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淫羊藿苷对AD细胞模型GSK-3β表达影响及机制研究

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淫羊藿苷对AD细胞模型GSK-3β表达影响及机制研究

作者：郑桃林中南大学

学位级别：硕士

背景和目的：阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是老年人常见的一种慢性进行性神经退行性疾病。AD的主要病理学特征是脑内生成有神经毒性的p-样淀粉样蛋白（β-amyloid, Ap）, Aβ通过一系列的复杂分子病理机制导致大脑神... 详细信息

背景和目的：阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）是老年人常见的一种慢性进行性神经退行性疾病。AD的主要病理学特征是脑内生成有神经毒性的p-样淀粉样蛋白（β-amyloid, Ap）, Aβ通过一系列的复杂分子病理机制导致大脑神经元细胞变性、缺失,最终导致认知功能损害,即脑内异常沉积的A6是造成AD记忆认知损伤的始动因素,是诱发AD的中心环节。糖原合成酶激酶3β（Glycogen sunthase kinase-3p,GSK-3p）是普遍存在于真核细胞中的一种多功能丝氨酸/苏氨酸激酶,是糖原合成的关键调节酶,是为数不多的通过磷酸化而失活的蛋白激酶。GSK-3β参与机体多个细胞信号传导通路,是PI3K/Akt信号通路下游分子,其中GSK-3β过度激活时促进淀粉样前体蛋白降解产生Ap,促进神经细胞骨架蛋白tau蛋白的异常过度磷酸化,加重神经元的退行性变,干扰正常的突触可塑性,进而加速阿尔茨海默病样病理过程。研究GSK-3β的调节机制对于治疗AD至关重要,抑制GSK-3β活性的过度升高,已成为AD治疗药物的新靶点。淫羊藿苷（icariin, ICA）是小檗科淫羊藿属植物中的一种黄酮类化合物,近年来,关于淫羊藿苷在中枢神经系统的药理作用及其机制的研究日益增多,研究发现淫羊藿苷具有抗痴呆抗衰老、抗抑郁、改善缺血性脑损伤等作用。本研究基于PI3K/Akt信号通路,探讨ICA对AD细胞模型存活率及GSK-3β表达的影响,揭示出AD的部分发病机制以及ICA的作用机制,为指导临床应用和开发新药提供理论和实验依据。方法：以Aβ25-35孵育PC12细胞制备的AD细胞模型为对象,分为5组,分别为正常对照组、Aβ组、Aβ+ICA组、Ap+LY组、Ap+LY+ICA组（LY为PI3K/Akt信号通路的经典抑制剂）,MTT法检测各组细胞的存活率,Western-Blot法检测各组的Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3p的表达。结果：（1）MTT法检测显示,与正常对照组比较,Aβ孵育后PC12细胞模型组的存活率明显下降,差异有显著性（P＜0.01）;与Aβ组相比,加入ICA干预后细胞存活率明显增加,差异有显著性（P＜0.01）;与ICA组相比,ICA+LY组细胞存活率明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2） Western-Blot法检测显示,与正常对照组相比,Aβ组的p-Akt水平、P-GSK-3β水平明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。与Aβ组相比,ICA组的p-Akt水平、P-GSK-3β水平明显增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。与ICA组相比,ICA+LY组p-Akt水平、P-GSK-3β水平明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：（1）经Aβ25-35诱导的PC12细胞其细胞存活率明显下降,ICA可明显提高Aβ25-35诱导的PC12细胞存活率。（2）经PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002作用后,ICA提高PC12细胞存活率的作用被明显抑制。提示ICA可能通过PI3K/Akt信号通路发挥保护作用。（3）Aβ25-35能明显下调PC12细胞中p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达水平,而ICA干预后能上调上述蛋白的表达,发挥保护作用。（4）经PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002作用后,ICA上调上述蛋白表达的作用被抑制,提示ICA可能通过PI3K/Akt信号通路,上调p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达,发挥其保护作用。

关键词：淫羊藿苷阿尔茨海默病糖原合成酶激酶3β PI3K/Akt信号通路蛋白激酶B（Akt）

淫羊藿苷对阿尔茨海默病细胞模型糖原合成酶激酶-3β表达的影响及机制

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中国老年学杂志 2016年第4期36卷 800-803页

作者：郑桃林王哲刘超何伟解放军第163医院神经内科湖南长沙410003 中南大学湘雅二医院中医科

目的研究淫羊藿苷（ICA）对阿尔茨海默病（AD）细胞模型糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）表达的影响及机制。方法以Aβ25~35孵育PC12细胞制备的AD细胞模型为研究对象,分为对照组、β-淀粉样蛋白（Aβ）组、ICA组、PI3K/Akt信号通路的经典... 详细信息

目的研究淫羊藿苷（ICA）对阿尔茨海默病（AD）细胞模型糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）表达的影响及机制。方法以Aβ25~35孵育PC12细胞制备的AD细胞模型为研究对象,分为对照组、β-淀粉样蛋白（Aβ）组、ICA组、PI3K/Akt信号通路的经典抑制剂（LY）组、ICA＋LY组,Western印迹法检测各组的蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3β的表达。结果与对照组相比,Aβ组的p-Akt水平、p-GSK-3β水平明显下降（P〈0.01）。与Aβ组相比,ICA组的p-Akt水平、p-GSK-3β水平明显增高（P〈0.01）。与ICA组相比,ICA＋LY组p-Akt水平、p-GSK-3β水平明显下降（P〈0.01）。结论 ICA可能通过PI3K/Akt信号通路,上调p-Akt、p-GSK-3β蛋白表达,发挥其保护作用。

关键词：淫羊藿苷阿尔茨海默病糖原合成酶激酶3β PI3K/Akt信号通路蛋白激酶B(Akt)

沙库巴曲缬沙坦片对高龄慢性心力衰竭合并抑郁患者的疗效研究

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湖南师范大学学报（医学版） 2022年第1期19卷 11-14页

作者：郑桃林刘小阳刘超罗嫩苗贾巧湖南师范大学第二附属医院联勤保障部队第九二一医院长沙410003

目的:观察沙库巴曲缬沙坦片对射血分数降低的慢性心力衰竭合并抑郁患者的研究。方法:选取2018年1月~2020年09月本院收治的射血分数降低的慢性心力衰竭合并抑郁的患者100例作为研究对象,在常规治疗的基础上按照随机数字表法将其随机分为... 详细信息

目的:观察沙库巴曲缬沙坦片对射血分数降低的慢性心力衰竭合并抑郁患者的研究。方法:选取2018年1月~2020年09月本院收治的射血分数降低的慢性心力衰竭合并抑郁的患者100例作为研究对象,在常规治疗的基础上按照随机数字表法将其随机分为两组:观察组(A组,沙库巴曲缬沙坦+黛力新)和对照组(B组,黛力新),观察24周比较两组受试者左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左心室后壁厚度(LVPW)、血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平差异,并比较两组汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分。结果:治疗后两组LVEF、LVEDD、LVESD、LVPW及NT-proBNP水平较治疗前均有改善,差异有统计学意义;A组较B组改善更明显,差异有统计学意义。治疗后两组患者HAMD评分均有改善,与治疗前比较差异有统计学意义,A组较B组改善更明显。结论:沙库巴曲缬沙坦片能更好的改善射血分数降低的慢性心力衰竭合并抑郁患者心功能及NT-proBNP水平,同时降低高敏C反应蛋白水平,进而提高患者日常生活质量。

关键词：心力衰竭抑郁氨基末端脑钠肽前体沙库巴曲缬沙坦片

颈-股脉搏波速度与居家老人血清高分子量脂联素的相关性

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中国动脉硬化杂志 2013年第2期21卷 165-168页

作者：刘超杜万红王艳姣郑桃林田英刘幼硕中南大学湘雅二医院老年病科湖南省长沙市410011 中国人民解放军163医院老年病科湖南省长沙市410003

目的探讨颈-股脉搏波速度(cfPWV)与居家老人血清高分子量脂联素的相关性。方法选择87例体检中心进行健康体检的居家老人。受试者的临床资料包括年龄、性别、腰围、臀围、收缩压、舒张压、肝肾功能、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三... 详细信息

目的探讨颈-股脉搏波速度(cfPWV)与居家老人血清高分子量脂联素的相关性。方法选择87例体检中心进行健康体检的居家老人。受试者的临床资料包括年龄、性别、腰围、臀围、收缩压、舒张压、肝肾功能、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、甘油三酯、总胆固醇、空腹血糖、餐后2 h血糖、空腹C肽、空腹胰岛素、血清总脂联素及高分子量脂联素、cfPWV。同时计算体质指数。按照cfPWV=9 m/s为界分为两组,cfPWV0.05)。多元回归分析显示血清高分子量脂联素、总脂联素、高密度脂蛋白与cfPWV呈负相关(OR^=0.011,0.019,0.125;P=0.011,0.012,0.015),收缩压与cfPWV呈正相关(OR^=1.046,P=0.045)。结论血清高分子量脂联素和总脂联素高水平可能是动脉硬化保护因素。

关键词：颈-股脉搏波速度高分子量脂联素动脉硬化

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老年性痴呆的诊治研究进展

卒中与神经疾病 2013年第2期20卷 123-126页

作者：郑桃林王哲中南大学湘雅二医院中医科长沙410000

老年性痴呆又称阿尔茨海默氏病（Alzheimer’SDisease，AD），是由德国精神病和神经病理学家Alzheimer于1906年首先报道，是一种与高龄有关的智能障碍性疾病，以神经炎性斑（又称老年斑，senileplaque，SP）、神经元纤维缠结（neu—rofi... 详细信息

老年性痴呆又称阿尔茨海默氏病（Alzheimer’SDisease，AD），是由德国精神病和神经病理学家Alzheimer于1906年首先报道，是一种与高龄有关的智能障碍性疾病，以神经炎性斑（又称老年斑，senileplaque，SP）、神经元纤维缠结（neu—rofibrillarytangles，NFTs）和脑血管淀粉样变性（CAA）为典型病理特征，其起病隐匿，认知功能逐渐受损下降，严重威胁人类健康和生存质量及影响社会发展稳定，是继肿瘤、心血管疾病、脑卒中后的第4大死亡原因，已成为65岁以上老人易患的疾病。

关键词：老年性痴呆神经元纤维缠结 Alzheimer 脑血管淀粉样变性阿尔茨海默氏病障碍性疾病诊治心血管疾病

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3种药物联合治疗糖尿病周围神经病变50例

医药导报 2012年第8期31卷 1023-1025页

作者：刘超杜万红郑桃林解放军第163医院老年病科长沙410003

目的观察α-硫辛酸、前列地尔、丹红注射液联合治疗糖尿病周围神经病变(DNP)的效果。方法将100例2型糖尿病并发DNP患者随机分成两组各50例,均严格控制饮食,适量运动,口服降糖药物或注射胰岛素控制血糖,α-硫辛酸0.6 g+0.9%氯化钠注射液2... 详细信息

目的观察α-硫辛酸、前列地尔、丹红注射液联合治疗糖尿病周围神经病变(DNP)的效果。方法将100例2型糖尿病并发DNP患者随机分成两组各50例,均严格控制饮食,适量运动,口服降糖药物或注射胰岛素控制血糖,α-硫辛酸0.6 g+0.9%氯化钠注射液250 mL静脉滴注,qd。治疗组加用前列地尔10μg静脉注射,qd;丹红注射液30 mL+0.9%氯化钠注射液250 mL静脉滴注,qd。均治疗2周。比较治疗前后密歇根症状评分及运动、感觉神经传导速度(MNCV、SNCV)。结果治疗组改善糖尿病DNP自觉症状总有效率(90.0%)显著高于对照组(64.0%)(P<0.01);两组神经传导速度均明显改善,治疗组优于对照组(P<0.01)。治疗组治疗后各症状密歇根评分均低于治疗前。对照组感觉减退、麻木症状密歇根评分低于治疗前。治疗组治疗后刺痛、烧灼感密歇根评分低于对照组,均差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后正中神经和腓神经的MNCV、SNCV均高于本组治疗前,且高于对照组治疗后,均差异有统计学意义(P<0.01)。结论α-硫辛酸、前列地尔、丹红注射液联合治疗DNP疗效显著。

关键词：前列地尔 α-硫辛酸丹红注射液糖尿病周围神经病变

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早期护理干预对妊娠期糖尿病妊娠结局的影响

大家健康(学术版) 2015年第10期 252-253页

作者：郑桃林山西省朔州市人民医院

目的:探讨与研究早期护理干预对妊娠期糖尿病孕妇妊娠结局的影响。方法:将我院收治的妊娠糖尿病孕妇纳入研究,共216例。观察组108例为接受早期护理干预的孕妇,对照组为由于孕周较大或其他原因失去早期护理干预机会的孕妇。对照组给予常... 详细信息

目的:探讨与研究早期护理干预对妊娠期糖尿病孕妇妊娠结局的影响。方法:将我院收治的妊娠糖尿病孕妇纳入研究,共216例。观察组108例为接受早期护理干预的孕妇,对照组为由于孕周较大或其他原因失去早期护理干预机会的孕妇。对照组给予常规护理干预,观察组在常规护理干预的基础上加以早期护理干预。观察并比较两组孕妇血糖控制情况及母婴结局情况。结果:观察组血糖控制情况明显优于对照组,分娩前后孕妇并发症及新生儿并发症情况低于对照组,以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:对妊娠糖尿病孕妇提供早期护理干预,可提高孕妇对血糖的控制效果,同时减少孕妇及新生儿不良结局的产生,值得临床推广使用。

关键词：妊娠期糖尿病早期护理干预分娩结局

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经阴道全子宫切除术的围术期护理

基层医学论坛 2014年第21期18卷 2763-2764页

作者：郑桃林朔州市朔城区人民医院山西朔州036002

目的探讨围术期综合护理对经阴道全子宫切除手术患者的护理效果。方法将60例患者随机分为观察组和对照组各30例,对照组患者采用常规护理方法,观察组患者在此基础上加强对围术期的综合护理。结果 2组患者治疗前后焦虑情绪和抑郁情绪的发... 详细信息

目的探讨围术期综合护理对经阴道全子宫切除手术患者的护理效果。方法将60例患者随机分为观察组和对照组各30例,对照组患者采用常规护理方法,观察组患者在此基础上加强对围术期的综合护理。结果 2组患者治疗前后焦虑情绪和抑郁情绪的发生率无显著差异(P>0.05),治疗后观察组患者并发症的发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论围术期综合护理对于改善和提高经阴道全子宫切除手术患者的心理不良情绪及降低并发症有较好效果,从而可提高患者的康复效果。

关键词：全子宫切除经阴道术式围术期护理

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Rho激酶与蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛

卒中与神经疾病 2011年第2期18卷 125-127页

作者：郑桃林何伟王桂斌湖南长沙市解放军163医院内三科 410003

脑血管痉挛（CVS）是蛛网膜下腔出血（SAH）最严重的并发症之一,其发生率高达30%~90%,是SAH患者致死致残的主要原因。1951年Ecker及Rei menschneider首先利用造影证明了脑血管痉挛现象的存在,并作了详细的描述,但CVS的发病机制仍未完全... 详细信息

脑血管痉挛（CVS）是蛛网膜下腔出血（SAH）最严重的并发症之一,其发生率高达30%~90%,是SAH患者致死致残的主要原因。1951年Ecker及Rei menschneider首先利用造影证明了脑血管痉挛现象的存在,并作了详细的描述,但CVS的发病机制仍未完全阐明,仍存在很多令人难以理解和亟待解决的问题。但有关Rho激酶通路在CVS发生中的作用研究取得了一些进展。

关键词：蛛网膜下腔出血脑血管痉挛 Rho激酶发病机制文献综述 CVS 并发症发生率