检索结果-南通市图书馆

牛分枝杆菌外膜相关蛋白的原核表达与反应原性鉴定

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

牛分枝杆菌外膜相关蛋白的原核表达与反应原性鉴定

作者：郑新勇河北农业大学

学位级别：硕士

牛结核病是由细胞内寄生的革兰氏阳性牛分枝枝杆菌引起的一种人畜共患病,给人类健康和畜牧业的发展带来了巨大危害。世界卫生组织(WHO)指出:“在存在牛结核的国家中,人类始终受到它的威胁,除非着手消灭牛结核病,否则人类结核病的控制是... 详细信息

牛结核病是由细胞内寄生的革兰氏阳性牛分枝枝杆菌引起的一种人畜共患病,给人类健康和畜牧业的发展带来了巨大危害。世界卫生组织(WHO)指出:“在存在牛结核的国家中,人类始终受到它的威胁,除非着手消灭牛结核病,否则人类结核病的控制是不会成功的。”目前,一些较发达的国家和地区,如美国、澳大利亚、北欧等已基本消灭了牛结核病,但由于人结核病和野生动物结核病的存在,致使这些国家仍对牛结核处于不断的检疫和高度的警惕之中。在广大的发展中国家,该病仍严重的流行。但近年来,随着分子生物学和免疫学的发展和应用,牛分枝杆菌基因组序列的不断增加及许多重要基因功能的阐明,对该菌致病机理和免疫机制等认识不断加深,这为该病的防治打下了良好的基础。近年来,牛结核病诊断方法逐渐得到改善,发现了很多特异性抗原蛋白编码基因。传统细菌学检测方法、免疫学方法和分子生物学方法相结合,加速了牛结核病诊断技术和产品的研究和开发。牛分枝杆菌外膜蛋白位于细菌细胞膜的最外层,因其具有免疫原性和免疫保护作用一直备受注目。本研究通过对牛分枝杆菌基因组序列分析,选取其外膜蛋白或胞壁蛋白编码基因20个,通过信号肽和跨膜结构分析,选定20种膜外蛋白基因,利用Primer 5.0分析软件设计相应引物。将牛结核分枝杆菌灭活后提取基因组作为模板,通过降落PCR方法扩增目的片段并与原核表达载体PET-32a(+)连接,成功构建了13个牛结核分枝杆菌膜相关蛋白基因重组表达载体;经测序鉴定、诱导表达和SDS-PAGE检测表明,7种膜蛋白重组载体获得表达。最后,以结核病牛临床阳性动物血清为一抗,经Western-blot检测表明7种膜相关蛋白都能与结核临床阳性病牛血清发生免疫学反应,表明本研究选择表达的牛结核分枝杆菌外膜蛋白或胞壁蛋白在感染动物体内具有较强的免疫原性和反应原性,有望成为进一步筛选牛结核病诊断性抗原的候选蛋白,同时这些蛋白的成功表达也成为相关蛋白功能研究的基础。

关键词：牛分枝杆菌外膜蛋白诊断性蛋白免疫原性

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

合肥地区猪圆环病毒Ⅱ型感染的血清学调查

畜牧与兽医 2007年第3期39卷 46-47页

作者：丁昌春陈俊郑新勇安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 安徽省合肥市动物疫病预防控制中心安徽合肥230011

采用酶联免疫吸附试验对合肥地区6个规模化猪场的320份血清样品进行猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)血清抗体的检测。结果显示:(1)6个猪场均有抗体阳性猪存在,阳性感染率分别为12.50%、8.89%、24.00%、7.69%、12.00%、13.33。(2)被检猪场中种猪的... 详细信息

采用酶联免疫吸附试验对合肥地区6个规模化猪场的320份血清样品进行猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)血清抗体的检测。结果显示:(1)6个猪场均有抗体阳性猪存在,阳性感染率分别为12.50%、8.89%、24.00%、7.69%、12.00%、13.33。(2)被检猪场中种猪的PCV2抗体阳性率为18.24%,总阳性率为13.75%。

关键词：酶联免疫吸附试验猪圆环病毒Ⅱ型抗体检测

维普期刊数据库

白头翁皂苷B4体外抑制人肝癌细胞HepG2增殖并诱导其凋亡

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海交通大学学报（医学版） 2011年第10期31卷 1481-1485页

作者：王海侠郑新勇郜尽安徽科技学院理学院凤阳233100 巢湖市公安局刑侦支队巢湖238000 上海交通大学药学院上海200240

目的筛查中药白头翁抗肝癌有效成分,探索其抗癌机制。方法分离白头翁皂苷成分,以人肝癌细胞HepG2为作用靶细胞,MTT法测定其对细胞增殖的抑制,流式细胞术检测细胞周期阻滞,DNA片断化方法检测细胞凋亡情况,检测半胱氨酸蛋白酶3酶活性,从... 详细信息

目的筛查中药白头翁抗肝癌有效成分,探索其抗癌机制。方法分离白头翁皂苷成分,以人肝癌细胞HepG2为作用靶细胞,MTT法测定其对细胞增殖的抑制,流式细胞术检测细胞周期阻滞,DNA片断化方法检测细胞凋亡情况,检测半胱氨酸蛋白酶3酶活性,从信号通路的角度探寻其诱导凋亡的机制。结果白头翁药材含量较高的成分白头翁皂苷B4对HepG2具有显著的抑制作用,最大抑制率达到71.5%;通过细胞周期分布分析,发现最多有83.2%的细胞被阻滞在G2期;用流式细胞仪研究其凋亡情况发现,在40 mg/mL药物浓度作用下,细胞凋亡与孵育时间呈现依赖关系,随着时间从0到48 h,初期凋亡比例从接近于零最高增长到14.3%,并且发生了DNA片段化;进一步研究发现,白头翁皂苷B4处理后的HepG2细胞半胱氨酸蛋白酶3活性显著升高。结论白头翁皂苷B4调控肝癌细胞周期,阻滞G2/M期更替,诱导细胞凋亡,是肝癌治疗的潜在候选分子,奠定了白头翁药材用于肝癌治疗的理论基础。

关键词：白头翁皂苷B4 肝癌细胞细胞周期阻滞凋亡流式细胞仪半胱氨酸蛋白酶3

维普期刊数据库

牛分枝杆菌Mb0616c基因的克隆、原核表达及免疫原性鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑龙江畜牧兽医 2013年第1期 102-104页

作者：郑新勇吴清民黄会岭河北农业大学动物医学院河北保定071001 中国农业大学动物医学院北京100193

牛结核病是由牛结核分枝杆菌引起的一种人畜共患传染病。人畜结核病的交叉传播是造成该病广。泛流行的重要原因之一。牛与人类关系密切，10％以上的人类结核病是由牛分枝杆菌引起的，该病的流行严重影响着养牛业的发展，并严重威胁着人... 详细信息

牛结核病是由牛结核分枝杆菌引起的一种人畜共患传染病。人畜结核病的交叉传播是造成该病广。泛流行的重要原因之一。牛与人类关系密切，10％以上的人类结核病是由牛分枝杆菌引起的，该病的流行严重影响着养牛业的发展，并严重威胁着人类健康。检测牛结核病的方法是世界卫生组织推荐的结核菌素变态反应（PPD），该法在牛结核病诊断和防治过程中起到了重要作用，但PPD最大缺点是呈现明显的假阳性和假阴性反应。

关键词：牛分枝杆菌免疫原性原核表达人畜共患传染病 c基因牛结核分枝杆菌牛结核病克隆

维普期刊数据库