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基于NF-κB/miR-494信号调控MUC5AC和CFTR研究小青龙汤与清气化痰丸改善病理性气道黏液的机制

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中华危重病急救医学 2022年第8期34卷 831-836页

作者：彭梦薇刘燕陈玉龙张艳桑亚洲郝羚伦吴耀松河南中医药大学中医药科学研究院河南省中医方证信号传导重点实验室郑州450046

目的观察小青龙汤和清气化痰丸对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的人肺癌细胞H292黏液高分泌模型及核转录因子-κB/微小RNA-494(NF-κB/miR-494)信号通路相关分子的影响,探讨两者改善病理性气道黏液的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色... 详细信息

目的观察小青龙汤和清气化痰丸对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的人肺癌细胞H292黏液高分泌模型及核转录因子-κB/微小RNA-494(NF-κB/miR-494)信号通路相关分子的影响,探讨两者改善病理性气道黏液的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测不同浓度小青龙汤、清气化痰丸对IL-1β诱导的H292细胞活性的影响并选择合适浓度进行后续实验。将细胞随机分为空白组、模型组(5μg/L IL-1β)、NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)组(5μg/L IL-1β+100μmol/L PDTC)、小青龙汤组(5μg/L IL-1β+1000 mg/L小青龙汤)和清气化痰丸组(5μg/L IL-1β+1000 mg/L清气化痰丸);采用5μg/L IL-1β诱导H292细胞24 h建立气道上皮黏液高分泌细胞模型。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞分泌黏蛋白5AC(MUC5AC)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-8水平及细胞内MUC5AC和囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)蛋白含量;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测MUC5AC mRNA、CFTR mRNA和miR-494的表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测NF-κB信号通路关键蛋白p65和NF-κB抑制因子(IκB)的蛋白表达。结果选择浓度为1000 mg/L的小青龙汤和清气化痰丸进行后续实验。与空白组比较,模型组细胞分泌MUC5AC、TNF-α和IL-8水平显著升高,细胞内MUC5AC蛋白含量和mRNA表达也显著升高,细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达均显著降低,且细胞内p65蛋白表达显著上调,IκB蛋白表达显著下调,miR-494表达显著升高。与模型组相比,PDTC组、小青龙汤组和清气化痰丸组细胞分泌MUC5AC、TNF-α、IL-8水平显著降低,细胞内MUC5AC蛋白含量和mRNA表达也显著降低,且细胞内p65蛋白表达均显著下调,IκB蛋白表达均显著上调,miR-494表达均显著降低;PDTC组和清气化痰丸组细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达均显著升高。与PDTC组相比,小青龙汤组细胞分泌TNF-α水平显著升高(ng/L:22.77±3.14比11.09±3.37,P<0.05),细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达、IκB蛋白表达均显著降低〔CFTR蛋白(ng/L):97.38±6.62比227.04±19.48,CFTR mRNA(2^(-ΔΔCt)):0.99±0.08比1.21±0.08,IκB/β-actin:1.69±0.11比2.00±0.18,均P<0.05〕;清气化痰丸组细胞分泌TNF-α水平显著升高(ng/L:19.08±3.71比11.09±3.37,P<0.05)。与小青龙汤组相比,清气化痰丸组细胞内CFTR蛋白含量和mRNA表达、IκB蛋白表达均显著升高〔CFTR蛋白(ng/L):235.01±22.71比97.38±6.62,CFTR mRNA(2^(-ΔΔCt)):1.32±0.15比0.99±0.08,IκB/β-actin:1.94±0.16比1.69±0.11,均P<0.05〕。结论小青龙汤改善气道上皮黏液高分泌炎症的机制可能与抑制NF-κB/miR-494炎症信号介导的MUC5AC高分泌有关,而清气化痰丸则可能与抑制NF-κB/miR-494炎症信号介导的MUC5AC高分泌及CFTR功能障碍有关,因此,二者治疗病理性气道黏液的机制差异主要在对CFTR基因和蛋白的调控上。

关键词：小青龙汤清气化痰丸黏蛋白5AC 囊性纤维化跨膜转导调节因子核转录因子-κB/微小RNA-494信号通路

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针刺治疗肿瘤并发症的临床研究进展

中华中医药学刊 2023年

作者：郝羚伦彭梦薇张艳陈玉龙刘燕吴耀松河南中医药大学中医药科学院河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室

针刺作为传统的中医疗法，作用于不同腧穴具有疏经通络、益气活血的功效。中医认为阳虚、气滞、血阻是肿瘤并发症的主要发病机制，近年来针刺广泛用于治疗肿瘤及其并发症，且效果显著。基于此，文章以“恶性肿瘤、针刺治疗、临床观察、... 详细信息

针刺作为传统的中医疗法，作用于不同腧穴具有疏经通络、益气活血的功效。中医认为阳虚、气滞、血阻是肿瘤并发症的主要发病机制，近年来针刺广泛用于治疗肿瘤及其并发症，且效果显著。基于此，文章以“恶性肿瘤、针刺治疗、临床观察、临床研究”为主题对2001～2021年CNKI数据库进行检索，共计检索文献357篇，归纳、整理相关文献37篇，主要从肿瘤癌性疼痛、胃肠道反应、骨髓抑制、癌性疲乏、抑郁、睡眠障碍、周围神经病变等方面进行概述，旨在探析针刺治疗肿瘤并发症的可行性，为肿瘤及其并发症的临床治疗和研究提供依据。

关键词：肿瘤针刺胃肠道反应癌痛骨髓抑制

肿瘤恶病质肌管萎缩细胞模型构建及六君子汤对其改善机制研究

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时珍国医国药 2023年第10期34卷 2538-2541页

作者：郝羚伦张艳彭梦薇桑亚洲陈玉龙刘燕吴耀松河南中医药大学中医药科学院河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室河南郑州450046 天津中医药大学天津301617 华中科技大学湖北武汉430074

目的建立肿瘤恶病质肌管萎缩细胞模型,探讨六君子汤在体外对该模型的改善作用,为阐明六君子汤抗肿瘤恶病质肌肉萎缩的分子机制提供依据。方法诱导成肌细胞C2C12分化,倒置显微镜观察分化后肌管长度;小鼠肺癌细胞(Lewis细胞)与C2C12细... 详细信息

目的建立肿瘤恶病质肌管萎缩细胞模型,探讨六君子汤在体外对该模型的改善作用,为阐明六君子汤抗肿瘤恶病质肌肉萎缩的分子机制提供依据。方法诱导成肌细胞C2C12分化,倒置显微镜观察分化后肌管长度;小鼠肺癌细胞(Lewis细胞)与C2C12细胞共培养,免疫荧光法检测C2C12细胞中肌球蛋白重链(myosin heavy chain, MyHC)的荧光表达;MTT比色法检测六君子汤、叉头转录因子-1(Forkhead Box O1,FoxO1)抑制剂对两种细胞增殖影响;将共培养的C2C12细胞与Lewis细胞分为空白组、模型组、六君子汤组、抑制剂组(FoxO1抑制剂)、联合用药组(六君子汤联合FoxO1抑制剂),酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent Assay, ELISA)检测各组上清转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)的含量;倒置显微镜观测各组C2C12细胞肌管变化;蛋白免疫印迹法(Western blot, WB)检测各组C2C12细胞MyHC蛋白表达;透射电子显微镜观察各组C2C12细胞自噬体数量。结果实验发现,C2C12细胞于分化48h肌管横径最长;与空白组比,模型组C2C12细胞MyHC的荧光表达明显降低(P<0.05),药物浓度以六君子汤100g/mL、FoxO1抑制剂1μmol/L为宜;与空白组比,模型组上清TGF-β1含量显著上升(P<0.05),C2C12细胞肌管长度减少(P<0.05),MyHC蛋白表达降低(P<0.05),自噬体数量增多(P<0.05);与模型组比,六君子汤组、抑制剂组、联合用药组TGF-β1含量下降(P<0.05),C2C12细胞肌管长度增加(P<0.05),MyHC蛋白表达增高(P<0.05),自噬体数量减少(P<0.05);与六君子汤组比,抑制剂组TGF-β1含量升高(P<0.05)。结论诱导分化的成肌细胞C2C12与肺癌细胞Lewis共培养可构建肿瘤恶病质肌管萎缩模型,健脾和胃法的代表方六君子汤可以显著降低肌管萎缩模型上清TGF-β1含量、提高MyHC蛋白表达、减少自噬体数量,改善因肿瘤细胞环境下引起的肌管萎缩。

关键词：肿瘤恶病质肌管萎缩模型构建六君子汤

储能科学与技术不同负极材料对LiFePO高功率储能器件循环性能的影响

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储能科学与技术 2024年

作者：张玉曼范羚羚杨重阳上海奥威科技开发有限公司国家车用超级电容器系统工程技术研究中心

磷酸铁锂(LiFePO4，LFP)以低成本、高安全性、长循环寿命等优点在近些年来备受关注，然而市场上常见的LFP储能器件在0.1-2 C倍率的循环寿命为2000次左右。为了进一步开发高功率、长寿命的LFP储能器件，本文设计了容量为9Ah的不同负极材... 详细信息

磷酸铁锂(LiFePO4，LFP)以低成本、高安全性、长循环寿命等优点在近些年来备受关注，然而市场上常见的LFP储能器件在0.1-2 C倍率的循环寿命为2000次左右。为了进一步开发高功率、长寿命的LFP储能器件，本文设计了容量为9Ah的不同负极材料（硬碳/软碳/石墨）软包储能器件。对4 C大倍率循环性能进行探究，发现4000次循环后，硬碳和软碳用作负极的储能器件的容量保持率分别为83.0%、78.9%，优于石墨（51.6%）。通过XRD、EIS、容量增量法和电压微分法等手段进行分析，发现接触内阻和SEI膜内阻增加，以及结构变化造成负极中锂离子的消耗是容量衰减的主要原因。进一步探究石墨用作负极时循环寿命差的原因，发现石墨用作负极时库伦效率较低，工作温度较高，dQ/dV峰值在循环过程中发生更大的位移，峰强的降幅也较大。由于石墨的层间距为0.335 nm，小于软碳（0.360 nm）和硬碳（0.395 nm），在反复脱嵌锂过程中石墨更易发生结构变化，造成体积膨胀，因此循环后接触电阻和SEI膜电阻增长幅度较高，锂离子扩散动力学也更差。与石墨相比，硬碳和软碳用作大倍率LFP储能器件的负极活性物质时具有更长的循环寿命。

关键词：磷酸铁锂硬碳软碳石墨循环寿命

蛋白合成与降解信号参与肿瘤恶病质肌肉萎缩及中医药调节机制研究进展

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中国比较医学杂志 2023年第7期33卷 123-129页

作者：彭梦薇刘燕张艳郝羚伦陈玉龙吴耀松河南中医药大学中医药科学研究院河南省中医方证信号传导重点实验室郑州450046

恶病质是一种涉及多个器官的多因素代谢障碍综合征,是恶性肿瘤患者常见的致死因素。临床最主要的症状为肌肉萎缩和丢失,其机制与蛋白质过度降解及合成障碍相关。近年来中医药凭借副作用少以及多靶点、多通路干预疾病等显著优势,在防治... 详细信息

恶病质是一种涉及多个器官的多因素代谢障碍综合征,是恶性肿瘤患者常见的致死因素。临床最主要的症状为肌肉萎缩和丢失,其机制与蛋白质过度降解及合成障碍相关。近年来中医药凭借副作用少以及多靶点、多通路干预疾病等显著优势,在防治肿瘤恶病质肌肉萎缩的方面具有独特价值。本文主要是从不同信号介导的肌肉蛋白降解及合成对肿瘤恶病质肌肉萎缩的影响及中医药的调节作用展开论述,以期为中医药治疗肿瘤恶病质肌肉萎缩的临床应用和研究提供一定的参考。

关键词：肿瘤恶病质肌肉萎缩蛋白质合成蛋白质降解调控信号中医药防治

水稻HSP20家族的群体基因组差异及功能单倍型分析

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分子植物育种 2024年第14期 4534-4548页

作者：梁伦平冯庭马赛郝芷圻黎珉安徽农业大学农学院

HSP20家族是植物中非常丰富的一类小热休克蛋白(sHSPs)，它们能够与细胞内的各个组分相互作用，从而维持细胞的稳定性。相较于大分子热激蛋白家族(如HSP70和HSP90),HSP20家族的研究相对较少，尤其是在水稻(Oryza sativa L.)群体基因组... 详细信息

HSP20家族是植物中非常丰富的一类小热休克蛋白(sHSPs)，它们能够与细胞内的各个组分相互作用，从而维持细胞的稳定性。相较于大分子热激蛋白家族(如HSP70和HSP90),HSP20家族的研究相对较少，尤其是在水稻(Oryza sativa L.)群体基因组中的分析和功能单倍型研究更不多见。本研究对HSP20基因家族在水稻中的序列组成及基因结构进行了系统分析。在籼稻(O. sativa Xian/Indica group)基因组中鉴定到41个HSP20基因，粳稻(O. sativa Geng/Japonica group)基因组中鉴定出33个HSP20基因，其中有27个基因在籼粳基因组中都被鉴定到。这些基因共分为8个亚家族，分布在第1、第2、第3和第10号染色体上。通过MEME (Multiple em for motif elicitation)和基因结构分析，发现除了个别成员存在差异外，大部分家族成员序列都较为保守。利用3 000份水稻泛基因组数据库对HSP20家族进行存在/缺失变异(presence/absence variations, PAV)分析，发现33个HSP20基因中有26个核心基因(在所有水稻亚群中都存在)和7个分散式基因(特异分布于某些亚群)。分散式基因中包含1个粳稻特有基因和2个籼稻特有基因，推测这3个基因可能与籼/粳分化有关。利用水稻功能基因单倍型数据库，结合抽穗期和株高表型对6个在水稻亚群中分布具有特异性的基因进行了单倍型分析。结果显示，这6个基因一共关联到了20个高频单倍型，其中对株高和抽穗期效应显著的各有6个，对两者均显著的单倍型有2个。此外，外源激素响应分析表明，Os01g0136100和Os02g0782500基因的表达受外源脱落酸显著诱导，在根部中表达上调，而在茎段中表达下调。本研究为后期HSP家族基因的功能分析及其功能单倍型的发掘提供了重要的参考信息。

关键词：水稻 HSP20 基因结构群体差异单倍型

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18例蓬佩病患者酶替代治疗效果分析

中华神经科杂志 2024年第5期57卷 443-450页

作者：廉羚利婧姚晓黎中山大学附属第一医院神经科广东省重大神经疾病诊治研究重点实验室国家临床重点专科和国家重点学科广州510080

目的分析蓬佩病患者酶替代治疗(ERT)的效果。方法回顾性收集、分析2020年10月至2023年5月就诊于中山大学附属第一医院的18例婴儿型及晚发型蓬佩病患者的临床、实验室检查、酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)活性检测、GAA基因、ERT资料及随访情况... 详细信息

目的分析蓬佩病患者酶替代治疗(ERT)的效果。方法回顾性收集、分析2020年10月至2023年5月就诊于中山大学附属第一医院的18例婴儿型及晚发型蓬佩病患者的临床、实验室检查、酸性α-葡萄糖苷酶(GAA)活性检测、GAA基因、ERT资料及随访情况。结果18例蓬佩病患者中男性9例,女性9例;婴儿型4例,儿童晚发型5例,成人晚发型9例;发病年龄4个月至43岁;接受ERT最少1次、最多61次,出现输注不良反应仅1次。经过规范ERT,4例婴儿型患儿中,2例运动及呼吸功能稳定,1例脱机困难,1例死亡。儿童晚发型及成人晚发型患者接受ERT后多数四肢肌力难以逆转,肌酸激酶逐渐下降或保持稳定,但主观症状、运动耐力、呼吸功能方面有明显改善。ERT在早期效果最为明显,治疗后1~2年内患者病情可保持稳定。结论ERT安全有效,有助于延缓疾病进展,改善患者生活质量,早期规范治疗无论对婴儿型还是晚发型患者均有益。

关键词：糖原贮积病Ⅱ型酶替代治疗婴儿型晚发型随访研究

mA修饰在骨骼肌生成中的作用及骨骼肌损伤再生的中医疗法

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生命的化学 2023年

作者：郝羚伦彭梦薇陈玉龙刘燕吴耀松河南中医药大学中医药科学院河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室

骨骼肌是人体运动系统的主要器官，骨骼肌受损会降低生活质量、加重疾病恶化，探究骨骼肌再生和修复对恢复和维持肌肉功能至关重要。N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰是真核生物中重要的mRNA甲基化修饰，其在调控骨骼肌生成中... 详细信息

骨骼肌是人体运动系统的主要器官，骨骼肌受损会降低生活质量、加重疾病恶化，探究骨骼肌再生和修复对恢复和维持肌肉功能至关重要。N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰是真核生物中重要的mRNA甲基化修饰，其在调控骨骼肌生成中的作用与中医药健脾补肾法滋养肌肉生长相契合。本文总结了m6A甲基化修饰相关同源因子甲基转移酶、去甲基化酶和识别蛋白在骨骼肌生成中的作用，并探讨了其与中医理论的相关性，以及中医药疗法在骨骼肌生成中的应用，为深入研究骨骼肌修复与再生的相关分子机制及中医药介导m6A修饰调控骨骼肌生成提供理论依据和研究思路。

关键词： m A甲基化甲基转移酶去甲基化酶识别蛋白骨骼肌成肌细胞

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法国工程师培养理念及我国探索实践研究

中国大学教学 2024年第1期 115-120页

作者：王莉黄光团张羚羚华东理工大学卓越工程学院

法国具有特色的工程师教育为其经济产业快速发展提供了重要的人才和技术支撑,对我国完善卓越工程人才培养体系具有借鉴意义。本文系统阐述了法国工程师教育的培养理念,探讨了法国工程师教育在本土化应用过程中面临的挑战,最后结合我国... 详细信息

法国具有特色的工程师教育为其经济产业快速发展提供了重要的人才和技术支撑,对我国完善卓越工程人才培养体系具有借鉴意义。本文系统阐述了法国工程师教育的培养理念,探讨了法国工程师教育在本土化应用过程中面临的挑战,最后结合我国高等工程教育的实际情况和发展趋势,提出了法国工程师教育模式在我国实践应用的优化路径。

关键词：法国工程师教育卓越工程人才人才培养体系