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间充质干细胞胞外囊泡成药性研究进展

中国实验血液学杂志 2023年第4期31卷 1247-1251页

作者：刘玉爽孙媛郭子宽北京京都儿童医院血液科北京102208 北京京都儿童医院中心实验室北京102208

间充质干细胞(MSC)作为一种细胞药物,已经被多个国家批准用于造血干细胞移植后的移植物抗宿主病、自身免疫性疾病及组织损伤性疾病的治疗。研究证实,旁分泌是MSC的主要作用机制,细胞外囊泡(MSC-EV)是MSC作用的物质基础。在临床应用方面,... 详细信息

间充质干细胞(MSC)作为一种细胞药物,已经被多个国家批准用于造血干细胞移植后的移植物抗宿主病、自身免疫性疾病及组织损伤性疾病的治疗。研究证实,旁分泌是MSC的主要作用机制,细胞外囊泡(MSC-EV)是MSC作用的物质基础。在临床应用方面,MSC-EV可避免MSC的某些不良反应,因此,MSC-EV可替代MSC用于临床实现无细胞的细胞治疗。成熟的规模化MSC培养技术,针对治疗目的及MSC-EV体内动力学特点对MSC进行改造,以及制备和收获大量高纯度MSC-EV方法的稳定,是MSC-EV成药性的基础。本文对上述问题的研究进展进行简要综述。

关键词：间充质干细胞细胞外囊泡成药性微小RNA

人骨髓间充质干细胞在兔膀胱脱细胞基质微环境中的生物学特性

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西安交通大学学报（医学版） 2019年第1期40卷 55-59页

作者：谭云鹤邢俊平郭子宽西安交通大学第一附属医院泌尿外科陕西西安710061 西安市第三医院泌尿外科陕西西安710018 军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验血液学研究室北京100850

目的利用兔膀胱脱细胞基质(bladder acellular matrix graft,BAMG)构建微环境,从细胞增殖能力、表面标记物及分子蛋白水平探讨其对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived stem cells,hBMSCs)的影响。方法制备BAMG浸泡液培养基,... 详细信息

目的利用兔膀胱脱细胞基质(bladder acellular matrix graft,BAMG)构建微环境,从细胞增殖能力、表面标记物及分子蛋白水平探讨其对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived stem cells,hBMSCs)的影响。方法制备BAMG浸泡液培养基,MTT法检测其对hBMSCs增殖的影响;流式细胞仪检测hBMSCs表面标志物CD44、CD45、CD73及PDGFRβ的表达;RT-PCR检测BAMG微环境对PPAR、OCN、α-SMA等基因表达的影响,Western blot检测不同处理方法 OCT-4蛋白的表达情况。结果 hBMSCs与BAMG有良好的相容性;实验组与对照组细胞曲线均呈"S"型增殖,于第3天进入快速增殖期,第7天趋于平稳;两组细胞CD44、CD45、CD73、PDGFRβ的表达量基本一致,差异不具有统计学意义;OCN、PPAR、α-SMA两组均表达目的基因;Western blot法检测亦显示OCT-4阳性表达。结论 hBMSCs在兔BAMG的微环境中仍能良好保持原有的生物学特性,将该种子细胞与基质材料结合可构建需要的组织材料,为泌尿系统组织工程修复提供可能。

关键词：人骨髓间充质干细胞膀胱脱细胞基质 RT-PCR 生物学特性 OCT-4

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间充质干细胞免疫调控功能研究新进展

中国实验血液学杂志 2007年第5期15卷 1117-1120页

作者：李红郭子宽毛宁军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学室北京100850 军事医学科学院放射医学研究所实验血液学室北京100850

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是具有自我更新和多向分化能力的成体干细胞的一种。近年来的相关研究表明,MSC具有低免疫原性,它可以通过抑制淋巴细胞的增殖、抑制抗原呈递细胞分化成熟及功能发挥、抑制CTL形成、增加调节性... 详细信息

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是具有自我更新和多向分化能力的成体干细胞的一种。近年来的相关研究表明,MSC具有低免疫原性,它可以通过抑制淋巴细胞的增殖、抑制抗原呈递细胞分化成熟及功能发挥、抑制CTL形成、增加调节性T细胞比例等多种途径发挥免疫调节作用。体内实验证明,MSC输注能够延长狒狒异体皮肤移植的存活时间,可减轻小鼠实验性自体免疫性脑脊髓膜炎。在临床上,MSC应用于异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病的预防和治疗效果显著。本文对MSC的免疫学特性及其在体内外试验中发挥的免疫调控功能的研究进展进行了综述。

关键词：间充质干细胞免疫调控移植物抗宿主病

TGF-β1和IL-10对间充质干细胞来源细胞外囊泡免疫调节功能的影响

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中国实验血液学杂志 2018年第6期26卷 1785-1792页

作者：马聪张青宜郭子宽王恒湘空军总医院血液科北京100142 大连医科大学辽宁大连116044 军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验血液学研究室北京100850

目的:探讨TGF-β1和IL-10对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)分泌的细胞外囊泡(extracellular vesicle, EV)免疫调控功能的影响。方法:分离扩增人脐带来源的MSC,分别用TGF-β1和IL-10处理72 h,提取上清中MSC-EV。应用BCA法测定提取EV的总蛋白含量,在透射电子显微镜下观察EV的形态结构,流式细胞术检测EV表面标志物以鉴定MSC-EV。在ConA刺激后的人外周血单个核细胞(PBMNC)培养体系中,加入不同处理方法获得的EV,培养72 h后应用流式细胞仪检测PBMNC的凋亡,以及CD4+CD25+/CD127-调节T(Treg)细胞比例。应用CBA试剂盒和ELISA试剂盒检测培养PBMNC上清以及MSC-EV中IL2,IL4,IL6,IL10,IFN-γ,TNF-α,Th17A和TGF-β1的含量。结果:不同处理后的EV在透射电子显微镜下均呈现特征性杯口状膜样结构,均表达CD9,CD44,CD63及CD81。TGF-β1处理后MSC-EV促PBMNC凋亡的能力明显增强(P <0.01),不同处理后EV均可以提高Treg细胞比例。MSC-EV可以提高PBMNC培养上清中IL-10的含量,TGF-β1处理MSC-EV共培养后的PBMNC上清TGF-β1含量较未处理组明显降低(P <0.05)。TGF-β1处理后的MSC-EV样本IL-6含量显著升高,TGF-β1含量降低。结论:TGF-β1处理后MSC-EV的免疫调控功能发生改变,其意义值得进一步研究阐明。

关键词：间充质干细胞细胞外囊泡 TGF—β 1 IL-10 免疫调控

骨髓间充质干细胞来源的膜微囊对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用

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中国实验血液学杂志 2014年第4期22卷 1078-1083页

作者：林珊珊朱波郭子宽黄国志南方医科大学珠江医院康复医学科广东广州510282 南方医科大学珠江医院骨科广东广州510282 军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验血液学研究室北京100850

本研究目的在于探讨骨髓间充质干细胞(BMMSC)来源的膜微囊(microvesicle,MV)对神经细胞的保护作用,以了解MSC对神经修复作用的机制。采用密度梯度离心联合贴壁法分离BMMSC,采用低温高速离心法提取BMMSC-MV。采用流式细胞术鉴定BMMSC,并... 详细信息

本研究目的在于探讨骨髓间充质干细胞(BMMSC)来源的膜微囊(microvesicle,MV)对神经细胞的保护作用,以了解MSC对神经修复作用的机制。采用密度梯度离心联合贴壁法分离BMMSC,采用低温高速离心法提取BMMSC-MV。采用流式细胞术鉴定BMMSC,并在透射电子显微镜下观察MV形态。建立谷氨酸致PC12细胞损伤模型,实验分为对照组、谷氨酸损伤组以及BMMSC-MV共培养组。用MTT法检测MV对PC12细胞活性的影响;流式细胞术、Hoechst荧光标记法检测细胞凋亡率的变化。结果表明:分离提取的BMMSC高表达CD29和CD44,不表达或低表达CD31,CD34,CD45。在电子显微镜下MV呈典型的圆形囊泡状。与对照组相比,损伤组细胞活性显著下降,凋亡率增加;BMMSC-MV共培养显著提高了谷氨酸损伤的PC12细胞活性、降低了凋亡率。结论:BMMSC来源的MV对谷氨酸兴奋性损伤的细胞具有明显的保护作用,为MV应用于神经兴奋性损伤性疾病提供了初步的实验和理论依据。

关键词：骨髓间充质干细胞膜微囊 PC12细胞兴奋性损伤

孕酮通过ERK途径促进人骨髓间充质干细胞合成纤黏蛋白

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中国实验血液学杂志 2015年第6期23卷 1692-1696页

作者：吴振勇陈晶砺黄舒张慧王芳王燕毕晓云郭子宽广州市开发区医院检验科广东广州510730 军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验血液学研究室北京100850

目的:探讨孕酮是否能促进人骨髓间充质干细胞(MSC)合成纤黏蛋白(FN)及其机制。方法:向人脐带M SC无血清培养体系中加入孕酮并培养72 h后,应用M TT实验检测M SC增殖活性及细胞粘附能力,并以G APDH为内参照,应用蛋白印迹杂交观察处理与否... 详细信息

目的:探讨孕酮是否能促进人骨髓间充质干细胞(MSC)合成纤黏蛋白(FN)及其机制。方法:向人脐带M SC无血清培养体系中加入孕酮并培养72 h后,应用M TT实验检测M SC增殖活性及细胞粘附能力,并以G APDH为内参照,应用蛋白印迹杂交观察处理与否对细胞FN合成的影响、孕酮处理不同时间ERK1/2磷酸化状态,以及ERK抑制剂PD98059预处理后细胞FN含量的改变。结果:在一定的浓度范围内,孕酮不影响人骨髓MSC增殖。选择适宜浓度(25μg/L)孕酮处理MSC 72 h后,细胞粘附活性明显增强,OD490 nm平均值为0.29±0.018,显著高于未处理组(0.21±0.011,P<0.001);Western blot结果表明,孕酮处理后,细胞内ERK1/2在10 min内活化,孕酮可明显促进细胞合成FN,而ERK特异性抑制剂PD98059预处理后加入孕酮培养,细胞FN合成量与孕酮未处理组近似。结论:孕酮通过ERK途径促进人骨髓MSC合成FN,因此它可能用于人骨髓MSC的无血清培养。

关键词：间充质干细胞孕酮纤黏蛋白

间充质干细胞来源的细胞外囊泡:免疫相关疾病的理想细胞替代疗法

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现代免疫学 2019年第2期39卷 159-163页

作者：马聪张青宜郭子宽王恒湘大连医科大学大连116044 空军总医院血液科北京100142 军事医学科学院辐射与放射医学研究所北京100850

间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)作为一种具有多向分化潜能的非造血干细胞,已被应用于多种组织损伤与免疫相关疾病的治疗。MSC获得如此广泛应用的原因与其强大的促进受损组织再生和免疫调控功能密不可分。近年来,MSC的免疫调... 详细信息

间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)作为一种具有多向分化潜能的非造血干细胞,已被应用于多种组织损伤与免疫相关疾病的治疗。MSC获得如此广泛应用的原因与其强大的促进受损组织再生和免疫调控功能密不可分。近年来,MSC的免疫调控功能已在多种免疫相关疾病的治疗中得到广泛验证。研究表明,MSC免疫调节作用的发挥主要通过旁分泌,其中,MSC分泌的细胞外囊泡(extracellular vesicle, EV)发挥着重要作用。EV可以复制MSC的多种免疫调节功能,但是,MSC-EV在MSC的免疫调节中具体发挥哪些作用,MSC-EV能否替代MSC用于免疫相关疾病的治疗?文章结合以上问题,对近年来MSC与MSC-EV的免疫调控功能进行综述。

关键词：间充质干细胞细胞外囊泡免疫调控

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肝细胞生长因子与免疫调控

中国实验血液学杂志 2007年第2期15卷 441-444页

作者：边莉郭子宽艾辉胜军事医学科学院附属医院血液科北京100039 军事医学科学院放射医学研究所北京100071

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多功能细胞因子。近年来,对HGF在免疫系统生理与病理过程中的作用及其机制的研究不断深入,HGF的免疫调节效应逐渐被阐明。本文结合近几年国内外研究进展,就肝细胞生长因子在免疫调... 详细信息

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一种多功能细胞因子。近年来,对HGF在免疫系统生理与病理过程中的作用及其机制的研究不断深入,HGF的免疫调节效应逐渐被阐明。本文结合近几年国内外研究进展,就肝细胞生长因子在免疫调控中的作用,如HGF调控T、B淋巴细胞和树突状细胞等多种免疫细胞功能,调节特异性体液及细胞免疫应答,预防和治疗实验性异基因骨髓移植后并发的急性移植物抗宿主病,促进造血功能和免疫功能的恢复,在心、肝、肾等器官移植中发挥保护作用并促进组织再生,以及用于治疗自身免疫相关疾病等方面的研究结果进行了综述。

关键词：肝细胞生长因子免疫调节移植物抗宿主病

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知识经济条件下人力资源会计特征及确认

科技情报开发与经济 2004年第8期14卷 123-124页

作者：郭子宽太原市旅游执法监察大队

详细介绍了知识经济条件下人力资源会计的特征,论述了在知识经济条件下建立人力资源会计的必要性和可行性,分析了知识经济条件下人力资源会计的确认。

关键词：人力资源会计知识经济人力资源