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miR-135b促进肝癌细胞侵袭和转移

细胞与分子免疫学杂志 2015年第10期31卷 1316-1321页

作者：张彦兵王妍华郭亚焕廖子君徐瑞阮之平西安交通大学医学院附属陕西省肿瘤医院肿瘤内科陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院陕西西安710061

目的探讨miR-135b对肝癌细胞浸润转移的影响及其分子机制。方法分别在肝癌细胞系中过表达和下调miR-135b,通过Transwell^(TM)实验检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力,利用肝癌移植瘤模型检测肝癌细胞的体内增殖能力和成瘤能力;采用Western blo... 详细信息

目的探讨miR-135b对肝癌细胞浸润转移的影响及其分子机制。方法分别在肝癌细胞系中过表达和下调miR-135b,通过Transwell^(TM)实验检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力,利用肝癌移植瘤模型检测肝癌细胞的体内增殖能力和成瘤能力;采用Western blot法结合双荧光素酶基因报告系统预测miR-135b的下游靶基因。结果 miR-135b在高侵袭性的MHCC97肝癌细胞系中高表达;过表达miR-135b能够增强HepG2和Bel-7402肝癌细胞的体外侵袭和转移能力,促进肝癌细胞的体内转移能力;通过靶向miR-135b的干扰载体pcDNA-miR-135b-Sponge下调miR-135b的表达,MHCC97肝癌细胞的体外侵袭转移能力及移植瘤的转移能力明显受到抑制;双荧光素酶基因报告系统和Western blot实验结果显示miR-135b能够靶向Hippo信号通路中的关键分子,包括大型肿瘤抑制因子同源蛋白2(LATS2)、含β转导素重复序列蛋白(β-TrCP)、N-myc下游调节基因2(NDR2)和亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZTS1)等。结论 miR-135b可能通过靶向Hippo信号通路相关基因促进肝癌细胞的侵袭和转移。

关键词： miR-135b Hippo信号通路肝癌转移侵袭

得力生通过调节血管蛋白抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖并促凋亡

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西安交通大学学报（医学版） 2015年第5期36卷 702-706页

作者：孙海凤黎明赵征郭亚焕杨广宁薛丽雷宝霞南克俊陕西省肿瘤医院陕西西安710061 西安交通大学医学部陕西西安710061 西安交通大学医学部第一附属医院心血管外科陕西西安710061 西安交通大学医学部第一附属医院肿瘤内科陕西西安710061

目的探讨得力生注射液对肝癌SMMC-7721细胞的作用机制。方法用不同浓度的得力生作用肝癌SMMC-7721细胞后,MTT方法检测肝癌SMMC-7721细胞不同时间(24、48、72h)的增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡及细胞周期,免疫细胞化学方法检测肝癌S... 详细信息

目的探讨得力生注射液对肝癌SMMC-7721细胞的作用机制。方法用不同浓度的得力生作用肝癌SMMC-7721细胞后,MTT方法检测肝癌SMMC-7721细胞不同时间(24、48、72h)的增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡及细胞周期,免疫细胞化学方法检测肝癌SMMC-7721细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和内皮抑素(endostadin,ENS)的表达。结果得力生作用于肝癌SMMC-7721细胞后,随着作用时间的延长和药物浓度的增加,细胞增殖逐渐减少,细胞凋亡逐渐增加,而对正常肝细胞HL-7702的作用很轻微。得力生将肝癌SMMC-7721细胞主要阻滞在G1期,且VEGF和OPN表达下调,ENS表达上调。结论得力生抑制肝癌SMMC-7721细胞增殖及诱导凋亡,呈现时间和浓度依赖效应,并可能通过调节血管蛋白而实现,这为得力生治疗肝癌提供了理论依据。

关键词：得力生凋亡细胞周期肝癌血管内皮生长因子(VEGF) 骨桥蛋白(OPN) 内皮抑素(ENS)

β-榄香烯对胃癌细胞BGC-823细胞周期和血管生成相关蛋白的影响研究

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临床和实验医学杂志 2022年第9期21卷 914-918页

作者：王颖栋丁海斌郭甲民黄子超郭亚焕周菁陕西省肿瘤医院腹部肿瘤外科陕西西安710061

目的研究β-榄香烯对胃癌细胞BGC-823细胞周期蛋白和血管生成相关蛋白的影响。方法以胃癌细胞BGC-823作为研究对象,实验分为对照组和50、100、200、400、800μmol/Lβ-榄香烯组,对照组中加入含有二甲亚砜的新鲜培养基,β-榄香烯处理组... 详细信息

目的研究β-榄香烯对胃癌细胞BGC-823细胞周期蛋白和血管生成相关蛋白的影响。方法以胃癌细胞BGC-823作为研究对象,实验分为对照组和50、100、200、400、800μmol/Lβ-榄香烯组,对照组中加入含有二甲亚砜的新鲜培养基,β-榄香烯处理组分别加入含有50、100、200、400、800μmol/Lβ-榄香烯的新鲜培养基。分别于干预后12、24、48 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、前列腺素E2(PEG2)水平。于干预后24 h,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用蛋白质印迹法检测细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)、环氧化物酶2(COX-2)表达情况。结果干预12~48 h,所有分组细胞增殖均随时间延长显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。同一时间下,与对照组比较,200μmol/Lβ-榄香烯组和800μmol/Lβ-榄香烯组BGC-823细胞上清液VEGF和PEG2水平均显著降低,且800μmol/Lβ-榄香烯组上清液VEGF和PEG2水平显著低于200μmol/Lβ-榄香烯组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论β-榄香烯可能通过抑制细胞周期调控蛋白表达抑制胃癌BGC-823细胞增殖,通过抑制COX-2及下游VEGF和PGE2表达BGC-823细胞抑制血管生成进而促进凋亡,且随着β-榄香烯浓度增加和作用时间延长,其对胃癌细胞增殖率抑制及促血管生成效果均呈显著增加和增强。

关键词：胃癌BGC-823细胞 β-榄香烯细胞周期血管生成

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中华肿瘤杂志 2013年第12期35卷 897-903页

作者：李春燕姚安梅常小宁郭亚焕徐瑞陕西省肿瘤医院肿瘤内科一病区西安710061 陕西省肿瘤医院妇瘤科西安710061

目的应用抑制性消减杂交技术（SSH）筛选人肾癌差异表达基因，并探讨其对。肾癌生物学功能和耐药的影响。方法从人肾透明细胞癌细胞株RLC-310和正常细胞株HK-2中提取mRNA，应用SSH技术获得肾癌细胞差异表达基因文库，筛选差异表达最明... 详细信息

目的应用抑制性消减杂交技术（SSH）筛选人肾癌差异表达基因，并探讨其对。肾癌生物学功能和耐药的影响。方法从人肾透明细胞癌细胞株RLC-310和正常细胞株HK-2中提取mRNA，应用SSH技术获得肾癌细胞差异表达基因文库，筛选差异表达最明显的基因。以逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）和Westernblot法验证差异表达基因的表达。构建干扰载体沉默人肾癌RLC-310和GRC-1细胞中差异表达基因SIPL1的表达，分别采用细胞计数法、四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和裸鼠移植瘤实验检测RLC-310和GRC-1细胞的增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期，MTT法检测对阿霉素的耐药性。结果构建了人肾癌细胞差异表达基因文库，筛选了12种差异表达基因，其中SIPL1基因的表达差异最为明显。RT—PCR和Western blot法验证SIPL1基因在人肾癌细胞系及肾透明细胞癌组织中高表达。SIPL1shRNA重组质粒稳定转染至RLC-310和GRC-1细胞后，可明显下调SIPL1蛋白的表达。与转染阴性对照组细胞比较，转染SIPL1shRNA组细胞的增殖能力均明显下降（P〈0．05），肿瘤形成能力明显减弱[转染SIPL1shRNA组和阴性对照组RLC-310细胞的裸鼠移植瘤重量分别为（0．22±0．07）g和（0．85±0．06）g，转染SIPL1shRNA组和阴性对照组GRC-1细胞的裸鼠移植瘤重量分别为（0．32±0．07）g和（1．21±0．11）g，均P〈0．05]，G0／G1期细胞的比例增加[转染SIPL1shRNA组和阴性对照组RLC-310细胞中Go／G，期细胞的比例分别为（71．13±4．58）％和（53．27±3．34）％，转染SIPL1shRNA组和阴性对照组GRC-1细胞中Go／G，期细胞的比例分别为（73．83±3．97）％和（59．33±3．03）％，均P〈0．05]，对阿霉素的敏感性提高（P〈0．05）。沉默SIPL1基因表达可以使AKT通路失活，同时细胞周期抑制蛋白p27^Kip1和p21^Cip1的表达增加。结论应用SSH技术成功筛选出肾癌差异表达基因SIPL1。SIPL1基因是一个肾癌促进基因，可能成为肾癌诊断和治疗的新靶点。

关键词：肾肿瘤抑制性消减杂交 SIPL1基因细胞增殖细胞周期抗药性,肿瘤

miR-200a靶向胰岛素样生长因子2抑制肾母细胞瘤细胞G401的迁移与侵袭

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空军航空医学 2022年第3期39卷 58-61页

作者：王佳郭亚焕王玉珍廖子君焦咪段炼周菁空军军医大学西京医院泌尿外科西安710000 陕西省肿瘤医院肿瘤内科西安710061

目的探究miR-200a靶向调控胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)对肾母细胞瘤细胞G401迁移与侵袭的影响。方法收集30例肾母细胞瘤患者的癌组织及癌旁组织,RT-PCR检测miR-200a和GF2的表达水平。双荧光素酶实验检测miR-2... 详细信息

目的探究miR-200a靶向调控胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)对肾母细胞瘤细胞G401迁移与侵袭的影响。方法收集30例肾母细胞瘤患者的癌组织及癌旁组织,RT-PCR检测miR-200a和GF2的表达水平。双荧光素酶实验检测miR-200a对IGF2的靶向作用。G401细胞过表达miR-200a模拟物后,RT-PCR和蛋白印迹法分别检测IGF2 mRNA和蛋白表达水平。转染细胞进行分组:miR-NC组、miR-200a模拟物组、pIGF2组、pIGF2+miR-200a模拟物组,划痕实验检测各组细胞迁移能力,Transwell检测各组细胞侵袭能力。结果与癌旁组织比较,癌组织中miR-200a在癌组织中表达量显著下降(t=6.76,P<0.01),而IGF2的mRNA以及蛋白水平显著升高(t=12.41,t=8.75,P<0.01)。与IGF2 WT+miR-NC比较,IGF2 WT+miR-200a模拟物荧光素酶活性显著降低(t=6.33,P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-200a模拟物组IGF2的mRNA和蛋白水平显著降低(t=4.82、t=6.12,P<0.01),细胞迁移、侵袭能力显著降低(P<0.01);pIGF2组细胞迁移、侵袭能力显著提高(PC0.01)。与pIGF2组比较,pIGF2+miR-200a模拟物组G401迁移、侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论miR-200a通过靶向IGF2抑制肾母细胞瘤细胞G401的迁移与侵袭。

关键词：肾母细胞瘤 miR-200a 胰岛素样生长因子2 迁移侵袭

康艾注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察

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陕西中医 2015年第10期36卷 1322-1323页

作者：郭亚焕陕西省肿瘤医院西安710061

目的:探究晚期非小细胞肺癌患者,采用康艾注射液联合化疗进行治疗的作用效果,并分析其临床意义。方法:回顾性选取2012年1月至2013年12月期间,我院收治的晚期非小细胞肺癌患者共72例,随机将其分为对照组和治疗组,每组各为36例。对照组患... 详细信息

目的:探究晚期非小细胞肺癌患者,采用康艾注射液联合化疗进行治疗的作用效果,并分析其临床意义。方法:回顾性选取2012年1月至2013年12月期间,我院收治的晚期非小细胞肺癌患者共72例,随机将其分为对照组和治疗组,每组各为36例。对照组患者采用常规的化疗进行诊治,而治疗组患者是在对照组的基础上,联合康艾注射液进行诊治,记录两组患者的治疗结果以及不良反应情况,并进行统计学的分析与处理。结果:治疗后两组的生存质量都有改善,而治疗组的改善情况要明显好于对照组,同时治疗组在治疗过程中出现的不良情况明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:采用康艾注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌,效果显著,患者经治疗基本上能够保持病情稳定,同时应注意用药过程中的不良反应等。

关键词：肺肿瘤/中西医结合疗法康艾注射液

抗肿瘤血管生成靶向药物心血管不良反应研究进展

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中国临床研究 2020年第6期33卷 849-852页

作者：杨柳郭亚焕廖子君西安医学院研究生处陕西西安710068 陕西省肿瘤医院内一科陕西西安710061

抗血管生成靶向药物目前已广泛用于多种晚期实体肿瘤的姑息治疗,其常见不良反应主要包括腹泻、恶心、疲劳、手足综合征、厌食症、口腔炎、血小板减少、皮疹和中性粒细胞减少等;最严重的不良反应主要表现在心血管方面,如高血压、血栓栓... 详细信息

抗血管生成靶向药物目前已广泛用于多种晚期实体肿瘤的姑息治疗,其常见不良反应主要包括腹泻、恶心、疲劳、手足综合征、厌食症、口腔炎、血小板减少、皮疹和中性粒细胞减少等;最严重的不良反应主要表现在心血管方面,如高血压、血栓栓塞、心力衰竭和QT间期延长。本文就抗肿瘤血管生成靶向药物在心血管方面引起不良反应的机制及相应防治策略做一阐述。

关键词：抗血管生成靶向药物高血压血栓栓塞心力衰竭 QT间期延长

白花蛇舌草总黄酮对TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞EMT的逆转作用及其机制

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西安交通大学学报（医学版） 2016年第2期37卷 279-282,306页

作者：张彦兵朱娇肖菊香郭亚焕廖子君徐瑞西安交通大学附属陕西省肿瘤医院肿瘤内科陕西西安710061 西安交通大学第一附属医院肿瘤内科陕西西安710061

目的探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对TGF-β1诱导肝癌细胞MHCC97-H上皮细胞间质转化(EMT)的逆转作用及其相关机制。方法用TGF-β1诱导MHCC97-H细胞建立EMT模型,再将其分为5组:正常对照组、TGF-β1组、TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组及TGF-... 详细信息

目的探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对TGF-β1诱导肝癌细胞MHCC97-H上皮细胞间质转化(EMT)的逆转作用及其相关机制。方法用TGF-β1诱导MHCC97-H细胞建立EMT模型,再将其分为5组:正常对照组、TGF-β1组、TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组及TGF-β1+FOD+5-FU组,分别干预48h,Transwell侵袭小室法检测细胞体外侵袭能力,Western blot法检测各组细胞中E-cadherin、vimentin蛋白的表达。结果与正常细胞形态相比,TGF-β1诱导后细胞呈现明显的长梭形,且侵袭能力增强(P=0.02);给予药物处理后,TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组细胞的穿透能力较TGF-β1组减弱(P=0.03、P=0.02),且联合用药组减弱程度更加明显(P=0.01);Western blot结果显示,TGF-β1组细胞中E-cadherin蛋白表达显著降低(P=0.01),vimentin蛋白的表达显著增加(P=0.01),TGF-β1+FOD组、TGF-β1+5-FU组E-cadherin蛋白表达有所上调(P=0.03、P=0.02),vimentin蛋白的表达有所下调(P=0.04、P=0.03),且联合组变化更为显著(P=0.01)。结论 FOD能够逆转TGF-β1诱导的肝癌MHCC97-H细胞的上皮间质转化,其机制可能与其抑制TGF-β1诱导的E-cadherin蛋白下调及上皮细胞间质转化相关。

关键词： MHCC97-H细胞 TGF-β1 上皮间质转化白花蛇舌草总黄酮侵袭 E-cadherin vimentin

复方苦参注射液调节磷脂酰肌醇3激酶——丝氨酸/苏氨酸激酶信号通路对肺腺癌细胞生物学行为的影响

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山西医药杂志 2023年第6期52卷 408-415页

作者：周菁王佳王玉珍李丽娜郭亚焕焦咪段炼阎丽陕西省肿瘤医院肿瘤内六科西安710061 陕西省肿瘤医院人事科西安710061 空军军医大学附属西京医院泌尿外科

目的探索复方苦参注射液抑制肺腺癌转移的可能的作用机制。方法①利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库、在线人类孟德尔网(OMIM)和Genecard数据库、STRING软件检索复方苦参注射液所含的2种成分苦参与土茯苓的活性成分及对... 详细信息

目的探索复方苦参注射液抑制肺腺癌转移的可能的作用机制。方法①利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库、在线人类孟德尔网(OMIM)和Genecard数据库、STRING软件检索复方苦参注射液所含的2种成分苦参与土茯苓的活性成分及对应靶标,及其与肺腺癌重合的潜在靶基因、治疗肺腺癌的作用靶点,并对关键靶点进行基因本体(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析获知其潜在作用机制。②通过MTT比色法、Transwell、细胞划痕、流式细胞术等体外实验检测苦参注射液对人肺腺癌A549细胞增殖、迁移侵袭、凋亡能力的影响;蛋白印迹法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化(p)-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达。结果①复方苦参注射液作用于肺腺癌共包含2味中药、58种有效活性成分、127个靶基因,KEGG通路富集分析涉及脂质与动脉粥样硬化、PI3K—AKT信号通路等生物学通路;②体外实验证实复发苦参注射液对肺腺癌A549增殖的抑制作用呈剂量依赖性,并可减弱A549细胞的迁移侵袭能力,增强细胞凋亡率,这一过程可能是通过抑制PI3K—AKT磷酸化水平,进而抑制该通路的促癌作用。结论复方苦参注射液的活性成分大豆抗毒素、芸豆球蛋白、甘草素、刺芒柄花素等,可能通过作用于丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、TP53、MAPK3、AKT1、JUN、TNF等靶点,通过PI3K—AKT信号通路调控肿瘤微环境抑制肺腺癌的转移发生。

关键词：肺肿瘤腺癌复方苦参注射液 PI3K-AKT信号通路