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我国恙虫病立克次体(恙虫病东方体)分型研究近况

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中国人兽共患病杂志 2000年第3期16卷 79-80页

作者：郭恒彬南京军区军事医学研究所南京210002

恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi,Rt)是恙虫病病原体,自从1931年定名以来,陆续发现Rt流行株,得到国际公认的有Gilliam,Karp,Kato,TA678,TA686,TA716,TA763和H1877 8个血清型[1],而Gilliam、Karp、Kato三型作为国际标准参照株.80年代初,日本[2]又分离到Kawasaki、Kuroki和Shimokoshi三型.在病原体的研究中,流行病学专家关注的问题,也就是病原体的分型,病原体的分型方法可分为表型分型和基因分型.有关Rt分型研究作简要叙述.

关键词：恙虫病立克次体表型分型 Rt分型

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诊断梅毒的三种过筛试验的原理及应用

中国皮肤性病学杂志 1992年第4期6卷 257-258页

作者：郭恒彬南京军区军事医学研究所 210002

诊断梅毒应有病史、临床症状及实验室检查结果综合分析才能确诊。血清学试验是诊断梅毒的主要手段之一。目前WHO推荐诊断梅毒的血清学方法用于过筛的试验有:(1)性病研究室试验(Veneral Disease Research Laboratory——VDRL)。(2)不加热... 详细信息

诊断梅毒应有病史、临床症状及实验室检查结果综合分析才能确诊。血清学试验是诊断梅毒的主要手段之一。目前WHO推荐诊断梅毒的血清学方法用于过筛的试验有:(1)性病研究室试验(Veneral Disease Research Laboratory——VDRL)。(2)不加热(灭能)

关键词：梅毒诊断过筛试验

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国外恙虫病立克次体研究进展

中国人兽共患病杂志 1992年第2期8卷 51-53页

作者：郭恒彬吴光华南京军区军事医学研究所

1975年日本发现流行株与古典型不同的新型恙虫病立克次体[Rickettsia tsutsugamushi,Rt]。新型Rt主要流行于秋冬,对小白鼠致病力弱或不致病,从而给分离病原带来难度。Kabayashi 采用 Tachibana 建立的CPA处理小白鼠后分离立克次体的方法... 详细信息

1975年日本发现流行株与古典型不同的新型恙虫病立克次体[Rickettsia tsutsugamushi,Rt]。新型Rt主要流行于秋冬,对小白鼠致病力弱或不致病,从而给分离病原带来难度。Kabayashi 采用 Tachibana 建立的CPA处理小白鼠后分离立克次体的方法,成功地从病人外周血中分离到弱毒株Rt,促进了弱毒株Rt的研究。本文对近几年Rt研究情况作一综述。

关键词：恙虫病立克次体研究

原位RT-PCR检测革螨体内HFRSV的实验研究

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中国人兽共患病杂志 2002年第4期18卷 61-62,74页

作者：朱进张云陶开华郭恒彬唐家琪南京军区军事医学研究所南京210002

目的　确定肾综合征出血热病毒 (HFRSV)在革螨体内分布和定位 ,进一步证明革螨作为HFRS传播媒介的意义。方法　采用原位RT -PCR分子杂交技术检测鼠肺组织细胞内和革螨体内的HFRSV -RNA。结果　阳性信号呈弥散分布 ,多见于鼠肺吞噬细胞... 详细信息

目的　确定肾综合征出血热病毒 (HFRSV)在革螨体内分布和定位 ,进一步证明革螨作为HFRS传播媒介的意义。方法　采用原位RT -PCR分子杂交技术检测鼠肺组织细胞内和革螨体内的HFRSV -RNA。结果　阳性信号呈弥散分布 ,多见于鼠肺吞噬细胞、血管内皮细胞等组织细胞内 ;革螨体内的阳性信号主要分布于卵巢细胞、中肠及支囊上皮细胞中 ,前体组织细胞较少。结论　地高辛素标记的核酸探针原位RT

关键词：原位RT-PCR 革 HFRSV 实验研究肾综合征出血热毒传播媒介肾综合征出血热

应用噬菌体展示技术筛选、鉴定抗汉滩病毒单克隆抗体的模拟表位

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第4期20卷 429-432页

作者：王长军唐家琪陶开华李先富白薇郭恒彬南京军区军事医学研究所江苏南京210002

目的 :应用噬菌体 12肽文库筛选抗汉滩病毒单抗 (mAb)F3、B11的模拟配体肽 ,并对其免疫学特性进行初步分析。方法 :以纯化的mAb为筛选配基 ,进行噬菌体肽库的生物亲和淘选。用ELISA法鉴定筛选克隆的结合活性 ,对阳性克隆进行序列测定和... 详细信息

目的 :应用噬菌体 12肽文库筛选抗汉滩病毒单抗 (mAb)F3、B11的模拟配体肽 ,并对其免疫学特性进行初步分析。方法 :以纯化的mAb为筛选配基 ,进行噬菌体肽库的生物亲和淘选。用ELISA法鉴定筛选克隆的结合活性 ,对阳性克隆进行序列测定和分析。用动物免疫试验初步分析噬菌体颗粒展示的抗原肽的免疫特性。结果 :通过 3～ 4轮生物淘选 ,ELISA显示筛选到的多数噬菌体克隆均可与mAb特异性结合 ;与mAbF3结合的阳性克隆的氨基酸序列高度一致 ,均为 MHGP TKNQMWHT ,与HTNV/SEOVM蛋白G2区第 75 0～ 75 9位氨基酸具有较高的同源性 ;而mAbB11特异性的结合肽在氨基酸水平上表现出一定的多态性 ,其序列的基序尚未能确定 ;动物免疫试验表明 ,噬菌体肽抗原具有良好的免疫反应性和免疫原性 ,是天然病毒抗原较好的免疫原模拟物。结论 :获得了具有良好结合活性的模拟表位肽 ,为基于表位的HFRSV多肽疫苗及DNA疫苗的研制奠定了基础。

关键词：汉滩病毒噬菌体肽文库单克隆抗体抗原表位

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我军恙虫病流行病学研究回顾与展望

解放军预防医学杂志 2003年第3期21卷 157-160页

作者：陶开华吴光华郭恒彬南京军区联勤部军事医学研究所南京210002

半个世纪来 ,我军通过广泛持久地开展恙虫病的流行病学调查研究与预防工作 ,取得了系列成果 ,主要有 :(1)疫区分布 :首先证实福建、浙江、云南、西藏、江苏、山东、辽宁、吉林、黑龙江、山西、河北等省存在恙虫病自然疫源地。 (2 )宿主... 详细信息

半个世纪来 ,我军通过广泛持久地开展恙虫病的流行病学调查研究与预防工作 ,取得了系列成果 ,主要有 :(1)疫区分布 :首先证实福建、浙江、云南、西藏、江苏、山东、辽宁、吉林、黑龙江、山西、河北等省存在恙虫病自然疫源地。 (2 )宿主动物 :在国内首次证实黄毛鼠、社鼠、大麝　、大林姬鼠、大仓鼠和兔为恙虫病的宿主动物。 (3)媒介恙螨 :以完整证据证明地里纤恙螨为我国南方、小盾纤恙螨为我国北方恙虫病的主要传播媒介。发现并证实高湖纤恙螨、海岛纤恙螨为恙虫病的新媒介。 (4 )季节分布与东方体分型 :证明我国恙虫病南方地区属夏季型 ,首先报告北方地区属秋冬型、东方体属Kawasaki型。 (5 )疫源地类型 :证明我国存在着多型恙虫病疫源地 ,其中具有代表性的主要有沿海岛屿型 (主要分布于福建 )、内陆山林型 (主要分布于浙江 )和内陆平原丘陵型 (主要分布于江苏 )。这 3型疫源地的景观、植被、宿主、媒介、季节分布与东方体型别均有所不同 ,因此 ,采取的预防措施亦应有所区别。 (6 )预防 :研究出许多灭鼠、灭螨和个体防护方法 ,通过采取综合性预防措施 ,有效地控制了发病和疫源地。

关键词：恙虫病流行病学研究展望

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小盾纤恙螨经卵传递病原体研究

中国媒介生物学及控制杂志 2004年第4期15卷 301-303页

作者：吴光华张云郭恒彬南京军区军事医学研究所专家组南京210002

目的　探索快速取得大量小盾纤恙螨未食子代幼虫的方法 ,以适应研究恙螨经卵传递病原体的需要。方法　将小黑板放置在肾综合征出血热 (HFRS)及恙虫病疫区草地上 ,10min后取回计算螨数并鉴定螨种。该法可收集到大量小盾纤恙螨未食子代幼... 详细信息

目的　探索快速取得大量小盾纤恙螨未食子代幼虫的方法 ,以适应研究恙螨经卵传递病原体的需要。方法　将小黑板放置在肾综合征出血热 (HFRS)及恙虫病疫区草地上 ,10min后取回计算螨数并鉴定螨种。该法可收集到大量小盾纤恙螨未食子代幼虫。 2 0～ 3 0只幼虫为 1批叮刺 1只小白鼠乳鼠以分离汉坦病毒 (HV)或叮刺 1只小白鼠以分离恙虫病东方体 (Ot)。结果　 2 4批恙螨幼虫叮刺乳鼠 ,分离到 5株HV ;6只小白鼠被恙螨幼虫叮刺 ,分离到 2株Ot。试验中所用幼虫未曾叮刺过 ,但鼠被这些幼虫叮刺后能感染上HV和Ot ,表明这些螨所带病原体系由母代螨经卵传递而来。结论　小黑板可采集到疫区草地上大量小盾纤恙螨未食幼虫 ,为研究恙螨经卵传递病原体提供了一种快速、简便、经济的方法。研究结果证明小盾纤恙螨可经卵传递HV和Ot,可作为HFRS和恙虫病的传播媒介。

关键词：小盾纤恙螨卵病原体恙虫病传播媒介

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从大麝鼩分离到恙虫病立克次体

中国人兽共患病杂志 1992年第6期8卷 51-52页

作者：郭恒彬徐毛华于明明吴光华南京军区军事医学研究所

1986年前,恙虫病在我国仅发现于浙江以南,属夏季型;1986年,我们在江苏发现秋冬型恙虫病的流行。为查明恙虫病在江苏的流行环节、特点和流行因素等,我们进行了系统调查研究。1990年10月从东台市安丰乡捕获的大麝鼩(Crocidura lasiura)中... 详细信息

1986年前,恙虫病在我国仅发现于浙江以南,属夏季型;1986年,我们在江苏发现秋冬型恙虫病的流行。为查明恙虫病在江苏的流行环节、特点和流行因素等,我们进行了系统调查研究。1990年10月从东台市安丰乡捕获的大麝鼩(Crocidura lasiura)中分离到2 株恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugamushi,Rt.),现报道如下。

关键词：恙虫病立克次氏体大麝Qu 鼠目

应用噬菌体肽文库筛选McAb F3特异性结合肽

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中华微生物学和免疫学杂志 2003年第1期23卷 63-66页

作者：王长军唐家琪李先富潘秀珍白薇郭恒彬南京军区军事医学研究所南京210002

目的　应用噬菌体展示肽文库筛选可与抗汉坦病毒囊膜蛋白单抗F3特异性结合的配体肽。方法　采用protein A亲和层析纯化的F3单抗为筛选配基 ,对噬菌体展示的随机 12肽文库进行生物亲和淘洗 ;夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性 ... 详细信息

目的　应用噬菌体展示肽文库筛选可与抗汉坦病毒囊膜蛋白单抗F3特异性结合的配体肽。方法　采用protein A亲和层析纯化的F3单抗为筛选配基 ,对噬菌体展示的随机 12肽文库进行生物亲和淘洗 ;夹心ELISA、竞争ELISA鉴定筛选克隆的结合特性 ,并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果　通过 3轮生物淘洗 ,能被抗体捕获的噬菌体克隆为 91.7% (11 12 ) ;ELISA测定显示筛选到的噬菌体短肽能与F3单抗特异性结合 ;序列分析表明 7个阳性克隆氨基酸序列相同 ,均为 MHGPTKNQMWHT ,同源性分析显示该序列与HTNV SEOVM蛋白G2区第 75 0～ 75 9位氨基酸有较高的同源性。结论　获得了具有良好结合活性的模拟表位肽 ,为基于表位水平的HFRSV(肾病综合征出血热病毒 )特异性分子多肽疫苗的设计提供了重要依据。

关键词：噬菌体展示肽文库 McAbF3 特异性结合肽汉滩病毒中和抗体