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基于内体-溶酶体系统探讨电针“百会”“涌泉”改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的作用机制

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针刺研究 2023年第8期48卷 791-798页

作者：栗晨璐杨晓坤高誉珊郭孟玮谭韵湘张洋陈浩天薛卫国北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029

目的:观察电针“百会”“涌泉”对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力、海马区β淀粉样蛋白沉积及相关蛋白表达的影响,从内体-溶酶体系统角度探讨电针改善阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:将6月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为模型组... 详细信息

目的:观察电针“百会”“涌泉”对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力、海马区β淀粉样蛋白沉积及相关蛋白表达的影响,从内体-溶酶体系统角度探讨电针改善阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法:将6月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为模型组和电针组,每组10只;另以10只6月龄雄性C57BL/6小鼠作为正常组。电针组针刺“百会”“涌泉”,双侧“涌泉”接电针,15 min/次;模型组和正常组在相同时间以相同方法束缚15 min/次。以上干预均隔日1次,共6周。以Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力,免疫组织化学法检测小鼠海马区老年斑(SP)的阳性表达,透射电镜观察小鼠海马神经元内体、溶酶体超微结构,Western blot法检测小鼠海马Ras相关蛋白5(Rab5)、Ras相关蛋白7(Rab7)、组织蛋白酶D(CTSD)等内体-溶酶体系统相关蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),穿越原平台次数及原平台象限游泳路程均减少(P<0.05),海马区SP阳性表达增加(P<0.01),海马神经元胞体中内体、溶酶体堆积,海马组织Rab5、Rab7、CTSD蛋白表达水平均升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组小鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越原平台次数及原平台象限游泳路程均增加(P<0.05),海马区SP阳性表达减少(P<0.01),海马神经元胞体中内体、溶酶体堆积减少,海马组织Rab5、Rab7、CTSD蛋白表达水平均降低(P<0.01)。结论:电针“百会”“涌泉”可改善AD小鼠学习记忆能力,减少海马区β淀粉样蛋白沉积,其机制可能与电针调控内体-溶酶体系统功能有关。

关键词：阿尔茨海默病电针内体-溶酶体系统学习记忆能力老年斑海马

电针对糖尿病肥胖大鼠肝脏Akt/FoxO1信号通路的影响

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中国针灸 2023年第6期43卷 679-683,708页

作者：董滢李瑞郭卫星莫芳芳宋姗姗段浩茹庄舒婷郭孟玮北京中医药大学针灸推拿学院北京102401 北京中医药大学中医学院北京102401

目的:观察电针对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠肝脏蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子1(FoxO1)信号通路的影响,探讨电针改善2型糖尿病肝脏胰岛素抵抗的可能机制。方法:12只雄性2月龄ZDF大鼠以高脂饲料喂养4周制备糖尿病模型,成模后随机分为模... 详细信息

目的:观察电针对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠肝脏蛋白激酶B(Akt)/叉头框转录因子1(FoxO1)信号通路的影响,探讨电针改善2型糖尿病肝脏胰岛素抵抗的可能机制。方法:12只雄性2月龄ZDF大鼠以高脂饲料喂养4周制备糖尿病模型,成模后随机分为模型组与电针组,每组6只;6只雄性Zucker瘦型(ZL)大鼠作为空白组。电针组大鼠予电针双侧“足三里”“三阴交”“胃脘下俞”“脾俞”干预,同侧“足三里”“胃脘下俞”连接电针,连续波,频率15 Hz,每次20 min,每日1次,每周6次,共干预4周。比较各组大鼠造模前及干预前后空腹血糖(FBG)水平;采用放射免疫法检测各组大鼠血清胰岛素(INS)、C肽含量,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色法观察各组大鼠肝脏组织形态;Western blot法检测各组大鼠肝脏Akt、FoxO1、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)蛋白表达。结果:干预前,与空白组比较,模型组、电针组大鼠FBG升高(P<0.01);干预后,与模型组比较,电针组大鼠FBG降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠血清INS和C肽含量、HOMA-IR、肝脏FoxO1和PEPCK蛋白表达升高(P<0.01),肝脏Akt蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠血清INS和C肽含量、HOMA-IR、肝脏FoxO1和PEPCK蛋白表达降低(P<0.01),肝脏Akt蛋白表达升高(P<0.01)。模型组大鼠肝细胞结构紊乱,排列散乱,细胞质内出现大量脂质空泡;电针组大鼠肝细胞形态趋于正常,脂质空泡减少。结论:电针能够下调ZDF大鼠空腹血糖、胰岛素抵抗指数,改善肝脏胰岛素抵抗,可能与调控Akt/FoxO1信号通路有关。

关键词： 2型糖尿病电针胰岛素抵抗蛋白激酶B(Akt) 叉头框转录因子1(FoxO1) 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)

电针对2型糖尿病大鼠睾丸形态及生精细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响

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针灸临床杂志 2023年第4期39卷 73-78页

作者：郭卫星李瑞董滢宋姗姗段浩茹庄舒婷莫芳芳郭孟玮北京中医药大学针灸推拿学院北京102488 北京中医药大学中医学院糖尿病研究中心北京100029

目的:观察电针对2型糖尿病大鼠睾丸形态及睾丸生精细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响,探讨通过电针降糖改善T2DM大鼠生精细胞凋亡的作用机制。方法:12只雄性Wistar大鼠高糖高脂饲料喂养结合2%链脲佐菌素溶液(35 mg/kg)腹腔注射制备... 详细信息

目的:观察电针对2型糖尿病大鼠睾丸形态及睾丸生精细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响,探讨通过电针降糖改善T2DM大鼠生精细胞凋亡的作用机制。方法:12只雄性Wistar大鼠高糖高脂饲料喂养结合2%链脲佐菌素溶液(35 mg/kg)腹腔注射制备2型糖尿病模型,以大鼠随机血糖(BG)>16.67 mmol/L、空腹血糖(FBG)>11.1 mmol/L为成模标准。成模后的糖尿病大鼠按血糖高低随机区组分为模型组和电针组,后续仍以高糖高脂饲料喂养。同时设立空白对照组6只,普通饲料喂养。电针组大鼠选取双侧“胃脘下俞”“脾俞”“足三里”“三阴交”进行针刺,电针同侧“胃脘下俞”“足三里”,每周6次,持续6周。干预前后检测各组大鼠空腹血糖(FBG);干预结束后取大鼠血清Elisa法检测血清胰岛素(INS)、睾酮(T)含量;HE染色法观察各组大鼠睾丸形态学变化;Western Blot法检测各组大鼠睾丸Bcl-2、Bax蛋白表达水平,Image J软件测定条带灰度。结果:干预前,模型组、电针组大鼠FBG均显著高于空白组(P0.05)。干预6周后,与空白组相比,模型组大鼠FBG显著升高(P<0.01),血清INS、T水平显著降低(P<0.01),睾丸Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),Bax蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,电针组大鼠FBG显著降低(P<0.01),血清INS、T水平升高(P<0.05或P<0.01),睾丸Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax蛋白表达降低(P<0.05)。HE染色显示模型组较空白组病理改变明显,电针组整体情况优于模型组。结论:高血糖状态下,雄性大鼠血清睾酮水平下降,生精细胞凋亡增加;电针可明显降低2型糖尿病大鼠FBG水平,缓解高血糖状态下大鼠生精小管内部形态的病理性改变,保护精子正常发育,其机制可能与电针下调促凋亡因子Bax蛋白表达、上调抑凋亡因子Bcl-2蛋白表达和抑制生精细胞凋亡的功能有关。

关键词：电针 2型糖尿病生精细胞凋亡 Bax Bcl-2

针刀松解法对膝骨关节性大鼠上位中枢不同部位β-内腓肽的影响

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中华中医药杂志 2011年第10期26卷 2258-2261页

作者：陈幼楠郭长青嵇波金燕钟鼎文刘清国郭孟玮北京中医药大学针灸推拿学院

目的:通过观察针刀松解干预后上位中枢不同部位β-内腓肽(β-EP)的变化并与电针干预相比较,探讨针刀松解在脊髓以上水平的镇痛机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组和针刀组。将4%木瓜蛋白酶溶液与0.3mol/L半胱... 详细信息

目的:通过观察针刀松解干预后上位中枢不同部位β-内腓肽(β-EP)的变化并与电针干预相比较,探讨针刀松解在脊髓以上水平的镇痛机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组和针刀组。将4%木瓜蛋白酶溶液与0.3mol/L半胱氨酸溶液按1:1混合静置0.5h后分别于造模第1、4、7天注射于模型组、电针组和针刀组大鼠左膝关节腔,每次20μL。4周后针刀组和电针组给予相应治疗。治疗3周后大鼠断头处死,取出脑组织,分别测定延髓、丘脑、下丘脑、垂体、海马的β-EP含量,针刀组分别与空白组、模型组、电针组进行对比。结果:在膝骨关节炎形成过程中,模型组脑内各不同部位的β-EP含量均呈现出升高的趋势,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。在针刀及电针干预后β-EP含量在多数部位均表现出下降的趋势,其中在丘脑水平针刀组、电针组的β-EP含量比模型组明显降低,有显著性差异(P<0.05);在丘脑水平2个干预组的β-EP含量更为接近空白组。除在海马水平针刀组与电针组存在显著差异外,在脑内其余各水平针刀组与电针组的β-EP含量差异并不明显。结论:针刀松解法对膝骨关节炎大鼠中枢各水平的β-EP有良性调节作用,这种调节可能与膝关节局部伤害性刺激减弱有关。

关键词：膝骨关节炎针刀松解法电针 β-内啡肽

电针预处理对脑缺血再灌注大鼠HO-1表达及脑血流、神经功能、脑梗死体积的影响

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临床和实验医学杂志 2023年第22期22卷 2353-2357页

作者：张潇卢海洋赵雅芳郭孟玮张艺吴雯昱李鑫陈璐任晓暄邬继红任秀君北京中医药大学针灸推拿学院北京102488 首都医科大学附属北京友谊医院麻醉科北京100050

目的观察电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠血清血红素氧合酶-1(HO-1)表达以及脑血流量、神经功能、脑梗死体积的影响。方法27只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组和电针预处理组,每组各9只。假手术组除不插入线栓外... 详细信息

目的观察电针预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠血清血红素氧合酶-1(HO-1)表达以及脑血流量、神经功能、脑梗死体积的影响。方法27只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组和电针预处理组,每组各9只。假手术组除不插入线栓外,其余同模型组;模型组造模前束缚14 d,采用线栓法制备大脑中动脉缺血再灌注模型;电针预处理组在造模前14 d行EA预处理,其余同模型组。比较大鼠造模即刻、造模后和再灌注后的脑血流量,造模后24 h的Bederson评分、改良神经功能缺损评分(mNSS)及脑梗死体积;采用Morris水迷宫实验测试空间学习记忆能力;并采用酶联免疫吸附试验检测血清HO-1浓度变化。结果造模即刻,造模后60、120 min,再灌注即刻,再灌注后10、20、30 min,与假手术组比较,模型组大鼠脑血流量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,电针预处理组大鼠的第四象限滞留时间百分比和血清HO-1水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论电针预处理可有效恢复脑血流,改善神经缺损功能,减小脑梗死体积,提高认知水平,从而在脑缺血再灌注损伤中发挥一定的保护作用。其机制可能与提高模型大鼠血清中HO-1蛋白表达水平发挥抗氧化应激作用有关。

关键词：大鼠电针预处理脑缺血再灌注损伤大脑中动脉栓塞 HO-1

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痛经模型建立和评价方法的思考

中国药理学通报 2008年第6期24卷 711-714页

作者：嵇波张露芬朱江任晓暄郭孟玮赵雅芳徐莉莉宋晓琳北京中医药大学针灸学院北京100029

原发性痛经是妇科常见病,因其发病率高及影响了人们的正常工作和日常生活而受到人们的关注。由于在人体研究痛经的发病机制和防治有许多因素限制,如观察组织病理生理的改变情况等,制备痛经模型显得尤为重要。本文对近20年痛经模型建立... 详细信息

原发性痛经是妇科常见病,因其发病率高及影响了人们的正常工作和日常生活而受到人们的关注。由于在人体研究痛经的发病机制和防治有许多因素限制,如观察组织病理生理的改变情况等,制备痛经模型显得尤为重要。本文对近20年痛经模型建立和评价的方法进行了系统回顾,以期为痛经病因、发病机制和防治等研究奠定基础。

关键词：原发性痛经痛经模型痛经评价

电针对阿尔茨海默病不同病理阶段自噬状态影响差异性研究

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上海针灸杂志 2023年第8期42卷 854-863页

作者：杨晓坤高誉珊栗晨璐陈浩天郭孟玮谭韵湘张洋薛卫国北京中医药大学北京100029

目的观察电针对APP/PS1双转基因小鼠老年斑出现前后不同病理阶段自噬状态影响的差异性,从自噬角度探讨电针干预阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法 4月龄和8月龄APP/PS1双转基因雄性小鼠各20只,随机分为模型组(4... 详细信息

目的观察电针对APP/PS1双转基因小鼠老年斑出现前后不同病理阶段自噬状态影响的差异性,从自噬角度探讨电针干预阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法 4月龄和8月龄APP/PS1双转基因雄性小鼠各20只,随机分为模型组(4月龄和8月龄模型组)和电针组(4月龄和8月龄电针组),每组10只;以同月龄同性别C57BL/6野生型小鼠为正常组(4月龄和8月龄正常组)各10只。电针组取双侧涌泉穴直刺后接电针仪,百会穴平刺后单向滞针再留针,共20 min。干预隔日1次,共6周。采用Morris水迷宫实验评价小鼠空间学习记忆能力;通过免疫组化技术观察小鼠海马淀粉样斑块沉积情况;用免疫荧光技术观察小鼠海马LC3和β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)表达情况;用酶联免疫吸附法检测小鼠海马Aβ表达水平;用Western blot法检测小鼠海马自噬相关蛋白LC3和p62相对表达量。结果 Morris水迷宫结果显示,6月龄和10月龄模型组小鼠平均逃避潜伏期均较同月龄正常组增加(P0.05)。与同月龄正常组比较,10月龄模型组LC3Ⅱ/Ⅰ比值和p62表达均增加(P<0.01,P<0.05);与同月龄模型组比较,电针组LC3Ⅱ/Ⅰ比值和p62表达均降低(P<0.01,P<0.05)。结论6月龄和10月龄APP/PS1转基因鼠老年斑出现前后不同病理阶段的自噬状态不同。电针可提高6月龄APP/PS1双转基因鼠海马自噬功能,调节10月龄双转基因鼠自噬功能紊乱状态,电针改善不同病理阶段APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力,降低海马Aβ水平的机制存在差异性。

关键词：针刺疗法电针阿尔茨海默病 APP/PS1双转基因小鼠自噬

针刀和电针对膝骨关节炎大鼠痛阈和中枢单胺类神经递质的影响

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中国病理生理杂志 2010年第6期26卷 1091-1095页

作者：嵇波郭长青金燕钟鼎文陈幼楠郭孟玮北京中医药大学针灸学院北京100029

目的:对比观察针刀松解法、电针对膝骨关节炎(KOA)大鼠痛阈和中枢神经递质的影响。方法:80只SD大鼠被随机分为空白对照组、模型组、针刀组和电针组,4%木瓜蛋白酶溶液与0.3 mol/L半胱氨酸溶液(1∶1混置0.5 h)的混合液20μL,分别于造模第... 详细信息

目的:对比观察针刀松解法、电针对膝骨关节炎(KOA)大鼠痛阈和中枢神经递质的影响。方法:80只SD大鼠被随机分为空白对照组、模型组、针刀组和电针组,4%木瓜蛋白酶溶液与0.3 mol/L半胱氨酸溶液(1∶1混置0.5 h)的混合液20μL,分别于造模第1 d、4 d、7 d注射于大鼠左侧膝关节腔中,4周后,治疗组分别以针刀松解法或电针治疗,共3周。采用光辐射热法检测大鼠痛阈,膝关节HE染色,ELISA法分别测定大鼠中脑、下丘脑、延脑、海马、脊髓等不同部位5-HT、NE、DA含量。结果:膝骨关节炎大鼠造模后痛阈显著降低(P<0.01),而针刀松解法或电针治疗后,第1周、第2周、第3周痛阈值均明显高于模型组(P<0.05,P<0.01);针刀和电针疗法可以改善大鼠膝骨关节炎病理组织损伤,可调节大鼠中脑、下丘脑、海马、脊髓等部位5-HT的合成与代谢,调节脊髓、下丘脑和延脑NA合成和代谢,调节中脑DA合成与代谢。结论:针刀和电针疗法对膝骨关节炎大鼠痛阈、组织形态学和中枢单胺类神经递质的含量有一定的调节作用。提示2种疗法可通过调节中枢神经5-羟色胺和儿茶酚胺类神经递质的合成和代谢的失衡状态,以减轻关节软骨损伤,缓解膝骨关节炎发生发展时出现的疼痛。

关键词：骨关节炎针刀松解法电针 5-羟色胺儿茶酚胺类

预先电针三阴交血海合谷对痛经大鼠模型子宫IP_3的影响

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辽宁中医杂志 2010年第10期37卷 2048-2051页

作者：郭孟玮丁喜艳任晓暄赵雅芳李春华嵇波朱江张露芬北京中医药大学针灸学院北京100029

目的:观察预先电针同经不同类及不同经脉腧穴对痛经大鼠模型子宫IP3的影响。方法:50只雌性SD大鼠,随机分为盐水组、模型组、电针三阴交组、血海组、合谷组,每组10只。除盐水组外,其余各组大鼠均连续10天给予大鼠皮下注射苯甲酸雌二醇注... 详细信息

目的:观察预先电针同经不同类及不同经脉腧穴对痛经大鼠模型子宫IP3的影响。方法:50只雌性SD大鼠,随机分为盐水组、模型组、电针三阴交组、血海组、合谷组,每组10只。除盐水组外,其余各组大鼠均连续10天给予大鼠皮下注射苯甲酸雌二醇注射液,末次给药后1h,腹腔注射缩宫素2U/只,制造痛经大鼠模型,盐水组每日给予同等剂量的生理盐水。于第8日针刺各组给予电针20min,盐水组及模型组束缚20min,每日1次,共3次,于末次针刺后观察扭体反应,并采用酶联免疫法检测子宫IP3。结果:①每分钟扭体分数:与盐水组比较,模型组、血海组及合谷组均明显升高(P均0.05)。与模型组比较,三阴交组显著性降低(P0.05)。各电针组之间比较,血海组较三阴交组明显升高(P0.05)。与模型组比较,三阴交组明显升高(P0.05)。各电针组之间比较,三阴交组明显高于血海组、合谷组(P均<0.01)。结论:三阴交组明显抑制了大鼠扭体反应,其机制是通过对IP3信号转导途径的生理性调节,而产生抑制子宫平滑肌收缩的作用。血海组及合谷组对扭体反应及IP3均未产生明显调节作用,表明同经不同类及不同经脉穴位之间的效应存在差异。

关键词：痛经 IP3 经穴效应特异性预先电针