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棉花Lea蛋白D-113基因启动子的克隆及序列分析

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Acta Genetica Sinica 2002年第2期29卷 161-165,T001页

作者：罗克明郭余龙肖月华侯磊裴炎西南农业大学生物技术中心重庆北碚400716

为研究植物Lea (lateembryogenesisabundant)蛋白基因启动子在种子中的特异性表达 ,通过PCR扩增 ,从棉花(Gossypiumhirsutumcv .Coker312 )中克隆了Lea蛋白基因家族中D - 113基因上游 10 2 4bp的调控序列。DNA序列分析结果表明 ,该片段... 详细信息

为研究植物Lea (lateembryogenesisabundant)蛋白基因启动子在种子中的特异性表达 ,通过PCR扩增 ,从棉花(Gossypiumhirsutumcv .Coker312 )中克隆了Lea蛋白基因家族中D - 113基因上游 10 2 4bp的调控序列。DNA序列分析结果表明 ,该片段与已报道的Lea蛋白基因同一家族该基因的对应序列同源性达 90 %以上。将该启动子序列与GUS基因融合 ,构建成表达载体后 ,通过基因枪轰击导入到经ABA诱导处理的棉花胚性愈伤组织和油菜种子以及棉花的根、茎、叶中 ,组织化学分析结果表明 ,D - 113基因启动子在胚中特异性表达。

关键词：胚胎后期丰富性蛋白 D-113基因启动子分析棉花克隆序列分析

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棉花川239体胚发生和植株再生

棉花学报 1999年第5期11卷 247-250页

作者：郭余龙李名扬裴炎蔡应繁西南农业大学生物技术研究中心重庆北碚400716 四川省农科院棉花研究所四川简阳641400

以长江流域棉花新品系川２３９为材料，系统比较了四种激素组合（２，４－Ｄ＋ＫＴ，ＮＡＡ＋ＫＴ，ＩＡＡ＋ＫＴ，ＺＴ）对愈伤组织诱导和体胚发生的影响，对获得大量再生植株的条件进行了研究，获得了“川２３９”再生植株。

关键词：棉花体胚发生植株再生

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叶用芥菜叶片原生质体再生植株

园艺学报 1992年第1期19卷 52-56,T001页

作者：雷建军陈世儒郭余龙西南农业大学植物遗传工程研究室重庆630716

叶用芥菜品种‘冲辣菜’(Brassica juncea *** cv,‘Chonglacai’)试管苗叶片原生质体用液体浅层培养。培养后48—72h观察到第一次分裂。培养7—10天后每隔一周添加甘露醇浓度逐渐降低(6％—4％—0％)的新鲜培养基,一共加3次。培养过程... 详细信息

叶用芥菜品种‘冲辣菜’(Brassica juncea *** cv,‘Chonglacai’)试管苗叶片原生质体用液体浅层培养。培养后48—72h观察到第一次分裂。培养7—10天后每隔一周添加甘露醇浓度逐渐降低(6％—4％—0％)的新鲜培养基,一共加3次。培养过程中不时地慢速振荡有利于细胞的持续分裂,从而促进细胞团和微愈伤组织的形成。6周后形成直径达0.5—1.0mm的微愈伤组织。植板率(微愈伤组织数占培养原生质体数的百分率)为0.2％。微愈伤组织转至附加萘乙酸(NAA)0.2、6-苄氨基嘌呤(BAP)2.0mg/L 的MS固体培养基上,10天后分化出芽。当这些芽长成 2—3 cm高的新梢后转至含NAA 1.0mg/L和赤霉素(GA_3)0.2mg/L或只附加吲哚乙酸(IAA)1.0mg/L的MS培养基上分化出根,形成了完整的小植株。

关键词：叶用芥菜原生质体植株再生芥菜

棉花MADS框蛋白基因(GhMADS1)的克隆

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Acta Genetica Sinica 2004年第10期31卷 1136-1141页

作者：郑尚永郭余龙肖月华罗明侯磊罗小英裴炎西南农业大学生物技术中心

作为转录因子 ,MADS框蛋白基因在植物花器官发育中有着重要的功能。为研究棉花花器官发育的分子机理 ,以棉花花器官突变体CHV1(cottonhomeoticvariant)和徐州 14 2正常植株为材料 ,利用棉花EST数据库资料 ,通过EST序列整合 ,从陆地棉徐... 详细信息

作为转录因子 ,MADS框蛋白基因在植物花器官发育中有着重要的功能。为研究棉花花器官发育的分子机理 ,以棉花花器官突变体CHV1(cottonhomeoticvariant)和徐州 14 2正常植株为材料 ,利用棉花EST数据库资料 ,通过EST序列整合 ,从陆地棉徐州 14 2花蕾中克隆出一个MADS框蛋白的编码区段 ,GenBank登录号为AF5 3896 5。该片段 (GhMADS1)长 713bp ,包含一个 711bp的开放阅读框 ,推导的氨基酸序列 (2 36个氨基酸 )与葡萄、烟草、矮牵牛、拟南芥和金鱼草等的AGL2组MADS框蛋白有很高的序列相似性。系统进化分析同样将Gh MADS1基因归入AGL2组MADS框蛋白。RT PCR分析显示 ,该基因在陆地棉的花瓣、雄蕊、胚珠和纤维中表达 ,特别是在花瓣中表达量最高 ,而在根、茎、叶等营养器官和棉花同源异型突变体CHV1(所有花器官均变为苞叶状叶性器官 )的变异花蕾中不表达。

关键词：棉花花器官 MADS框

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RNA干扰机理与应用

安徽农业科学 2009年第7期37卷 2870-2872页

作者：遇玲李名扬郭余龙西南大学园艺园林学院重庆400716

RNA干扰(RNA Interference,RNAi)是一种转录后水平的基因沉默(Post-transcriptional Gene Silencing,PTGS)现象,是通过体外人工合成的或体内的双链RNA(Dubble-stranded RNA,dsRNA)在细胞内特异性的降解其同源mRNA,使相应的基因沉默,达到阻止基因表达的目的。因其具有特异、高效、易于操作等优点,为细胞内基因表达研究提供了新思路、新方法,从而使其具有广阔的应用前景。就RNAi机制及其应用研究进行了综述。

关键词： RNAi PTGS 机制应用

Cloning of a MADS Box Gene(GhMADS3)from Cotton and Analysis of Its Homeotic Role in Transgenic Tobacco

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Journal of Genetics and Genomics 2007年第6期34卷 527-535页

作者：郭余龙祝钦泷郑尚永李名扬西南大学园艺园林学院重庆400716 农业部生物技术与作物品种改良重点实验室重庆400716

A MADS box gene （GhMADS3） was cloned from cotton （Gossypium hirsutum L.） based on EST sequences. The predicted protein sequence of GhMADS3 showed 85%, 73%, and 62% identity with Theobroma cacao TcAG, Antirrhinum majus FAR, and Arabidopsis thaliana AG, respectively, and was grouped with AG homologues when the full length sequences excluding N-extensions were compared. GhMADS3 expressed in the wild type cotton flower primarily in stamens and carpels, which was comparable to AG in Arabidopsis. However, it was not expressed in floral buds of a homeotic cotton variant chvl. Ectopic expression of GhMADS3 in tobacco （Nicotiana tabacum L.） resulted in flowers with sepal-to-carpel and petal-to-stamen transformation. The carpelloid first whorl organs, with stigmatic tissue on their upper edges, had a white appearance when compared with the dark green color of the wild type sepals. At times, long filaments were observed at the fusion site of the first carpelloid oranges. The second whorl organs in staminoid were usually smaller than the wild type and the color was changed from pink to white. These results suggest that GhMADS3 has a homeotic role in flower development.

关键词： MADS-box AG subfamily homeotic role cotton flower development

棉花变异体(CHV1)的花形态特征分析(英文)

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实验生物学报 2003年第3期36卷 202-208页

作者：郭余龙薛美凤李名扬裴炎郑尚永西南农业大学生物技术研究中心重庆400716

棉花体细胞培养再生植株存在大量的生理变异和可遗传变异,从中分离到一个性状稳定的花器变异体(CHV1)。从花器官形态特征和表面显微特征分析,该变异体的所有花器官都变成了苞叶状器官,但中央数片叶状器官的基部有胎座和胚珠着生。变异... 详细信息

棉花体细胞培养再生植株存在大量的生理变异和可遗传变异,从中分离到一个性状稳定的花器变异体(CHV1)。从花器官形态特征和表面显微特征分析,该变异体的所有花器官都变成了苞叶状器官,但中央数片叶状器官的基部有胎座和胚珠着生。变异体每朵花有苞叶3-7片,苞叶状器官19-41片。苞叶状器官在花梗上的排布介于“轮”与“螺旋”状之间。据花器发育理论和变异体花的生长特性推测,该变异体中控制花器发育的A、B和C功能皆失活。对造成该变异的可能机理和棉花花发育模式进行了分析。该变异材料对研究棉花花发育和体细胞无性系变异的机理有一定价值。

关键词：棉花花器官同源异型变异体细胞培养再生植株花器变异体

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表达阳离子抗菌肽的转基因棉花表型异常

植物生理与分子生物学学报 2003年第4期29卷 295-300页

作者：郭余龙罗小英李名扬裴炎张浩西南农业大学生物技术研究中心重庆400716

用基因枪轰击茎尖法将人工合成的阳离子抗菌肽CEMA基因导入棉花中 ,获得 3株转基因棉花 ,它们均出现嵌合体表型。在表型不正常的枝条上 ,叶片扭曲畸形 ,出现灰绿色与绿色条纹相间的花叶 ,花器发育异常、无花粉、人工授粉不能结实。花叶... 详细信息

用基因枪轰击茎尖法将人工合成的阳离子抗菌肽CEMA基因导入棉花中 ,获得 3株转基因棉花 ,它们均出现嵌合体表型。在表型不正常的枝条上 ,叶片扭曲畸形 ,出现灰绿色与绿色条纹相间的花叶 ,花器发育异常、无花粉、人工授粉不能结实。花叶区的叶绿素含量降低约 2 0 % ,叶肉栅栏组织细胞局部缺损 ,维管束及其管状分子数目减少。叶片灰绿色区叶肉细胞的次生壁明显增厚 ,局部区域吞噬现象明显 ,叶绿体内基粒片层数目较少 ,嗜锇小体明显较多 ,类囊体腔不明显。PCR分析表明 ,仅在不正常枝条的花叶中检测到外源CEMA基因。

关键词：阳离子肽转基因棉花形态变异超微结构

超量表达PhWRIL1基因抑制矮牵牛叶片外植体再生不定芽

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园艺学报 2018年第10期45卷 1961-1969页

作者：梁玲鸽杨霞王浩李政李名扬郭余龙西南大学园艺园林学院重庆市花卉工程技术中心南方山地园艺学教育部重点实验室重庆400715

许多研究发现AP2/ERF家族euANT支基因超量表达可以促进植物生长和离体再生。但尚未有关于与euANT支亲缘关系很近的AP2/ERF基因basalANT进化支基因超量表达对离体培养中不定芽再生影响的研究。本研究中从矮牵牛中克隆了一个basalANT基因... 详细信息

许多研究发现AP2/ERF家族euANT支基因超量表达可以促进植物生长和离体再生。但尚未有关于与euANT支亲缘关系很近的AP2/ERF基因basalANT进化支基因超量表达对离体培养中不定芽再生影响的研究。本研究中从矮牵牛中克隆了一个basalANT基因,命名为PhWRIL1。Real-time PCR结果显示,PhWRIL1的m RNA在矮牵牛各种组织中均有表达,表达量处于中等水平,在成熟组织中比幼嫩组织中更高。超量表达PhWRIL1的矮牵牛植株严重矮化,但开花时间没有显著变化。测定再生能力的结果表明:PhWRIL1超量表达的转基因植株叶片外植体的愈伤组织和芽的诱导与生长明显减少。这些结果表明PhWRIL1在矮牵牛中超量表达抑制了离体培养过程中不定芽的再生能力,在植物发育过程中basalANT和euANT基因可能发挥相反的作用。

关键词：矮牵牛 AP2/ERF basal ANT基因离体再生植物生长