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动静态浸泡体系对聚乙交酯丙交酯体外降解产物的影响

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中国临床康复 2005年第34期9卷 61-63页

作者：郭尚春孙皎上海第二医科大学附属第九人民医院口腔材料科上海市生物材料研究测试中心上海市200023

目的:了解动静态浸泡体系对聚乙交酯丙交酯体外降解产物乳酸和乙醇酸生成的影响。方法:实验于2002-09/12在上海第二医科大学附属第九人民医院口腔材料科,上海市生物材料研究测试中心实验室进行。取2cm×2cm大小的聚乙交酯丙交酯材料片,... 详细信息

目的:了解动静态浸泡体系对聚乙交酯丙交酯体外降解产物乳酸和乙醇酸生成的影响。方法:实验于2002-09/12在上海第二医科大学附属第九人民医院口腔材料科,上海市生物材料研究测试中心实验室进行。取2cm×2cm大小的聚乙交酯丙交酯材料片,浸泡介质为磷酸盐缓冲液(pH=7.4),分别在37℃恒温静态和动态(往返振荡速率为160次/min)条件下浸泡。于0周(浸泡前)以及浸泡后2,3,4,6,8和10周通过气相色谱法测定材料的水溶性降解产物乳酸及乙醇酸的质量,每时间点5片。在整个浸泡过程中,浸泡体系的浸泡介质不进行更换。推算标准品乙醇酸的衍生化标准曲线为:yG=a1x+b1;标准品乳酸的衍生化标准曲线为:yL=a2x+b2。由气相色谱图可计算出乙醇酸与苯甲酸的峰面积比值x1,再带入上述公式计算出乙醇酸和乳酸生成量。结果:动静态浸泡体系中聚乙交酯丙交酯降解产物乳酸和乙醇酸的质量生成情况:经过第0周(浸泡前),2,3,4,6,8和10周浸泡后,浸泡液中降解产物乳酸和乙醇酸的质量是增加的。在动态系统中生成的降解产物乳酸和乙醇酸均显著高于静态体系中生成的质量[(4.21±1.49),(3.76±1.52)mg,t=3.798,P<0.01;(23.30±6.73),(20.00±5.86)mg,t=3.865,P<0.01]。结论:动态体系可以促进降解产物乳酸和乙醇酸的质量生成,使材料降解速度加快。

关键词：聚合物/代谢生物降解乳酸

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PGLA降解产物对机体主要生理功能的影响

生物医学工程学杂志 2007年第5期24卷 1102-1106页

作者：孙皎郭尚春上海交通大学医学院附属第九人民医院上海生物材料研究测试中心上海200023

降解产物的生物安全性是生物降解类材料生物学评价的重要内容。本文采用自体对照的方法,通过测定聚乙交酯丙交酯（PGLA）材料植入前后动物体内某些生化指标的变化,研究降解产物对机体主要脏器——肝肾功能的影响,探讨降解产物的在体生... 详细信息

降解产物的生物安全性是生物降解类材料生物学评价的重要内容。本文采用自体对照的方法,通过测定聚乙交酯丙交酯（PGLA）材料植入前后动物体内某些生化指标的变化,研究降解产物对机体主要脏器——肝肾功能的影响,探讨降解产物的在体生物可接受性。实验分别将不同大小的PGLA材料植入Wistar大白鼠和新西兰兔的背部皮下组织内,在动物的相同部位进行同样的手术切口和缝合作为对照,植入前和植入后2-10周的各不同时段,分别采集兔血和大鼠的尿液,测定尿素氮和尿肌酐、血清谷丙转氨酶、尿素和肌酐等生化指标。结果显示：植入后2-3周实验组尿样中的尿素氮和尿肌酐浓度出现明显的增高,与植入前比较,统计学上具有显著性差异（P〈0.01）;植入后第2周血清谷丙转氨酶略有所下降（P〈0.05）,而血尿素和血肌酐有较明显的增高（P〈0.01）,但自第4周起所有变化均恢复到了植入前的水平,且基本维持在一个相对恒定的范围。对照组手术前后的所有指标均未见明显的变化（P〉0.05）。由此提示：（1）PGLA降解产物对肾脏和肝脏组织无永久性的损伤;（2）选用自体对照法,通过检测动物血液和尿液中主要生化指标的变化来评价PGLA降解产物对生物体全身生物学的影响作用被初步证明是一种有效而可行的研究方法;（3）在活体上评价降解产物的生物可接受性具有客观、灵敏、减少动物使用数量、可直接观察体内动态变化、能评估产物对生理功能影响等优点,为生物可降解材料的生物学评价提供新的检测途径。

关键词：降解产物聚乙交酯丙交酯生物安全性生理功能

PGLA降解产物对材料降解性能影响的体外研究

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生物医学工程学杂志 2006年第5期23卷 1062-1065页

作者：孙皎郭尚春何伟上海第二医科大学附属第九人民医院上海生物材料研究测试中心上海200023

为了探讨PGLA材料的降解产物对材料本体降解性能的影响，本研究设计了体外两种浸泡体系——磷酸缓冲液（PBS）和人工血浆，分别在替换和不替换浸泡介质两组不同条件下，分析材料的质量损耗情况，并将不替换组的各时间段降解液进行pH值... 详细信息

为了探讨PGLA材料的降解产物对材料本体降解性能的影响，本研究设计了体外两种浸泡体系——磷酸缓冲液（PBS）和人工血浆，分别在替换和不替换浸泡介质两组不同条件下，分析材料的质量损耗情况，并将不替换组的各时间段降解液进行pH值的测定，以判断环境的酸碱度对材料本体降解的作用。实验降解周期分别为2、3、4、6、8、10周。结果显示：在浸泡初期，人工血浆和PBS降解液中的质量损耗两者间无显著性差异（P〉0．05）；大约从2周到6周，不替液组中材料在两种介质内的降解速度显著快于相对应的同期换液组（P〈0．01）；不替换液组材料在PBS液中的降解快于在人工血浆中的降解，而且在整个降解周期内PBS降解液的pH值基本保持稳定（pH≈7．0～7．4），而人工血浆降解液中的pH值随着降解过程的不断进行，其pH值由7．5逐渐降到5．7左右，两种降解液pH值变化之间的差异具有显著的统计学意义（P〈0．01）。由此提示：在不替换浸泡介质的条件下，降解液中持续存在的降解产物显然影响材料本体的降解速度，PGLA材料的降解产物具有加速材料质量损耗的作用；环境的酸碱度对材料的降解会产生一定的影响，pH值越低，材料的降解速度越缓慢。

关键词：聚乙交酯丙交酯降解产物酸碱度体外降解

复合细胞和人工骨的富血小板血浆成骨能力研究

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中国修复重建外科杂志 2007年第1期21卷 58-64页

作者：李四波张长青袁霆郭尚春曾炳芳上海交通大学附属第六人民医院骨科上海200233

目的探讨复合细胞和人工骨的富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)促进骨缺损修复的能力。方法取新西兰大白兔骨髓,分离培养骨髓基质干细胞(marrowstromalstemcells,MSCs);取兔全血体外诱导培养为类成骨样细胞,应用低密度两次离心法制... 详细信息

目的探讨复合细胞和人工骨的富血小板血浆(platelet-richplasma,PRP)促进骨缺损修复的能力。方法取新西兰大白兔骨髓,分离培养骨髓基质干细胞(marrowstromalstemcells,MSCs);取兔全血体外诱导培养为类成骨样细胞,应用低密度两次离心法制备PRP。取48只1岁左右新西兰大白兔建立双侧桡骨1.2cm骨缺损模型,根据缺损中植入材料的不同随机分为4组,每组12只。A组左侧PRP/MSCs/β-磷酸三钙(β-tricalciumphosphate,β-TCP),右侧MSCs/β-TCP;B组左侧自体骨,右侧PRP/MSCs/β-TCP;C组左侧自体骨,右侧MSCs/β-TCP;D组左侧PRP/β-TCP,右侧β-TCP。术后2、6及12周通过大体观察、X线片、组织学及生物力学观察桡骨缺损的愈合情况。结果制备的PRP血小板浓度稳定,约为全血的5.45±0.23倍。大体标本与X线片显示2、6周时PRP/MSCs/β-TCP在缺损处桥接及新生骨外形较自体骨差,与MSCs/β-TCP无明显区别;12周,PRP/MSCs/β-TCP在缺损处桥接及新生骨外形接近于自体骨,优于MSCs/β-TCP。组织学观察,在新生骨数量及成熟度方面,术后各时间点PRP/MSCs/β-TCP明显优于MSCs/β-TCP(P0.05);2、6周PRP/β-TCP与β-TCP无差异(P>0.05);12周PRP/β-TCP优于β-TCP(P0.05);12周PRP/β-TCP与β-TCP无差异(P>0.05)。结论PRP复合MSCs和β-TCP显示出了良好的成骨能力,PRP可通过提高MSCs和成骨细胞的增殖与分化活性,促进骨缺损的修复。

关键词：富血小板血浆骨髓基质干细胞 β-磷酸三钙骨缺损修复

骨髓间充质干细胞来源小细胞外囊泡对骨质疏松症的改善作用

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上海交通大学学报（医学版） 2023年第4期43卷 406-416页

作者：李旭冉陶诗聪郭尚春上海交通大学医学院附属第六人民医院骨科上海200233 上海交通大学医学院六院临床医学院上海200233 上海交通大学医学院附属第六人民医院四肢显微外科研究所上海200233

目的·探究人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)来源的小细胞外囊泡(small extracellular vesicle,sEV)对小鼠破骨细胞分化和巨噬细胞极化的调控作用,以及对骨质疏松症小鼠的影响。方法·培养BMSC并通过差速离... 详细信息

目的·探究人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)来源的小细胞外囊泡(small extracellular vesicle,sEV)对小鼠破骨细胞分化和巨噬细胞极化的调控作用,以及对骨质疏松症小鼠的影响。方法·培养BMSC并通过差速离心法提取sEV,通过透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)及纳米颗粒跟踪分析技术(nanoparticle tracking analysis,NTA)鉴定得到的sEV。通过巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)及核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)刺激RAW264.7细胞以诱导形成破骨细胞,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色及鬼笔环肽染色检测sEV对破骨细胞分化的调控作用。通过荧光定量PCR检测sEV对破骨细胞标志基因环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMPresponse element binding protein,CREB)、组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)及c-Jun(Jun proto-oncogene)mRNA表达量的影响。使用脂多糖刺激RAW264.7细胞极化为M1型巨噬细胞;使用白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)及IL-13刺激RAW264.7细胞极化为M2型巨噬细胞。利用流式细胞术检测sEV对M1及M2型巨噬细胞极化的影响。通过微计算机断层扫描成像(micro-computed tomography,micro-CT)及TRAP染色观察sEV对骨质疏松症小鼠模型腰椎骨组织的影响。结果·TEM及NTA结果显示分离得到的sEV具有典型的球状结构,直径为30~150 nm。TRAP染色及鬼笔环肽染色结果显示,BMSC来源的sEV能够有效抑制RAW264.7细胞融合形成破骨细胞。PCR结果表明sEV能够降低CREB、CTSK和c-Jun mRNA的表达量(均P<0.05)。流式细胞术分析表明,BMSC来源的sEV能够抑制RAW264.7细胞极化为M1型巨噬细胞,促进其极化为M2型巨噬细胞。Micro-CT检测结果显示,sEV干预后模型小鼠腰椎骨小梁数量和骨体积分数显著高于未干预小鼠(均P<0.05);TRAP染色结果显示,sEV干预后腰椎组织中的破骨细胞数量减少。结论·人BMSC来源的sEV可以延缓骨质疏松小鼠的骨质流失,这可能与其抑制小鼠破骨细胞分化及促进M2型巨噬细胞极化的作用有关。

关键词：骨髓间充质干细胞小细胞外囊泡骨质疏松症破骨细胞巨噬细胞极化

通过PINK1/Parkin通路增强的线粒体自噬在骨关节炎治疗中的应用研究进展

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中华物理医学与康复杂志 2023年第8期45卷 761-768页

作者：刘珀霖陶诗聪郭尚春上海交通大学医学院上海200025 上海交通大学医学院附属第六人民医院骨科上海200233 上海市四肢显微外科研究所上海200233

自噬是细胞通过溶酶体机制将受损细胞结构成分降解并再利用的一种自然、保守的能量动态循环过程。线粒体自噬是自噬的一种形式,指受损或失去功能的线粒体被自噬小体选择性吞噬,随后被溶酶体降解的过程,从而维持线粒体质量和内环境的稳... 详细信息

自噬是细胞通过溶酶体机制将受损细胞结构成分降解并再利用的一种自然、保守的能量动态循环过程。线粒体自噬是自噬的一种形式,指受损或失去功能的线粒体被自噬小体选择性吞噬,随后被溶酶体降解的过程,从而维持线粒体质量和内环境的稳定。骨关节炎(OA)是骨科常见的一种慢性退行性疾病,也叫退行性关节炎,是导致中老年人群活动受限的主要原因。近年来,关于线粒体自噬调控机制以及与疾病关联的研究不断增加。目前已证明,软骨细胞线粒体自噬与OA的发生密切相关。本文聚集于线粒体自噬及其与OA的联系,论述了经典线粒体自噬通路——PINK1/Parkin通路在骨关节炎治疗中的应用研究进展,以及未来治疗OA的可能的方向。

关键词：自噬线粒体自噬骨关节炎软骨细胞 PINK1/Parkin

光生物调节治疗骨关节炎的抗氧化机制及应用研究进展

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中华物理医学与康复杂志 2023年第7期45卷 667-670页

作者：李旭冉郭尚春陶诗聪上海交通大学医学院附属第六人民医院骨科上海200233 上海市四肢显微外科研究所上海200233 上海交通大学医学院六院临床医学院外科教研室上海200233

骨关节炎是一种常见的退行性疾病,发病机制与活性氧(ROS)积累相关,目前缺少较好的临床治疗及疾病管理方案。光生物调节(PBM)治疗是一种新兴的康复治疗技术,可以提高线粒体膜电位,减少ROS积累,调节细胞代谢稳态,在骨关节炎康复治疗中已... 详细信息

骨关节炎是一种常见的退行性疾病,发病机制与活性氧(ROS)积累相关,目前缺少较好的临床治疗及疾病管理方案。光生物调节(PBM)治疗是一种新兴的康复治疗技术,可以提高线粒体膜电位,减少ROS积累,调节细胞代谢稳态,在骨关节炎康复治疗中已有广泛研究。PBM具有无创、便捷等优点,有着广泛的临床应用前景,但现阶段PBM治疗缺少较为统一的治疗方案,其中一些关键参数的设定仍缺少标准。本文回顾了软骨细胞ROS的积累机制,阐述了PBM治疗通过改善线粒体功能,减轻ROS积累而产生的治疗作用,并汇总了PBM治疗在骨关节炎治疗中的临床研究进展,以期为PBM在骨关节炎中的应用提供参考。

关键词：骨关节炎光生物调节活性氧康复治疗

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胞外囊泡在细菌致病机制中作用的研究进展

中国修复重建外科杂志 2018年第12期32卷 1597-1604页

作者：郭尚春赵丽萍陶诗聪张长青上海交通大学附属第六人民医院四肢显微外科研究所上海200233 上海交通大学材料与工程学院上海200240 上海交通大学附属第六人民医院骨科上海200233

目的对细菌来源的胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)所含生物活性物质及其在介导细菌-细菌间和细菌-宿主间相互作用中的机制进行综述,并分析其对临床植入物感染防治的指导意义。方法广泛查阅近年来国内外细菌来源EVs相关的文献,并... 详细信息

目的对细菌来源的胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)所含生物活性物质及其在介导细菌-细菌间和细菌-宿主间相互作用中的机制进行综述,并分析其对临床植入物感染防治的指导意义。方法广泛查阅近年来国内外细菌来源EVs相关的文献,并进行分析和总结。结果无论是革兰阴性菌(G–菌)还是革兰阳性菌(G+菌)都能分泌包含了多种生物活性物质(如蛋白质、脂质、核酸和毒力因子)的EVs,可以介导细菌-细菌间和细菌-宿主间的相互作用,并在细菌的致病机制和生物膜形成等方面发挥重要作用。结论细菌来源的EVs包含的生物活性物质,在细菌感染性疾病的致病机制中发挥着重要作用,深入研究和理解其致病机制,可以为临床早期诊断、预防和治疗植入物感染等提供新思路。但目前该领域研究还处于初级阶段,相关机制尚需深入研究。

关键词：胞外囊泡外泌体感染革兰阴性菌革兰阳性菌致病机制

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自体富血小板血浆与难愈合伤口的修复

中华整形外科杂志 2006年第5期22卷 391-393页

作者：袁霆张长青李四波郭尚春曾炳芳上海交通大学附属第六人民医院骨科上海200233 上海市四肢显微外科研究所

近年来,随着社会经济的发展,我国因交通伤和工伤导致创伤的患者数量逐年上升,其中以四肢伤尤为严重,由于四肢与身体其他部位相比,伤口本身就易感染,愈合时间长,这直接导致了目前临床上伤口延迟愈合和不愈合的数量增加.另外,随着我国逐... 详细信息

近年来,随着社会经济的发展,我国因交通伤和工伤导致创伤的患者数量逐年上升,其中以四肢伤尤为严重,由于四肢与身体其他部位相比,伤口本身就易感染,愈合时间长,这直接导致了目前临床上伤口延迟愈合和不愈合的数量增加.另外,随着我国逐渐进入老龄化社会,老年人口增多,由于老年人伤口愈合较慢,加上糖尿病、褥疮等老年人易患病,进一步增加了难愈合伤口的数量.所以,如何促进难愈合伤口的修复成为了目前研究的热点。

关键词：难愈合伤口自体富血小板血浆修复伤口延迟愈合老年人口老龄化社会社会经济患者数量