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黑鲷生长激素放射受体分析法的建立及其受体组织的分布

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动物学报 2002年第2期48卷 270-276页

作者：邓利张为民林浩然郑汉其中山大学水生经济动物研究所香港中文大学生物化学系

利用黑棘鲷 (Acanthopagrusbutcheri)生长激素 (brGH )作为配体 ,建立了黑鲷 (Sparusmacrocephalus)生长激素受体放射受体分析法 (RadioreceptorAssay ,RRA)并分析其组织分布特征。在 2 5℃下 ,12 5I brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的特异性结... 详细信息

利用黑棘鲷 (Acanthopagrusbutcheri)生长激素 (brGH )作为配体 ,建立了黑鲷 (Sparusmacrocephalus)生长激素受体放射受体分析法 (RadioreceptorAssay ,RRA)并分析其组织分布特征。在 2 5℃下 ,12 5I brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的特异性结合具有如下特点 :(1)时间依赖性　特异性结合达最大结合量一半的时间 (Ta1/ 2 )为 10 4h ,结合达到平衡状态需 2 0h ;激素受体复合物的解离在 3h之内最快 ,2 4h后仅解离约40 % ,表明激素 -受体复合物的结合仅具部分可逆转性 ;(2 )可饱和性　12 5I brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的特异性结合随着膜蛋白浓度或12 5I brGH加入量的上升而呈逐渐上升并达到饱和状态的趋势 ;(3)可取代性　12 5I brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的特异性结合可被非标记brGH竞争性地取代 ,将特异性结合取代 5 0 % (ED50 )所需非标记brGH约为 3 8ng ,非标记重组金鱼生长激素 (rgfGH)及人生长激素 (hGH)对12 5IbrGH的竞争性取代能力明显较brGH低 ,而重组金鱼催乳素 (rgfPRL)、羊催乳素 (oPRL)在该系统中几乎无交叉反应。Scachard作图分析表明黑鲷肝细胞膜蛋白存在brGH单一的高亲和结合位点 ,Ka为 (3 49± 0 2 4)× 10 10 (mol/L) -1,Bmax为 146 8± 10 6fmol/mgprotein。结果表明 ,brGH与黑鲷肝细胞膜蛋白的?

关键词：黑鲷生长激素放射受体分析法受体组织分布

串果藤中甘草素和异甘草素对大鼠单胺氧化酶的体外抑制作用(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2000年第10期21卷 88-92页

作者：潘宣,孔令东,张勇,郑汉其,谭仁祥南京大学功能生物分子研究所南京大学功能生物分子研究所国家医药生物技术重点实验室南京大学功能生物分子研究所国家医药生物技术重点实验室南京大学功能生物分子研究所香港中文大学生物化学系南京 210093 中国兰州医学院药学系兰州 730000 南京 210093 中国香港中文大学生物化学系中国国家医药生物技术重点实验室南京 210093 中国中国国家医药生物技术重点实验室南京 210093 中国

目的:研究串果藤中甘草素和异甘草素体外对单胺氧化酶A型和B型的抑制作用.方法:根据不同的离心速度制备大鼠全脑粗线粒体作为单胺氧化酶的酶源;分别以5-羟基[侧链-2-14C]色胺肌酸硫酸盐([14C]5-HT)和2-苯基[1-14C]乙基胺盐酸盐([14C]β-... 详细信息

目的:研究串果藤中甘草素和异甘草素体外对单胺氧化酶A型和B型的抑制作用.方法:根据不同的离心速度制备大鼠全脑粗线粒体作为单胺氧化酶的酶源;分别以5-羟基[侧链-2-14C]色胺肌酸硫酸盐([14C]5-HT)和2-苯基[1-14C]乙基胺盐酸盐([14C]β-PEA)为单胺氧化酶A型和B型放射性底物,用液体闪烁技术,研究甘草素和异甘草素酶抑制作用和抑制类型.结果:甘草素和异甘草素对单胺氧化酶A型和B型均具有抑制作用,呈良好的量效关系,对单胺氧化酶A型的IC50（95％的可信限）分别为32（26-36）μmol/L和13.9（12.8-15.6）μmol/L,对单胺氧化酶B型的IC50值分别为104.6（89.0-118.9）μmol/L和47.2（39.5-54.5）μmol/L.酶抑制特征曲线显示甘草素和异甘草素对单胺氧化酶A型呈非竞争性抑制,Ki值分别为31.5μmol/L和14.3μmol/L,而对单胺氧化酶B型呈混合竞争性抑制,Ki值分别为164.7μmol/L和62.2μmol/L,KI值分别为15.2μmol/L和9.3μmol/L.结论:甘草素和异甘草素体外对单胺氧化酶A型呈非竞争性抑制作用,对单胺氧化酶B型呈混合竞争性抑制作用.

关键词：甘草素异甘草素串果藤木通科单胺氧化酶

定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交/RNase保护法

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中国实验动物学报 2003年第1期11卷 7-11页

作者：邓利张为民郑汉其林浩然中山大学水生经济动物研究所香港中文大学生物化学系

目的　建立液相杂交核糖核酸酶保护测定 (RibonucleaseProtectionAssay,RPA)技术定量检测黑鲷(Sparusmacrocephalus)生长激素受体mRNA水平。方法　将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM T载体 ,制备特异性的放射性反义RNA探针及正... 详细信息

目的　建立液相杂交核糖核酸酶保护测定 (RibonucleaseProtectionAssay,RPA)技术定量检测黑鲷(Sparusmacrocephalus)生长激素受体mRNA水平。方法　将黑鲷生长激素受体cDNA片断亚克隆至pGEM T载体 ,制备特异性的放射性反义RNA探针及正义RNA ,将反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA进行液相杂交 ,用RNaseA和RNaseT1 降解杂交产物的单链RNA ,双链杂交体得到保护 ,然后检测杂交体的分子大小及放射强度。结果　检测出了黑鲷生长激素受体反义RNA探针与正义RNA及样品总RNA的特异性杂交片断 ,由此建立了定量测定黑鲷生长激素受体mRNA的液相杂交 RNase保护法 ,并采用该方法在黑鲷的多种组织中检测出了生长激素受体基因的表达 ,表达水平在肝脏中最高。该结果与我们曾采用生长激素放射受体分析法对黑鲷生长激素受体所研究的结果相吻合。结论　为进一步深入研究鱼类生长激素受体分子内分泌的调控理论提供了有力手段。

关键词：黑鲷受体,促生长素核糖核酸酶保护测定液相杂交

从噬菌体构象型7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽

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细胞与分子免疫学杂志 2004年第4期20卷 398-401页

作者：吉清何凤田李蓉芬高会广郑英如钟小林郑汉其第三军医大学生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学大坪医院妇产科重庆400042 香港中文大学生物化学系

目的 :从噬菌体构象型 7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽。方法 :用重组人BLyS筛选噬菌体构象型 7肽库 ,用间接ELISA、竞争ELISA和细胞增殖活性试验鉴定噬菌体克隆。结果 :经过 3轮亲和筛选 ,噬菌体的回收率增加 ,阳性克隆得到富集。所获两... 详细信息

目的 :从噬菌体构象型 7肽库中筛选BLyS的抑制性短肽。方法 :用重组人BLyS筛选噬菌体构象型 7肽库 ,用间接ELISA、竞争ELISA和细胞增殖活性试验鉴定噬菌体克隆。结果 :经过 3轮亲和筛选 ,噬菌体的回收率增加 ,阳性克隆得到富集。所获两个阳性噬菌体克隆能特异性地抑制BLyS刺激细胞增殖的活性。结论 :获得了噬菌体呈现的能够抑制BLyS的两个短肽。

关键词： BLyS 噬菌体肽库小肽

［B1－Ala，B2－Ala］－胰岛素：受体结合特性及生物活力研究

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生物化学与生物物理学报 1996年第3期28卷 250-254+256页

作者：朱尚权张新堂徐明华叶莺郑汉其中国科学院上海生物化学研究所香港中文大学生物化学系

本文报道了［Ｂ１～Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素与人胎盘细胞膜胰岛素受体结合的特性和体外生物活力，并与胰岛素进行比较。在３７℃和杆菌肽存在下，１２５Ｉ－［Ｂ１－Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素和１２５Ｉ－胰岛素与人胎盘... 详细信息

本文报道了［Ｂ１～Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素与人胎盘细胞膜胰岛素受体结合的特性和体外生物活力，并与胰岛素进行比较。在３７℃和杆菌肽存在下，１２５Ｉ－［Ｂ１－Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素和１２５Ｉ－胰岛素与人胎盘细胞膜作用依赖于反应时间，反应６分钟到达平衡，此时，［Ｂ１－Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素和胰岛素与胰岛素受体的最大结合分别为每毫克膜蛋白结合６．４４ｆｍｏｌ和３．４７ｆｍｏｌ：达到平衡一半所需时间（Ｔ１／２）分别为１９秒和２５秒。用１２５Ｉ－［Ｂ１－Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素作为放射配体进行竞争性结合研究，从ＩＣ（５０）得［Ｂ１－Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］胰岛素的受体结合活力为胰岛素的１３９．６％。Ｓｃａｔｏｈａｒｄ分析求得；［Ｂ１－Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素与高亲和和低亲和结合位点的结合常数在４℃时分别为５．８８×１０８Ｌ／ｍｏｌ和７．６３×１０５Ｌ／ｍｏｌ，而胰岛素分别为４．８３×１０８Ｌ／ｍｏｌ和３．３９×１０５Ｌ／ｍｏｌ。促脂肪细胞生成脂的实验表明：［Ｂ１－Ａｌａ，Ｂ２－Ａｌａ］－胰岛素的活力为胰岛素的１３０％。

关键词： [B1-Ala,B2-Ala]-胰岛素受体结合离体活力

重组人BAFF_(112-285)的制备及活性分析

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免疫学杂志 2003年第3期19卷 178-182页

作者：何凤田郑英如高会广李蓉芬郑汉其吉青江渝陈敏钟小林第三军医大学生物化学与分子生物学教研室重庆400038 第三军医大学大坪医院妇产科重庆400042 香港中文大学生物化学系

目的　制备具有功能活性的重组人TNF家族的B细胞激活因子 (BcellactivatingfactorbelongingtotheTNFfa mily ,BAFF)胞外区 1 1 2～ 2 85氨基酸残基段 (rhBAFF1 1 2 -2 85) ,为BAFF的深入研究奠定基础。方法　提取人HL 6 0细胞总RNA ,经R... 详细信息

目的　制备具有功能活性的重组人TNF家族的B细胞激活因子 (BcellactivatingfactorbelongingtotheTNFfa mily ,BAFF)胞外区 1 1 2～ 2 85氨基酸残基段 (rhBAFF1 1 2 -2 85) ,为BAFF的深入研究奠定基础。方法　提取人HL 6 0细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人BAFF胞外区 1 1 2～ 2 85氨基酸残基 (BAFF1 1 2 -2 85)的cDNA ,行序列测定后 ,构建于原核表达载体pQE 80L并转化大肠杆菌DH5α ,经IPTG诱导表达rhBAFF1 1 2 -2 85,Ni2 + NTA层析纯化 ,进而经3 H TdR掺入实验检测其免疫学活性。结果　RT PCR扩增得到了 5 2 5bp的DNA片段 ,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF1 1 2 -2 85的cDNA序列一致 ,该胞外区片段在大肠杆菌中获得了高效表达 ,表达水平达细菌总蛋白的 4 5 .7% ,经纯化后纯度可达 98.4 % ,活性检测证实其能明显刺激外周血淋巴细胞活化。结论　利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF1 1 2 -2 85,所获纯化产物具有生物学活性。

关键词：重组人BAFFll2-285 制备活性原核表达淋巴细胞活化

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双功能铜催化全取代烷基烯基醚的可控合成

有机化学 2024年第3期44卷 1043-1044页

作者：郑汉良朱钢国浙江师范大学化学与材料科学学院、先进催化材料教育部重点实验室浙江金华321004

烷基烯基醚(AVEs)是一类重要的有机合成砌块,被广泛应用于天然产物和高分子聚合物的合成[1-2].由于其多样的生物和药物活性,AVEs也常作为一种药效团而被大量引入药物候选化合物中(图1).因此,发展AVEs的高效合成策略具有重要意义.AVEs的... 详细信息

烷基烯基醚(AVEs)是一类重要的有机合成砌块,被广泛应用于天然产物和高分子聚合物的合成[1-2].由于其多样的生物和药物活性,AVEs也常作为一种药效团而被大量引入药物候选化合物中(图1).因此,发展AVEs的高效合成策略具有重要意义.AVEs的经典合成方法包括烯基醚的Heck芳基化反应[3]、钯催化炔基醚的可控氢芳基化反应[4]以及高价碘介导的炔烃烷氧-碘化反应[5].尽管这些方法为AVEs的制备提供了有效的途径,但是全取代AVEs的区域与立体选择性合成还面临挑战.

关键词：芳基化反应碘化反应烯基醚钯催化高价碘立体选择性合成药物活性药效团

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黑鲷生长激素及其受体的季节变化

水产学报 2001年第3期25卷 203-208页

作者：邓利张为民林浩然郑汉其中山大学水生经济动物研究所香港中文大学生物化学系广东广州　510275 香港　沙田

采用黑鲷生长激素（ｓｅａｂｒｅａｍｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ，ｂｒＧＨ）放射免疫测定法（ｂｒＧＨＲＩＡ）及黑鲷生长激素放射受体测定法（ｂｒＧＨＲＲＡ），研究了不同季节（３月、６月、９月及１２月）黑鲷血清ＧＨ水平... 详细信息

采用黑鲷生长激素（ｓｅａｂｒｅａｍｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅ，ｂｒＧＨ）放射免疫测定法（ｂｒＧＨＲＩＡ）及黑鲷生长激素放射受体测定法（ｂｒＧＨＲＲＡ），研究了不同季节（３月、６月、９月及１２月）黑鲷血清ＧＨ水平及肝脏和性腺中生长激素受体（ｇｒｏｗｔｈ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＧＨＲ）水平的变化，同时测定了黑鲷白肌及肝脏ＲＮＡ－ＤＮＡ比率及黑鲷肥满度（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ，Ｋ）和性腺指数（ｇｏｎａｄｏｓｏｍａｔｉｃ　ｉｎｄｅｘ，ＧＳＩ）的季节变化。黑鲷血清ＧＨ水平于６月出现高峰，显著高于３月、９月至１２月的水平（Ｐ＜０．０１）。黑鲷肝脏中ＧＨＲ水平在９月及１２月显著高于３月及６月的水平（Ｐ＜０．０１）；黑绸性腺中的ＧＨＲ水平在９月显著高于其他月份（Ｐ＜０．０５）。雄性黑鲷肝脏中ＲＮＡ－ＤＮＡ比率在四个季节均无显著差异，雌性个体肝脏中ＲＮＡ－ＤＮＡ比率在６月显著低于３月（Ｐ＜０．０１）；雄性及雌性黑鲷白肌中ＲＮＡ－ＤＮＡ比率在６月均显著高于其他季节的水平（Ｐ＜０．０５）。黑鲷的性腺指数（ＧＳＩ）在１２月达到最高，３月以后显著下降。结果表明，黑鲷血清ＧＨ水平、ＧＨＲ水平和白肌及肝脏中ＲＮ?

关键词：黑鲷生长激素生长激素受体季节变化

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欧盟数据要素市场培育政策、实践与模式

图书馆论坛 2024年

作者：赵琳钱雨秋郑汉武汉大学信息管理学院上海海事大学经济管理学院西班牙马德里康普顿斯大学信息科学学院

文章以实地考察法与网络调研法相结合，面向欧盟数据要素市场培育政策，围绕数据空间与数据处理基础设施建设、数据要素主体培育与数据要素市场规则制定，梳理与论述政策逻辑和内核。关于欧盟数据要素市场培育实践，基于数据价值链，从... 详细信息

文章以实地考察法与网络调研法相结合，面向欧盟数据要素市场培育政策，围绕数据空间与数据处理基础设施建设、数据要素主体培育与数据要素市场规则制定，梳理与论述政策逻辑和内核。关于欧盟数据要素市场培育实践，基于数据价值链，从数据要素市场主体及其关系、数据要素增值模式、数据要素服务维度，探究政策实施下的市场实践现状。基于欧盟数据要素市场培育政策与实践，将欧盟模式总结为“一个宗旨、两个抓手、三条主线、四个主体与四个强化”，结合中国特色提出面向国内的针对性建议。

关键词：欧盟数据要素市场培育政策体系培育实践模式