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扭角羚肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定

中国畜牧兽医 2015年第1期42卷 203-208页

作者：郝中香廖红刘丹郭玲杨绍林文彩芳张曼丽罗露郗立新杨艳谌利民颜其贵四川农业大学动物医学院雅安625014 唐家河国家级自然保护区广元628100 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室雅安625014

本试验旨在报告四川省野生扭角羚自然生存过程中致病性细菌的检测及生物学特征。试验对发病死亡扭角羚病变组织进行细菌学检查及分离,对分别从肝脏、脾脏和肺脏分离得到的4株优势菌进行形态特征、生化特性和16SrDNA分子鉴定,判定为肺炎... 详细信息

本试验旨在报告四川省野生扭角羚自然生存过程中致病性细菌的检测及生物学特征。试验对发病死亡扭角羚病变组织进行细菌学检查及分离,对分别从肝脏、脾脏和肺脏分离得到的4株优势菌进行形态特征、生化特性和16SrDNA分子鉴定,判定为肺炎克雷伯氏菌。这4株菌对供试小白鼠均有致病性。测其LD50,分别为2.9×107、2.9×107、4.5×107和1.1×108 CFU/只。4株分离菌对供试的先锋霉素等敏感,对阿米卡星等中度敏感,对红霉素等耐药。推测这4株肺炎克雷伯氏菌是导致扭角羚死亡的主要病原菌。

关键词：扭角羚肺炎克雷伯氏菌分离鉴定 LD50

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地方性鼻内腺瘤中DNMTs启动子甲基化状态及转录表达的研究

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中国预防兽医学报 2015年第5期37卷 353-356页

作者：权自芳叶泥文彩芳郝中香廖红张曼丽颜其贵四川农业大学动物生物技术中心四川雅安625014 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014

为研究山羊地方性鼻内腺瘤中DNA甲基转移酶（DNMTs）启动子区甲基化状态及其对转录表达的影响,本研究采用甲基化特异性PCR和荧光定量RT-PCR法检测20例正常鼻内腺组织和24例鼻内腺瘤组织中DNMTs基因启动子甲基化状态及其转录表达水平,分... 详细信息

为研究山羊地方性鼻内腺瘤中DNA甲基转移酶（DNMTs）启动子区甲基化状态及其对转录表达的影响,本研究采用甲基化特异性PCR和荧光定量RT-PCR法检测20例正常鼻内腺组织和24例鼻内腺瘤组织中DNMTs基因启动子甲基化状态及其转录表达水平,分析DNMTs基因甲基化对转录表达的影响。结果显示,24例鼻内腺瘤组织中DNMT1和DNMT3b基因启动子甲基化阳性率分别为20.8%（5/24）和41.7%（10/24）,与正常鼻内腺组织（未检测到甲基化）均差异显著（p〈0.05）。20例正常鼻内腺组织中DNMT1和DNMT3b基因相对转录表达量分别为1（0.693~1.444）和0.382（0.503~1.840）;5例甲基化和19例非甲基化鼻内腺瘤组织中DNMT1相对转录表达量分别为1.56（0.678~1.474）和1.248（0.820~1.905）,两者差异不显著;10例甲基化和14例非甲基化鼻内腺瘤组织中DNMT3b相对转录表达量分别为1.165（0.646~1.548）和0.376（0.230~1.231）,两者差异显著（p〈0.05）。而DNMT3a在两组间无差异。以上结果表明,鼻内腺瘤组织中DNMT3b基因甲基化与转录表达相关,推测其对鼻内腺瘤具有促进肿瘤相关基因甲基化的作用,导致肿瘤相关基因失活或激活,最终导致肿瘤发生。

关键词：地方性鼻内腺瘤 DNA甲基转移酶启动子甲基化转录表达

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不同生境大熊猫源肠球菌耐药性分析

四川动物 2015年第5期34卷 641-649页

作者：郝中香廖红刘丹赵珊郗立新颜其贵韩国全张和民李德生王承东侯蓉齐敦武四川农业大学动物医学院四川雅安625014 四川农业大学食品学院四川雅安625014 中国保护大熊猫研究中心四川雅安625000 成都大熊猫繁育研究基地成都610081

目的为了了解大熊猫源肠球菌耐药性发展和流行现状,为大熊猫源细菌耐药性监测体系的建立和大熊猫细菌性疾病的控制奠定基础,同时为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法本试验采用临床实验室标准化协会推荐的纸片法,对从不同生境来源的25... 详细信息

目的为了了解大熊猫源肠球菌耐药性发展和流行现状,为大熊猫源细菌耐药性监测体系的建立和大熊猫细菌性疾病的控制奠定基础,同时为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法本试验采用临床实验室标准化协会推荐的纸片法,对从不同生境来源的254份大熊猫粪便样品分离鉴定出的11种大熊猫源肠球菌共计381株进行21种抗生素的药物敏感试验。结果在381株大熊猫源肠球菌中,对青霉素、先锋霉素V、链霉素耐药率均在10%以上,其余抗生素的耐药率均低于10%,未发现有对恩诺沙星、复方新诺明、万古霉素、庆大霉素、替考拉宁耐药的菌株;不同种类的大熊猫源肠球菌对同一种抗生素的耐药率不同;同一种大熊猫源肠球菌对不同抗生素的耐药率也有差异;不同生存方式来源的大熊猫源肠球菌耐药情况各有不同,但耐药最严重的均为粪肠球菌;多重耐药主要以1～3重耐药为主。结论大熊猫源肠球菌对大部分抗生素产生了耐药性,整体和多重耐药情况较轻微,耐药性差异主要体现在肠球菌的种类上,大熊猫的生存环境和方式等对其影响相对较小,尤其是圈养大熊猫、野化大熊猫和野生大熊猫之间只有很细微的差别,可以从侧面反映出目前给予圈养大熊猫使用的抗菌药物较为科学合理,提示在治疗肠球菌感染时,应根据分离株的耐药特点和药敏试验结果合理选用或及时更换抗生素,以减少耐药菌株的产生和耐药基因的传播。

关键词：不同生境大熊猫肠球菌耐药性

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猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析

养猪 2014年第6期 118-120页

作者：文彩芳郗立新罗露张曼丽刘丹郝中香颜其贵四川农业大学动物医学院四川雅安625014 四川农业大学动物医学院生物技术中心四川雅安625014

为有效监测四川巴中某猪场病死仔猪大肠杆菌的耐药性和致病性,对从该猪场病死仔猪的内脏和组织中分离得到的13株大肠杆菌进行了药物敏感性检测和动物致病性试验。结果表明,菌株对12种药物均存在不同程度的耐药,其中,对强力霉素、氟苯尼... 详细信息

为有效监测四川巴中某猪场病死仔猪大肠杆菌的耐药性和致病性,对从该猪场病死仔猪的内脏和组织中分离得到的13株大肠杆菌进行了药物敏感性检测和动物致病性试验。结果表明,菌株对12种药物均存在不同程度的耐药,其中,对强力霉素、氟苯尼考和红霉素等7种药物的耐药率均达100%;对阿米卡星的敏感性最高,为69%。动物致病性结果显示,3号小鼠注射对应菌液16 h内死亡,剖检可见多个脏器组织均有出血;仔猪注射死亡小鼠分离纯化液后都没有死亡,但不同猪只出现不同的临床病理变化。该猪场大肠杆菌耐药性较为严峻,建议制定合理的用药方案实行交替用药,避免长期使用同一种药物。

关键词：大肠杆菌致病性耐药性

鲤疱疹病毒2型ORF5截短基因的克隆表达及免疫原性研究

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中国兽医科学 2016年第11期46卷 1394-1400页

作者：廖红林华郝中香佘容陈世界杨苗陈珍容薛昌华赵珊韩国全曹三杰颜其贵四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川出入境检验检疫局技术中心四川成都610041 通威股份有限责任公司检测中心四川成都610041 四川农业大学食品学院四川雅安625014

根据G en Bank上已登录的鲤疱疹病毒2型的O RF5基因序列(登录号:AFJ20457.1)设计1对引物,采用PCR扩增技术获得目的基因。序列分析表明,目的基因长357 bp,是一个完整的开放阅读框,编码119个氨基酸,理论分子质量为13 059.70 u,无信号肽,... 详细信息

根据G en Bank上已登录的鲤疱疹病毒2型的O RF5基因序列(登录号:AFJ20457.1)设计1对引物,采用PCR扩增技术获得目的基因。序列分析表明,目的基因长357 bp,是一个完整的开放阅读框,编码119个氨基酸,理论分子质量为13 059.70 u,无信号肽,无跨膜区,含有4个抗原表位。将扩增片段克隆至原核表达载体p ET-32a中,并将获得的重组质粒转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。对表达蛋白进行复性纯化后免疫小鼠和异育银鲫,SD S-PAGE和W estern-blot检测分析表明,重组蛋白的分子质量约为33 ku,与预期相符,表达形式为包涵体,该蛋白能够与抗H is标签的抗体发生特异性反应,也能识别病毒粒子上的ORF5蛋白。对免疫的异育银鲫进行攻毒,结果显示注射生理盐水组的银鲫保护率为0,注射15、25、50 g重组蛋白组的保护率分别为20%、30%、35%,表明免疫重组蛋白组的保护率高于对照组。本研究证实了表达的融合蛋白具有一定的免疫原性,丰富了鲤疱疹病毒2型ORF5基因及基因组的研究,为研发制备新型鲤疱疹病毒2型的疫苗和诊断试剂盒奠定了基础。

关键词：鲤疱疹病毒2型 ORF5截短基因序列分析克隆表达攻毒保护试验

养殖池塘底泥水体中适用于TaqMan荧光定量PCR的不同DNA提取方法

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浙江农业科学 2016年第11期57卷 1793-1796页

作者：佘容郝中香罗丹林华张凤枰廖红陈世界刘耀敏杨苗薛昌华赵珊颜其贵通威股份有限公司检测中心四川成都610041 四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川出入境检验检疫局技术中心四川成都610041

通过人工模拟即在养殖池塘底泥和水样中加入阳性组织处理样品,对人工模拟的底泥样品分别采用磁珠法、酚氯仿法以及吸附柱法进行核酸提取,结果发现底泥含量对磁珠法和吸附柱法病毒DNA提取效果影响较小,而对酚氯仿法病毒DNA提取效果影响较... 详细信息

通过人工模拟即在养殖池塘底泥和水样中加入阳性组织处理样品,对人工模拟的底泥样品分别采用磁珠法、酚氯仿法以及吸附柱法进行核酸提取,结果发现底泥含量对磁珠法和吸附柱法病毒DNA提取效果影响较小,而对酚氯仿法病毒DNA提取效果影响较大,且底泥含量较少提取相对较好。3种病毒DNA提取方法中采用混样提取核酸的效果均好于用上清液提取的效果。吸附柱法和磁珠法对病毒DNA提取效果较接近且明显好于酚氯仿法。通过对不同浓度的PEG6000进行浓缩后提取核酸,结果发现原始水样中未检测到Cy HV-2或其含量极低未达到检测限。PEG6000浓度为13%时,核酸浓缩提取效果最佳。本研究为实时监测养殖池塘中的底泥和水体中是否存在病毒提供了一种参考方法,从而更好地维护水产养殖环境的生态安全和促进我国水产养殖业健康可持续发展。

关键词：养殖池塘底泥养殖池塘水体 DNA提取 TaqMan荧光定量PCR

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猪源乳酸杆菌的分离鉴定及体外抑菌试验

养猪 2015年第2期 126-128页

作者：郝中香廖红刘丹郭玲刘杰葛红杨绍林张曼丽颜其贵四川农业大学动物医学院四川雅安625014 四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014

为了获得用于研制微生态制剂的乳酸杆菌菌株,从健康仔猪小肠中利用MRS固体培养基分离得到一株革兰氏阳性杆菌,通过培养特性、染色特征、菌落形态以及生化鉴定结果,初步判定该菌株为乳酸杆菌,再结合16S rDNA分子鉴定进一步确定该菌株为... 详细信息

为了获得用于研制微生态制剂的乳酸杆菌菌株,从健康仔猪小肠中利用MRS固体培养基分离得到一株革兰氏阳性杆菌,通过培养特性、染色特征、菌落形态以及生化鉴定结果,初步判定该菌株为乳酸杆菌,再结合16S rDNA分子鉴定进一步确定该菌株为乳酸杆菌。牛津杯法体外抑菌试验结果显示,该菌对致病性大肠杆菌的抑菌效果较好,可以作为微生态制剂的保存菌种。

关键词：猪源乳酸杆菌分离鉴定抑菌试验

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仔猪大肠杆菌病病原分离鉴定及自家苗的制备

养猪 2014年第6期 115-117页

作者：廖红郝中香张曼丽罗露文彩芳赵珊郗立新陈珍容颜其贵四川农业大学动物医学院四川雅安625000

试验以腹泻仔猪肠道为试验材料,对其肠道内容物进行细菌学检查及分离,对从肠道内容物分离得到的优势菌进行形态特征、生化特性和16S r DNA分子鉴定,判定为大肠杆菌。此菌株对供试的小白鼠有致病性,测其LD50为1.26×107 CFU/只。菌株对... 详细信息

试验以腹泻仔猪肠道为试验材料,对其肠道内容物进行细菌学检查及分离,对从肠道内容物分离得到的优势菌进行形态特征、生化特性和16S r DNA分子鉴定,判定为大肠杆菌。此菌株对供试的小白鼠有致病性,测其LD50为1.26×107 CFU/只。菌株对供试的氧氟沙星等敏感;对庆大霉素等中度敏感;对林可霉素等耐药。推断此菌株是导致仔猪腹泻致死的主要病原菌。利用病死猪肠道制作自家苗,给产前母猪注射,其后代仔猪腹泻率大幅降低。研究弄清了四川某猪场仔猪腹泻的原因,减少了猪场的经济损失,也为仔猪大肠杆菌病的预防和治疗提供了一定参考,为临床早期合理用药提供一定借鉴。

关键词：仔猪大肠杆菌病分离鉴定自家苗 LD50

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哺乳仔猪的饲养管理

中国畜牧兽医文摘 2012年第6期 69-69页

作者：代军郝中香陈一恋栾志舫周建瑜四川农业大学

哺乳仔猪的饲养管理是养猪业的中心环节之一,由于其年龄小、体质弱,抗病能力差等弱点突出,故仔猪的死亡绝大多数是发生在30日龄内,以7日龄内尤为明显。其死亡率几乎达50%以上。众所周知,仔猪高成活率是猪场取得高存栏量及高利润的关键,... 详细信息

哺乳仔猪的饲养管理是养猪业的中心环节之一,由于其年龄小、体质弱,抗病能力差等弱点突出,故仔猪的死亡绝大多数是发生在30日龄内,以7日龄内尤为明显。其死亡率几乎达50%以上。众所周知,仔猪高成活率是猪场取得高存栏量及高利润的关键,然而一些小型猪场和散养养殖户饲养管理不当造成哺乳仔猪大量死亡。因此,加强哺乳仔猪饲养管理,提高仔猪成活率在生产中处于核心地位。

关键词：仔猪饲养管理哺乳要点