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作者：郑武燕成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:随着现代医学的不断进步与发展,临床癌症治疗从传统的手术治疗和放化疗,发展到现今的生物治疗。后者包括生物大分子靶向药物治疗与免疫细胞治疗,如工程化T细胞受体T细胞(T cell receptor engineered-T cell,TCR-T)治疗和工程化嵌... 详细信息

目的:随着现代医学的不断进步与发展,临床癌症治疗从传统的手术治疗和放化疗,发展到现今的生物治疗。后者包括生物大分子靶向药物治疗与免疫细胞治疗,如工程化T细胞受体T细胞(T cell receptor engineered-T cell,TCR-T)治疗和工程化嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor engineered T-cell,CAR-T)治疗等免疫细胞治疗。免疫细胞治疗因其瞩目的临床试验疗效被认为是最有希望攻克癌症的治疗方式。这些细胞治疗都是体外对T细胞进行基因改造,以提高T细胞的抗原识别和杀伤能力。回输的T细胞数量、活力及亚群比例对于细胞治疗疗效密切相关。因此,探索T细胞体外分离、激活与扩增的方式是细胞免疫治疗的关键。环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)是中药黄芪的主要皂苷成分,被认为具有免疫调节、抗炎、抗氧化的作用,是中药提取化合物中现今唯一发现的端粒酶激活剂。本实验利用不同浓度的CAG联合细胞因子诱导培养脐带血来源T细胞,利用多色流式细胞技术检测T细胞的增殖倍数和细胞表型的变化,以观察不同浓度的CAG对脐带血来源的T细胞扩增的影响,为以T细胞为基础的细胞免疫疗法提供新的培养方案,奠定实验基础。研究方法:1.理论研究:通过文献查阅和梳理,探讨T细胞免疫学特性及T细胞在免疫细胞治疗中的研究进展,从环黄芪醇的现代药理研究为基础,探究环黄芪醇在体外对T细胞扩增和细胞表型的影响。2.实验研究:2.1 T细胞体外培养条件摸索:以CD3/CD28抗体偶联磁珠与T细胞比例分别为1:2、1:1、2:1、3:1的磁珠分别活化来源于外周血或脐带血的T细胞,利用含5ng/ml IL-7和5ng/ml IL-15的RPMI 1640完全培养基连续培养T细胞7天。利用多色流式技术检测T细胞扩增和细胞表型变化情况,统计分析得出最佳的外周血和脐带血来源的T细胞活化条件。以CD3/CD28抗体偶联磁珠与T细胞比例为1:1的磁珠分别活化来来源于外周血或脐带血的T细胞,分别置于IL-2(50 IU/ml)、IL-7(5 ng/ml)、IL-15(5 ng/ml)、IL-7(5 ng/ml)和IL-15(5 ng/ml)联用组的RPMI 1640完全培养基连续培养7天。利用多色流式技术检测T细胞扩增和细胞表型变化情况,统计分析得出最佳的外周血和脐带血来源的T细胞培养细胞因子条件。以相同冻存体积1ml,不同T细胞冻存密度(1E7/ml、2E6/ml、5E5/ml)分别冻存外周血和脐带血来源的T细胞,统计分析得出T细胞的最佳冻存密度。以相同冻存密度2E6/ml,不同T细胞冻存体积(1ml、0.5ml、0.2ml)分别冻存外周血和脐带血来源的T细胞,统计分析得出T细胞的最佳冻存体积。2.2不同浓度CAG联合细胞因子体外扩增脐带血来源T细胞:脐带血来源T细胞在CD3/CD28抗体偶联磁珠与CD3T细胞比例为3:1、RPMI 1640完全培养基(含5ng/ml IL-7和5ng/ml IL-15)的培养条件下,以0、0.04、0.2、1、5μM不同浓度CAG联合IL-7和IL-15为实验组,和DMSO对照组连续培养T细胞11天,利用多色流式技术检测T细胞扩增和细胞表型变化情况,用GraphPad Prism 6.0进行数据统计分析。结果:2.1 T细胞体外培养条件摸索结果:来源不同的T细胞最佳的活化条件不同,外周血来源的T细胞经磁珠比1:2的磁珠活化后,连续培养7天的T细胞累积增殖倍数最高,提示外周血来源T细胞的最佳磁珠/细胞活化比例为1:2;脐带血来源的T细胞经磁珠比3:1的磁珠活化后,连续培养7天的T细胞累积增殖倍数最高,提示脐带血来源T细胞的最佳磁珠/细胞活化比例为3:1。不同细胞因子培养T细胞的实验中,外周血和脐带血来源的T细胞利用细胞因子IL-7和IL-15联用连续培养T细胞7天,不仅可以促进T细胞增殖,又可以保持较高的T细胞亚群,优于其他细胞因子的培养条件。T细胞冻存条件实验:外周血来源的T细胞的最佳冻存密度为1E7/ml,最佳细胞冻存体积为1ml。脐带血来源的T细胞的最佳冻存密度为1E7/ml,最佳细胞冻存体积为0.5ml。2.2不同浓度CAG联合细胞因子体外扩增脐带血来源T细胞结果:利用磁珠比例3:1活化脐带血来源的T细胞后,浓度为0.2、1μM的CAG与细胞因子IL-7和IL-15联用组促T细胞扩增作用显著高于单独使用细胞因子IL-7和IL-15联用组,且可以促进CD8T中T的CD197CD45RA细胞表型的表达,即维持CD8T中高比例的T亚群。5μM CAG组与DMSO对照组相比差异不显著,提示高浓度CAG并无促T细胞增殖作用。结论:低浓度CAG联合IL-7和IL-15可以显著提高IL-7和IL-

关键词：环黄芪醇 T细胞 TSCM 体外扩增

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针灸疗法治疗类风湿关节炎的研究进展

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中国疗养医学 2021年第2期30卷 136-138页

作者：张政蒙兴文张世俊郑武燕成都风湿医院风湿科 610072 四川省第二中医医院风湿科 610014

类风湿关节炎(rheumatoicl arthritis,RA)是以慢性对称性多关节炎为主要表现的一种全身性疾病。临床针对RA不局限传统的药物治疗,常配合外科手术、中医汤剂、针灸、传统藏药等综合治疗。其中,针灸治疗属于传统中医疗法,临床结合患者的... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoicl arthritis,RA)是以慢性对称性多关节炎为主要表现的一种全身性疾病。临床针对RA不局限传统的药物治疗,常配合外科手术、中医汤剂、针灸、传统藏药等综合治疗。其中,针灸治疗属于传统中医疗法,临床结合患者的中医体质,选择合适针灸方式和配穴,可缓解RA患者的临床症状。本文就目前研究浅谈针灸疗法治疗RA的应用价值及相关作用机制。

关键词：类风湿关节炎针灸温针艾灸

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高频联合三维超声对半月板损伤的诊断价值

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当代医学 2021年第10期27卷 34-36页

作者：王磊谭巍崔光香郑武燕成都风湿医院医技科四川成都610072

目的回顾性分析膝关节半月板损伤患者的高频及三维超声声像图特点,探讨高频联合三维超声对于半月板损伤的诊断价值。方法本研究回顾性分析2019年1月至2019年11月本院行膝关节高频及三维重建超声检查并经关节镜或手术确诊的46例半月板损... 详细信息

目的回顾性分析膝关节半月板损伤患者的高频及三维超声声像图特点,探讨高频联合三维超声对于半月板损伤的诊断价值。方法本研究回顾性分析2019年1月至2019年11月本院行膝关节高频及三维重建超声检查并经关节镜或手术确诊的46例半月板损伤患者的临床资料,行高频及三维超声检查,包括病变区域位置、范围及损伤程度,比较高频及三维超声的诊断效能。结果高频联合三维超声诊断半月板损伤46例,诊断准确率为88.5%;高频频联合三维超声诊断半月板撕裂的敏感度为95.8%,特异度为75.0%,准确度为92.3%。结论高频联合三维超声检查可明显提高超声诊断准确率,更直观了解半月板损伤的部位和程度,能为临床治疗方案的选择和疗效评估提供重要的参考依据。

关键词：半月板损伤高频超声三维超声

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经方二妙散治疗类风湿性关节炎的应用综述

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山西医药杂志 2021年第1期50卷 38-39页

作者：蒙兴文张政赵德军郑武燕郭玉翠成都风湿医院风湿科 610072 成都风湿医院科教部 610072

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA),是一种自身免疫病,主要的临床表现是对称性、慢性、进行性多关节炎,如诊断、治疗不及时,具有较高的致残性,致残的原因主要由RA的病理表现所导致,即关节的滑膜炎以及关节内形成血管翳,然后不断侵... 详细信息

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA),是一种自身免疫病,主要的临床表现是对称性、慢性、进行性多关节炎,如诊断、治疗不及时,具有较高的致残性,致残的原因主要由RA的病理表现所导致,即关节的滑膜炎以及关节内形成血管翳,然后不断侵袭关节处的软骨和骨,导致其被破坏,从而导致关节的畸形融合,最终功能丧失,失去劳动能力而致残[1]。在治疗RA的最新策略中,早期及时准确确诊RA,及时应用改善病情抗风湿药,在治疗RA及预防关节融合、残疾改变的过程中,是非常重要的。

关键词：多关节炎关节融合类风湿性关节炎致残性二妙散类风湿关节炎自身免疫病血管翳

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痛风继发阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者潜在发病机制及生物标记、亚型的研究进展

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中国医学创新 2021年第5期18卷 180-184页

作者：陈建春周攀谭巍郑武燕成都风湿医院四川成都610072

近年来,已有针对痛风继发阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea,OSA)患者的诊断、发病率的调查研究,显示痛风与OSA具有相关性,但二者共同发病的危险因素、关联程度和发展机制尚不清楚。临床若对这两种疾病进行单独治疗,用... 详细信息

近年来,已有针对痛风继发阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(obstructive sleep apnea,OSA)患者的诊断、发病率的调查研究,显示痛风与OSA具有相关性,但二者共同发病的危险因素、关联程度和发展机制尚不清楚。临床若对这两种疾病进行单独治疗,用药种类会增多,药物产生副作用的风险增加,造成临床治疗效果不佳。提示临床治疗痛风合并OSA患者应综合考虑制定合理治疗策略。另外,最新的研究发现对痛风合并OSA患者调查不连贯性和不均一性,可将此类患者分为不同的亚型进行调查。本文对痛风合并OSA疾病发生和发展机制、亚型的最新研究进展进行综述。

关键词：痛风阻塞性睡眠呼吸暂停综合征发病机制生物标记

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甲襞微循环检测在类风湿性关节炎中的应用

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四川生理科学杂志 2021年第5期43卷 898-900页

作者：程本维徐学成陈亚涛郑武燕董富康郑州痛风风湿病医院门诊部河南郑州450000 郑州痛风风湿病医院科教部河南郑州450000 成都风湿医院科教部四川成都610072

甲襞微循环检测是一种非侵入性的、便于操作的微循环形态学检查方法,可以直观显示微循环灌流状况以及微血管损伤情况,因而广泛应用于多种风湿性疾病如雷诺病、系统性硬化症、系统性红斑狼疮以及心脑血管病、糖尿病等的诊治过程。通过观... 详细信息

甲襞微循环检测是一种非侵入性的、便于操作的微循环形态学检查方法,可以直观显示微循环灌流状况以及微血管损伤情况,因而广泛应用于多种风湿性疾病如雷诺病、系统性硬化症、系统性红斑狼疮以及心脑血管病、糖尿病等的诊治过程。通过观察甲襞微循环形态、流态和袢周三个方面指标,可以对类风湿性关节炎进行早期预测以及疗效判断。本文就甲襞微循环检测在类风湿性关节炎中的应用进行综述。

关键词：甲襞微循环类风湿性关节炎风湿病

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超短波治疗膝骨关节炎的综述

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按摩与康复医学 2021年第8期12卷 17-19,22页

作者：张政蒙兴文郭以川郑武燕郭玉翠成都风湿医院四川成都610000

超短波从20世纪50年代引入中国后,目前在临床上运用越来越广泛,尤其在膝骨关节炎的治疗中取得了较好效果。本文通过总结超短波治疗膝骨关节炎的进展,以期未来在临床治疗膝骨关节炎时可以提供新的治疗方案,并提供有力的证据支持。

关键词：膝骨关节炎超短波综述

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银屑病关节炎误诊1例报告

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医学食疗与健康 2021年第3期19卷 199-200页

作者：张政蒙兴文郭以川郑武燕郭玉翠成都风湿医院成都610000

本文旨在对临床中遇到的1例误诊的银屑病关节炎进行报道,分析银屑病关节炎误诊原因,加强对该疾病的认识,探讨误诊的原因,减少以后同临床误诊事件的发生。

关键词：银屑病关节炎类风湿性关节炎误诊

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体重因素对类风湿关节炎影响的研究进展

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按摩与康复医学 2021年第4期12卷 65-67页

作者：张政蒙兴文钟小凤郑武燕成都风湿医院四川成都610072

随着人们生活水平的提高,人们越来越关注体重对健康的影响。肥胖和体重过轻都是困扰现代人生活常见的机体状态,是多种疾病的诱发因素。流行病学研究表明,类风湿关节炎的发病、治疗和预后可能与肥胖、体重过轻有关。目前研究关于肥胖、... 详细信息

随着人们生活水平的提高,人们越来越关注体重对健康的影响。肥胖和体重过轻都是困扰现代人生活常见的机体状态,是多种疾病的诱发因素。流行病学研究表明,类风湿关节炎的发病、治疗和预后可能与肥胖、体重过轻有关。目前研究关于肥胖、体重过轻是如何影响类风湿关节炎发病、诊断、治疗和预后的机制尚无定论,本文将对此进行综述,以便为临床提供参考。

关键词：类风湿关节炎肥胖体重过轻

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环黄芪醇联合IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增的影响

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免疫学杂志 2019年第11期35卷 965-971页

作者：郑武燕冉文萍家婷赵日曹倩刘佳慧邓彩云郑雅文陈巧段曦李华成都中医药大学基础医学院 610072 西部战区总医院肿瘤科成都610083 成都医学院第一附属医院妇产科 610500 西南交通大学基础医学院成都610031 成都医学院基础医学院 610500

目的探究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)联合细胞因子IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增和CD8^+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(stem cell-like central memory T cells,TSCM)比例的影响,为基于T细胞的肿瘤细胞免疫治疗研究奠定... 详细信息

目的探究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)联合细胞因子IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增和CD8^+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(stem cell-like central memory T cells,TSCM)比例的影响,为基于T细胞的肿瘤细胞免疫治疗研究奠定实验基础。方法采集健康产妇脐带血,通过密度梯度离心法分离获得脐带血单个核细胞(umbilical cord blood mononuclear cells,UCBMC),利用CD3/CD28抗体偶联磁珠刺激活化后,采用不同浓度的CAG(0、0.04、0.2、1、5μmol/L)联合IL-7和IL-15连续培养,利用多色流式细胞术分别测定T细胞的增殖程度以及CD8^+T细胞中TSCM比例的变化情况。结果 0.2μmol/L CAG与IL-7和IL-15细胞因子联用组促T细胞扩增作用显著高于其他浓度CAG与细胞因子IL-7和IL-15联用组或单独使用细胞因子IL-7和IL-15组。同时,0.2μmol/L CAG联用IL-7和IL-15组还可以促进CD8^+T中CD197^+CD45RA+细胞表型的表达,即维持CD8^+T中高比例的TSCM亚群。结论 0.2μmol/L CAG联合IL-7和IL-15可以显著提高活化T细胞扩增能力,并能保持CD8^+T细胞中高比例的TSCM亚群。

关键词：环黄芪醇 T细胞细胞扩增干细胞样中心记忆性T细胞

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