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降钙素基因相关肽调控Notch信号通路与高氧致AECⅡ损伤修复的相关...

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作者：郑雪媚南华大学

学位级别：硕士

目的建立实验需要的原代早产新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar epithelial typeⅡcell,AECⅡ)模型,进一步探索细胞分离纯化和培养的方法,为后续实验高体积分数氧诱导AECⅡ损伤和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CG... 详细信息

目的建立实验需要的原代早产新生大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar epithelial typeⅡcell,AECⅡ)模型,进一步探索细胞分离纯化和培养的方法,为后续实验高体积分数氧诱导AECⅡ损伤和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)干预高体积分数氧诱导AECⅡ损伤细胞奠定基础。探讨CGRP对高体积分数氧(即氧体积分数大于95%)暴露下的早产新生大鼠AECⅡ的影响及其意义。CGRP对高体积分数氧诱导AECⅡ损伤的保护作用是否涉及Notch信号通路,观察Notch信号通路中Notch1、Hes和HERP信号分子的改变。探明外源性神经肽类递质在高氧AECⅡ损伤时对Notch信号通路影响,为可能的治疗提供药物靶点。方法用孕19d的SPF级SD早产新生鼠的肺组织为实验细胞来源,解剖早产新生鼠快速取出其肺组织并剪碎先后用胰蛋白酶联合DNA酶和胶原酶Ⅰ消化肺组织。采用差速离心和差速贴壁的方法纯化AECⅡ,然后以Dulbecco改良的Eagle培养基/F12营养混合物(Dulbecco’s modified Eagle’s medium:Nutrientmixture F12,DMEM/F12)完全培养基培养(胎牛血清浓度为10%)。台盼蓝染色检测AECⅡ活力,巴氏染色检测AECⅡ纯度。早产大鼠原代AECⅡ分离纯化后,随机分为常氧组、高氧组、高氧+CGRP组、高氧+Gamma分泌酶抑制剂MW167组、高氧+CGRP+CGRP8-37组、高氧+Gamma分泌酶抑制剂MW167+CGRP组。常氧组在空气下培养,高氧组在氧体积分数大于95%的氧气下培养。体外培养24 h后显微镜下观察AECⅡ的细胞形态变化,CCK8检测法检测细胞存活率,流式细胞检测法检测各组AECⅠ和AECⅡ细胞凋亡情况,丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutas,SOD)分别检测氧化损伤及抗氧化损伤分析,用Western blot方法检测Notch1、Hes和HERP蛋白表达水平,QPCR检测Notch1、Hes和HERP mRNA表达情况。结果1.原代培养的AECⅡ产量较好,每只早产新生鼠可获得的肺组织中AECⅡ的数量为(8.2±1.2)×10～6,细胞的活力为(95.5±1.6)%;细胞纯度鉴定为(95.7±2.2)%。2.与常氧组比较,高氧组AECⅡ存活率及SOD含量明显下降,凋亡率及MDA含量升高(P<0.05);高氧+CGRP组与高氧组比较,AECⅡ凋亡率下降,存活率增加,下调MDA,上调SOD,CGRP8-37能阻断CGRP的生物学作用。3.与常氧组比较,高氧处理组Notch1、Hes和HERP蛋白及mRNA表达显著下降(P<0.05);与高氧组比较,高氧+CGRP组肺泡细胞中Notch1、Hes和HERP蛋白及mRNA表达增加(P<0.05);与高氧+CGRP处理组比较,高氧+CGRP及其拮抗剂组Notch1、Hes和HERP蛋白及mRNA表达反而下降接近高氧组水平(P<0.05);与高氧+CGRP处理组比较高氧+CGRP+MW167组Notch1、Hes和HERP蛋白及mRNA表达下降接近高氧组水平(P<0.05)。结论1.通过细胞培养实验改良,采用差速贴壁及离心去分离和纯化,培养的AECⅡ,细胞纯度高,活力较前方法好,死亡率低,可用于AECⅡ等相关实验研究。2.通过成功制作高体积分数氧暴露下AECⅡ损伤模型,发现CGRP有部分抗氧化应激的能力,在高体积分数氧的情况下可促进AECⅡ的增殖,对损伤的AECⅡ具有一定的保护作用。3.研究发现Notch信号通路可能参与了高体积分数氧暴露下AECⅡ损伤修复过程,CGRP对损伤后的AECⅡ具有一定的保护作用可能与Notch信号通路的激活有关。

关键词：降钙素基因相关肽高氧肺泡Ⅱ型上皮细胞 Notch信号通路

儿童孤独症谱系障碍早期诊断社区筛查管理模式研究

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中国妇幼保健 2012年第19期27卷 2904-2906页

作者：谢怡孙晓勉郑雪媚赵玮广东省深圳福田区妇幼保健院 518026

目的:通过对儿童孤独症谱系障碍(autism spectrum disorders,ASD)早期诊断社区筛查管理模式研究,探讨ASD早期发现的网络筛查程序及管理流程,为ASD儿童获得早期干预提供有利的条件。方法:成立辖区ASD早期诊断管理中心,建立社区筛查网络... 详细信息

目的:通过对儿童孤独症谱系障碍(autism spectrum disorders,ASD)早期诊断社区筛查管理模式研究,探讨ASD早期发现的网络筛查程序及管理流程,为ASD儿童获得早期干预提供有利的条件。方法:成立辖区ASD早期诊断管理中心,建立社区筛查网络及管理流程,进行社区筛查管理技术的指导及培训。结果:①社区儿保医生的ASD知识掌握正确率逐年提高,由76.83%上升到90.63%;②社区一级网络ASD初筛率由42.00%上升到80.02%,转诊到位率由37.33%上升到63.81%,呈逐年提高趋势;③ASD早期诊断中心2年干预疑似患儿39例。结论:ASD早期诊断管理中心的建立提高了社区儿保医生对ASD的初筛率及转诊到位率,有利于ASD儿童的早期发现,为ASD儿童的早期干预提供了最佳时期。

关键词：儿童孤独症谱系障碍筛查管理模式

现代纸书出版案例分析(二):《做有力量的教师——观察与支持儿童的学习》

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中国传媒科技 2017年第11期 17-18页

作者：郑雪媚

一、基本信息《做有力量的教师——观察与支持儿童的学习》是由广东教育出版社出版,全面阐述了如何从不同侧面观察和记录幼儿在各种活动中的表现以及评价、支持、分析儿童的各种行为全书既提供了丰富的实例,又列出了大量详细的观察要点... 详细信息

一、基本信息《做有力量的教师——观察与支持儿童的学习》是由广东教育出版社出版,全面阐述了如何从不同侧面观察和记录幼儿在各种活动中的表现以及评价、支持、分析儿童的各种行为全书既提供了丰富的实例,又列出了大量详细的观察要点,是一本观察与记录幼儿行为的＂宝典＂。该出版物属于大众类图书。

关键词：教育出版社儿童案例分析学习教师力量现代幼儿行为

现代纸书出版案例分析(三):《单元测评卷·优优好卷》

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中国传媒科技 2017年第11期 19-20页

作者：郑雪媚

一、基本信息出版物名《单元测评卷·优优好卷》,以六年级上册数学练习册为例。该书属于教辅类出版物,总发行量超过200万册,部分区域将直接由学校配发课堂,其他则直接由市场发行售卖。二、出版物属性及读者服务该出版物为雌性属性,让家... 详细信息

一、基本信息出版物名《单元测评卷·优优好卷》,以六年级上册数学练习册为例。该书属于教辅类出版物,总发行量超过200万册,部分区域将直接由学校配发课堂,其他则直接由市场发行售卖。二、出版物属性及读者服务该出版物为雌性属性,让家长快速获得解题思路并有效辅导孩子考试拿高分。同时该出版物又属于社会型人格属性,让家长辅导孩子时帮助其快速掌握知识点,明白解题思路,帮助孩子与他人交流互动时得到他人认可从而获取快感。

关键词：出版物属性案例分析评卷现代家长辅导解题思路基本信息读者服务

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抚养行为对6～12个月婴儿睡眠影响的研究

中国妇幼保健 2014年第11期29卷 1728-1730页

作者：谢怡孙晓勉郑雪媚余强梅启雯深圳市福田区妇幼保健院深圳518026 深圳市计划生育服务中心

目的：通过对6～12个月婴儿父母在喂养及入睡方式上的抚养行为研究，探讨抚养行为对睡眠的影响，为婴儿建立良好的睡眠模式提出干预措施。方法：采取分层随机整群抽样方法，从深圳市各区随机抽取5家社区健康服务中心500名婴儿父母进行... 详细信息

目的：通过对6～12个月婴儿父母在喂养及入睡方式上的抚养行为研究，探讨抚养行为对睡眠的影响，为婴儿建立良好的睡眠模式提出干预措施。方法：采取分层随机整群抽样方法，从深圳市各区随机抽取5家社区健康服务中心500名婴儿父母进行睡眠问卷调查。结果：①36～12个月龄婴儿单独入睡困难检出率为27．6％，夜间过度喂食的检出率为12．8％，夜惊的检出率为7．4％；②不同的喂养方式使婴儿在单独入睡困难、夜间过度喂食、夜惊的检出率存在差异；③在不同的入睡方式中，喂奶入睡、睡前拍抱、同床陪伴容易出现睡眠问题。结论：加强对父母科学喂养及睡眠知识的健康教育，消除父母的焦虑，并与父母共同制定睡眠计划是帮助婴儿建立正常睡眠模式的关键。

关键词： 6—12个月婴儿抚养行为睡眠问题喂养

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儿童期性教育行为社区干预模式的研究

中国妇幼保健 2008年第32期23卷 4537-4539页

作者：谢怡孙晓勉郑雪媚广东省深圳市福田区妇幼保健院儿童保健科 518026

目的:应用PRECEDEMODEL对深圳市小学生性教育行为影响因素做出诊断,根据诊断建立社区性教育干预模式。方法:分层随机整群抽取深圳市5所小学进行学生、家长及教师问卷调查。结果:4～6年级学生知道各种性生理现象及变化占23.9%,家庭难以... 详细信息

目的:应用PRECEDEMODEL对深圳市小学生性教育行为影响因素做出诊断,根据诊断建立社区性教育干预模式。方法:分层随机整群抽取深圳市5所小学进行学生、家长及教师问卷调查。结果:4～6年级学生知道各种性生理现象及变化占23.9%,家庭难以开展性教育的主要原因是缺乏交流技巧占65.4%,学校主要原因缺乏适合的教材占56.2%,承认与父母谈论过性方面的问题占20.8%。结论:建立以社区医疗服务中心为主导的性教育干预模式,以营造宽松的社区环境,促进儿童期性教育的开展。

关键词：儿童期性教育社区干预

不同方案治疗新生儿应激性溃疡出血的疗效观察

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中国中西医结合儿科学 2016年第1期8卷 24-26页

作者：郑雪媚深圳市福田区妇幼保健院儿科广东深圳518045

目的比较不同方案对新生儿应激性溃疡出血的治疗效果。方法 2012年3月至2014年12月深圳市福田区妇幼保健院儿科收治的80例应激性溃疡出血患儿为研究对象,采用随机双盲法将其分为两组,每组各40例,对照组采取禁食、原发病对症干预等常规治... 详细信息

目的比较不同方案对新生儿应激性溃疡出血的治疗效果。方法 2012年3月至2014年12月深圳市福田区妇幼保健院儿科收治的80例应激性溃疡出血患儿为研究对象,采用随机双盲法将其分为两组,每组各40例,对照组采取禁食、原发病对症干预等常规治疗,观察组在对照组基础上联合凝血酶治疗,比较两组临床疗效、主要症状消失时间及不良反应。结果观察组治疗总有效率95.0%(38/40),对照组80.0%(32/40),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组胃肠功能紊乱消失时间[(4.68±0.78)vs(7.86±0.82)]d、循环不良消失时间[(1.88±0.53)vs(3.92±0.35)]d、止血时间[(1.28±0.70)vs(2.82±0.84)]d方面比较,差异有统计学意义(P<0.01)。两组均未出现明显不良反应。结论常规治疗基础上联合血凝酶干预能明显缩短患儿的止血时间,疗效确切,可作为新生儿应激性溃疡出血治疗的重要手段。

关键词：应激性溃疡出血血凝酶/治疗应用婴儿,新生

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HPLC法测定硫酸黏菌素组分含量

安徽农学通报 2017年第12期23卷 24-26页

作者：蒋顺进郑雪媚林凌广东容大生物股份有限公司广东清远511517 安徽师范大学安徽芜湖241000

目的:采用HPLC法测定硫酸黏菌素组分含量。方法:测定色谱条件为:色谱柱为C18,5μm,4.6mm×250mm,流动相为:称取无水硫酸钠13.38g用纯化水稀释至2700m L,用稀磷酸调节p H至2.3~2.5,加水稀释至3000m L,再加乙腈846m L,摇匀,过滤,即得。检... 详细信息

目的:采用HPLC法测定硫酸黏菌素组分含量。方法:测定色谱条件为:色谱柱为C18,5μm,4.6mm×250mm,流动相为:称取无水硫酸钠13.38g用纯化水稀释至2700m L,用稀磷酸调节p H至2.3~2.5,加水稀释至3000m L,再加乙腈846m L,摇匀,过滤,即得。检测波长为215nm。结论:硫酸黏菌素在0.2~0.6mg/m L范围内线性关系良好,多黏菌素E1:相关系数R=0.9995、多黏菌素E2:相关系数R=0.9998、多黏菌素E3:相关系数R=0.9999、多黏菌素EI-1:相关系数R=0.9992、多黏菌素EI-7MOA:相关系数R=0.9996;硫酸黏菌素的回收率为98.6%~101.6%;多黏菌素E1重复性RSD为0.2%、多黏菌素E2重复性RSD为0.2%、多黏菌素E3重复性RSD为0.8%、多黏菌素EI-1重复性RSD为0.6%、多黏菌素EI-7MOA重复性RSD为0.5%。结论:该方法线性范围宽、分析时间短、样品前处理简便、定量结果准确、重现性好,为其质量控制提供了依据。

关键词：硫酸黏菌素 HPLC 组分含量测定

HPLC法测定阿维拉霉素预混剂中阿维拉霉素的含量

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安徽农学通报 2017年第12期23卷 157-159页

作者：潘镇涛林凌郑雪媚黄炜乾广东容大生物股份有限公司广东清远511517 安徽师范大学安徽芜湖241000

目的:采用HPLC法测定10%阿维拉霉素预混剂中阿维拉霉素的含量。方法:测定色谱条件为:流动相:乙腈-0.2%(g/m L)磷酸二氢铵溶液(用磷酸调节p H值至3.0)(51∶49);色谱柱:菲罗门C18(5μm,4.6mm×250mm);检测波长:214nm。结论:阿维拉霉素在0.... 详细信息

目的:采用HPLC法测定10%阿维拉霉素预混剂中阿维拉霉素的含量。方法:测定色谱条件为:流动相:乙腈-0.2%(g/m L)磷酸二氢铵溶液(用磷酸调节p H值至3.0)(51∶49);色谱柱:菲罗门C18(5μm,4.6mm×250mm);检测波长:214nm。结论:阿维拉霉素在0.1~5mg/m L范围内线性关系良好,相关系数R^2为0.9998;阿维拉霉素的回收率为98.7%~101.0%;阿维拉霉素的测定重复性RSD为0.97。结论:该方法具有分析时间短、线性范围宽、定性结果精确和重现性好、样品前处理简便等特点,为阿维拉霉素预混剂的质量控制提供了依据。

关键词： 10%阿维拉霉素预混剂 HPLC 含量测定