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PFOS和PFOS-K对半滑舌鳎抗氧化酶活性及激素受体等基因表达的影响

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PFOS和PFOS-K对半滑舌鳎抗氧化酶活性及激素受体等基因表达的影响

作者：郝若冰天津农学院

学位级别：硕士

全氟化合物(Perfluorinated Compounds,PFCs)是由碳原子里的氢原子被全部替代的持久性有机化合物,通常被用作添加剂应用在纺织,包装,化学镀膜等领域里。近年来,全氟化合物中污染浓度最高最典型的全氟辛烷磺酸(Perfluorooctane sulfonate... 详细信息

全氟化合物(Perfluorinated Compounds,PFCs)是由碳原子里的氢原子被全部替代的持久性有机化合物,通常被用作添加剂应用在纺织,包装,化学镀膜等领域里。近年来,全氟化合物中污染浓度最高最典型的全氟辛烷磺酸(Perfluorooctane sulfonate,PFOS)在我国近岸海域的海水和沉积物中被大量检出,尤其在水生生物体内表现出很强的生物富集性,目前PFOS对水生生物的毒性研究主要集中在斑马鱼和日本青鳉等模式生物鱼类中,但PFOS对海洋经济鱼类的毒性研究十分缺乏。本文利用半滑舌鳎为受试生物,比较研究不同浓度水平PFOS和PFOS钾盐(PFOS-K)长期胁迫下半滑舌鳎幼鱼体内抗氧化防御系统(SOD、CAT、POD、GSH、GST、Ach E、EROD)以及激素受体通路相关基因表达(AR、ERα、ERβ、AHR、ARNT)的响应特征。同时,利用整合生物响应指数(Integrated Biomarker Responses,IBR)法对PFOS和PFOS-K的毒性效应进行综合评价。为全面评价持久性有机污染物PFOS和PFOS-K对海洋生物毒性提供参考。研究中PFOS和PFOS-K对半滑舌鳎的毒性实验分别设置3个浓度组,即0.1μg·L(环境浓度),10μg·L和100μg·L,同时设置1个DMSO溶剂对照组。分别于胁迫的第1 d、3 d、7 d和15 d剖取各组鱼类肝脏和鳃样品,测定抗氧化系统指标(SOD,CAT,POD,和GSH)以及几种生物代谢酶(GST,EROD和Ach E)的活力变化。实验结果表明PFOS和PFOS-K对半滑舌鳎肝脏和鳃组织均有不同程度的氧化损伤效应。具体表现为:PFOS胁迫下半滑舌鳎肝脏和鳃组织CAT活性都有显著升高,在0.1μg·L组时肝脏和鳃组织CAT活性最高为12.01 U·mgprot和2.01 U·mgprot分别为空白组的1.54倍和2.71倍。PFOS对半滑舌鳎肝脏和鳃GST活性均有诱导作用。暴露1 d时0.1μg·L组肝脏GST活性为21.83 U·mgprot,是空白组的1.76倍。而0.1μg·L组鳃GST活性达到最高为56.18 U·mgprot,是空白组的2.45倍。说明鳃比肝脏组织氧化损伤更明显。同时不同浓度PFOS和PFOS-K对半滑舌鳎肝脏EROD活性都有不同程度诱导作用。暴露15 d时,PFOS暴露下EROD活性为在0.1μg·L组时为10.44 U·mgprot。是空白组的1.87倍,而PFOS-K暴露下0.1μg·L组EROD活性最高为12.26 U·mgprot,是空白组的2.40倍。说明PFOS和PFOS-K暴露作用下,PFOS-K比PFOS对组织的氧化损伤效应较强。因此,PFOS和PFOS-K都能够对海洋鱼类生物组织造成氧化损伤,且损伤程度与污染物暴露浓度和作用时间具有相关性。同时SOD、GST、POD、CAT、Ach E、EROD的活性变化趋势以及GSH含量均可以作为PFOS和PFOS-K毒性效应检测及评价指标。其次PFOS以及PFOS-K对半滑舌鳎肝脏中AR、ERα、ERβ、AHR与ARNT基因的表达量在不同浓度PFOS和PFOS-K胁迫下均有不同的显著性变化。其中AR,AHR,ARNT和ERβ基因的表达均呈现随污染物暴露时间延长先诱导后逐渐恢复对照组水平的趋势,并存在一定的时间效应和剂量效应关系。在15 d时所有AR与ARNT基因表达量均被抑制,但抑制程度不同。AHR基因表达量的变化趋势为先增加后下降,PFOS-K暴露下0.1μg·L浓度在7 d时AHR相对表达量达到最高是空白组的23.69倍。而PFOS暴露下无显著差异。而ERα基因表达水平在胁迫后期才受到显著变化,污染物比较下PFOS-K比PFOS在基因表达量上更显著。以上结果表明ERα,ERβ,AR,ARNT在半滑舌鳎的肝脏组织中均有表达,说明激素等受体基因可能参与了对其的毒性机制,PFOS和PFOS-K对半滑舌鳎肝脏激素受体等相关基因表达量的不同程度影响。最后利用整合生物响应指数对PFOS和PFOS-K的毒性效应进行综合评价,结果表明PFOS和PFOS-K胁迫下半滑舌鳎肝脏和鳃的酶活指标在相同剂量组中,同一暴露时间内鳃IBR值大于肝脏组织,鳃组织IBR星状图区域面积比肝脏组织大。同时PFOS和PFOS-K对半滑舌鳎肝脏相关基因整合生物标志物的影响中发现在相同时间点PFOS和PFOS-K相比,PFOS-K的IBR星状区域面积较大。这些结果为确定敏感生物标志物指标提供了参考价值,本实验通过测定抗氧化防御系统各指标以及激素受体通路相关基因表达的变化特征,不仅揭示了全氟辛烷磺酸及其钾盐对半滑舌鳎的毒性效应,还为评估PFCs的海洋环境风险提供了科学依据。

关键词：全氟化合物全氟辛烷磺酸全氟辛烷磺酸钾整合生物标志物细胞毒性

基于治理能力现代化的W市疫情防控政策跟踪审计研究

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基于治理能力现代化的W市疫情防控政策跟踪审计研究

作者：郝若冰哈尔滨商业大学

学位级别：硕士

2019年末新冠疫情初现,无论是从疫情传播的速度、感染的范围还是就防控的难度上看,新冠肺炎都是自1949年新中国成立至今最为严重的一次疫情。为确保将党中央有关疫情防控的重要指示落实,审计署针对疫情期间的财政资金以及捐赠物品的监... 详细信息

2019年末新冠疫情初现,无论是从疫情传播的速度、感染的范围还是就防控的难度上看,新冠肺炎都是自1949年新中国成立至今最为严重的一次疫情。为确保将党中央有关疫情防控的重要指示落实,审计署针对疫情期间的财政资金以及捐赠物品的监督专门印发了通知,对审计工作进行全面、系统部署,充分发挥监督的有效作用。政策实施是国家治理的重要方式,与国家进步发展息息相关。近年来,中国也陆续颁布实施了大量关乎宏观经济层面的政策,无论是中央还是地方各级政府,政策跟踪审计都备受重视。十九届五中全会强调:“积极推进审计现代化改革,要加快构建现代化体系,使之能够与国家治理体系和治理能力现代化相匹配。”鉴于此,在治理能力现代化背景下,以新冠疫情防控为案例,对政策跟踪审计问题进行研究,使审计发挥其常态化“经济体检”作用。本文以善治理论、新公共管理理论、信息经济学理论等作为全文的研究支撑,借鉴国内外政策跟踪审计的理论成果和实践化经验,首先对政策跟踪审计与治理能力现代化之间的作用机制进行系统分析,阐述两者间双向互动关系。其次,结合W市疫情防控政策跟踪审计案例,强调审计机关要结合疫情防控现况精准、系统、科学、高效地开展政策跟踪审计工作,对有倾向性苗头的问题及时制止。最后,立足于政策跟踪审计的监督职能,讨论如何更好的让其服务于治理能力现代化,以确保审计工作持续顺利开展,使治理能力现代化在整个政策跟踪审计中提供指导作用。

关键词：治理能力现代化疫情防控政策政策跟踪审计

醋栗花色苷降低神经酰胺减轻小鼠胰岛素抵抗的作用研究

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醋栗花色苷降低神经酰胺减轻小鼠胰岛素抵抗的作用研究

作者：郝若冰辽宁大学

学位级别：硕士

肥胖是全球第五大死亡风险因素,发生发展的过程极其复杂,它是许多心血管疾病的前期体现。肥胖产生的炎症反应、产生的游离脂肪酸、脂肪组织中特异性表达的蛋白如PPARγ等、脂肪细胞因子ADPN、TNF-α等以及鞘磷脂类物质如神经酰胺等都与... 详细信息

肥胖是全球第五大死亡风险因素,发生发展的过程极其复杂,它是许多心血管疾病的前期体现。肥胖产生的炎症反应、产生的游离脂肪酸、脂肪组织中特异性表达的蛋白如PPARγ等、脂肪细胞因子ADPN、TNF-α等以及鞘磷脂类物质如神经酰胺等都与肥胖导致的胰岛素抵抗（Insulin Resistance,IR）关系密切。目前市售的减肥产品或药品副作用大、治疗效果有限,因此寻找效果好的天然无毒产物治疗肥胖并探究其可能的作用途径和机制尤为重要。刺紫红醋栗（Gooseberry）,别名灯笼果,其果实含有丰富的天然营养成分如氨基酸、维生素以及多酚黄酮类物质等,刺紫红醋栗花色苷（Gooseberry anthocyanins,GA）含量丰富。研究表明GA具有显著的抗氧化、抗炎以及抗小鼠肝纤维化效果。本研究采用高脂乳剂灌胃诱导建立高脂小鼠模型,探究GA通过抑制神经酰胺合成缓解高脂产生的IR的作用和机制。利用高脂乳剂灌胃诱导建立高脂小鼠模型,考察GA对高脂小鼠IR的干预作用。通过进行小鼠体重、内脏脂肪、肝脏指数水平、血脂指标TC、TG、HDL-C、LDL-C的水平以及组织切片染色考察GA对高脂小鼠血脂以及肝脏组织形态学的影响,明确GA对高脂小鼠的降脂作用;通过检测氧化应激指标SOD以及GSH-Px的水平,明确GA对高脂小鼠氧化应激的影响;通过小鼠糖耐量实验,明确GA对高脂小鼠葡萄糖耐量的影响;进行血清胰岛素和ADPN水平检测,以及进行ISI和HOMA-IR指标测定,明确GA对高脂小鼠的改善IR增强胰岛素敏感性的作用。以上实验证明高脂小鼠模型建立成功,并产生IR。实验结果显示,GA显著减缓了高脂小鼠的体重增长,体重由53.73±2.24 g降至了49.02±2.23 g,降低高脂小鼠的内脏脂肪、肝脏指数;减轻小鼠TC、TG、LDL-C的水平以及提高HDL-C的水平;缓解小鼠的氧化应激,SOD和GSH-Px活力由69.49 U/m L和96.74 U/m L升至105.86U/m L和117.07 U/m L;改善小鼠的葡萄糖耐受程度;ISI水平由-5.15升至-4.54,HOMA-IR水平由6.57降至5.75,改善小鼠胰岛素敏感性以及胰岛素抗性。动物实验结果表明GA可以在一定程度上缓解高脂小鼠的IR现象,且呈剂量相关性。采用Real-time PCR技术检测GA对高脂小鼠IL-6、TNF-αm RNA表达的影响;利用Western Blot方法检测S1P/Cer信号通路在高脂小鼠产生IR现象下的表达情况。Real-time PCR检测结果表明,GA显著降低了炎症因子IL-6,TNF-α的m RNA表达水平。Western Blot结果显示,GA在S1P/Cer信号通路中显著抑制Cer S6的活化,抑制神经酰胺下游蛋白PKCδ的表达,促进了Akt的活化以及磷酸化水平;显著提高了Sph K2蛋白的表达水平,抑制了PPARγ及其下游的CD36蛋白的表达水平。综上所述,GA能够有效缓解高脂小鼠的血脂异常,减轻炎症反应,增强高脂小鼠的胰岛素敏感性以及缓解小鼠的IR,通过S1P/Cer信号通路达到改善IR的作用。本研究为今后研究中GA作为天然产物降脂以及预防和治疗IR提供科学理论依据。

关键词：醋栗花青素胰岛素抵抗神经酰胺代谢高脂模型

aurT基因对金褐霉素生物合成的调控及其作用机制

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食品科学技术学报 2021年第1期39卷 70-77页

作者：魏杰于文辰郝若冰杨静许德鑫高军辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036 辽宁省林业科学研究院辽宁沈阳110032

通过分子克隆技术获得了金褐霉素生物合成基因簇中新基因aurT(Genbank登录号:MH247109.1),并利用高效表达、基因敲除、高效液相色谱(HPLC)和生物信息学技术分析了aurT基因功能及其对金褐霉素生物合成的调控作用,以期为提高金褐霉素发酵... 详细信息

通过分子克隆技术获得了金褐霉素生物合成基因簇中新基因aurT(Genbank登录号:MH247109.1),并利用高效表达、基因敲除、高效液相色谱(HPLC)和生物信息学技术分析了aurT基因功能及其对金褐霉素生物合成的调控作用,以期为提高金褐霉素发酵产量奠定理论基础。研究结果表明:AurT属于RhtB家族调节因子,是金褐霉素生物合成的氨基酸转运蛋白;aurT基因高效表达菌株(♂aurT)的金褐霉素产量增加了1.3倍;aurT基因敲除菌株(ΔaurT)的金褐霉素产量减少了65%,但金褐霉素的产量没有完全被抑制,说明aurT对金褐霉素生物合成的调控过程不同于途径特异性调控基因aurJ3M。比较了4种不同的PI因子结构类似物(1,2-丙二醇、丙三醇、乙二醇、三乙醇胺)对金褐霉素合成的调控作用,结果表明:0.4 mL的丙三醇对金褐霉素生物合成的调节效果最佳;发酵时间达到96 h时,外源添加丙三醇后,ΔaurT菌株的金褐霉素产量为784μg/mL,而未添加的产量为244μg/mL;进一步通过R T-PCR反应验证在野生型菌株培养中添加丙三醇后,增加了aurT基因的转录水平和表达,说明PI因子结构类似物与基因簇中的特异性受体结合并启动了相关基因的表达,aurT是通过介导PI因子的胞外运输来参与金褐霉素的生物合成与调控的。

关键词：金褐霉素 aurT基因高效表达基因敲除 PI因子

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从管理入手强化服务建立现代化企业制度

内蒙古财会 1995年第7期 9-10页

作者：郝若冰乌盟财政处

今年改革的重点是国有企业．改革的方向是建立现代企业制度。建立现代企业制度，首先必须弄清什么是现代企业制度，党的十四届三中全会通过的《中共中央关于建立社会主义市场经济体制若干问题的决定》．对现代企业制度的描述是“产权清... 详细信息

今年改革的重点是国有企业．改革的方向是建立现代企业制度。建立现代企业制度，首先必须弄清什么是现代企业制度，党的十四届三中全会通过的《中共中央关于建立社会主义市场经济体制若干问题的决定》．对现代企业制度的描述是“产权清晰，权责明确、政企分开、管理科学的企业制度”．现代企业制度是相对于传统企业制度而言的．根据中央《决定》精神．并结合对传统，止业制度的比较分析，笔者认为，现代企业制度，是指适应社会化大生产和社会主义市场经挤要求．财产关系明确，独立自主经营．并以众多出资者投资形成的全部法人财产对债务承担有限责任的企业体制。现代企业制度是一种企业体制．即微观经济体制，是一定生产关系的表现形式。从生产力方面看．它是适应社会化大生产要求的；从生产关系看．它是适应社会主义市场经济客观要求的。

关键词：现代企业制度企业体制现代化企业制度社会化大生产生产关系《中共中央关于建立社会主义市场经济体制若干问题的决定》产权清晰债务承担财产关系客观要求

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从乌盟的实际论加速发展贫困旗县经济

内蒙古财会 1995年第12期 37-38页

作者：郝若冰内蒙古乌盟财政处

乌兰察布盟是内蒙古自治区的一个经济不发达的少数民族贫困地区，总面积8．4万平方公里．330万人口．其中农业人口占84%，耕地面积120．5万公项．年降水量350%毫米左右．是一个农业大盟，也是一个财政穷盟，所辖15个旗县市(含和林县)、... 详细信息

乌兰察布盟是内蒙古自治区的一个经济不发达的少数民族贫困地区，总面积8．4万平方公里．330万人口．其中农业人口占84%，耕地面积120．5万公项．年降水量350%毫米左右．是一个农业大盟，也是一个财政穷盟，所辖15个旗县市(含和林县)、有12个被列为全国、全区的贫困旗县，14个财政入不敷出靠国家补贴过日子。1994年(以后除特殊说叫外．均为1994年数据)全盟11个旗县市财政发主赤字达5017万元。

关键词：旗县财政少数民族贫困地区加速发展经济和林县不发达实际平方面积

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浅谈分税制体制下的地方财源建设

内蒙古财会 1994年第4期 5-6页

作者：郝若冰乌盟财政处

新出台的财税体制改革对地方财政的发展充实了新的内容，带来了新的机遇，同时也为地方财源建设提出了新的课题。地方政府和财政部门如何抓住机遇，转变观念，及时调整财源结构，强化地方财源意识，培植有利于地方财政发展的地方财源，... 详细信息

新出台的财税体制改革对地方财政的发展充实了新的内容，带来了新的机遇，同时也为地方财源建设提出了新的课题。地方政府和财政部门如何抓住机遇，转变观念，及时调整财源结构，强化地方财源意识，培植有利于地方财政发展的地方财源，这对于贫困落后、地方财政拮据的乌盟地区来说，显得尤为重要。

关键词：地方财政财源建设税收制度中国

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合理划分事权和财权建立规范的转移支付制度

内蒙古财会 1994年第8期 19-20页

作者：郝若冰乌盟财政处

乌盟是一个典型的老少边穷地区，各项经济指标和综合经济实力与先进地区相比，差距越拉越大。近几年虽然收入增长速度从比例上增的较快，每年都在两位数，但绝对额却很低，平均年增收只有1000-2000万元，而增支却高达8000万元左右，致... 详细信息

乌盟是一个典型的老少边穷地区，各项经济指标和综合经济实力与先进地区相比，差距越拉越大。近几年虽然收入增长速度从比例上增的较快，每年都在两位数，但绝对额却很低，平均年增收只有1000-2000万元，而增支却高达8000万元左右，致使收支供需矛盾逐年加大。1993年全盟财政收入虽达到26.98万元，比上年增长24.2％，但财政困难继续加大，巨额增支，超过了财政的承受能力，全盟增支约1亿元，特别是县乡财政更困难，盟本级及13个旗县出现赤字，赤字额达4371万元。

关键词：事权财权转移支付制度财政内蒙古

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自加压力又好又快推进元坝发展 001