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聚谷氨酸接枝聚乙二醇@碳酸钙遮蔽体系用于提高聚乙烯亚胺基因转染效率

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高等学校化学学报 2020年第2期41卷 235-242页

作者：郭兆培林琳陈杰田华雨陈学思中国科学院长春应用化学研究所生态环境高分子材料重点实验室

设计并合成了聚谷氨酸-聚乙二醇@碳酸钙(PPG@CaCO3)纳米遮蔽体系,用于遮蔽聚乙烯亚胺(PEI)。一方面,聚谷氨酸-聚乙二醇(PPG)可以降低PEI引起的细胞毒性,更有利于体内应用;另一方面,CaCO3可有效改善PPG导致的转染效率下降,并在一定程度... 详细信息

设计并合成了聚谷氨酸-聚乙二醇@碳酸钙(PPG@CaCO3)纳米遮蔽体系,用于遮蔽聚乙烯亚胺(PEI)。一方面,聚谷氨酸-聚乙二醇(PPG)可以降低PEI引起的细胞毒性,更有利于体内应用;另一方面,CaCO3可有效改善PPG导致的转染效率下降,并在一定程度上提高PEI的细胞转染效率。对比遮蔽体系PPG@CaCO3和聚谷氨酸-聚乙二醇@磷酸钙[PPG@Ca3(PO4)2]发现,PPG@CaCO3在微酸性环境中释放二氧化碳气体是提高细胞转染效率的关键因素。小鼠体内循环实验表明,PPG@CaCO3遮蔽体系可以增加载体在血液中的循环时间。因此,PPG@CaCO3遮蔽体系对于改善阳离子类基因载体的体内应用起到重要作用。

关键词：聚乙烯亚胺基因转染遮蔽体系聚谷氨酸-聚乙二醇@碳酸钙

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非病毒基因载体pH敏感遮蔽体系

非病毒基因载体pH敏感遮蔽体系

2011年全国高分子学术论文报告会

作者：田华雨郭兆培林琳陈学思中国科学院长春应用化学研究所生态环境高分子材料重点实验室

＜正＞非病毒类载体以其低毒性、无免疫原性以及结构的灵活多样性等,使它成为近年来优越于病毒类载体的研究热点。然而,非病毒类载体在体内运输,以及携带基因物质进入目标细胞过程中都存在着一定的障碍。阳离子载体携带基因物质在体内... 详细信息

＜正＞非病毒类载体以其低毒性、无免疫原性以及结构的灵活多样性等,使它成为近年来优越于病毒类载体的研究热点。然而,非病毒类载体在体内运输,以及携带基因物质进入目标细胞过程中都存在着一定的障碍。阳离子载体携带基因物质在体内运输过程中会

关键词：基因载体遮蔽体系 pH敏感

高分子基因载体介导MicroRNA-21沉默基因治疗乳腺癌的研究

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高分子基因载体介导MicroRNA-21沉默基因治疗乳腺癌的研究

2015年全国高分子学术论文报告会

作者：高世乾田华雨郭兆培陈学思中国科学院长春应用化学研究所生态环境高分子材料重点实验室

MicroRNA-21（miR-21）在各类乳腺癌细胞系和临床肿瘤样本中呈现高表达趋势,通过基因干预手段沉默miR-21是近几年新兴起的乳腺癌基因治疗手段。但是由于miR-21沉默基因结构不稳定,细胞内吞能力弱,限制了其在乳腺癌治疗中的广泛应用。阳... 详细信息

MicroRNA-21（miR-21）在各类乳腺癌细胞系和临床肿瘤样本中呈现高表达趋势,通过基因干预手段沉默miR-21是近几年新兴起的乳腺癌基因治疗手段。但是由于miR-21沉默基因结构不稳定,细胞内吞能力弱,限制了其在乳腺癌治疗中的广泛应用。阳离子聚合物聚乙烯亚胺（PEI）与基因形成静电复合物可以提高基因稳定性和转染效率,但是PEI本身细胞毒性较大,因此我们开发了以体内可降解聚赖氨酸改性的聚乙烯亚胺聚合物（PEI-PLL）作为基因载体,在乳腺细胞系中,PEI-PLL与PEI相比具有较高的转染效率和较低的细胞毒性。PEI-PLL可以转染两种不同形式的miR-21沉默基因显著下调乳腺癌细胞miR-21的表达量,并且通过诱导细胞周期G1期阻滞进而降低肿瘤细胞增殖活性。此外,PEI-PLL/mi R-21沉默基因复合物还可以降低乳腺癌细胞对化疗药物阿霉素的耐药性。这些结果表明高分子载体介导的以miR-21为靶点的基因治疗在乳腺癌抗肿瘤研究中具有良好的应用前景。

关键词：基因治疗乳腺癌高分子载体microRNA-21

具有pH敏感性能的可电荷翻转基因载体的制备及抗肿瘤研究

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具有pH敏感性能的可电荷翻转基因载体的制备及抗肿瘤研究

中国化学会2017全国高分子学术论文报告会

作者：陈杰焦自学郭兆培田华雨陈学思中国科学院长春应用化学研究所

我们设计制备了新型具有pH敏感性能的可电荷翻转的基因载体体系,该载体体系可用于抗肿瘤作用的研究。我们首先利用Click反应分别将巯基乙胺和巯基乙酸键合到聚谷氨酸丙烯酯的侧链双键上,得到侧链同时带有氨基和羧基的两性离子聚合物PAM... 详细信息

我们设计制备了新型具有pH敏感性能的可电荷翻转的基因载体体系,该载体体系可用于抗肿瘤作用的研究。我们首先利用Click反应分别将巯基乙胺和巯基乙酸键合到聚谷氨酸丙烯酯的侧链双键上,得到侧链同时带有氨基和羧基的两性离子聚合物PAMT。我们进一步通过调控巯基乙胺和巯基乙酸的比例来调节PAMT聚合物分子的电荷翻转点。PAMT两性分子通过静电作用能够与带正电的PEI/pDNA纳米颗粒形成表面带负电的三元复合物。该复合体系在生理条件下（pH7.4）带负电,增加体内稳定性,而当复合体系经生理条件转变为肿瘤微环境条件（pH6.8）时,通过电荷翻转作用,复合体系的表面带正电,从而增加肿瘤组织的内吞作用,并提高肿瘤治疗效果。肿瘤治疗结果也证明了PAMT/PEI/shVEGF治疗组能够显著地抑制肿瘤的生长。

关键词：两性离子聚合物 pH敏感肿瘤治疗基因治疗电荷翻转

半胱氨酸蛋白酶CfAtg4在油茶果生刺盘孢中的功能分析

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林业科学 2024年第7期60卷 65-72页

作者：郭树峰郭源陈妍李河张盛培经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室中南林业科技大学长沙410004

[目的]揭示半胱氨酸蛋白酶CfAtg4在油茶果生刺盘孢中的生物学功能,为油茶炭疽病新型防控药剂的开发提供候选靶标位点。[方法]通过Overlap PCR构建CfATG4基因敲除片段,利用同源重组原理和PEG介导的原生质体转化法获得敲除突变体和回补菌... 详细信息

[目的]揭示半胱氨酸蛋白酶CfAtg4在油茶果生刺盘孢中的生物学功能,为油茶炭疽病新型防控药剂的开发提供候选靶标位点。[方法]通过Overlap PCR构建CfATG4基因敲除片段,利用同源重组原理和PEG介导的原生质体转化法获得敲除突变体和回补菌株;测定野生型、突变体、回补菌株对自噬诱导剂雷帕霉素的敏感性,通过倒置荧光显微镜观察饥饿诱导前后自噬小体数量评价自噬发生程度,采用蛋白免疫印迹试验验证显微观察结果;测定野生型、突变体、回补菌株的生长速率、分生孢子产量、致病力、孢子萌发、附着胞形成以及对外界胁迫敏感性。[结果]1)果生刺盘孢CfATG4基因敲除突变体ΔCfatg4对雷帕霉素更敏感,自噬小体数量显著少于野生型,ΔCfatg4突变体饥饿诱导前后均不能降解自噬标记蛋白GFP-CfAtg8,自噬作用丧失。2)通过生物学表型分析发现,突变体ΔCfatg4在不同营养条件培养基上生长速率减缓,气生菌丝减少;ΔCfatg4突变体产孢量显著减少,在油茶叶片上致病性丧失,且无法穿透玻璃纸。3)突变体ΔCfatg4孢子萌发率和附着胞形成率显著降低。4)突变体ΔCfatg4对盐胁迫(NaCl、KCl)更耐受,对细胞壁完整性胁迫剂SDS更敏感,对CR更耐受;突变体ΔCfatg4在氧化环境(H_(2)O_(2))下更敏感,在还原环境(DTT)下更耐受。[结论]半胱氨酸蛋白酶CfAtg4介导的自噬参与调控油茶果生刺盘孢生长发育、产孢、附着胞形成、外界胁迫应答和致病过程。

关键词：油茶果生刺盘孢半胱氨酸蛋白酶Atg4 致病力

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含有金纳米簇的基因载体及其荧光性能

含有金纳米簇的基因载体及其荧光性能

2009年全国高分子学术论文报告会

作者：田华雨郭兆培陈杰林琳夏加亮陈学思景遐斌中国科学院长春应用化学研究所高分子物理与化学国家重点实验室

＜正＞超支化的小分子量聚乙烯亚胺（PEI）上引入硫辛酸,在硼氢化钠还原下,与氯金酸在水溶液中一步反应制备含金纳米簇的Au-PEI。通过调整PEI与氯金酸的摩尔比,得到含金量不同的材料。通过细胞转染实验以及毒性试验,证明了所合成的材料... 详细信息

＜正＞超支化的小分子量聚乙烯亚胺（PEI）上引入硫辛酸,在硼氢化钠还原下,与氯金酸在水溶液中一步反应制备含金纳米簇的Au-PEI。通过调整PEI与氯金酸的摩尔比,得到含金量不同的材料。通过细胞转染实验以及毒性试验,证明了所合成的材料具有高效低毒的特性,材料的转染性能和细胞毒性与纳米金的含量有直接关系。另外荧光扫描光谱表明,制备的材料随着含金量的不同,可发出红和黄这两种波长不同的荧光,这是由于两种材料中金纳米簇的尺寸不同造成的。本文首次制备了具有荧光性能的含纳米金的基因载体,为非病毒基因载体的发展和应用开辟了新的途径。

关键词：聚乙烯亚胺基因载体转染纳米金荧光

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A银行轻资产运营财务绩效评价与改进研究

A银行轻资产运营财务绩效评价与改进研究

作者：郭兆基西安理工大学

学位级别：硕士

近年来,在经济下行压力中,银行业的存贷业务竞争激烈、不良资产占比上升、盈利水平下降、金融行业面临的内外部监管愈发严格,并且由于央行不断降低存款准备金率,使得各家商业银行响应央行政策,缩小存贷款利息差以刺激市场经济的不断发... 详细信息

近年来,在经济下行压力中,银行业的存贷业务竞争激烈、不良资产占比上升、盈利水平下降、金融行业面临的内外部监管愈发严格,并且由于央行不断降低存款准备金率,使得各家商业银行响应央行政策,缩小存贷款利息差以刺激市场经济的不断发展。这样的宏观背景导致银行传统重资产经营模式难以为继,如果想要取得良好的发展,商业银行则需要改变过去的收入模式、创新业务产品、加快结构转型。本文利用文献研究法、案例分析法等研究方法,以A银行轻资产运营为财务绩效研究对象,首先根据梳理的国内外研究成果得出本文的研究内容与方法;其次介绍了商业银行轻资产运营及财务绩效评价的相关概念,并且选取了相应的财务绩效评价指标和方法;再次介绍了该银行概况,从年报中分析A银行实施轻资产运营现状,并对A银行实施轻资产运营进行评价与分析,通过对A银行2015-2022年轻资产运营财务绩效的研究,运用熵值法确定其财务绩效指标权重,对A银行轻资产运营财务绩效进行纵向分析,并选取10家其他商业银行作为分析样本,依靠功效系数法计算出A银行轻资产运营财务绩效指标得分对A银行轻资产运营财务绩效进行横向分析;最后得出了A银行近8年轻资产运营财务绩效平均得分为0.300分,评价等级为低,同时根据研究所发现的不足之处,提出了包含强化业务发展、优化管理模式、加大技术研发与应用、提高市场敏感度及加强人才培养与引进五方面的相关改进措施。A银行作为12家全国性股份制商业银行之一,早在2016年便提出轻资产运营的概念并得以实施,发展轻资产业务,想要借此形成市场优势。因此本文的结论对改善A银行轻资产运营财务绩效具有现实意义,能够为A银行轻资产运营的财务绩效提出具有针对性的改进措施,有利于提高该行的竞争力及轻资产运营效率。

关键词：轻资产运营熵值法功效系数法

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氨基酸改性聚乙烯亚胺基因载体的研究

氨基酸改性聚乙烯亚胺基因载体的研究

2007年全国高分子学术论文报告会

＜正＞基因治疗的发展使得医治遗传疾病或癌症成为可能。成功的基因治疗依赖于有效的基因载体。我们在前期的研究工作中,制备得到了具有良好转染性能的 PEI-PBLG 共聚物。本文对氨基酸改性的基因载体进行了深入的研究,比较引入不同的氨... 详细信息

＜正＞基因治疗的发展使得医治遗传疾病或癌症成为可能。成功的基因治疗依赖于有效的基因载体。我们在前期的研究工作中,制备得到了具有良好转染性能的 PEI-PBLG 共聚物。本文对氨基酸改性的基因载体进行了深入的研究,比较引入不同的氨基酸基团对 PEI 转染性

关键词：氨基酸聚乙烯亚胺基因载体

基于上下文感知与高效特征提取的航空铝合金焊缝缺陷智能识别与尺寸测量研究

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基于上下文感知与高效特征提取的航空铝合金焊缝缺陷智能识别与尺...

作者：郭兆丰南昌航空大学

学位级别：硕士