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石斛内生菌产石斛碱类生物碱发酵培养条件优化及降血糖活性研究

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中国食物与营养 2024年

作者：鲁为刘佳萌覃璐琪郑佳欢郭润芳范蓓中国农业科学院农产品加工研究所河北农业大学食品科技学院

目的：优化石斛内生菌Pseudomonas protegens CM-YJ 44的培养条件，提高其次级代谢产物石斛碱类生物碱的产量。方法：利用单因素试验及正交试验对其发酵培养条件进行了优化，借助高效液相色谱确定了石斛碱类生物碱产量最高的最佳培养条... 详细信息

目的：优化石斛内生菌Pseudomonas protegens CM-YJ 44的培养条件，提高其次级代谢产物石斛碱类生物碱的产量。方法：利用单因素试验及正交试验对其发酵培养条件进行了优化，借助高效液相色谱确定了石斛碱类生物碱产量最高的最佳培养条件。利用胰岛素抵抗（IR）细胞模型，二甲双胍（Met）作为阳性对照，测定2-(N-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑-4-氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖（2-NBDG）的摄取量，比较菌株次级代谢产物的降血糖活性。结果：优化实验发现，菌株CM-YJ 44培养的最佳碳源、氮源、无机盐添加量、维生素和初始pH值分别为5 g/L果糖、3 g/L酵母浸粉、5 g/L麦芽浸粉、0.1%无机盐。在200 r/min、28℃下培养48 h石斛碱类生物碱产量最高可达到39.56 mg/mL。活性测定结果发现，50 ng/mL和100 ng/mL的石斛碱与CM-YJ 44次级代谢产物作用下，细胞活力分别为101%和91.62%，且均能显著提高细胞2-NBDG的摄取（P<0.05）。结论：在最佳培养条件下石斛碱类生物碱产量最高；菌株次级代谢产物降血糖活性优于石斛碱纯品，且二者活性均优于Met。

关键词：石斛内生菌工艺优化石斛碱类生物碱 HepG2 降血糖

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冶金机械设备质量管理及维护措施分析

中国机械 2023年第10期 108-111页

作者：郭润芳河钢集团张宣科技设备能源部

为了确保冶金机械设备能安全可靠运行，进而为使用单位创造出更多的价值，做出加强质量管理及维护工作的建议。首先，阐述冶金设备质量管理及维护工作遵循的基本原则，包括清洁、润滑及定期检查维护的原则；其次，分析冶金设备质量管理... 详细信息

为了确保冶金机械设备能安全可靠运行，进而为使用单位创造出更多的价值，做出加强质量管理及维护工作的建议。首先，阐述冶金设备质量管理及维护工作遵循的基本原则，包括清洁、润滑及定期检查维护的原则；其次，分析冶金设备质量管理及维护过程中存在的问题，包括前期管理准备不充分、维护管理力度不足、润滑管理不完善、管理与维护制度缺失、操作工人专业能力及素养参差不齐等；最后，以全面提升设备质量管理及维护效果为目标，探究几点切实可行的措施方法，以供同行参考。

关键词：冶金设备质量管理设备维护现状分析措施探究

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红薯渣中不同果胶组分的提取及结构表征

中国调味品 2023年第8期48卷 24-32页

作者：宋静蕾潘晓帆裴家伟郭润芳河北农业大学食品科技学院河北保定071000

为开发红薯渣中的功能性营养组分,实现农业加工废弃物的高值化利用,该研究以红薯制粉工业的副产物红薯渣为原料,优化了果胶的盐-碱连续提取工艺,并对提取得到的2种果胶分子进行结构表征和性质研究。结果表明,盐提工艺中,在草酸钾浓度为9... 详细信息

为开发红薯渣中的功能性营养组分,实现农业加工废弃物的高值化利用,该研究以红薯制粉工业的副产物红薯渣为原料,优化了果胶的盐-碱连续提取工艺,并对提取得到的2种果胶分子进行结构表征和性质研究。结果表明,盐提工艺中,在草酸钾浓度为9.2 g/L、料液比为1∶39、提取时间为118 min的条件下,CSP型果胶产率最大,为8.68%,其分子量为49.42 kDa,结构中包含78.77%HG和12.46%RG I。在随后的碱提工艺中,当碳酸钠浓度为9.2 g/L、料液比为1∶44、提取时间为3.5 h时,ASP型果胶的产率最大,为14.30%,分子量为752.58 kDa,由42.57%HG和55.41%RG I组成。红外光谱分析表明两者都属于典型的低甲氧基果胶多糖;SEM观察到CSP型果胶呈片层状聚集,ASP型果胶呈明显的蜂窝状结构;功能特性上两者都表现出较好的WHC/OHC,但ASP型的总体乳化性优于CSP型。该研究建立了盐-碱连续提取工艺,获得了不同类型的低甲酯化果胶,为进一步研究不同类型红薯果胶的功能价值和精准利用奠定了基础。

关键词：红薯渣盐-碱连续提取 CSP型果胶 ASP型果胶结构表征

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淀粉型甘薯RS3制备工艺及体外抗消化特性

食品研究与开发 2023年第1期44卷 117-124页

作者：郝世娟宋静蕾裴家伟郭润芳河北农业大学食品科技学院河北保定071000

以淀粉型甘薯为原料,利用单因素试验研究不同淀粉乳质量浓度、pH值、压热温度、压热时间及冷却回生时间对甘薯三型抗性淀粉(resistant starch type 3,RS3)得率的影响,并通过响应面设计优化制备工艺。结果显示,响应面试验得出的最优制备... 详细信息

以淀粉型甘薯为原料,利用单因素试验研究不同淀粉乳质量浓度、pH值、压热温度、压热时间及冷却回生时间对甘薯三型抗性淀粉(resistant starch type 3,RS3)得率的影响,并通过响应面设计优化制备工艺。结果显示,响应面试验得出的最优制备条件为淀粉乳浓度13%、pH5.5、压热温度110℃、压热时间35 min,此时RS3得率为37.94%,与预测值仅相差0.92%,响应面模型与实际情况拟合良好。甘薯抗性淀粉RS3的体外抗消化特性研究表明,RS3的酶解率和模拟消化道的消化率低,展示很强的抗酶解、抗消化特性。电镜结果显示,RS3颗粒呈不规则块状,表面凹凸不平;结晶型以B型为主,颗粒有序度降低,双螺旋程度和结晶度提高,与原淀粉相比结构更加紧密,这些结构特性可以解释甘薯RS3的抗消化特性。

关键词：甘薯三型抗性淀粉(RS3) 结构表征红外光谱结晶性质消化特性

嗜热真菌Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶基因的cDNA克隆及表达

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微生物学报 2006年第1期46卷 99-103页

作者：郭润芳李多川山东农业大学植保学院环境生物系

根据Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶Chit的N-端氨基酸序列和同源保守序列设计简并引物,通过RT-PCR及快速扩增cDNA末端(RACE)的方法,克隆了该几丁质酶的编码基因chit,全长cDNA为1500bp,包含一个由442个氨基酸组成的开放阅读框。... 详细信息

根据Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶Chit的N-端氨基酸序列和同源保守序列设计简并引物,通过RT-PCR及快速扩增cDNA末端(RACE)的方法,克隆了该几丁质酶的编码基因chit,全长cDNA为1500bp,包含一个由442个氨基酸组成的开放阅读框。该基因已在GenBank中注册,登录号为DQ092332。将成熟肽几丁质酶Chit阅读框与酵母表达载体pPIC9K连接,构建重组质粒pPIC9K/chit,转化毕赤酵母GS115,在甲醇的诱导下,成功地分泌出具生物活性的几丁质酶,诱导6d后酶活性达2.261U/mL,酶蛋白表达量为0.36mg/mL。该酶的最适反应温度和pH值分别为60℃和5.5,该酶在50℃以下稳定;65℃的半衰期为40min。

关键词：几丁质酶 RACE 同源性表达

盂县第三实验小学:让阅读成为校园最美的声音

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山西教育（管理版） 2022年第10期 40-41页

作者：郭瑞祺郭润芳盂县第三实验小学

“双减”政策的落地减轻了学生校内作业和校外培训的负担,同时也增加了学生校内活动和家庭生活的时间。盂县第三实验小学审慎研判、科学破题,在做“减法”的同时做好提质增效的“加法”,全面推行“阅读+”项目工程。东林书院顾宪成名联... 详细信息

“双减”政策的落地减轻了学生校内作业和校外培训的负担,同时也增加了学生校内活动和家庭生活的时间。盂县第三实验小学审慎研判、科学破题,在做“减法”的同时做好提质增效的“加法”,全面推行“阅读+”项目工程。东林书院顾宪成名联有言:“风声雨声读书声声声入耳,家事国事天下事事事关心。”盂县第三实验小学的阅读实践教育正是用最美丽的童音去落实“双减”,去靓化、美化校园,让全体师生在琅琅的读书声中涵养精神、着色经历、品味成长。

关键词：阅读实践校外培训东林书院顾宪成读书声实验小学提质增效盂县

低温对锈赤扁谷盗不同虫态及其种群的抑制作用

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中国粮油学报 2023年第4期38卷 1-6页

作者：吴天意赵国民夏丽媛李慧静伍祎郭润芳河北农业大学食品科技学院保定071000 国家粮食和物资储备局科学研究院粮食储运国家工程研究中心北京100037

以常见的储粮害虫锈赤扁谷盗为研究对象,研究5、10、15、20℃低温对其不同虫态生长发育的影响,分析低温储粮下害虫对粮食的损害情况,观察低温对其种群增长的影响,为低温储粮状态下的害虫防控提供参考。结果表明,5~20℃低温处理30 d后,... 详细信息

以常见的储粮害虫锈赤扁谷盗为研究对象,研究5、10、15、20℃低温对其不同虫态生长发育的影响,分析低温储粮下害虫对粮食的损害情况,观察低温对其种群增长的影响,为低温储粮状态下的害虫防控提供参考。结果表明,5~20℃低温处理30 d后,成虫死亡率均在30%以下;幼虫死亡率在5℃时最高为76.7%,在10、15、20℃下均低于30%。5、10、15、20℃下,幼虫的致死中时分别为21、44、38、49 d,10~20℃的LT 50值为5℃的1.8~2.4倍;卵在5℃和10℃下不能孵化,15℃下无法完成发育历期,20℃下可发育为成虫。低温对害虫种群增长有显著抑制作用,随着温度降低,害虫对粮食的损害程度逐渐减弱,20℃下害虫对粮食损害程度最大。因此,5~20℃低温储粮可以抑制害虫种群的增长,但致死效果较差,仍需采取有效的害虫防控措施,以达到保质控害,保障粮食安全的目的。

关键词：锈赤扁谷盗低温种群增长不同虫态致死中时

疏绵状嗜热丝孢菌热稳定几丁质酶的纯化及其性质研究

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微生物学报 2005年第2期45卷 270-274页

作者：郭润芳李多川王荣山东农业大学环境生物系泰安271018

采用硫酸铵沉淀、DEAE SepharoseFastFlow阴离子层析、Phenyl Sepharose疏水层析等步骤获得了凝胶电泳均一的疏绵状嗜热丝孢菌 (Thermomyceslanuginosus)几丁质酶。经SDS PAGE和凝胶过滤层析测得纯酶蛋白的分子量在 4 8～ 4 9 .8kD之间... 详细信息

采用硫酸铵沉淀、DEAE SepharoseFastFlow阴离子层析、Phenyl Sepharose疏水层析等步骤获得了凝胶电泳均一的疏绵状嗜热丝孢菌 (Thermomyceslanuginosus)几丁质酶。经SDS PAGE和凝胶过滤层析测得纯酶蛋白的分子量在 4 8～ 4 9 .8kD之间。该酶反应的最适温度和最适pH分别为 5 5℃和 4 5 ,在pH4 5条件下 ,该酶在 5 0℃以下稳定 ;6 5℃的半衰期为 2 5min ;70℃保温 2 0min后 ,仍保留 2 4 %的酶活性。其N 端氨基酸序列为AQGYLSVQYFVNWAI。金属离子对几丁质酶的活性影响较大 ,Ca2 + 、Na+ 、K+ 、Ba2 + 对酶有激活作用 ;Ag+ 、Fe2 + 、Cu2 + 、Hg2 + 对酶有显著的抑制作用 ;以胶体几丁质为底物的Km 和Vmax值分别为 9 .5 6mg mL和 2 2 . 12 μmol min。抗菌活性显示 ,该酶对供试病原菌有不同程度的抑制作用。

关键词：嗜热真菌 Thermomyces lanuginosus 几丁质酶纯化性质

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食源性单核增生性李斯特氏菌毒力基因的分布

中国食品学报 2017年第3期17卷 241-249页

作者：亢春雨于宏伟郭润芳贾英民张楠河北农业大学食品科技学院河北保定071001 河北科技大学生物科学与工程学院石家庄050018

为探明保定、石家庄及周边地区食源性单增李斯特菌的污染状况以及食源性单增李斯特菌中毒力基因的分布情况,从保定、石家庄及周边地区农贸市场、超市采集七大类食品,共1 288个样品进行单增李斯特菌的污染调查,对鉴定分离出的308株食源... 详细信息

为探明保定、石家庄及周边地区食源性单增李斯特菌的污染状况以及食源性单增李斯特菌中毒力基因的分布情况,从保定、石家庄及周边地区农贸市场、超市采集七大类食品,共1 288个样品进行单增李斯特菌的污染调查,对鉴定分离出的308株食源性单增李斯特菌的27个毒力基因进行PCR检测。结果表明:七大类食品中单增李斯特菌的平均检出率为23.91%,动物源食品单增李斯特菌污染远高于植物源食品;27个毒力基因的PCR检测发现,inl、plcA、plcB、hpt、hly及fbp等与侵入、感染有关的毒力基因在动物源食品分离株中分布明显高于植物源食品分离株;而iap、ami、dlt、prfA、virR、hfq与粘附、调控有关的毒力基因在动物源食品分离株和在植物源食品分离株中差别不明显;hfq、dltC和iap 3个基因的检出率最高,分别达到94.68%,93.36%和91.03%,可作为该地区食源性单增李斯特氏菌鉴定的参考基因。

关键词：食源性单核增生性李斯特氏菌毒力基因 PCR