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TGF-β对体外培养人胚视网膜色素上皮细胞的影响

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眼科研究 2007年第1期25卷 14-17页

作者：郑晓汾褚仁远山西省眼科医院太原030002 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院上海200031

目的研究转化生长因子-β(TGF-β)对体外培养人胚视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响,从细胞生物学水平和分子生物学水平探讨近视眼的发病机制。方法外源性TGF-β刺激人RPE细胞后,通过绘制生长曲线、MTT法检测细胞活性及观察透射电镜研究其... 详细信息

目的研究转化生长因子-β(TGF-β)对体外培养人胚视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响,从细胞生物学水平和分子生物学水平探讨近视眼的发病机制。方法外源性TGF-β刺激人RPE细胞后,通过绘制生长曲线、MTT法检测细胞活性及观察透射电镜研究其细胞自身的生长情况;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定其分泌HGF、bFGF和TGF-β的量;采用RT-PCR法检测其细胞表达HGF的情况,从而分析外源性TGF-β对体外培养的RPE细胞的影响。结果不同质量浓度的TGF-β均可抑制人胚RPE细胞的生长,随时间的延长作用更加明显;TGF-β可使RPE细胞超微结构发生变化;ELISA结果显示TGF-β对其他两种因子的分泌均有抑制作用,但对自身有促进作用,为正反馈调节;同时可明显抑制RPE细胞内HGF的表达。结论TGF-β可影响RPE细胞增生、改变超微结构及抑制HGF的表达。

关键词：转化生长因子-β 近视眼视网膜色素上皮

胸腺基质淋巴细胞生成素和白细胞介素-4在变应性结膜炎鼠模型中的促炎作用

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中华实验眼科杂志 2017年第9期35卷 811-815页

作者：宁婵慧郑晓汾李冰山西省眼科医院太原030002

背景研究表明胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）为类白细胞介素（IL）-17的炎性细胞因子，在多种变应性疾病的发生和发展中发挥关键作用，但是尚未见到关于TSLP是否参与中国常见变应原诱导的变应性结膜炎的报道。目的研究TSLP和IL-4在由... 详细信息

背景研究表明胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）为类白细胞介素（IL）-17的炎性细胞因子，在多种变应性疾病的发生和发展中发挥关键作用，但是尚未见到关于TSLP是否参与中国常见变应原诱导的变应性结膜炎的报道。目的研究TSLP和IL-4在由中国常见的黄花蒿诱导的变应性结膜炎小鼠模型眼表组织和颈部淋巴结中的表达变化，探讨TSLP和IL-4在变应性结膜炎发病中的作用。方法采用随机数字表法将6-8周龄雌性BALB／c小鼠20只随机分为正常对照组和模型组。将400μl黄花蒿花粉提取液溶解于400μl变应原（抗原）溶媒中制备成抗原溶液，将50μl抗原溶液注射于模型组小鼠足底皮垫下初次致敏，于注射后第10-12天用黄花蒿花粉提取液局部点右眼再次致敏，每日点眼1次；正常对照组小鼠未做任何处理。于造模后第13天采用颈椎脱臼法处死小鼠并摘取眼球，在眼科显微镜下各组分别取16只小鼠32只眼角膜上皮、结膜和颈部淋巴结组织，采用实时定量PCR法检测各种靶组织中TSLP mRNA及IL-4 mRNA的相对表达量，另每组各取4只小鼠8只眼眼睑及眼球制备石蜡切片，采用免疫组织化学法检测角膜、结膜及结膜下组织中TSLP和IL-4蛋白的表达。结果模型组小鼠第2次致敏后0．5h可见小鼠眼睑水肿、结膜充血水肿、溢泪、搔抓眼睑等症状，症状持续6-24h，造模成功率为80％。实时定量PCR结果显示，模型组与正常对照组小鼠角膜上皮均未发现IL-4表达。模型组小鼠角膜上皮、结膜组织和颈部淋巴结组织中TSLP mRNA表达量分别是正常对照组的（1．63±0．20）、（2．71±0．48）和（1．48±0．05）倍，差异均有统计学意义（t=4．44、14．16、5．01，均P〈0．05）；模型组小鼠结膜和颈部淋巴结中IL4mRNA表达量分别是正常对照组的（2．94±0．39）倍和（1．74±0．09）倍，差异均有统计学意义（t=9．92、14．54，均P〈0．05）。免疫组织化学法检测显示，正常对照组小鼠角膜上皮和结膜上皮细胞中TSLP蛋白表达强度微弱，模型组小鼠TSLP蛋白表达增强。模型组小鼠结膜下组织中可见IL4呈强阳性表达，正常对照组小鼠结膜下组织中未发现IL4表达。结论TSLP主要表达于变应性结膜炎小鼠的角膜、结膜和颈部淋巴结组织，提示其参与变应性结膜炎角膜和结膜的炎症反应；IL-4主要表达于变应性结膜炎小鼠结膜下组织中，提示其主要参与结膜的炎症反应，TSLP和IL-4共同参与变应性结膜炎的发生和发展过程，这2种炎症因子为变应性结膜炎的临床治疗提供了新的靶点。

关键词：变应性结膜炎/免疫变应原/不良反应胸腺基质淋巴细胞生成素白细胞介素-4 眼上皮细胞动物模型近交系BALB/c小鼠

板层角膜移植时间对角膜碱烧伤后血清特异性抗体的影响

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中华眼科杂志 2004年第3期40卷 160-164页

作者：郑晓汾冯克孝李冰杨纪忠葛京京山西省眼科医院

目的　通过动物角膜碱烧伤模型 ,观察烧伤后不同时期和烧伤后不同时间行板层角膜移植手术的新西兰白兔血清特异性抗体水平与组织病理的变化。方法　新西兰白兔 2 0只 ,制作单侧眼角膜中央部中度碱烧伤模型并完全随机分为 5组 :烧伤组、... 详细信息

目的　通过动物角膜碱烧伤模型 ,观察烧伤后不同时期和烧伤后不同时间行板层角膜移植手术的新西兰白兔血清特异性抗体水平与组织病理的变化。方法　新西兰白兔 2 0只 ,制作单侧眼角膜中央部中度碱烧伤模型并完全随机分为 5组 :烧伤组、早期移植组两组 (即 3d移植组、7d移植组 )、中晚期移植组两组 (即 2周移植组、5周移植组 )。制备正常及碱烧伤角膜蛋白提取液 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测每组兔不同时期血清抗角膜变性蛋白抗体水平 ,并取不同时期的角膜做光镜、电镜观察。结果　角膜碱烧伤后机体产生特异性抗体 ,2周时升高明显 ,5～ 6周达高峰 ,之后下降 ,8周时再次烧伤对侧眼角膜 ,抗体生成明显。早期移植组抗体升高不显著 ,而中晚期移植组抗体变化趋势与烧伤组基本相似。光、电镜结果显示 :移植组与烧伤组比较 ,上皮愈合好 ,基质纤维排列整齐 ,炎细胞浸润轻 ,新生血管少 ;早期移植组比晚期移植组恢复更好。结论　早期板层角膜移植治疗角膜碱烧伤可阻断机体针对碱烧伤后角膜变性蛋白的体液免疫反应过程。

关键词：板层角膜移植角膜碱烧伤血清特异性抗体移植时间动物模型

不同波长的光照射对视网膜色素上皮细胞生长及其分泌生长因子的影响

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中华实验眼科杂志 2011年第9期29卷 774-779页

作者：郑晓汾康玉国褚仁远山西省眼科医院太原030002 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科上海200031

背景近视的发病机制是眼科研究的一个热点，近年来发现，由神经视网膜细胞及视网膜色素上皮（RPE）细胞分泌的细胞因子可能参与近视的发病，RPE细胞因子的分泌功能受光照射的影响，而RPE细胞对不同波长光的吸光度（A）值是不一样的。目... 详细信息

背景近视的发病机制是眼科研究的一个热点，近年来发现，由神经视网膜细胞及视网膜色素上皮（RPE）细胞分泌的细胞因子可能参与近视的发病，RPE细胞因子的分泌功能受光照射的影响，而RPE细胞对不同波长光的吸光度（A）值是不一样的。目的研究不同波长的光照射对人胚RPE细胞增生及其分泌肝细胞生长因子（HGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bVGF）和转化生长因子-β（TGF—β）的影响，从细胞水平和分子生物学水平探讨近视的发病机制。方法第4～5代人胚RPE细胞置于白光、波长为775nm的红光及波长为480nm的蓝光下照射和培养48h，MTT比色法检测各组人RPE细胞的增生情况，并用透射电子显微镜观察各组传代细胞的超微结构。分别于光照射后12、24、48、72h收集培养液，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定培养基中HGF、bFGF和TGF—β的质量浓度。用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测不同波长光照射24h后RPE细胞中HGFmRNA的表达水平，分析蓝光、红光、白光照射对体外培养RPE细胞的影响。结果蓝光组、红光组、白光组和对照组RPE细胞的A490值分别为0．0218±0．0014、0．0353±0．0025、0．0371±0．0024和0．0445-0．0046。4个组中RPE细胞的增生速度明显不同，差异有统计学意义（F=12．579，P〈0．05），蓝光组和红光组A490值均明显低于对照组，差异均有统计学意义（t=2．043、t=2．024，P〈0．05）。ELISA结果显示人胚RPE细胞可以分泌HGF、bFGF和TGF-β，在受到不同波长的光照射后，不同时间点HGF、bFGF和TGF—β的分泌量不同，随着时间的变化，4个组HGF、TGF—β的质量浓度均逐渐升高，二者在72h和48h均高于12h（P〈0．05），红光组与蓝光组更为明显，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。各波长组bFGF的质量浓度随着光照时间的延长在RPE细胞中的表达均逐渐降低，72h与12h时相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，不同波长光照射后RPE细胞中HGFmRNA的表达水平不同，蓝光下培养的RPE细胞HGFmRNA表达量最少，白光组、红光组和蓝光组HGFmRNA的表达量（A490）与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。透射电子显微镜下红光组、白光组人胚RPE细胞与对照组相比超微结构均无明显变化，但蓝光组RPE细胞核染色质稀疏变淡，细胞器减少，细胞界膜不清或消失。结论不同波长的光照射可影响人RPE细胞的增生及其分泌HGF、bFGF和TGF—β的功能，提示近视的形成可能与不同波长的光相互作用有关。

关键词：近视视网膜色素上皮细胞肝细胞生长因子碱性成纤维细胞生长因子转化生长因子-β 光照射

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实验性近视的药物治疗机制

国际眼科纵览 2004年第1期29卷 64-66页

作者：郑晓汾复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科上海200031

治疗近视有多种方法 ,药物治疗多是通过视网膜及周围组织的多种神经递质、生长因子的调控发挥作用 ,可望从根本上解决近视的成因。治疗近视的药物很多 ,包括M受体拮抗剂、N受体拮抗剂、VIP。

关键词：近视/药物疗法实验性近视

共焦激光角膜显微镜在真菌性角膜炎诊断中的应用

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中国实用眼科杂志 2006年第8期24卷 839-840页

作者：王效武郑晓汾赵炬伟山西省眼科医院太原030002

目的评价共焦激光角膜显微镜在临床诊断真菌性角膜炎中的应用价值。方法用共焦激光角膜显微镜对临床拟诊为真菌性角膜炎的26例患者进行检查,同时行涂片检查真菌菌丝,对两组结果进行比较。结果26例患者中,根据病史、临床表现24例确诊为... 详细信息

目的评价共焦激光角膜显微镜在临床诊断真菌性角膜炎中的应用价值。方法用共焦激光角膜显微镜对临床拟诊为真菌性角膜炎的26例患者进行检查,同时行涂片检查真菌菌丝,对两组结果进行比较。结果26例患者中,根据病史、临床表现24例确诊为真菌性角膜炎,其中共焦激光角膜显微镜的确诊率为95.83%(23/24),角膜刮片的确诊率为83.33%(20/24)。结论共焦激光角膜显微镜是一种快速、有效、无损伤的活体检查方法,在真菌性角膜炎的早期诊断、治疗和研究中将起重要作用。

关键词：共焦激光角膜显微镜诊断角膜真菌性

佩戴角膜接触镜后角膜变化的激光共焦显微镜观察

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中国实用眼科杂志 2006年第12期24卷 1285-1288页

作者：郑晓汾李冰王效武杨纪忠赵炬伟山西省眼科医院太原030002

目的应用激光共焦显微镜对长期佩戴角膜软性接触镜的患者活体角膜的组织结构变化进行观察。方法用激光共焦显微镜对长期佩戴角膜软性接触镜的15例患者进行检查,并选择未戴角膜接触镜者11例进行对照,对两组结果进行比较。结果1.佩戴角膜... 详细信息

目的应用激光共焦显微镜对长期佩戴角膜软性接触镜的患者活体角膜的组织结构变化进行观察。方法用激光共焦显微镜对长期佩戴角膜软性接触镜的15例患者进行检查,并选择未戴角膜接触镜者11例进行对照,对两组结果进行比较。结果1.佩戴角膜软性接触镜组与对照组相比,基底上皮细胞密度减少,为3705.00±447.62个/mm2(P0.05),但曲折度增加,有分支出现(P<0.05)。结论佩戴角膜软性接触镜,角膜组织可发生一系列改变,激光共焦显微镜与传统光学共焦显微镜相比,图象清晰,深度定位准确,在疾病的早期诊断、治疗和研究中将起重要作用。

关键词：角膜软性接触镜激光共焦显微镜

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医院革兰阳性球菌的耐药性分析

中华医院感染学杂志 2011年第2期21卷 382-383页

作者：康玉国张云琴郑晓汾山西省眼科医院检验科山西太原030002

目的分析山西省眼科医院临床分离的革兰阳性球菌感染情况和耐药特征,为临床用药提供依据。方法收集医院2009年5月-2010年6月医院患者眼部标本分离培养、药物敏感试验。结果在177株感染阳性菌中,表皮葡萄球菌最多,耐甲氧西林表皮葡萄球菌... 详细信息

目的分析山西省眼科医院临床分离的革兰阳性球菌感染情况和耐药特征,为临床用药提供依据。方法收集医院2009年5月-2010年6月医院患者眼部标本分离培养、药物敏感试验。结果在177株感染阳性菌中,表皮葡萄球菌最多,耐甲氧西林表皮葡萄球菌为70.37%;对常用抗菌药耐药率很高,替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺对葡萄球菌属、肠球菌属、链球菌属仍具有很好的抗菌活性。结论应加强医院感染控制,防止耐药菌株的产生。

关键词：革兰阳性球菌耐甲氧西林葡萄球菌耐药性

基于图像拼接方法对不同程度干眼症患者角膜上皮基底神经丛的定量分析

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中华眼视光学与视觉科学杂志 2022年第7期24卷 514-521页

作者：高欢于花郑晓汾赵炬伟宁晓玲马骎侯康山西医科大学第一临床医学院太原030001 山西省眼科医院太原030002

目的:利用图像拼接方法对不同程度干眼症患者角膜上皮基底神经丛进行定量分析,探讨其变化规律。方法:横断面研究。选取2021年4—10月于山西省眼科医院门诊就诊的干眼症患者共91例(91眼),其中轻度干眼34例、中度干眼33例、重度干眼24例,... 详细信息

目的:利用图像拼接方法对不同程度干眼症患者角膜上皮基底神经丛进行定量分析,探讨其变化规律。方法:横断面研究。选取2021年4—10月于山西省眼科医院门诊就诊的干眼症患者共91例(91眼),其中轻度干眼34例、中度干眼33例、重度干眼24例,同时征集正常健康志愿者作为对照组共27例(27眼),所有受检者均选择右眼数据分析,对所有受检者分别行常规眼科检查、眼表综合分析仪检查、角膜共焦显微镜检查后,运用Photoshop CC 2018图像处理软件合成大范围角膜上皮基底细胞层下神经丛(SNP)结构拼图,截取以涡状结构为中心的、大小为700μm×700μm的图像进行分析,结合Image J图像分析系统计算得出图像中神经纤维总长度(NFL),将所得数据通过图像大小与像素之间的换算关系计算出单位面积(1 mm2)的神经纤维总长度值即神经纤维密度值(mm/mm2)。采用单因素方差分析对各组数据进行比较,同时对两两之间进行LSD多重比较;采用Pearson线性相关分析各组角膜SNP密度与眼表综合分析检查中各项指标间的相关性。结果:4组间性别、年龄比较差异无统计学意义。对照组SNP密度为(22.71±6.19)mm/mm2,轻度干眼组为(28.58±5.19)mm/mm2,中度干眼组为(28.17±4.71)mm/mm2,重度干眼组为(5.98±7.32)mm/mm2,4组SNP密度总体差异有统计学意义(F=88.10,P<0.001);轻、中、重度干眼SNP密度与对照组差异均有统计学意义(均P<0.001),轻度干眼组与中度干眼组间差异无统计学意义,重度干眼组与轻、中度干眼组间差异均有统计学意义(均P<0.001)。干眼症患者角膜SNP密度与泪河高度、睑板腺缺失面积评分(上+下)及眼表充血评分之间无明显相关性,与非侵入性泪膜破裂时间呈正相关(r=0.51,P<0.001),与脂质层分级、角膜荧光素钠染色分级呈负相关(r=-0.30,P=0.004;r=-0.68,P<0.001)。结论:角膜SNP密度及形态改变与干眼症的严重程度分级有关,可作为临床评估干眼程度的有效指标。

关键词：干眼症共焦显微镜角膜上皮基底神经丛图像拼接方法定量分析