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作者：郭梦姚河北北方学院

学位级别：硕士

甲状腺乳头状癌（Papillary thyroid carcinoma,PTC）是最常见的分化型甲状腺恶性肿瘤,PTC发病率在所有癌症类型中增长最快,虽然治疗后五年总生存率可达98%,但仍有部分患者在经外科治疗或者放化疗后出现癌细胞浸润到周围淋巴组织,导致... 详细信息

甲状腺乳头状癌（Papillary thyroid carcinoma,PTC）是最常见的分化型甲状腺恶性肿瘤,PTC发病率在所有癌症类型中增长最快,虽然治疗后五年总生存率可达98%,但仍有部分患者在经外科治疗或者放化疗后出现癌细胞浸润到周围淋巴组织,导致死亡率的增加。因此有必要了解甲状腺癌发病分子和遗传学机制,探索新的治疗靶点。TFF3属于三叶因子（TFFs）家族,越来越多研究表明TFF3在多种肿瘤细胞中异常表达并参与肿瘤细胞扩散,侵袭和凋亡等多种生物学行为。高表达TFF3可以通过激活MAPK,ERK,PI3K/AKT等多种信号通路进而调节癌症进程,而TFF3对PTC的恶性生物学行为的调控和信号转导机制研究甚少。课题小组前期研究结果发现,当敲低内源性TFF3表达后,TPC-1细胞生长迟滞,侵袭能力下降与细胞阻滞于G0/G1期有关。在基于课题小组前期研究结果上,进一步明确TFF3差异表达对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞恶性生物学行为的影响及信号转导机制,为TFF3作为PTC治疗的潜在靶点基因和有效靶向抑制剂开发提供治疗策略。首先构建TFF3基因过表达以及敲低表达的慢病毒表达载体,通过慢病毒转染TPC-1细胞,收获稳定增强TFF3基因表达的TFF3-TPC-1细胞和增强对照组细胞Con TFF3-TPC-1;抑制TFF3基因表达的sh RN A-TFF3-TPC-1细胞和沉默对照组细胞sh Con-TPC-1;利用Real-time PCR（RT-PCR）以及Western Blot验证TFF3过表达及沉默效率。通过生长曲线和克隆形成实验检测TFF3-TPC-1,Con TFF3-TPC-1,sh RNA-TFF3-TPC-1,sh Con-TPC-1四组细胞增殖水平;流式细胞术检测四组细胞凋亡率;Western Blot和免疫细胞化学染色法（ICC）检测PI3K/AKT,NF-κB通路蛋白及凋亡相关蛋白Akt,p-Akt,NF-κB-p65,Bcl-2,Bax,细胞色素C（Cyt-c）,cleaved-Caspase-9,cleaved-Caspase-3表达水平。以上实验结果显示（1）TFF3-TPC-1细胞的增殖速度和克隆形成能力显著高于对照组Con TFF3-TPC-1（P＜0.05或P＜0.01）,sh RNA-TFF3-TPC-1细胞增殖速度和克隆形成能力显著低于对照组sh Con-TPC-1（P＜0.01）;（2）TFF3-TPC-1细胞凋亡率低于对照组Con TFF3-TPC-1（0.75%±0.08%VS 5.62%±0.3%,P＜0.01）,sh RNA-TFF3-TPC-1凋亡率高于对照组sh Con-TPC-1（22.2%±1.2%VS5.34%±0.4%,P＜0.01）;（3）与对照组相比,增强TFF3基因表达后Bax,Cyt-C,cleaved-Caspase-9,cleaved-Caspase-3表达下调,上述蛋白表达在沉默TFF3基因后被上调,Bcl-2,Akt,p-Akt,NF-κB-p65表达在增强TFF3基因表达后被上调,在沉默TFF3基因表达后被下调（P＜0.05或P＜0.01）。为进一步明确PI3K/AKT/NF-κB通路在PTC进程中的作用,进一步设置TFF3-TPC-1细胞株为过表达组;不做任何处理的野生型TPC-1细胞株作为Control组;经不同浓度的PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002（25μmol/L,50μmol/L,75μmol/L）干预培养的TFF3-TPC-1细胞株作为实验组,细胞培养48h。倒置显微镜观察各组细胞的形态变化和生长状态;生长曲线比较各组细胞的增殖水平;Transwell和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡;Western Blot检测各组细胞中p-Akt,p-IκB-α,IκB-α,NF-κB-p65,cleaved-Caspase-3,cleaved-Caspase-9,Bcl-2,Bax蛋白表达量。结果显示:（1）形态学观察:过表达组和Control组细胞呈上皮样,外形无明显差别。经LY294002干预培养后的实验组细胞随着LY294002培养浓度增加,细胞间隙变大,圆形透亮的细胞增多;（2）与Control组相比,过表达组细胞融合率,侵袭能力和迁移指数高于Control组,细胞凋亡率低于Control组（0.89%±0.03%VS 2.4%±0.06%,P＜0.05或P＜0.01）;（3）实验组细胞融合率,侵袭和迁移指数方面低于Control组,细胞凋亡率高于Control组（6.22%±0.02%,10.8%±0.02%,24%±0.07%VS 2.4%±0.06%,P＜0.05或P＜0.01）;（4）We

关键词： TFF3 甲状腺乳头状癌 PI3K/AKT/NF-κB 增殖凋亡 LY294002

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三叶因子3对甲状腺乳头状癌细胞周期的影响及机制

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解剖学报 2019年第2期50卷 211-219页

作者：代金林旭郭梦姚张静张文静薛刚吴靖芳河北北方学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000

目的探讨三叶因子3 (TFF3)基因沉默对人甲状腺乳头状癌TPC-1和BCPAP细胞增殖及细胞周期的影响及相关分子机制。方法包装TFF3 shRNA慢病毒载体,病毒感染获得TPC-1和BCPAP稳转细胞株;生长曲线和集落形成实验检测沉默TFF3后细胞增殖状况;... 详细信息

目的探讨三叶因子3 (TFF3)基因沉默对人甲状腺乳头状癌TPC-1和BCPAP细胞增殖及细胞周期的影响及相关分子机制。方法包装TFF3 shRNA慢病毒载体,病毒感染获得TPC-1和BCPAP稳转细胞株;生长曲线和集落形成实验检测沉默TFF3后细胞增殖状况;流式细胞术检测TFF3基因对TPC-1和BCPAP细胞周期的影响;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测P27、P21和cyclin D1、周期蛋白依赖性激酶(CDK) 4 mRNA的表达情况;免疫印迹法(Western blotting)、免疫细胞化学染色检测周期相关蛋白P27、P21、cyclin D1、CDK4和蛋白激酶B(Akt)、p Akt的蛋白表达水平。结果成功包装TFF3 shRNA慢病毒载体,病毒液感染获得TPC-1和BCPAP稳转细胞株;生长曲线和集落形成实验结果显示,沉默TFF3后,细胞增殖能力减弱;流式细胞术结果显示,与对照组相比,TFF3基因沉默组G1期的细胞比例明显增高(*P<0. 05),S和G2期的细胞比例明显下降(*P<0. 05); TFF3沉默组TPC-1和BCPAP细胞中的P27、P21 mRNA和蛋白明显上调(*P<0. 05),而cyclin D1,CDK4mRNA和蛋白表达降低(*P<0. 05); 4株细胞Akt蛋白含量无明显差异,但沉默TFF3组磷酸化蛋白激酶B(p Akt)表达减弱;免疫细胞化学染色显示,cyclin D1阳性蛋白位于癌细胞胞核,P27、P21蛋白表达于胞质和胞核,且沉默TFF3后在细胞核中阳性信号增强,细胞质中阳性表达降低。结论沉默TFF3可明显延长甲状腺癌细胞周期,抑制细胞的增殖,可能与抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路相关蛋白的表达有关。

关键词：三叶因子3 细胞周期慢病毒转染磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B 流式细胞术人

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三叶因子3/磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/核因子-κB在人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1增殖和凋亡中的作用

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解剖学报 2020年第4期51卷 528-535页

作者：郭梦姚孙琳林旭张文静张静吴靖芳薛刚河北北方学院形态学实验室河北张家口075000 河北北方学院耳鼻咽喉头颈外科教研室河北张家口075000

目的探讨三叶因子3(TFF3)对人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法构建TFF3基因过表达和敲低表达的慢病毒表达载体,包装293T细胞,产生慢病毒颗粒,病毒液转染TPC-1细胞,构建稳定增强TFF3表达的TFF3-TPC-1细... 详细信息

目的探讨三叶因子3(TFF3)对人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法构建TFF3基因过表达和敲低表达的慢病毒表达载体,包装293T细胞,产生慢病毒颗粒,病毒液转染TPC-1细胞,构建稳定增强TFF3表达的TFF3-TPC-1细胞系以及增强对照组细胞系ConT FF3-TPC-1;构建抑制TFF3表达的shRNA-TFF3-TPC-1细胞系以及沉默对照组细胞系shC on-TPC-1;利用Western blotting实验与Real\|time PCR验证TFF3过表达和沉默效率;生长曲线和集落形成实验检测4组细胞增殖状况;流式细胞术检测4组细胞凋亡情况;Western blotting和免疫细胞化学染色检测凋亡相关蛋白和磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、核因子-κB(NF-κB)通路蛋白表达水平。结果1.成功构建TFF3过表达和抑制表达稳转细胞系TFF3-TPC-1及细胞系shRNA-TFF3-TPC-1;***3-TPC-1细胞增殖能力和集落形成能力明显高于ConT FF3-TPC-1组(P<0.05或P<0.01),shRNA-TFF3-TPC-1细胞增殖能力和集落形成能力明显低于shC on-TPC-1组(P<0.01);***3-TPC-1细胞凋亡率低于ConT FF3-TPC-1(0.75%±0.08%vs 5.62%±0.3%,P<0.01),shRNA-TFF3-TPC-1凋亡率高于shC on-TPC-1(22.2%±1.2%vs 5.34%±0.4%,P<0.01);4.沉默TFF3基因后,Bax、细胞色素C(Cyt-C)、cleaved-Caspase-9、cleaved-Caspase-3表达升高,Bcl-2、通路蛋白Akt、p-Akt、NF-κB-P65表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论TFF3可能通过影响PI3K/Akt/NF-κB信号通路调节TPC-1细胞的增殖和凋亡。

关键词：三叶因子3 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子κB 甲状腺乳头癌慢病毒转染免疫印迹法流式细胞术实时定量聚合酶链反应人

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大肠杆菌感受态细胞制备及转化研究现状

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河北北方学院学报（自然科学版） 2020年第8期36卷 44-48页

作者：郭梦姚吴靖芳河北北方学院形态学实验室河北张家口075000 河北北方学院组织学与胚胎学教研室河北张家口075000

大肠埃希氏菌(Escherichia coli,***)又称大肠杆菌,因结构简单、遗传背景明确而成为基因克隆实验中最常用的受体菌种。感受态细胞的制备与转化是生物转化实验中的重要环节,大肠杆菌感受态细胞的转化效率直接影响携带目的基因的重组质粒... 详细信息

大肠埃希氏菌(Escherichia coli,***)又称大肠杆菌,因结构简单、遗传背景明确而成为基因克隆实验中最常用的受体菌种。感受态细胞的制备与转化是生物转化实验中的重要环节,大肠杆菌感受态细胞的转化效率直接影响携带目的基因的重组质粒能否导入受体细胞,表达出新的遗传性状。大肠杆菌感受态细胞(competent cells)制备常采用物理或化学方式改变细胞膜通透性,诱导受体菌摄取外源性DNA并整合入受体菌。此外,细菌细胞密度值(OD600)、转化液浓度、热激参数、培养条件等因素也影响转化效率。综述了国内外大肠杆菌感受态细胞的制备及转化方法,以期为各大实验室制备和转化大肠杆菌感受态细胞提供参考。

关键词：大肠杆菌感受态细胞制备方法转化

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基于智能手机识别的薄层色谱法快速检测油菜籽中的叶绿素

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中国油料作物学报 2024年

作者：郭梦帅李泽一肖华明吕昕梅德圣王丹姚旋郭亮胡琼陈洪魏芳中国农业科学院油料作物研究所农业农村部油料加工重点实验室湖北省油料脂质化学与营养重点实验室华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室湖北洪山实验室

为高效鉴定油菜籽品质，建立一种操作简单、成本低、耗时短的油菜籽中叶绿素含量的快速检测方法。采用乙醇（95%）提取样品中的叶绿素，以石油醚（60～90℃）-丙酮-甲苯（体积比2∶1.5∶2）为展开剂，紫外线分析仪（365 nm）激发叶绿素... 详细信息

为高效鉴定油菜籽品质，建立一种操作简单、成本低、耗时短的油菜籽中叶绿素含量的快速检测方法。采用乙醇（95%）提取样品中的叶绿素，以石油醚（60～90℃）-丙酮-甲苯（体积比2∶1.5∶2）为展开剂，紫外线分析仪（365 nm）激发叶绿素荧光显色，用智能手机采集荧光斑点图像，Image J软件进行荧光斑点自动识别，得到斑点面积，实现叶绿素a和叶绿素b的快速定性定量分析。该方法定量检测叶绿素a和b的线性范围为0.04～1.00 mg/mL，叶绿素a的决定系数R2为0.9965，日内精密度为5.9%，日间精密度为8.6%。叶绿素b的决定系数R2为0.9925，日内精密度为6.1%，日间精密度为5.6%。油菜籽中叶绿素a和叶绿素b的加标回收率分别为90.00%～91.67%和92.00%～113.00%。结果表明该方法线性关系较好，准确度良好，能快速测定油菜籽中叶绿素含量。

关键词：叶绿素薄层色谱法 Image J 智能手机定量分析

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子宫内膜息肉宫腔镜切除术中、术后LNG-IUS不同放置时机对术后复发率及不良反应的影响

子宫内膜息肉宫腔镜切除术中、术后LNG-IUS不同放置时机对术后复...

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作者：郭梦吉林大学

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锐眼·眼界

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人民教育 2024年第10期 39-40页

作者：郭梦涵(编译) 上海师范大学国际与比较教育研究院

联合国教科文组织:发布报告介绍全球快乐学校框架据联合国教科文组织(UNESCO)3月20日报道,教科文组织发布了《为什么世界需要快乐的学校:关于学习中的幸福的全球报告》(Why the world needs happy schools:global report on happiness i... 详细信息

联合国教科文组织:发布报告介绍全球快乐学校框架据联合国教科文组织(UNESCO)3月20日报道,教科文组织发布了《为什么世界需要快乐的学校:关于学习中的幸福的全球报告》(Why the world needs happy schools:global report on happiness in and forlearning),报告介绍了联合国教科文组织全球快乐学校框架,该框架由四大支柱以及指导学习转型的12项高级标准组成。当前,学校面临学习和幸福的双重危机,如儿童失学、教师短缺、校园欺凌频发等。

关键词：联合国教科文组织 UNESCO 教师短缺校园欺凌双重危机四大支柱

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2023年中国部分地区猫主要病毒病的流行病学调查及猫白血病病毒的遗传演化分析

2023年中国部分地区猫主要病毒病的流行病学调查及猫白血病病毒的...

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作者：郭梦帅山东农业大学

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光影效果下写意人物画笔墨语言运用研究

光影效果下写意人物画笔墨语言运用研究

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作者：郭梦媛湖北师范大学

学位级别：硕士

在中国画的发展历史中,写意人物画确立了以笔墨语言为核心,通过塑造意象造型来传达写意精神的艺术形式。直到20世纪,画家在“中西融合”的思想下开始有意识的引入光影明暗塑造写实造型,将这一表现手法与传统写意人物画的笔墨语言相融合... 详细信息

在中国画的发展历史中,写意人物画确立了以笔墨语言为核心,通过塑造意象造型来传达写意精神的艺术形式。直到20世纪,画家在“中西融合”的思想下开始有意识的引入光影明暗塑造写实造型,将这一表现手法与传统写意人物画的笔墨语言相融合,随后经过不断地发展与完善,不但使得写意人物画逐渐脱离了传统的面貌,同时在发展的过程中创造出了多元化、本土化的光影笔墨语言形式。因此,研究光影融入笔墨语言的发展历程和运用方式,对当代写意人物画实践而言有着重要的意义。本文分为四部分研究,第一部分是绪论,阐释课题价值和光影以及笔墨的概念;第二部分从梳理写意人物画的历史发展脉络入手,研究写意人物画中光影在笔墨上应用的发展过程,思考背后的成因和审美特征;第三部分在实践方式上总结为“写实塑造”、“光色融入”和“主观重构”三个方面,结合代表画家和作品具体分析;第四部分作为重点章节通过三幅创作作品以及毕业创作《缭绫》来实践光影下笔墨语言的表现方法,汲取经验在日后的创作中探索当代写意人物画更多的可能性。

关键词：写意人物画光影笔墨创作实践

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顺序主导和方向驱动下基于点边特征的人体动作识别方法

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控制与决策 2024年第9期39卷 3090-3098页

作者：苏本跃郭梦娟朱邦国盛敏安庆师范大学计算机与信息学院铜陵学院数学与计算机学院安庆师范大学数理学院

人体运动是肢体运动方向、关节活动顺序以及动作幅度相互协调的过程.然而,现有方法往往直接对原始3D骨骼关节点信息进行建模,容易忽略肢体关节活动的顺序关系、运动方向性以及动作幅度变化影响.因此,提出一种顺序主导和方向驱动下基于... 详细信息

人体运动是肢体运动方向、关节活动顺序以及动作幅度相互协调的过程.然而,现有方法往往直接对原始3D骨骼关节点信息进行建模,容易忽略肢体关节活动的顺序关系、运动方向性以及动作幅度变化影响.因此,提出一种顺序主导和方向驱动下基于点边特征的骨骼卷积神经网络,通过刻画人体关节点运动顺序、帧间距离和骨骼边方向向量等特征对人体动作分类识别.该网络包含顺序主导单元和方向驱动单元.顺序主导单元对骨骼边末端关节点进行建模,利用关节点的排列方式、帧间距离信息对关节活动顺序和肢体变化幅度进行表征.方向驱动单元利用骨骼边方向向量信息表征肢体运动的方向性.最后,将顺序主导单元与方向驱动单元进行特征融合,对人体日常行为动作进行分类识别.实验结果表明,在两个大型数据集NTU-RGB+D60和NTU-RGB+D120上的实验结果分别较基准方法提升了2.6%、3.5%和5.9%、6.1%.因此,所提出方法能有效利用多特征之间的协同互补性对人类日常行为运动进行深层次刻画,提高人体动作识别的精度.

关键词：人体动作识别骨骼数据骨骼边方向向量有序关节点帧间距离卷积神经网络

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