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UBA52对HSF4转录活性调控的分子机制

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UBA52对HSF4转录活性调控的分子机制

作者：郭康文河南大学

学位级别：硕士

背景白内障是世界范围内首要的致盲原因。成人白内障的发病率随年龄增加而升高,可高达60-80%。儿童白内障的发病率为0.015-0.03%,多与遗传因素有关。有报道HSF4突变与家族遗传性白内障的发生密切相关。基因敲除HSF4可诱发小鼠白内障,主... 详细信息

背景白内障是世界范围内首要的致盲原因。成人白内障的发病率随年龄增加而升高,可高达60-80%。儿童白内障的发病率为0.015-0.03%,多与遗传因素有关。有报道HSF4突变与家族遗传性白内障的发生密切相关。基因敲除HSF4可诱发小鼠白内障,主要表现为晶状体上皮细胞异常增生和纤维细胞分化障碍。这说明HSF4是晶状体的主要调控因子之一。HSF4是热休克转录因子家族中的一员,与典型的热休克转录因子HSF1相比,其缺少抑制三聚化的HR-C疏水结构域,因此,细胞内HSF4转录活性调控机制不同于HSF1,仍待研究中。通过酵母双杂交实验,我们发现了一个新的与HSF4b相互作用的蛋白-UBA52。UBA52是由泛素和核糖体蛋白L40组成的融合蛋白,可成熟为泛素分子(ubiquitin)和核糖体蛋白(L40)。泛素是一个进化十分保守的蛋白质,在细胞内有许多重要的功能,其中最主要的是形成多聚泛素链修饰底物蛋白,使其通过泛素蛋白酶体途径进行降解。泛素化修饰对晶状体发育起着重要作用,突变Ub/K6W可抑制纤维细胞分化,导致白内障发生。因此,我们推测,UBA52介导的蛋白质质量控制通过与HSF4b结合激活晶状体细胞的热休克反应,继而维持分化细胞的内稳态。目的利用晶状体上皮细胞和BL/C57小鼠晶状体,探究UBA52对HSF4b转录活性调控的分子机制。方法1.利用重叠延伸法构建UBA52K48R/K63R/G75/76A突变质粒。2.运用逆转录病毒方法构建UBA52过表达的稳定株细胞系。3.免疫沉淀,GST-pull-down和ubiquitin-enrichment用于测定UBA52与HSF4b之间,HSF4b与Rpb1之间的相互作用。免疫荧光确定这些蛋白在细胞内的共定位。4.免疫印迹和实时定量PCR测定小鼠晶状体上皮细胞及晶状体组织中蛋白的表达。5.染色质免疫共沉淀和双荧光素酶报告实验检测UBA52对HSF4b的DNA结合能力的影响。结果***52在不同发育时期的晶状体上皮和纤维中均表达,并且可以在晶状体上皮细胞中成熟为ubiquitin和L40,且其ubiquitin端与HSF4b相互作用,但不直接泛素化修饰HSF4b。***52通过增强HSF4b的DNA结合能力来促进HSF4b的转录活性,进而增加HSF4b下游基因hsp25,αB-crystallin的mRNA和蛋白的表达;***52点突变(K48R,K63R,G75/76A)后,其成熟和定位发生改变,并进一步影响其与HSF4b的相互作用进而削弱其调控HSF4b转录活性的能力;***4b通过与Rpb1相互作用激活HSF4b的转录活性,UBA52可以与HSF4b和Rpb1形成复合物参与调控HSF4b的转录活性。结论晶状体上皮细胞中,UBA52可成熟为ubiquitin和L40,且UBA52在晶状体发育的各个时期都有表达。UBA52的ubiquitin端通过与HSF4b相互作用增强HSF4b的DNA结合能力,进而上调HSF4b的转录活性。Rpb1介导UBA52和HSF4b的相互作用和调控功能。以上研究结果表明,UBA52通过与HSF4b相互作用参与HSF4b介导的晶状体发育过程。

关键词： UBA52 HSF4 RNA聚合酶Ⅱ 晶状体发育

宫颈癌三维后装治疗中两种优化方式的剂量及相关性分析

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中国实用医药 2020年第10期15卷 64-65页

作者：陈戈梁国连郭康文杨廉洲广东省农垦中心医院放疗一区 524000 广东省农垦中心医院外二科 524000

目的观察分析宫颈癌三维(在CT图像引导下)后装治疗中两种优化方式的剂量及相关性。方法26例宫颈癌患者,随机分为实验组和对照组,每组13例。对照组应用手动优化的后装治疗计划,实验组在原有图像信息基础上利用模拟退火逆向优化重新设计... 详细信息

目的观察分析宫颈癌三维(在CT图像引导下)后装治疗中两种优化方式的剂量及相关性。方法26例宫颈癌患者,随机分为实验组和对照组,每组13例。对照组应用手动优化的后装治疗计划,实验组在原有图像信息基础上利用模拟退火逆向优化重新设计治疗计划。观察比较两组宫颈癌患者靶区剂量参数(D90、D100、V100、膀胱D2cm^3、膀胱D1 cm^3、直肠D2cm^3、直肠D1 cm^3)、平均治疗时间,分析实验组宫颈癌患者膀胱参考点剂量参数以及相关性。结果两组靶区D90、D100、V100剂量参数等比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组靶区膀胱D2cm^3、膀胱D1 cm^3、直肠D2cm^3、直肠D1 cm^3剂量参数分别为(4.15±0.23)、(4.54±0.28)、(3.05±0.52)、(3.52±0.55)Gy,均低于对照组的(4.56±0.39)、(4.97±0.46)、(3.51±0.38)、(3.99±0.42)Gy,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组患者平均治疗时间(322.33±45.20)s显著短于对照组的(364.18±53.02)s,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组宫颈癌患者膀胱参考点剂量为(2.77±0.52)Gy,直肠参考点剂量为(2.96±0.77)Gy,实验组宫颈癌患者膀胱参考点剂量显著低于膀胱D2cm^3剂量,膀胱参考点剂量与膀胱D2cm^3剂量、直肠D2cm^3剂量呈正相关(r=0.265、0.158,P<0.05)。结论模拟退火逆向优化重新设计治疗计划能够提供与手动优化的后装治疗计划相同的靶区覆盖率,但是能够显著降低直肠和膀胱的最大受量。

关键词：宫颈癌三维后装治疗两种优化方式剂量相关性

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13C尿素呼气试验检测幽门螺杆菌的研究

泰山医学院学报 2015年第6期36卷 703-704页

作者：周文辉李斯桃卢浩锋郭康文中山市东升医院急诊科广东中山528414

目的用13C尿素呼气试验(13C—UBT)检测幽门螺杆菌,观察其特异性、敏感性。方法对因上腹不适来本院行胃镜检查证实为消化性溃疡的238例患者分别用13C—UBT、快速尿素酶试验(RUT)和病理组织学HE染色三种方法检测幽门螺杆菌(Hp),其中任两... 详细信息

目的用13C尿素呼气试验(13C—UBT)检测幽门螺杆菌,观察其特异性、敏感性。方法对因上腹不适来本院行胃镜检查证实为消化性溃疡的238例患者分别用13C—UBT、快速尿素酶试验(RUT)和病理组织学HE染色三种方法检测幽门螺杆菌(Hp),其中任两项阳性者诊断为Hp感染,从中分析13C—UBT敏感性和特异性。结果任两项同时阳性者共176例,13C—UBT、RUT、组织学敏感性和特异性分别为93.8%、93.5%;90.9%、91.9%;94.9%、95.2%,三种方法对HP感染诊断的敏感性及特异性均较高,经配对卡方检验,P>0.05,差异比较无统计学意义。结论用13C—UBT检测幽门螺杆菌,准确性及特异性高,具有简便、安全、可重复等优点,可作为检测HP感染及抗Hp治疗后复查的首选方法值得临床推广应用。

关键词：幽门螺杆菌 13C-尿素呼气试验快速尿素酶试验病理组织学

奈达铂与顺铂同步调强放疗治疗局部晚期鼻咽癌的临床研究

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第6期 76-78页

作者：陈戈梁国连郭康文杨廉洲黄康龙广东省农垦中心医院广东湛江524000

探讨奈达铂与顺铂同步调强放疗治疗局部晚期鼻咽癌的临床效果。方法:在2020年5月到2022年5月时间段内广东省农垦中心医院收治的病人中,选取局部晚期鼻咽癌且明确表示参加研究的患者60例,视为研究对象。在随机数字表法下,对这些患者实施... 详细信息

探讨奈达铂与顺铂同步调强放疗治疗局部晚期鼻咽癌的临床效果。方法:在2020年5月到2022年5月时间段内广东省农垦中心医院收治的病人中,选取局部晚期鼻咽癌且明确表示参加研究的患者60例,视为研究对象。在随机数字表法下,对这些患者实施等分处理,一组为顺铂组,一组为奈达铂组。全部对象均接受同步调放疗治疗,基于治疗有效率与不良反应率,分析不同药物治疗作用。结果:在治疗总有效率、血小板减少症、口腔黏膜炎发生率方面,两组差异不显著(P0.05),相较顺铂组,奈达铂组胃肠道反应率明显更低(P0.05)。结论:对于局部晚期鼻咽癌患者,临床应用奈达铂与顺铂同步调放疗治疗的效果基本相近,但前者不会过度刺激患者胃肠道,可进一步推广应用。

关键词：奈达铂顺铂同步调强放疗局部晚期鼻咽癌不良反应有效性

系统化急诊救治在糖尿病低血糖昏迷患者治疗中的应用效果分析

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中国现代药物应用 2023年第18期17卷 71-74页

作者：周文辉郭康文麦学东中山市东升医院 528414

目的分析系统化急诊救治在糖尿病低血糖昏迷患者治疗中的应用效果。方法50例糖尿病低血糖昏迷患者为研究对象,依照入院先后顺序分为研究组与对照组,各25例。对照组开展常规救治,研究组在对照组基础上开展系统化急诊救治。对比两组救治... 详细信息

目的分析系统化急诊救治在糖尿病低血糖昏迷患者治疗中的应用效果。方法50例糖尿病低血糖昏迷患者为研究对象,依照入院先后顺序分为研究组与对照组,各25例。对照组开展常规救治,研究组在对照组基础上开展系统化急诊救治。对比两组救治效果及生活质量评分。结果研究组苏醒时间(70.25±10.12)min及治疗总时间(4.02±0.39)h短于对照组的(81.25±9.35)min、(6.48±1.11)h,救治后空腹血糖(5.42±0.21)mmol/L及随访6个月内糖尿病低血糖昏迷复发率4.00%低于对照组的(6.19±0.28)mmol/L、28.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。随访6个月后,两组社会职能、认知功能、心理机能、躯体功能评分均高于本组出院前,且研究组社会职能、认知功能、心理机能、躯体功能评分分别为(78.38±5.74)、(80.28±5.15)、(83.29±5.37)、(82.16±6.32)分,显著高于对照组的(69.37±6.38)、(62.37±6.39)、(62.38±6.17)、(62.39±7.34)分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对糖尿病低血糖昏迷患者开展系统化急诊救治处理,临床疗效十分理想,能有效控制患者的病情,降低复发风险,有助于改善患者的生活质量。

关键词：糖尿病低血糖昏迷急诊救治生活质量

洛铂对比顺铂同步放射治疗ⅡB-ⅣA期宫颈癌的疗效及毒副反应

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广东医科大学学报 2021年第4期39卷 418-421页

作者：林远雄杨廉洲陈戈郭康文广东省农垦中心医院肿瘤放疗一区广东湛江524002

目的对比洛铂与顺铂同步放射治疗ⅡB-ⅣA期宫颈癌的疗效及毒副反应。方法选取病理学确诊且未经放化疗的宫颈癌患者60例,分为洛铂组和顺铂组,每组30例。其中洛铂组接受洛铂方案同步放化疗,顺铂组接受顺铂方案同步放化疗,比较两组的疗效... 详细信息

目的对比洛铂与顺铂同步放射治疗ⅡB-ⅣA期宫颈癌的疗效及毒副反应。方法选取病理学确诊且未经放化疗的宫颈癌患者60例,分为洛铂组和顺铂组,每组30例。其中洛铂组接受洛铂方案同步放化疗,顺铂组接受顺铂方案同步放化疗,比较两组的疗效和毒副反应。结果两组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05)。洛铂组患者恶心呕吐和肾功能损害的发生率低于顺铂组(P<0.01)。结论洛铂联合同步放射治疗宫颈癌在不降低治疗效果的前提下其毒副反应比顺铂小。

关键词：洛铂顺铂宫颈癌放疗

Livin与Fas/FasL在肺癌中表达的意义及其关系

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药学研究 2016年第10期35卷 610-613页

作者：苏文媚王焱叶海茵麦宗炯郭康文杨志雄广东医科大学附属医院肿瘤中心广东湛江524001

目的检测肺癌组织中Livin和Fas/FasL的表达水平,研究它们与临床病理特征的关系及其相互关系,为肺癌的早期诊断、治疗及靶向药物研发提供线索。方法采用免疫组织化学来检测肺癌组织216例、癌旁肺组织90例、肺良性病变组织45例中Livin、Fa... 详细信息

目的检测肺癌组织中Livin和Fas/FasL的表达水平,研究它们与临床病理特征的关系及其相互关系,为肺癌的早期诊断、治疗及靶向药物研发提供线索。方法采用免疫组织化学来检测肺癌组织216例、癌旁肺组织90例、肺良性病变组织45例中Livin、Fas和FasL基因的表达情况。结果 Livin在肺癌组织、癌旁肺组织、良性病变组织中阳性表达分别为:63.43%、14.44%、13.33%,差异有统计学意义(P<0.01);Fas在肺癌组织、癌旁肺组织、良性病变组织中阳性表达分别为:53.24%、83.33%、86.67%,其差异有统计学意义(P<0.01);Fas表达与病理学分级相关(P<0.05);FasL在肺癌中表达、淋巴结转移与病理学分级及TNM分期相关(P<0.05)。结论研究结果提示Livin和Fas/FasL可能作为凋亡相关的基因参与了肺癌的发生发展。

关键词：肺癌 Livin Fas FasL 免疫组织化学

基于OpenCV的机车数据自动获取方法研究

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铁道标准设计 2024年

作者：吕希奎郭康张楷宋雪省部共建交通工程结构力学行为与系统安全国家重点实验室石家庄铁道大学土木工程学院中国铁路郑州局集团有限公司

机车数据是列车牵引电算的重要基础数据，现有规范提供的10km/h及以上的速度间隔数据，难以有效满足列车牵引电算要求。目前，主要根据规范给出的关键点数据，采用插值法或拟合法获取所需的计算数据。列车特性曲线复杂、种类众多，现有... 详细信息

机车数据是列车牵引电算的重要基础数据，现有规范提供的10km/h及以上的速度间隔数据，难以有效满足列车牵引电算要求。目前，主要根据规范给出的关键点数据，采用插值法或拟合法获取所需的计算数据。列车特性曲线复杂、种类众多，现有方法通过有限的数据信息推算曲线任意位置信息，误差来源较多，插值或拟合精度难以保证。以牵引规范提供的机车特性曲线图像为数据源，使用八邻域追踪路径方法消除图像分支，三邻域方法定位边框角点，通过角点位置修正图像存在的角度偏差。结合OpenCV计算机视觉库，采用灰度化、二值化和骨架化图像处理方法对曲线进行单通道处理。利用形态学滤波方法，实现图像无效信息的有效剔除，获取可用于读取数据的有效机车特性曲线，并对曲线进行膨胀运算，提升数据的可读性，实现对机车特性曲线像素级数据提取算法。以HXD1D型电力机车牵引特性曲线图为例，对算法进行验证，并通过规范内关键点取值进行误差分析。试验结果表明，本文基于像素级的数据提取方法，运算速度快、实用性强、精度高，最大相对误差为0.8681%，研究为解决机车数据的自动获取提供新的解决方案。

关键词：机车数据图形处理特性曲线 OpenCV 邻域追踪

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地质力学学报 2024年第2期30卷 289-297页

作者：康文君徐锡伟应急管理部国家自然灾害防治研究院北京100085 复合链生自然灾害动力学应急管理部重点实验室北京100085 中国地质大学(北京) 地球科学与资源学院北京100083

2023年2月6日在土耳其中南部卡赫拉曼马拉什省10个小时内连续发生M_(W)7.8与M_(W)7.5双强震,震源机制解表明两个地震均为走滑型地震。土耳其双强地震发生后,国内外学者利用野外测量、GNSS以及差分InSAR等方法开展了一系列地表同震变形研... 详细信息

2023年2月6日在土耳其中南部卡赫拉曼马拉什省10个小时内连续发生M_(W)7.8与M_(W)7.5双强震,震源机制解表明两个地震均为走滑型地震。土耳其双强地震发生后,国内外学者利用野外测量、GNSS以及差分InSAR等方法开展了一系列地表同震变形研究,但由于所采用的技术手段限制,当前已有地表同震变形结果尚存在空间分辨率低、近断层处数据缺失等不足。为了弥补这些不足,研究利用哨兵2号光学影像数据,通过影像相关性匹配技术得到了土耳其双强震的东西向和南北向的地表同震变形场,并将这些地表变形转换成为沿着断层方向的左旋走滑位移。变形场结果显示两次地震地表破裂长度分别约280 km和约130 km,首先发生的M_(W) 7.8地震的平均走滑位移量为4.2±1.66 m,最大走滑位移量6.9±0.81 m;随后发生的M_(W)7.5地震的平均走滑位移量为4.9±2.45 m,最大走滑位移量为9.6±1.16 m。通过对比COSI-Corr方法和野外测量得到的水平位移,结果显示2种方法得到的最大水平位移相吻合,而COSI-Corr方法得到的平均位移略大于野外测量得到的水平位移,这是由COSI-Corr方法测量结果中包含了部分离断层弥散变形导致的。研究结论不仅可为断层面滑动反演模型提供变形数据和约束条件,同时可以加深对走滑断裂的破裂行为控制因素的理解。

关键词：土耳其双强震东安纳托利亚断裂哨兵2号光学影像相关性匹配地表同震变形恰尔达克断裂