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云南省药物研究的优势、现状和问题

云南科技管理 2011年第3期24卷 7-10页

作者：杨柳萌郑昌博普岳红郑永唐中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所云南昆明650223 中国药科大学药学院江苏南京210009 云南农业大学云南昆明650201

云南省拥有丰富的药用生物资源、底蕴深厚的民族民间药和丰富的灵长类实验动物资源优势,这些资源优势为研发具有自主知识产权的创新药物奠定了坚实的基础。云南省已初步形成了以中药、天然药、民族药为主,包括化学药、疫苗、保健药、中... 详细信息

云南省拥有丰富的药用生物资源、底蕴深厚的民族民间药和丰富的灵长类实验动物资源优势,这些资源优势为研发具有自主知识产权的创新药物奠定了坚实的基础。云南省已初步形成了以中药、天然药、民族药为主,包括化学药、疫苗、保健药、中药饮片、中药种植等,集研发、生产、服务为一体的具有鲜明特色的医药产业体系。但云南省医药产业的发展现状不容乐观,与国外和国内发达地区存在明显差距,面临诸多的挑战与机遇。

关键词：云南药物研究现状优势

富马酸替诺福韦二吡呋酯体外抗寨卡病毒活性研究

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药学学报 2019年第9期54卷 1582-1587页

作者：陈秀秀罗荣华郑昌博姚债文唐秋菊熊思东郑永唐苏州大学药学院江苏苏州215021 中国科学院昆明动物研究所云南省活性多肽研究与利用重点实验室云南昆明650223 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500 苏州大学-中国科学院昆明动物研究所疾病动物模型与新药研发联合实验室江苏苏州215021

富马酸替诺福韦二吡呋酯(tenofovir disoproxil fumarate, TDF)是一种核苷类似物(nucleoside analogues),已广泛用于临床治疗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)和乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染。本研究旨在探讨TDF是否具有体外抗寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)活性。首先通过噬斑抑制实验在细胞水平检测TDF是否具有抑制ZIKV作用,随后通过实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR)实验和蛋白质印迹(Western blot)实验分别在RNA水平和蛋白水平进一步验证TDF的抗ZIKV活性,最后通过MTT实验检测TDF的细胞毒性。结果发现, TDF不仅可降低ZIKV感染细胞后噬斑形成,还可抑制ZIKV RNA复制和ZIKV NS2B蛋白的表达,其对ZIKV的半数有效浓度(50%effective concentration, EC50)为14.96~27.47μmol·L-1。阳性药物利巴韦林抑制ZIKV的EC50为56.01±12.16μmol·L-1。MTT检测结果表明, TDF和利巴韦林的细胞毒性很小,半数细胞毒浓度(50%cytotoxic concentration, CC50)均大于500μmol·L-1。通过CC50/EC50计算出TDF的治疗指数(therapeutic index, TI)大于18.20,高于阳性对照药利巴韦林。本研究表明, TDF在细胞、RNA及蛋白水平均具有很好的体外抗ZIKV活性,有望成为抗ZIKV治疗的候选药物。

关键词：富马酸替诺福韦二吡呋酯核苷类似物寨卡病毒抗病毒活性治疗

HIV-1核衣壳蛋白NCp7抑制剂体外筛选方法的建立

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中国药理学通报 2008年第1期24卷 136-139页

作者：王云华王睿睿杨柳萌李健峰徐维明郑永唐中国科学院昆明动物研究所动物模型和人类疾病机理重点实验室分子免疫药理学实验室中国医学科学院医学生物学研究所云南昆明650231

目的表达HIV-1核衣壳蛋白(nucleocapside proteinp7,NCp7),并建立抑制剂筛选方法。方法从pBRU2/ADP202质粒经PCR得到HIV-1NCp7编码序列,克隆到pet28a质粒中构建HIV-1NCp7表达载体。阳性克隆转染***21DE3,以IPTG诱导,细胞裂解液经Q SepharoseH.P和SP Sepharose H.P纯化后纯度达到90%以上。将具有锌离子逐出活性的H2O2和2,2′-联硫基二吡啶(2,2′-di-thiodipyridine,AT-2)与NCp7作用,用锌离子特异的荧光染料检测。用该方法检测KIZ-CM系列化合物。结果可以检测H2O2和AT-2的锌离子逐出活性,经该方法筛选,KIZ-CM10,18,19等化合物具有一定的锌离子逐出活性。结论在国内首次建立了HIV-1NCp7锌离子逐出方法,该方法可以用于NCp7抑制剂的筛选。

关键词： HIV-1 NCp7 表达纯化抑制剂筛选

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抗人类免疫缺陷病毒药物的研究进展

大自然探索 1998年第4期17卷 80-86页

作者：郑永唐贲昆龙中国科学院昆明动物研究所

ＨＩＶ复制周期的每一步骤均可成为抗ＨＩＶ药物的靶点。逆转录酶、蛋白酶和整合酶的抑制剂一直是抗ＨＩＶ药物的研究重点和热点。作用于不同靶点的抗ＨＩＶ药物的联合治疗取得了重大突破，对减少ＨＩＶ引起的发病率和死亡率起了主要作... 详细信息

ＨＩＶ复制周期的每一步骤均可成为抗ＨＩＶ药物的靶点。逆转录酶、蛋白酶和整合酶的抑制剂一直是抗ＨＩＶ药物的研究重点和热点。作用于不同靶点的抗ＨＩＶ药物的联合治疗取得了重大突破，对减少ＨＩＶ引起的发病率和死亡率起了主要作用，为治愈ＡＩＤＳ带来了希望。从天然资源中寻找新的抗ＡＩＤＳ药物或先导化合物的研究，是当前国内外新药创制中重要的研究方向和非常活跃的领域，至少已发现近百种天然化合物具有抗ＨＩＶ的活性。

关键词：艾滋病 HIV 抗病毒药物天然化合物

酒花查尔酮体外抗HIV-1活性及机制的进一步研究

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酒花查尔酮体外抗HIV-1活性及机制的进一步研究

利用假病毒技术研究抗HIV-1药物的作用机制

中华中医药学会防治艾滋病学术研讨会暨2006年年会

作者：张高红刘吉开郑永唐中国科学院昆明动物研究所动物模型和人类疾病机理重点实验室分子免疫药理学实验室中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室

酒花查尔酮(Xanthohumol)是一个从啤酒花Humulus lupulus中分离出来的具有多种生物活性的天然产物,属于黄酮类异戊二烯查尔酮。酒花查尔酮具有体外抑制人乳腺癌,结肠癌和卵巢癌细胞系的细胞增殖的活性。此外,酒花查尔酮还具有抗氧化活性... 详细信息

酒花查尔酮(Xanthohumol)是一个从啤酒花Humulus lupulus中分离出来的具有多种生物活性的天然产物,属于黄酮类异戊二烯查尔酮。酒花查尔酮具有体外抑制人乳腺癌,结肠癌和卵巢癌细胞系的细胞增殖的活性。此外,酒花查尔酮还具有抗氧化活性,能够抑制低密度脂蛋白(LDL)的氧化。王茜等研究了酒花查尔酮的抗HIV-1活性并对其抗HIV-1的作用机制进行了初步探讨。

关键词： HIV 艾滋病抗病毒啤酒花酒花查尔酮

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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微生物学通报 2011年第10期38卷 1507-1517页

作者：李艳丽郑永唐肖伟烈孙汉董王嵬刘利新中国科学院研究生院生命科学学院北京100049 中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室云南昆明650223 中科院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室云南昆明650204

采用假病毒系统对5种具有抗HIV-1活性的天然化合物的作用机制进行研究,建立了一种可在普通实验室进行抗HIV-1作用机理研究的实验平台。通过构建假病毒系统,利用定量PCR实验分析感染细胞内病毒生命周期早期的特异性DNA产物,发现5种化合... 详细信息

采用假病毒系统对5种具有抗HIV-1活性的天然化合物的作用机制进行研究,建立了一种可在普通实验室进行抗HIV-1作用机理研究的实验平台。通过构建假病毒系统,利用定量PCR实验分析感染细胞内病毒生命周期早期的特异性DNA产物,发现5种化合物可通过不同的作用机制在早期抑制HIV-1复制。部分化合物表现出新的作用机制,如LC-1、LC-2可抑制HIV-1的入核。通过分析药物对2种不同的逆转录病毒(HIV-1和MLV)的感染性,发现LC-1可特异地阻断HIV-1的复制,而对MLV无影响。同时为了检测药物是否也会在病毒的生命周期晚期有作用,利用直接转染前病毒质粒的方式进行了验证。利用以上方法,初步确定了这几种药物的作用靶点,构建了一个有效的抗HIV-1药物作用机理的研究平台。

关键词：假病毒系统 HIV-1 入核病毒特异性

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阿兹夫定体外抗登革病毒活性研究

药学学报 2018年第6期53卷 944-949页

作者：张春涛罗荣华陈欢刘光明常俊标杨柳萌郑永唐大理大学药学与化学学院云南大理671000 中国科学院昆明动物研究所云南省活性多肽研究与利用重点实验室/中国科学院动物模型与人类疾病重点实验室云南昆明650223 河南师范大学河南新乡453007

本文通过检测化合物对登革Ⅱ型重组病毒(DENV-ⅡLuc+)表达海肾荧光素酶活性的影响,进行化合物筛选,发现阿兹夫定(azvudine,FNC)、盐酸阿兹夫定(hydrochloride salt of azvudine,FNC-HCl)和三磷酸酯阿兹夫定(triphosphate azvudine,FNC-TP)能够抑制DENV-ⅡLuc+的复制,并研究其体外抗登革病毒(dengue virus,DENV)活性。首先通过噬斑法检测FNC、FNC-HCl和FNC-TP对DENV的抑制活性;并通过蛋白印迹实验检测3种化合物对DENV-Ⅱ囊膜蛋白E(envelope protein E)表达的影响,最后通过实时定量PCR检测化合物对DENV-Ⅱ病毒RNA的抑制作用。结果显示,FNC、FNC-HCl和FNC-TP抑制DENV复制的半数有效浓度(EC50)在0.54~25.42μmol·L^(-1)之间,阳性药物利巴韦林抑制DENV-Ⅱ的EC50为40.78±1.02μmol·L^(-1)。蛋白印迹实验及定量结果显示,3种化合物均能抑制DENV-Ⅱ囊膜蛋白E的表达,并且显著地抑制DENV-Ⅱ病毒RNA的复制。通过MTT法检测发现FNC、FNC-HCl和FNC-TP的细胞毒性很小,半数细胞毒性浓度(CC50)均大于3 000.00μmol·L^(-1)。本研究表明FNC、FNC-HCl和FNC-TP在细胞水平、蛋白水平及RNA水平均能抑制DENV的复制,且抑制作用优于利巴韦林,有望成为抗登革病毒的候选药物。

关键词：阿兹夫定登革病毒抗病毒活性体外

高等级生物安全实验室标识系统设计设置方法探讨

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实验室研究与探索 2018年第10期37卷 301-304,309页

作者：韩建保李明华冯小丽杨丽梅郑永唐中国科学院昆明动物研究所生物安全三级实验室昆明650223 国家昆明高等级生物安全灵长类动物实验中心昆明650107 中国科学院昆明动物研究所条件保障处昆明650223 中国科学院昆明动物研究所中国科学院动物模型与人类疾病机理重点实验室昆明650223

针对生物安全实验室标识系统建设不够完善的现状,结合生物安全实验室建设的特点和标识系统建设的经验,探讨最有效、最直接、最形象的标识系统设计设置的方法和手段。通过建立良好的全方位的标识系统,在安全、醒目、便利、协调的原则和... 详细信息

针对生物安全实验室标识系统建设不够完善的现状,结合生物安全实验室建设的特点和标识系统建设的经验,探讨最有效、最直接、最形象的标识系统设计设置的方法和手段。通过建立良好的全方位的标识系统,在安全、醒目、便利、协调的原则和一致性和秩序性的指导下,符合审美,材料安全环保的标识和标识系统可以很好地降低生物安全事故发生的几率。通过规范化、人性化、简洁化的标识系统可以很好完善安全管理体系,不仅实现了"安全第一,预防为主"的原则,而且可以在最大程度上避免高等级生物安全实验室安全事故的发生,为高等级生物安全实验室的安全管理保驾护航,保障实验室在科研、研发、教学等各项事业上快速发展。

关键词：生物安全实验室生物危害标识标识系统

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云南省HIV-1分子流行病学研究进展

皮肤病与性病 2010年第1期32卷 20-23页

作者：周衍衡庞伟郑永唐中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室昆明650223 中国科学院研究生院北京100049

云南省是中国HIV-1感染最早和最为严重的地区之一,流行的HIV-1病毒亚型种类复杂多样。已有证据表明国内其它地区的HIV-1亚型很可能主要来源于云南省。本文对云南省的HIV-1亚型的流行情况进行综述,希望能为预防控制云南省乃至全国HIV-1... 详细信息

云南省是中国HIV-1感染最早和最为严重的地区之一,流行的HIV-1病毒亚型种类复杂多样。已有证据表明国内其它地区的HIV-1亚型很可能主要来源于云南省。本文对云南省的HIV-1亚型的流行情况进行综述,希望能为预防控制云南省乃至全国HIV-1的流行以及合理设计HIV-1疫苗提供基础信息。

关键词：云南 HIV-1 分子流行病学