKL诱导的OC生成,且多为10核以上的巨大OC,有较大的红色伪足小体F-actin环;Pe、PgOMV在无RANKL作用时也可促进OC生成,多为5-10核的OC,F-actin环大小与RANKL组相当;Pe、Pg OMV显著促进了NFATc1、OSCAR、Cathepsin K及TRAP的基因表达。加入OPG后,RANKL组OC生成显著减少,而Pe OMV和Pg OMV组OC生成未见显著减少。Pe OMV和Pg OMV作用RAW264.7细胞24、48 h,IL-1β、IL-6、TNF-α、NOD2基因表达均呈现不同程度的升高。结论:Pe OMV和Pg OMV以非RANKL依赖的方式促进了破骨细胞分化,该过程可能与NOD2受体的激活和IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的表达,从而替代了RANKL信号导致破骨细胞分化相关,但具体机制仍有待一进步验证。

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氧化石墨烯量子点促进牙髓干细胞成骨向分化

氧化石墨烯量子点促进牙髓干细胞成骨向分化

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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第十四次全国牙体牙...

作者：鄢晓媛邱秋劲郭佳杰仇丽鸿中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科

目的:在体外环境中研究氧化石墨烯量子点(Graphene Oxide Quantum Dots,GOQDs)对牙髓干细胞(Dental Pulp Stem Cells,DPSCs)的增殖及成骨向分化的影响,以期为临床工作中大面积骨缺损的修复提供组织工程学材料和实验依据。方法:检测不同...

目的:在体外环境中研究氧化石墨烯量子点(Graphene Oxide Quantum Dots,GOQDs)对牙髓干细胞(Dental Pulp Stem Cells,DPSCs)的增殖及成骨向分化的影响,以期为临床工作中大面积骨缺损的修复提供组织工程学材料和实验依据。方法:检测不同浓度GOQDs (0、0.25、0.5、0.75、1、5、10和20μg/mL)作用DPSCs细胞1、3、5日,CCK-8检测细胞活性。不同浓度GOQDs (0、1、5、10μg/mL)的成骨分化诱导液作用DPSCs,每3天换液,10天时进行ALP染色,并定量检测ALP活性;21天时进行茜素红染色检测钙化结节的形成,并用氯代十六烷基吡啶溶解钙化结节后进行定量分析。结果:CCK-8结果显示0.25、0.5、0.75、1μg/mL的GOQDs对DPSCs增殖的影响无统计学差异,而5、10、20μg/mL GOQDs对DPSCs的增殖有浓度依赖性的抑制作用。ALP染色、ALP活性测定、茜素红染色及矿化结节定量结果显示,1、5、10μg/mL GOQDs均能显著促进DPSCs成骨向分化,且该作用呈浓度依赖性。结论:GOQDs在安全浓度范围内能够促进DPSCs成骨向分化。

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氧化石墨烯量子点通过促进线粒体自噬依赖的牙髓干细胞成骨向分化修复骨缺损的实验研究

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第十六次全国牙体牙髓病学学术大会

作者：鄢晓媛张泽颖邱秋劲仇丽鸿郭佳杰中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科辽宁省口腔医学疾病重点实验室

目的:检验水凝胶包装的经氧化石墨烯量子点(Graphene Oxide Quantum Dots,GOQDs)诱导后的牙髓干细胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)体内修复骨缺损的效果,并探索GOQDs促进DPSCs成骨向分化的分子生物学机制。方法:CCK-8检测GOQDs作用于D...

目的:检验水凝胶包装的经氧化石墨烯量子点(Graphene Oxide Quantum Dots,GOQDs)诱导后的牙髓干细胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)体内修复骨缺损的效果,并探索GOQDs促进DPSCs成骨向分化的分子生物学机制。方法:CCK-8检测GOQDs作用于DPSCs的安全浓度。ALP染色、茜素红染色及成骨分化标志蛋白表达检测验证GOQDs能否促进DPSCs成骨向分化。体外构建GOQDs/DPSCs/水凝胶复合物,活死染色及ALP染色检测DPSCs在水凝胶中的生长及成骨向分化情况。构建大鼠颅骨缺损,Micro-CT及免疫组化检测GOQDs/DPSCs/水凝胶复合物修复骨缺损效果。体外检测GOQDs作用下DPSCs线粒体自噬的变化,及抑制线粒体自噬后GOQDs对DPSCs成骨活性的影响。结果:5μg/mL GOQDs不影响DPSCs活性,且促进DPSCs的ALP活性、茜素红活性及成骨标志蛋白Col-1和OPN的表达。GOQDs能促进水凝胶包装的DPSCs的ALP活性。GOQDs/DPSCs/水凝胶复合物促进大鼠颅骨骨缺损区的新骨形成及成骨标志蛋白Osterix、Runx2、Col-1及OPN的表达。GOQDs促进DPSCs线粒体自噬相关分子Parkin和PINK1的表达;抑制线粒体自噬后,GOQDs促DPSCs成骨分化作用显著降低。结论:GOQDs通过升高线粒体自噬水平促进DPSCs成骨向分化,且GOQDs/DPSCs/水凝胶复合物显著促进大鼠颅骨缺损的修复。

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ATF4调控的lncRNA Malat1结合JMJD3促进人牙髓干细胞成牙本质向分化的机制研究

ATF4调控的lncRNA Malat1结合JMJD3促进人牙髓干细胞成牙本质向分...

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中华口腔医学会牙体牙髓病学专业委员会第十四次全国牙体牙...

作者：喻施文杨谛郭佳杰尉鹏功鄢晓媛仇丽鸿中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科

目的:活化转录因子4 (ATF4)对多种生理或病理进程有重要作用,但其在hDPSCs成牙本质向分化过程中的作用尚未明确。研究表明lncRNA Malat1可正向调控hDPSCs成牙本质向分化,本研究旨在明确ATF4调控Malat1在hDPSCs成牙本质向分化中发挥的作...

目的:活化转录因子4 (ATF4)对多种生理或病理进程有重要作用,但其在hDPSCs成牙本质向分化过程中的作用尚未明确。研究表明lncRNA Malat1可正向调控hDPSCs成牙本质向分化,本研究旨在明确ATF4调控Malat1在hDPSCs成牙本质向分化中发挥的作用及具体机制。方法:(1)检测hDPSCs成牙本质向分化过程中ATF4和Malat1表达;分别沉默ATF4和Malat1,qRTPCR、Western blot和ALP染色分析其对分化功能的影响。(2) qRT-PCR检测沉默ATF4对Malat1影响,ChIP验证ATF4与Malat1启动子区结合。(3)沉默Malat1检测JMJD3基因、蛋白及酶活性水平,RIP分析Malat1与JMJD3的结合情况,ChIP探究Malat1对DSPP、DMP1启动子区组蛋白修饰的影响;同时沉默Malat1和过表达JMJD3,观察JMJD3对Malat1的分化功能拯救效果。结果:(1) hDPSCs成牙本质向分化过程中,ATF4和Malat1表达显著上调,且诱导分化后ATF4在hDPSCs核定位显著增强;沉默ATF4或Malat1明显下调DSPP、DMP1基因和蛋白表达水平。(2)沉默ATF4后Malat1表达量随之下调,ChIP进一步证实ATF4可与Malat1启动子区结合。(3) Malat1主要位于核内,沉默Malat1后JMJD3 mRNA水平无明显变化,但蛋白水平及酶活性显著降低;RIP证实Malat1可与JMJD3相结合,ChIP实验证明干扰Malat1会显著升高DSPP、DMP1启动子区H3K27me3水平;回复实验表明JMJD3过表达后部分逆转了Malat1对分化能力的抑制作用。结论:ATF4转录调控Malat1,Malat1通过结合JMJD3,增加JMJD3蛋白水平及酶活性,介导DSPP和DMP1启动子区H3K27me3脱甲基,增加DSPP和DMP1转录水平,进而发挥促进hDPSCs成牙本质向分化作用。

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口腔卟啉单胞菌外膜囊泡通过损伤线粒体活性抑制成骨细胞分化

口腔卟啉单胞菌外膜囊泡通过损伤线粒体活性抑制成骨细胞分化

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第十六次全国牙体牙髓病学学术大会

作者：邱秋劲张泽颖鄢晓媛仇丽鸿郭佳杰中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科辽宁省口腔医学疾病重点实验室

目的:研究牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)和牙周卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)外膜囊泡(Outer membrane vesicles,OMVs)对成骨细胞分化的影响及作用机制。方法:厌氧培养Pe和Pg,分离提取OMVs,透射电子显微镜和纳米粒度电位仪行形态及粒径分析。DIL染料标记Pe OMV和Pg OMV,荧光共聚焦显微镜检测Pe OMV和Pg OMV被小鼠前成骨细胞MC3T3-E1内化情况。ALP染色、茜素红染色、成骨分化标志蛋白表达检测Pe OMV和Pg OMV对MC3T3-E1成骨向分化的影响。ATP、JC-1及Mitosox检测Pe OMV和Pg OMV对MC3T3-E1线粒体功能、膜电位及氧化应激的影响。提取成骨向分化MC3T3-E1活线粒体,并作用于Pe OMV和Pg OMV诱导的MC3T3-E1,检测细胞线粒体相关功能及成骨向分化情况。结果:Pe OMV和Pg OMV呈直径约为180 nm的单层囊泡样结构,可快速被MC3T3-E1内化。Pe OMV和Pg OMV显著抑制MC3T3-E1细胞ALP活性、茜素红活性和成骨分化标志蛋白的表达。Pe OMV和Pg OMV抑制MC3T3-E1胞内ATP水平、降低线粒体膜电位并升高线粒体氧化应激水平。添加外源性活线粒体能部分逆转Pe OMV和Pg OMV对MC3T3-E1成骨向分化的抑制。结论:Pe OMV和Pg OMV通过降低线粒体膜电位、诱导线粒体氧化应激、损伤线粒体功能抑制成骨细胞分化。

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ATF4调控BNIP3线粒体自噬促进牙髓干细胞成牙本质向分化的研究

ATF4调控BNIP3线粒体自噬促进牙髓干细胞成牙本质向分化的研究

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第十六次全国牙体牙髓病学学术大会

作者：张泽颖郭佳杰杨谛鄢晓媛邱秋劲仇丽鸿中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科辽宁省口腔医学疾病重点实验室

目的:探究BCL-2/腺病毒E1B 19-kDa相互作用蛋白3(BNIP3)线粒体自噬调控牙髓干细胞(DPSCs)成牙本质向分化中的作用,及活化转录因子4(ATF4)调控上述过程的分子机制。方法:(1)生物信息学筛选DPSCs成牙本质向分化所涉及的差异表达基因及相...

目的:探究BCL-2/腺病毒E1B 19-kDa相互作用蛋白3(BNIP3)线粒体自噬调控牙髓干细胞(DPSCs)成牙本质向分化中的作用,及活化转录因子4(ATF4)调控上述过程的分子机制。方法:(1)生物信息学筛选DPSCs成牙本质向分化所涉及的差异表达基因及相关通路后,RT-qPCR、western blot验证关键通路和差异基因。(2)细胞实验中,沉默或过表达BNIP3探究体外环境中BNIP3对DPSCs成牙分化的影响;动物实验模型分析体内环境中BNIP3对DPSCs的分化影响。(3)双荧光素酶报告实验和Chip实验探究ATF4对BNIP3直接调控的分子机制。(4)IF、流式细胞术和seahorse实验探究ATF4-BNIP3对DPSCs内线粒体功能影响。(5)IP-MS筛选ATF4的互作蛋白--核转运蛋白β1(KPNB1)。构建ATF4核定位序列野生型及突变型质粒,明确KPNB1识别ATF4位点和该位点对DPSCs成牙分化的影响。结果:(1)DPSCs成牙本质向分化中自噬通量升高,伴随BNIP3线粒体自噬信号增强;体内、外实验均表明BNIP3同DPSCs成牙分化标记蛋白DSPP、DMP1表达正相关,发挥促DPSCs成牙分化作用。(2)ATF4直接靶向BNIP3启动子区内多个位点激活转录。线粒体功能实验表明ATF4通过BNIP3增加DPSCs线粒体自噬水平、线粒体功能和成牙本质分化潜能。(3)KPNB1识别ATF4后引领其入核,调控BNIP3表达和DPSCs成牙本质分化。结论:ATF4经KPNB1识别其核定位序列后入核激活BNIP3转录,从而优化线粒体功能,促进DPSCs成牙本质向分化。

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纳米氧化锌表面修饰对羟基磷灰石晶须成骨诱导性的影响

纳米氧化锌表面修饰对羟基磷灰石晶须成骨诱导性的影响

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第十六次全国牙体牙髓病学学术大会

作者：尉鹏功张泽颖鄢晓媛邱秋劲王万锋仇丽鸿中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院牙体牙髓病科辽宁省口腔医学疾病重点实验室

目的:拥有高长径比的羟基磷灰石晶须(HAw)具有提高基质材料力学性能的优势,但HAw的低成骨诱导性限制了其在骨缺损修复中的应用。本研究制备表面含纳米氧化锌颗粒的羟基磷灰石晶须(nano-ZnO/HAw),探索具有增强基质材料力学性能,同时兼备...

目的:拥有高长径比的羟基磷灰石晶须(HAw)具有提高基质材料力学性能的优势,但HAw的低成骨诱导性限制了其在骨缺损修复中的应用。本研究制备表面含纳米氧化锌颗粒的羟基磷灰石晶须(nano-ZnO/HAw),探索具有增强基质材料力学性能,同时兼备良好成骨诱导性的骨缺损修复材料。方法:检测nano-ZnO/HAw对基质材料抗压强度的影响;扫描电镜(SEM)观测HAw对成骨细胞形貌的影响,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验定量分析细胞膜完整性;对nano-ZnO/HAw在体外对成骨细胞分化、及体内大鼠股骨缺损修复的影响进行验证。结果:Nano-ZnO/HAw对基质材料的增强作用高于HAw。SEM可捕捉到HAw刺破成骨细胞。与HAw共培养的成骨细胞上清液中LDH含量显著升高,而5%和10%nano-ZnO颗粒表面修饰可降低HAw造成的细胞内LDH外泄。相比于HAw,与nano-ZnO/HAw共培养的成骨细胞的碱性磷酸酶活性及成骨向分化标志基因表达水平升高。同时,植入nano-ZnO/HAw骨缺损区的影像学密度、骨体积分数和新生骨组织量高于HAw组。结论:Nano-ZnO/HAw具有更好的增强基质材料抗压强度的性能;同时,nano-ZnO颗粒表面修饰降低HAw对成骨细胞的机械性损伤,提高HAw的成骨诱导性。

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不同玷污层对4种树脂粘接系统粘接强度及粘接耐久性的影响

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中国组织工程研究 2020年第4期24卷 517-523页

作者：郑适泽李轲陈玥鄢晓媛战德松付佳乐中国医科大学口腔医学院辽宁省沈阳市110002 吉林大学口腔医学院吉林省长春市130021 中国医科大学口腔医学院口腔材料学教研室中国医科大学附属口腔医院修复二科辽宁省沈阳市110002

背景:当用旋转式或手动器械处理牙表面时,在牙釉质和牙本质上由切割和磨损产生的碎片形成了玷污层。玷污层是影响牙和修复材料之间粘接的重要因素,明确玷污层对不同种类粘接剂的影响对口腔医生的临床选择与正确使用具有重要的临床意义... 详细信息

背景:当用旋转式或手动器械处理牙表面时,在牙釉质和牙本质上由切割和磨损产生的碎片形成了玷污层。玷污层是影响牙和修复材料之间粘接的重要因素,明确玷污层对不同种类粘接剂的影响对口腔医生的临床选择与正确使用具有重要的临床意义。目的:评价使用不同金刚砂车针预备的试件在人工唾液中存储24 h与100 d后,对4种粘接剂与牙本质粘接强度的影响。方法:获取离体人磨牙80颗,分别进行600号碳化硅砂纸(对照)、中细粒度金刚砂车针、标准粒度金刚砂车针、粗粒度金刚砂车针4种牙本质表面处理,每种处理20颗;每种处理方法内分4个亚组,分别以两步法自酸蚀粘接剂Optibond Versa(VSA组)、一步法自酸蚀粘接剂Optibond All in One(AIO组)、通用型粘接剂Single Bond Universal(SBU组)及全酸蚀粘接剂Bond5(GLU组)进行树脂粘接。粘接完成后,将试件置于人工唾液中37℃储存24 h及100 d,随后进行微拉伸强度测试,使用扫描电镜观察牙本质端断裂面,并对断裂模式进行分析。结果与结论:(1)储存24 h:使用两步法粘接剂或全酸蚀粘接剂的情况下,不同表面处理组间的粘接强度比较差异无显著性意义(P>0.05);使用一步法粘接剂或通用型粘接剂的情况下,仅粗粒度车针组粘接强度低于砂纸组(P0.05);使用粗粒度车针的情况下,VSA组与AIO组、GLU组、SBU组粘接强度比较差异均有显著性意义(P0.05);(2)储存100 d:使用两步法粘接剂或全酸蚀粘接剂的情况下,不同表面处理组间的粘接强度比较差异无显著性意义(P>0.05);使用一步法粘接剂的情况下,仅粗粒度车针组粘接强度低于砂纸组(P0.05);使用标准粒度车针的情况下,仅SBU组与VSA组、GLU组与SBU组、GLU组与VSA组粘接强度无差异(P>0.05);使用粗粒度车针的情况下,仅VSA组与AIO组粘接强度无差异(P>0.05);(3)仅在使用两步法粘接剂的情况下,不同表面处理组100 d后的粘接强度与24 h比较差异有显著性意义(P<0.05);(4)与浸泡24 h相比,VSA组、SBU组、GLU组浸泡100 d后的粘接界面断裂和混合断裂比例略有增加,其中VSA组变化最大;与其他组比较,GLU组浸泡24 h与100 d的粘接界面断裂和混合断裂模式比例均超过50%;(5)结果表明,使用不同粒度车针预备产生了不同的玷污层,对一步法自酸蚀粘接剂粘接强度产生了显著影响,对两步法自酸蚀粘接剂和全酸蚀粘接剂未产生显著影响;存储时间对不同粘接剂产生了显著影响。

关键词：牙本质金刚砂车针玷污层通用型粘接剂微拉伸测试粘接强度扫描电镜断面观察

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