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中国老年学杂志 1997年第2期17卷 92-93页

作者：宋敏郑永晨韩梅中国医科大学基础医学院病理解剖教研室白求恩医科大学第一临床学院中心实验室吉林省人民医院

应用免疫组织化学方法，研究了类固醇糖尿病胰岛内分泌细胞量的变化。结果表明类固醇糖尿病产生胰岛素的细胞明显减少。

关键词：免疫组化类固醇糖尿病糖尿病

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免疫PCR

国外医学（免疫学分册） 1996年第1期19卷 42-44页

作者：郑永晨白求恩医科大学免疫学教研室

将抗原抗体反应与ＰＣＲ技术结合在一起建立了一种新的检测微量抗原的技术，这种技术称之为免疫ＰＣＲ，其具有非常高的敏感性，比ＥＬＩＳＡ敏感１０５倍，在理论上可以检测到一个分子的抗原，因此，免疫ＰＣＲ具有非常广泛的应用前景。

关键词：免疫生物素聚合酶链反应抗原检测

结缔组织生长因子在肾切除大鼠肾脏中的表达和氟伐他汀的调节作用

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中华医学杂志 2003年第16期83卷 1428-1432页

作者：宋国炜李才郑永晨孔俭孙波吉林大学再生医学科学研究所长春130021 吉林大学第二医院吉林大学第一医院

目的　观察结缔组织生长因子 (CTGF)mRNA在 5 / 6肾切除大鼠肾皮质的表达特点和羟甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂氟伐他汀的调节作用。方法　将 2 4只 5 / 6肾切除大鼠随机分为未治疗的 5 / 6肾切除组 (模型组 ,12只 )和氟伐他... 详细信息

目的　观察结缔组织生长因子 (CTGF)mRNA在 5 / 6肾切除大鼠肾皮质的表达特点和羟甲基戊二酰辅酶A(HMG CoA)还原酶抑制剂氟伐他汀的调节作用。方法　将 2 4只 5 / 6肾切除大鼠随机分为未治疗的 5 / 6肾切除组 (模型组 ,12只 )和氟伐他汀治疗的 5 / 6肾切除组 (治疗组 ,12只 ) ,另设6只假手术大鼠作为对照。氟伐他汀治疗 (7mg·kg-1·d-1) 13周后 ,检测尿蛋白排泄、血清尿素氮和肌酐含量 ,用RT PCR法检测肾皮质CTGFmRNA表达 ,免疫组织化学检测肾小球转化生长因子 β1(TGF β1)、IV型胶原和纤连蛋白的表达水平 ,并评价肾脏病变和肾小球硬化指数 (GSI)。结果　实验终止时 ,模型组尿蛋白排泄 (30 5 4mg/ 2 4h)显著高于假手术组 (5 6mg/ 2 4h ,P <0 0 1) ,氟伐他汀治疗的大鼠尿蛋白排泄 (2 30 9mg/ 2 4h)明显低于模型组 (P <0 0 5 )。与假手术组相比 ,模型组血清尿素氮(P <0 0 1)和肌酐 (P <0 0 5 )水平均明显增高 ,氟伐他汀治疗使血清尿素氮和肌酐的含量明显降低。模型组GSI为 4 1 8± 11 5 ,明显高于假手术组 (2 2± 1 3,P <0 0 1) ,治疗组GSI(2 3 4± 6 1)明显低于模型组 (P <0 0 5 )。肾皮质CTGFmRNA表达水平约为假手术组的 3倍 (P <0 0 1) ,而在治疗组其表达水平减少 5 5 4 %。

关键词：结缔组织生长因子肾切除大鼠肾脏表达氟伐他汀调节作用肾脏病

大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶自杀基因对人胃癌细胞的作用

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吉林大学学报（医学版） 2007年第1期33卷 105-108页

作者：黄颖曹岩郑永晨吉林大学第二医院中心实验室吉林长春130041

目的:探讨大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶自杀基因对胃癌细胞MKN-45的抑制及杀伤作用,并证实旁观者效应。方法:构建真核表达载体pcDNA3.1-ePNP,将重组载体转染MKN-45细胞获得高表达大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶基因(ePNP)的MKN-45细胞克隆。在MK... 详细信息

目的:探讨大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶自杀基因对胃癌细胞MKN-45的抑制及杀伤作用,并证实旁观者效应。方法:构建真核表达载体pcDNA3.1-ePNP,将重组载体转染MKN-45细胞获得高表达大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶基因(ePNP)的MKN-45细胞克隆。在MKN-45/ePNP细胞培养物中加入前体药物MePdR,观察MePdR对该细胞的杀伤作用及旁观者效应。结果:随MePdR浓度的增大,MKN-45/ePNP细胞的生存率逐步下降,在MePdR浓度达到1 mg.L-1时MKN-45/ePNP细胞全部被杀灭,而未经转染的MKN-45细胞的生存率则不受影响,MePdR对MKN-45/ePNP有显著的抑制及杀灭作用;当MKN-45/ePNP细胞占总细胞的10%时,全部细胞被杀死。结论:ePNP/MePdR自杀基因系统对胃癌细胞有生长抑制及杀伤作用并具有旁观者效应。

关键词：胃肿瘤自杀基因旁观者效应大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶

p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞对化疗药物敏感性的研究

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中国老年学杂志 2006年第9期26卷 1221-1223页

作者：曹岩郑永洁郑永晨黄颖吉林大学第二医院中心实验室吉林长春130041 吉林大学中日联谊医院肿瘤内科

目的探讨p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞（7721细胞）对化疗药物的敏感性，深入研究p21基因对肝癌细胞的治疗作用。方法应用磷酸钙介导p21基因转染人肝癌7721细胞；通过G418筛选稳定表达细胞株并扩大培养；采用MTT法检测肿瘤细胞增殖... 详细信息

目的探讨p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞（7721细胞）对化疗药物的敏感性，深入研究p21基因对肝癌细胞的治疗作用。方法应用磷酸钙介导p21基因转染人肝癌7721细胞；通过G418筛选稳定表达细胞株并扩大培养；采用MTT法检测肿瘤细胞增殖速度；流式细胞术检测细胞周期变化。结果经过3～4w G418筛选得到稳定表达的细胞株，p21基因稳定转染并联合化疗药物应用可明显抑制7721细胞的体外增殖，细胞周期明显改变，细胞从G1期到G2期发生阻滞。结论提示转染外源p21基因联合化疗药物可使7721细胞周期阻滞于G1期，并可抑制肿瘤细胞增殖。

关键词： p21基因肝癌细胞株 MTT法基因转染

p21基因转染人胃癌细胞对化疗药物敏感性的影响

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吉林大学学报（医学版） 2005年第5期31卷 785-787页

作者：曹岩郑永晨黄颖吉林大学第二医院中心实验室吉林长春130041

目的:探讨p21基因转染人胃癌细胞系(BGC)对化疗药物的敏感性。方法:应用MTT摄入方法测定5-氟尿嘧啶、阿霉素、长春新碱、环磷酰胺、平阳霉素和替尼泊甙对p21基因转染人胃癌细胞增殖抑制作用,并进行72 h观察。结果:p21基因转染人胃癌细胞... 详细信息

目的:探讨p21基因转染人胃癌细胞系(BGC)对化疗药物的敏感性。方法:应用MTT摄入方法测定5-氟尿嘧啶、阿霉素、长春新碱、环磷酰胺、平阳霉素和替尼泊甙对p21基因转染人胃癌细胞增殖抑制作用,并进行72 h观察。结果:p21基因转染人胃癌细胞对5-氟尿嘧啶最敏感,72 h抑制率为77.9%;其次为阿霉素、长春新碱、环磷酰胺、平阳霉素和替尼泊甙,其抑制率分别为62.7%、61.1%、59.3%、58.2%及45.9%。其敏感性与对照组相比差异有显著性(P<0.05),随时间延长而逐渐增加。结论:用MTT法检测p21基因转染人胃癌细胞对化疗药物敏感性的实验,即可以针对性指导临床对肿瘤敏感性化疗药物的选用,又可避免盲目用药而产生对机体免疫细胞的毒性作用。p21基因可提高对5-氟尿嘧啶的敏感性。

关键词： p21基因胃肿瘤微生物敏感性试验比色法氮蓝四唑

p21^(WAF1/CIP1)基因转染对胃癌细胞生物学活性的影响

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中国老年学杂志 2005年第6期25卷 694-696页

作者：曹岩郑永晨吉林大学第二医院中心实验室吉林长春130041

目的探讨p21WAF1/CIP1基因(p21基因)对人胃癌细胞系(BGC)生物学活性的影响。方法应用分子克隆技术构建p21WAF1/CIPl基因真核表达载体,然后用脂质体法将其导入到人胃癌细胞BGC中,经G418筛选获得可稳定表达p21WAF1/CIPl的人胃癌细胞克隆,... 详细信息

目的探讨p21WAF1/CIP1基因(p21基因)对人胃癌细胞系(BGC)生物学活性的影响。方法应用分子克隆技术构建p21WAF1/CIPl基因真核表达载体,然后用脂质体法将其导入到人胃癌细胞BGC中,经G418筛选获得可稳定表达p21WAF1/CIPl的人胃癌细胞克隆,用中性红摄入法观察细胞生长速率,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化。结果p21导入胃癌BGC细胞后,肿瘤细胞增值能力明显受到抑制,并出现细胞周期G1期阻滞。结论p21基因具有抑制胃癌细胞增殖的作用,可作为胃癌基因治疗的靶基因.

关键词：胃癌p21^WAF1/CIP1基因细胞周期

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简单快速提取病毒DNA的方法

中华医学检验杂志 1990年第2期13卷 91-93页

作者：郑永晨梁东 130021，白求恩医科大学第一临床学院儿科 30021，白求恩医科大学第一临床学院儿科

我们用聚乙二醇(PEG)法从感染腺病毒的细胞悬液中提取病毒DNA。其结果表明,提出的病毒DNA在量上和纯度上都比较理想,可以用于限制性内切酶图谱分析和DNA重组。与改良赫特(Hirt)法相比较,本方法更为简单快速,且不需特殊设备,一般的实验... 详细信息

我们用聚乙二醇(PEG)法从感染腺病毒的细胞悬液中提取病毒DNA。其结果表明,提出的病毒DNA在量上和纯度上都比较理想,可以用于限制性内切酶图谱分析和DNA重组。与改良赫特(Hirt)法相比较,本方法更为简单快速,且不需特殊设备,一般的实验室均有条件利用此方法提取病毒DNA。我们利用此方法研究了腺病毒3型和7型的内切酶图谱,实验结果满意。

关键词：聚乙二醇法腺病毒DNA 提取

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人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定

吉林大学学报（医学版） 2007年第5期33卷 834-836页

作者：徐波郑永晨费邵阳吉林大学第二医院中心实验室吉林长春13004 吉林省第三人民医院神经外科吉林四平136000

目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2(CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和XhoⅠ两酶... 详细信息

目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2(CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白。结果:RT-PCR扩增出约894bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致。经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体。SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达。结论:从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达。

关键词：人细胞分裂周期基因2 基因克隆原核表达

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一氧化氮与巨噬细胞的免疫调节

国外医学（免疫学分册） 1995年第4期18卷 204-206页

作者：郑永晨杨贵贞白求恩医科大学免疫学教研室

一氧化氮参与许多生理和病理过程，免疫系统中的巨噬细胞在一些细胞因子和内毒素的诱导下可以产生大量的一氧化氮，同时一氧化氮又可以影响其它细胞因子的合成与释放。一氧化氨的合成与发挥生物效应又与免疫调节过程中的信息传递有直接... 详细信息

一氧化氮参与许多生理和病理过程，免疫系统中的巨噬细胞在一些细胞因子和内毒素的诱导下可以产生大量的一氧化氮，同时一氧化氮又可以影响其它细胞因子的合成与释放。一氧化氨的合成与发挥生物效应又与免疫调节过程中的信息传递有直接的关系。巨噬细胞在细胞内、外环境变化时可通过一氧化氮产生免疫保护、免疫损伤和免疫调节作用。

关键词：巨噬细胞一氧化氮合成酶免疫调节