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新型冠状病毒肺炎流行期的现场生物物证取证初探

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法医学杂志 2020年第2期36卷 174-175页

作者：林锦锋宋丹璐郑行恺庞宏兵宁波市刑事科学技术研究所浙江宁波315000 宁波海尔施基因科技有限公司浙江宁波315040

公安机关法医具有勘查非正常死亡案件现场、提取生物物证检材等职责,在各类现场环境中,不可避免地存在诸多潜在危险因素,威胁一线勘查人员的身体健康和生命安全。其中,传染性生物物证检材对于法医物证检验人员而言一直是个颇为棘手的问... 详细信息

公安机关法医具有勘查非正常死亡案件现场、提取生物物证检材等职责,在各类现场环境中,不可避免地存在诸多潜在危险因素,威胁一线勘查人员的身体健康和生命安全。其中,传染性生物物证检材对于法医物证检验人员而言一直是个颇为棘手的问题。自2020年1月以来,2019新型冠状病毒(以下简称“新冠病毒”)蔓延成为一个全球性公共卫生安全问题。在此背景下,法医物证检验人员处理涉及新型冠状病毒肺炎患者(尸体)或疑似新冠病毒感染者(尸体)的案件时,既增加了现场生物物证检材(以下简称“生物物证”)采集和处理的难度,也增加了检验人员的人身安全危险系数。故本文从生物物证的采集、运输、DNA提取纯化、保存和废物管理5个方面,对处理涉及新型冠状病毒肺炎患者(尸体)或疑似新冠病毒感染者(尸体)案件的生物物证取证流程进行探讨。

关键词：法医学法医遗传学新型冠状病毒肺炎现场勘验样本 DNA提取安全防护

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DNA鉴定工作中的特殊STR分型

法医学杂志 2022年第4期38卷 533-537页

作者：李甫肖东侯银玲王鹏金海英王礼斌罗祥敏郑行恺北京市公安局东城分局北京100005 徐州市公安局刑警支队江苏徐州221000 宁波海尔施基因科技股份有限公司浙江宁波315040

DNA数据库是将分子遗传学技术、计算机网络技术和数据库管理技术相结合,实现DNA信息数字化存储、管理和检索的系统[1]。STR由于具有良好的多态性,现已成为法庭科学实践中所使用的重要遗传标记[2]。常染色体STR基因座是目前亲权鉴定和个... 详细信息

DNA数据库是将分子遗传学技术、计算机网络技术和数据库管理技术相结合,实现DNA信息数字化存储、管理和检索的系统[1]。STR由于具有良好的多态性,现已成为法庭科学实践中所使用的重要遗传标记[2]。常染色体STR基因座是目前亲权鉴定和个体识别中运用最广泛的遗传标记,性染色体STR基因座以其独特的遗传特点在个体识别、亲子鉴定、血缘关系鉴定及族谱DNA分析等方面具有十分重要的研究和应用价值[3]。

关键词：法医遗传学短串联重复序列染色体缺失侧翼序列稀有等位基因

橡胶树炭疽菌HCkHNQZ1736 β-TUB2基因对多菌灵的抗性相关性分析

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热带作物学报 2021年第8期42卷 2334-2341页

作者：郑肖兰刘先宝李博勋郑行恺时涛冯艳丽黄贵修中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口571101 海南大学植物保护学院海南海口570228

天然橡胶是四大工业原料中唯一的可再生资源,由炭疽病菌侵染引起的橡胶树炭疽病是当前我国橡胶生产上最为严重的两大叶部病害之一。本研究以分离自云南保山的喀斯特炭疽病菌MeCkYN1705为对照,对海南新发炭疽病菌喀斯特炭疽菌HCkHNQZ173... 详细信息

天然橡胶是四大工业原料中唯一的可再生资源,由炭疽病菌侵染引起的橡胶树炭疽病是当前我国橡胶生产上最为严重的两大叶部病害之一。本研究以分离自云南保山的喀斯特炭疽病菌MeCkYN1705为对照,对海南新发炭疽病菌喀斯特炭疽菌HCkHNQZ1736进行抗药性评价。结果表明,菌株HCkHNQZ1736对苯并咪唑类杀菌剂多菌灵表现出高抗药性,EC_(50)达1107.2654μg/mL,而MeCkYN1705的EC_(50)仅为0.0554μg/mL。克隆了菌株HCkHNQZ1736的tub2基因,序列分析发现其所编码的第198个氨基酸位点由谷氨酸(Glu-E)突变为丙氨酸(Ala-A),推测该氨基酸位点突变是导致该菌株产生多菌灵抗性的原因。此外生物学特性测定发现,该菌株最适生长温度为28℃,致死温度为35℃;最适生长pH为6;光暗交替利于菌落生长;果胶、蛋白胨分别为最适碳源和氮源。

关键词：橡胶树炭疽病喀斯特炭疽病菌 β-TUB2 抗药性

海南橡胶树炭疽病调查及喀斯特炭疽病菌的鉴定

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热带作物学报 2023年第12期44卷 2546-2557页

作者：郑肖兰刘先宝郑行恺李博勋时涛冯艳丽黄贵修中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/院士团队创新中心/农业农村部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口571101

天然橡胶是四大工业原料中唯一的可再生资源,由炭疽病菌侵染引起的橡胶树炭疽病是当前我国橡胶生产上最为严重的两大叶部病害之一。本研究通过调查海南省主栽橡胶树品种(系)及监测炭疽病发生流行情况,调查发现PR107和RRIM600种植面积最... 详细信息

天然橡胶是四大工业原料中唯一的可再生资源,由炭疽病菌侵染引起的橡胶树炭疽病是当前我国橡胶生产上最为严重的两大叶部病害之一。本研究通过调查海南省主栽橡胶树品种(系)及监测炭疽病发生流行情况,调查发现PR107和RRIM600种植面积最大,分别占51.06%(102000 hm^(2))和43.39%(86700 hm^(2));在对橡胶树炭疽病的随机踏查和固定监测中发现,该病在实生苗、嫁接苗、增殖苗、各主栽品种幼龄树和成龄胶园中全年均可发生,3—4月为盛发期;海南省橡胶树种植面积大,且品种(系)单一,因此炭疽病在适宜发病条件下易暴发流行。通过形态观察、致病性测定和多基因系统发育分析发现,分离自琼中县阳江农场苗圃橡胶树叶片上的菌株HCkHNQZ1736为喀斯特炭疽菌(Colletotrichum karstii),这是首次在海南省橡胶树上发现该类病菌。致病力评价发现其对PR107、RRIM600、热研7-33-97和大丰95四个主推品种均有强致病力。杀菌剂敏感性测定结果表明,菌株HCkHNQZ1736和分离自云南保山的同种菌株MeCkYN1705对咪鲜胺锰盐差异不显著且不具抗药性,EC_(50)分别为0.0784μg/mL和0.0775μg/mL。HCkHNQZ1736对多菌灵表现出高抗药性,EC_(50)达1107.2654μg/mL,而MeCkYN1705的EC_(50)仅为0.0554μg/mL。

关键词：橡胶树炭疽病病害调查喀斯特炭疽菌分子鉴定

橡胶树胶胞炭疽菌T-900突变体生物学研究及其假定基因LV1敲除载体构建

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热带作物学报 2017年第11期38卷 2129-2135页

作者：郑肖兰李秋洁郑行恺刘先宝李博勋时涛黄贵修中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南海口571101 农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南海口571101 海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口571101 三亚市南繁科学技术研究院海南三亚572000 海南大学环境与植物保护学院海南海口570228

从构建的橡胶树胶孢炭疽菌RC178(Colletotrichum gloeosporioides)突变体库中筛选获得一株致病力明显减弱突变体T-900,与野生菌株相比其菌落生长速率、产孢能力,孢子萌发率及附着孢形成率均明显降低。通过对突变菌株T-900 T-DNA侧翼序... 详细信息

从构建的橡胶树胶孢炭疽菌RC178(Colletotrichum gloeosporioides)突变体库中筛选获得一株致病力明显减弱突变体T-900,与野生菌株相比其菌落生长速率、产孢能力,孢子萌发率及附着孢形成率均明显降低。通过对突变菌株T-900 T-DNA侧翼序列克隆、比对和基因预测结果表明外源片段的插入破坏了一个预测基因的功能,该基因和组蛋白H3同源性为99%,暂命名为LV1。通过同源臂克隆构建了该基因敲除载体900-1A-900-1B-p CT74,为进一步研究该基因在病原菌致病过程中的作用机理提供了基础。

关键词：胶孢炭疽菌 T-900 生物学特性基因敲除载体转化与再生

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海南省南繁种植区玉米病害调查

热带农业科学 2019年第6期39卷 56-66页

作者：郑肖兰徐春华郑行恺冯艳丽中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南海口571101 海南大学热带农林学院海南海口570228 农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南海口571101 海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口571101

2017年11月至2018年4月对海南省南繁种植区玉米病害进行普查。普查过程中,发现17种病害。在中小苗阶段,相对发病较严重的是玉米的纹枯病、茎腐病2种病害;在种植后期,发病最严重的是玉米锈病,其次是玉米灰斑病,玉米大斑病、玉米穗腐病等... 详细信息

2017年11月至2018年4月对海南省南繁种植区玉米病害进行普查。普查过程中,发现17种病害。在中小苗阶段,相对发病较严重的是玉米的纹枯病、茎腐病2种病害;在种植后期,发病最严重的是玉米锈病,其次是玉米灰斑病,玉米大斑病、玉米穗腐病等。不同生育期的玉米育种种植区内,玉米病害种类相对较多,发病程度往往也对于种植物候期一致的育种基地相对较重。总体上,海南省南繁玉米种植区均管理规范,加上早中期每隔6~10 d施药一次进行预防,因此玉米生长早中期病害发生仅零星出现,后期发病相对较重。

关键词：海南省南繁种植区玉米病害调查

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星油藤青枯病病原菌鉴定

植物病理学报 2019年第5期49卷 602-611页

作者：王国芬李超萍杨腊英徐春华郑行恺王童欣王亚荣于旭东中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海口571101 海南大学热带农林学院海口570228 农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室海口571101

星油藤(Plukenetia volubilis L.)是一种重要的藤本油料植物,在我国华南地区广泛种植。青枯病是近两年在海南星油藤种植区发生的新病害,为探究星油藤青枯病菌的基本特性及种下分化情况,本研究对分离的6株代表菌株进行了相关分析。细菌... 详细信息

星油藤(Plukenetia volubilis L.)是一种重要的藤本油料植物,在我国华南地区广泛种植。青枯病是近两年在海南星油藤种植区发生的新病害,为探究星油藤青枯病菌的基本特性及种下分化情况,本研究对分离的6株代表菌株进行了相关分析。细菌学鉴定及致病性测定结果表明,该病害是由类茄科雷尔氏菌(Ralstonia pseudosolanacearum)侵染引起。同时,从传统分类及分子生物学不同层面分析了星油藤青枯病菌的遗传分化情况。生理小种及生化变种的测试结果表明,星油藤青枯病菌属于1号生理小种和生化变种Ⅲ;16S r DNA和egl基因部分序列聚类分析显示,星油藤青枯病菌属类茄科雷尔氏菌演化型Ⅰ即亚洲分支菌株,序列变种34。

关键词：星油藤青枯病病原鉴定 Ralstonia pseudosolanacearum

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橡胶树炭疽病无人机精准施药技术初探

橡胶树炭疽病无人机精准施药技术初探

南繁区玉米弯孢霉叶斑病菌的鉴定及其生物学特性研究

中国植物病理学会2019年学术年会

作者：郑肖兰郑行恺刘先宝李博勋时涛黄贵修中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南大学环境与植物保护学院

鉴于目前智能化植保机具研制与精准施药技术的推广,本研究针对橡胶树炭疽病防治新型药剂"保叶清"微乳剂无人机飞防试验结果发现,在苗圃地飞行高于树冠2m,未添加飞防助剂,以3%和4%浓度的"保叶清"微乳剂进行施药校正防效分别为46.33%和55.... 详细信息

鉴于目前智能化植保机具研制与精准施药技术的推广,本研究针对橡胶树炭疽病防治新型药剂"保叶清"微乳剂无人机飞防试验结果发现,在苗圃地飞行高于树冠2m,未添加飞防助剂,以3%和4%浓度的"保叶清"微乳剂进行施药校正防效分别为46.33%和55.91%;飞行高于树冠1m,添加1%飞防助剂,以3%和4%浓度的"保叶清"微乳剂进行施药校正防效分别为67.42%和73.27%;飞行高于树冠2m,添加1%飞防助剂,以3%和4%浓度的"保叶清"微乳剂进行施药校正防效分别为71.27%和80.07%。在试验剂量下对橡胶树及环境无不良影响。此外,通过对橡胶树成龄胶林（海南阳江和云南勐捧）进行无人机精准施药防治技术熟化,并使用水敏纸图像分析的方法检测,结果发现橡胶树割龄12年的胶林下层叶片雾滴粒良好、飘移损失较小、雾群分布均匀;该结果显示使用无人机进行成龄开割树防治炭疽病方法可行,且能胜任平地胶林和山地胶林的相关防治。

关键词：橡胶树炭疽病无人机精准施药技术

来源： cnki会议评论

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热带农业科学 2019年第3期39卷 44-50页

作者：郑肖兰郑行恺赵爽郑浩陆翠梅蔡秀清中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南海口571101 农业部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海南海口571101 海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口571101 海南大学热带农林学院海南海口570228

为了深入研究玉米弯孢霉叶斑病,从三亚南滨农场等南繁种植基地采集病叶,分离得到致病力强的玉米弯孢霉叶斑病病菌C24。利用柯赫氏法则和分子生物学鉴定、生长速率测定等方法 ,分别从培养基(PSA、PDA、 Czapek、 PSA+玉米绿叶煎汁、玉米... 详细信息

为了深入研究玉米弯孢霉叶斑病,从三亚南滨农场等南繁种植基地采集病叶,分离得到致病力强的玉米弯孢霉叶斑病病菌C24。利用柯赫氏法则和分子生物学鉴定、生长速率测定等方法 ,分别从培养基(PSA、PDA、 Czapek、 PSA+玉米绿叶煎汁、玉米绿叶煎汁、 PDA+玉米绿叶煎汁、燕麦)、温度(10、 15、 20、 25、 28、33、 37、 41℃)、光照(全日光照、全日黑暗)、 pH(5、 6、 7、 8、 9、 10、 11)、碳源(蔗糖、麦芽糖、乳糖、 D-木糖、 D-果糖、可溶性淀粉)、氮源(甘氨酸、苏氨酸、 NaNO3、 L-缬氨酸、 L-丝氨酸、 L-精氨酸、 L-谷氨酰胺、 L-赖氨酸、 L-脯氨酸、 L-亮氨酸)6个方面对南繁区玉米弯孢霉叶斑病菌C24的生物学特性进行了研究。结果显示:C24鉴定为弯孢菌(Curvularia lunata Boedijn)在供试培养基上均能生长,其中在燕麦培养基上生长最好;最适生长温度在28～37℃;最适pH值为7～9;光照有利于菌丝生长;最适碳源为麦芽糖,氮源为L-亮氨酸。本研究发现玉米弯孢霉菌能引起南繁区玉米病害,较适应热带地区高温天气,在28～37℃生长旺盛。

关键词：南繁种植区玉米弯孢霉叶斑病菌生物学特性