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有机磷类农药适配体筛选及应用

有机磷类农药适配体筛选及应用

作者：郭文斐湖南工业大学

学位级别：硕士

食品、水和环境中有机磷类农药残留严重危害到人类身体健康。发展快速检测技术是保障人类健康的重大战略需求,具有重大意义。生物识别材料是快速准确检测技术的核心,开发新型生物识别材料是发展快速检测技术的关键技术研究。本论文拟改... 详细信息

食品、水和环境中有机磷类农药残留严重危害到人类身体健康。发展快速检测技术是保障人类健康的重大战略需求,具有重大意义。生物识别材料是快速准确检测技术的核心,开发新型生物识别材料是发展快速检测技术的关键技术研究。本论文拟改进基于磁珠-指数富集配体系统进化技术(MB-SELEX)适配体筛选方法,开发筛选辛硫磷、甲基对硫磷等物质的新型生物识别材料核酸适配体;同时将其应用于构建快速便捷检测的荧光或电化学传感器。本论文主要研究内容如下:1、辛硫磷适配体的筛选及荧光传感器的构建。采用改进的磁珠-SELEX筛选方法,获得了特异性识别辛硫磷的适配体PHO-APT3,解离常数为0.93±0.25μM。基于修饰的适配体PHO-APT3s,在适配体5’端修饰荧光素,互补链3’端修饰猝灭剂,构建了一种竞争型荧光适配体传感器。在0.1-5.0μM范围内呈线性关系(R=0.992),检测限为34.35 n M,具有操作便捷,反应速度快、价格低廉等优势。考虑到适配体优先识别和检测信号背景的降低,我们又构建了基于多互补链和纳米金(Au NPs)的荧光适配体传感器。该传感器具有更低的背景和更广泛的荧光强度变化范围,且检测误差小,在0.05-5μM范围内呈线性关系(R=0.996),检测限为29.69 n M。结果表明筛选的辛硫磷适配体具有复杂实际环境特异性捕获辛硫磷的特性,具有重要的实用价值。2、甲基对硫磷适配体的筛选及电化学传感器的构建。在上述筛选方法的基础上选用洗脱率定量法监测筛选进程。获得了一条具有高亲和力和高特异性的甲基对硫磷适配体MPapta-6。该适配体的解离常数为39.66±14.73μM。并应用制备了一种基于多聚赖氨酸功能化黑磷纳米片(PLL-BP)和纳米金(Au NPs)的电化学适配体传感器。在最佳条件下,该传感器在1-10p M范围内呈良好的线性关系(R=0.992),检测限低至0.49 p M。该适配体传感器具有灵敏度高、特异性好、响应速度快等优势。

关键词：有机磷类农药适配体纳米金磁珠-SELEX 传感器

生存相关DLEU1与HPV感染阳性宫颈癌关系研究

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潍坊医学院学报 2023年第2期45卷 81-86页

作者：苗霞董爱萍郭文斐潍坊市人民医院检验科山东潍坊261041

目的探讨淋巴细胞白血病中lncRNA缺失型1(DLEU1)是否与人乳头瘤病毒(HPV)感染相关以及DLEU1在HPV阳性(HPV+)宫颈癌(CC)患者中的临床价值。方法选择2016年1月~2017年12月接受治疗的CC患者128例作为宫颈癌组,同期行子宫切除术的子宫肌... 详细信息

目的探讨淋巴细胞白血病中lncRNA缺失型1(DLEU1)是否与人乳头瘤病毒(HPV)感染相关以及DLEU1在HPV阳性(HPV+)宫颈癌(CC)患者中的临床价值。方法选择2016年1月~2017年12月接受治疗的CC患者128例作为宫颈癌组,同期行子宫切除术的子宫肌瘤患者99例作为对照组,通过受试者工作特征分析评估DLEU1从对照中筛选CC患者的能力以及区分不同HPV感染状态个体的能力,利用Kaplan-Meier生存分析和Cox回归分析评估DLEU1与CC患者生存预后的关系。结果 DLEU1表达在CC组织和细胞系中显著上调,特别是在HPV+的组织和细胞系中。DLEU1在区分CC患者以及区分HPV+和HPV阴性(HPV-)CC患者方面具有较高的诊断价值,并对HPV+对照具有一定的筛选能力。结论 DLEU1与CC患者HPV感染相关,与总CC患者和HPV+CC患者的生存预后相关,并可独立预测CC患者的预后,DLEU1可作为HPV+CC患者的诊断和预后生物标志物。

关键词：宫颈肿瘤人乳头瘤病毒长链非编码RNA 淋巴细胞白血病缺失基因1

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RPSA在SS2感染小鼠组织、免疫细胞中的分布及其作用研究

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RPSA在SS2感染小鼠组织、免疫细胞中的分布及其作用研究

作者：郭文斐吉林大学

学位级别：硕士

目的:猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是人类动物源性脑膜炎的常见病原。核糖体蛋白SA(Ribosomal protein SA,RPSA)是一种多形性、多位点、多功能的高度保守的核糖体蛋白质,在多种细胞中广泛表达。本课题组前期的研究工作发... 详细信息

目的:猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)是人类动物源性脑膜炎的常见病原。核糖体蛋白SA(Ribosomal protein SA,RPSA)是一种多形性、多位点、多功能的高度保守的核糖体蛋白质,在多种细胞中广泛表达。本课题组前期的研究工作发现RPSA介导SS2穿越血脑屏障。但是RPSA与感染相关的研究目前较少,并且关于该蛋白的组织学分布尚未有报道。RPSA分布是功能研究的基础,对感染机制与免疫互作机制非常重要。因此,本研究的主要目的是探究RPSA在SS2感染时的组织分布及其与炎症应答的关系。方法:本研究用SS2菌株JZLQ022感染ICR小鼠,利用免疫组化方法和流式细胞术分析RPSA在小鼠各个脏器的表达变化以及在外周血免疫细胞中的表达变化,同时对组织切片进行HE染色,对比小鼠感染SS2后的病理变化。最后,在细胞水平上,以小鼠小胶质细胞系BV2为研究对象,采用qRT-PCR技术探究RPSA与TLR的关系。结果:(1)心、肝、脑、小肠是小鼠感染SS2的主要易感器官,感染后均出现不同程度的病变,其中心脏和小肠RPSA的表达在感染1d后下降明显(P均<0.01),而肝脏和脑组织在感染1d后RPSA表达升高明显,尤以脑组织为甚(P<0.001)。(2)小鼠外周血中,T细胞、B细胞以及NK细胞表面均有RPSA,其中CD4T细胞在感染3d后蛋白表达增多(P<0.01),而CD8T细胞、B细胞以及NK细胞在感染3d均呈现下降趋势(P均<0.01)。(3)BV2细胞SS2感染后TLR2、TLR5、TLR6、TLR9转录水平均显著升高(P均<0.05);以抗体封闭细胞表面RPSA再感染SS2后,TLR2转录水平下降(P<0.05),同时在BV2激活后转录增多的细胞因子IL-1β、TNF-α也表现为转录减少(P均<0.01)。结论:SS2感染后,脑组织受累最严重且RPSA表达升高最为明显,并且RPSA对TLR2的表达有促进作用,靶向封闭细胞表面RPSA可能是细菌性脑膜炎的防治方法之一,这一发现为SS2感染以及SS2脑膜炎的预防和治疗提供了新的思路。

关键词：细菌性脑膜炎猪链球菌2型核糖体蛋白SA Toll样受体

黄土高原草地和农田系统碳动态对降雨、温度和CO2浓度变化响应的模拟

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草业学报 2018年第2期27卷 1-14页

作者：郭丁郭文斐赵建特木其勒图李旭东傅华骆亦其草地农业生态系统国家重点实验室农业部草牧业创新重点实验室兰州大学草地农业科技学院甘肃兰州730020 内蒙古阿拉善盟额济纳旗草原工作站内蒙古巴彦浩特750306 内蒙古阿拉善盟草原监督管理所内蒙古巴彦浩特750306 美国北亚利桑那大学工程林业和自然科学学院亚利桑那弗拉格斯塔夫86011

全球气候变化通常是多种环境条件同时连续地发生变化,而多因子的控制实验并不能完全模拟环境的变化且其通常需要耗费很高的成本。应用模型可以加深理解全球气候变化对生态系统结构和功能的影响。应用陆地生态系统(TECO)模型模拟黄土高... 详细信息

全球气候变化通常是多种环境条件同时连续地发生变化,而多因子的控制实验并不能完全模拟环境的变化且其通常需要耗费很高的成本。应用模型可以加深理解全球气候变化对生态系统结构和功能的影响。应用陆地生态系统(TECO)模型模拟黄土高原草地和农田生态系统在CO_2浓度、温度和降水改变情况下生态系统碳动态,探讨黄土高原草地和农田生态系统碳动态对未来气候变化响应。研究结果表明,随着温度升高,草地和农田生态系统净初级生产力(NPP)和异养呼吸(Rh)都呈现先增加后减少的趋势,生态系统碳净交换(NEE)表现出先减少后增加趋势,除农田系统的Rh对温度响应的拐点在当前温度,其余对温度响应拐点在增温4℃,此时系统固碳能力最高。降水和CO_2浓度增加改变生态系统NPP,Rh和NEE对温度变化的响应。随着降水增加,生态系统对温度响应更敏感;草地生态系统NPP,Rh和NEE对温度变化响应拐点发生改变,而农田系统无变化。CO_2浓度升高使农田生态系统NPP,Rh和NEE在增加4℃情景下,对温度变化响应不敏感。增加降水和增温对草地和农田生态系统NPP、Rh和NEE交互作用相对强度最大,分别为51.0%和30.0%、51.3%和16.6%以及-46.1%和-28.9%;增雨和增加CO_2浓度对草地和农田生态系统NPP、Rh和NEE交互作用相对强度最小,分别为2.4%和7.5%、3.7%和3.4%以及8.1%和-9.0%。三因子交互作用对生态系统NPP,Rh和NEE没有明显促进作用。与农田相比,草地生态系统碳动态对气候变化交互作用响应更显著。

关键词：气候变化异养呼吸净生态系统碳交换净初级生产力陆地生态系统(TECO)模型

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经济管理现代化和经济管理发展新趋势

中外企业家 2018年第12期 90-91页

作者：郭文斐河南机电职业学院

经济管理现代化发展的意义重大,不管是从国家层面,还是小型经济组织上来看都是如此。现代化的经济管理发展不是传统的经济管理,其是在实践中不断总结而形成的一种新式经济管理模式,在当前的经济态势下,呈现出管理思想柔性化、和谐化,管... 详细信息

经济管理现代化发展的意义重大,不管是从国家层面,还是小型经济组织上来看都是如此。现代化的经济管理发展不是传统的经济管理,其是在实践中不断总结而形成的一种新式经济管理模式,在当前的经济态势下,呈现出管理思想柔性化、和谐化,管理组织民主化、扁平化,管理工具数字化、自动化的特点,并逐步围绕先进的科学技术实现经济管理的智能化。

关键词：和谐化经济管理模式民主化