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茶树花色素还原酶基因的克隆及其在***中的表达

作者：郑华坤福建农林大学

学位级别：硕士

原花色素(proanthocyanidin，PA)具有很强的抗氧化能力，其清除自由基的能力分别为V的50倍和V的20倍。儿茶素类物质既是PA的构成单位，也是PA聚合的启动单位，在PA的形成中具有重要的作用。花色素还原酶(anthocyanidin reductase，ANR)... 详细信息

原花色素(proanthocyanidin，PA)具有很强的抗氧化能力，其清除自由基的能力分别为V的50倍和V的20倍。儿茶素类物质既是PA的构成单位，也是PA聚合的启动单位，在PA的形成中具有重要的作用。花色素还原酶(anthocyanidin reductase，ANR)的主要作用是将花青素、花葵素、花翠素等前体物质转化为相应的儿茶素类物质。因此，ANR在原花色素的生物合成过程中起重要作用。以本实验室自主选育的高EGCG茶树品系“1005”为材料，采用RACE的方法获得了茶树ANR的全长cDNA序列，扩增其开放阅读框，构建了pET-28a-ANR重组子在BL21中表达，SDS-PAGE电泳检测融合蛋白。具体结果如下： 1．获得了茶树花色素还原酶基因全长cDNA序列：用Tnzol试剂从茶树嫩芽中提取总RNA，根据不同植物花色素还原酶基因同源性较高的区域设计保守区引物，利用RT-PCR技术获得茶树花色素还原酶基因的保守序列。然后，根据测序结果设计引物扩增该基因的3′-和5′-端序列。拼接的全长cDNA序列(1260bp)通过DNAman推断其氨基酸序列。推断的氨基酸序列与茶树花色素还原酶，葡萄花色素还原酶，茶树无色花色素还原酶的一致性分别为99％，84％和83％。 2．原核表达：设计茶树花色素还原酶基因开放阅读框的上、下游引物，扩增其开放阅读框，与pET-28a进行体外重组，然后在大肠杆菌BL21中表达，SDS-PAGE检测融合蛋白大小。结果表明，获得了高表达的预期大小(约45kDa)的融合蛋白。

关键词：茶树花色素还原酶RACE 基因克隆原核表达

小张找工作——威县“互联网+”智能就业服务侧记

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中国就业 2016年第4期 42-43页

作者：郑华坤河北省邢台市威县人社局

＂就业直通车＂直通就业路家住河北省邢台市威县七级镇张庄村的张丽娟常年在北京某电子厂打工,但因父母年迈、孩子年幼等原因一直想在家乡找个合适工作。这不,春节前父亲又患了脑血栓,还没等厂里放假,小张就急匆匆的请假回了家,看到躺... 详细信息

＂就业直通车＂直通就业路家住河北省邢台市威县七级镇张庄村的张丽娟常年在北京某电子厂打工,但因父母年迈、孩子年幼等原因一直想在家乡找个合适工作。这不,春节前父亲又患了脑血栓,还没等厂里放假,小张就急匆匆的请假回了家,看到躺在病塌上的父亲,更坚定了她在家乡找工作的决心。

关键词：河北省邢台市七级镇张丽娟手机网站二维码公司名称线下新兴村劳动力需求逢人便说

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解读飞速发展的威县劳务经济

中国就业 2012年第2期 28-29页

作者：郑华坤河北省威县人力资源和社会保障局

威县,作为邢台市第二人口大县,曾经是综合经济实力一直处于全省后几名的农业大县,工业小县,省级贫困县。全县的58万人口,由于受工业经济滞后的制约,大批农村剩余劳动力到外地去打工。为实现从农业大县向工业强县的强力转折,威县县委、... 详细信息

威县,作为邢台市第二人口大县,曾经是综合经济实力一直处于全省后几名的农业大县,工业小县,省级贫困县。全县的58万人口,由于受工业经济滞后的制约,大批农村剩余劳动力到外地去打工。为实现从农业大县向工业强县的强力转折,威县县委、县政府在承接产业转移的道路上,开拓了发展劳务经济的空间。近两年来,该县围绕承接产业转移,努力发挥人力资源优势,2011年全年完成生产总值41亿元;全部财政收入2.26亿元,首次突破两亿元大关;农民人均纯收入4150元,农村劳务收入占到了农民人均纯收入的68%,威县的做法,拓宽了劳务经济发展思路。

关键词：劳务经济威县农村剩余劳动力农民人均纯收入承接产业转移解读综合经济实力工业强县

办就业大餐促返乡就业——河北省威县举办2014年春季企业用工对接洽谈会侧记

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中国就业 2014年第3期 26-27页

作者：郑华坤河北省威县人社局

2014年2月3日,农历大年初四,河北省邢台市威县新建的人力资源广场上人潮涌动,场面火爆,由该县政府主办,人社局、经济开发区承办的威县2014年春季企业用工对接洽谈会在此隆重举行,标志着该县以＂搭建供需平台,促进转移就业＂为主题的201... 详细信息

2014年2月3日,农历大年初四,河北省邢台市威县新建的人力资源广场上人潮涌动,场面火爆,由该县政府主办,人社局、经济开发区承办的威县2014年春季企业用工对接洽谈会在此隆重举行,标志着该县以＂搭建供需平台,促进转移就业＂为主题的2014年＂春风行动＂系列活动正式启动。初春的冀南大地虽春寒料峭,但难已抑制从四面八方早早赶来的热情的求职者。闻讯而来的近万名城乡劳动者、高校毕业生和下岗失业人员。

关键词：转移就业企业用工洽谈会河北省威县对接侧记返乡

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城市规划测绘中地理信息系统的运用研究

现代物业（中旬刊） 2021年第7期20卷 190-191页

作者：郑华坤杨怀宇贵州省遵义市规划设计院有限责任公司贵州遵义560000

随着卫星定位与空间信息技术的快速发展,城市规划测绘向高精度、多时态与智能化方向发展,其工作内容不仅限于依靠人工进行外业测量与内业绘图等传统工作,还包括地形图实时更新、空间数据库构建、地表遥感信息快速获取等内容。地理信息... 详细信息

随着卫星定位与空间信息技术的快速发展,城市规划测绘向高精度、多时态与智能化方向发展,其工作内容不仅限于依靠人工进行外业测量与内业绘图等传统工作,还包括地形图实时更新、空间数据库构建、地表遥感信息快速获取等内容。地理信息系统技术在采集空间信息、空间数据管理与地理空间分析上存在较大优势,特别是对于城市规划测绘来说,通过该项技术的应用,可快速获取准确的空间坐标信息,构建地表模型,有效提高测绘工作效率,在确保城市规划科学准确、促进城市基础设施建设发展上起着重要作用。

关键词：城市规划测绘地理信息系统运用

小RNA生物合成途径主要元件调控稻瘟病菌生长发育和致病性

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植物保护学报 2023年第2期50卷 333-342页

作者：张丽梅项旭跃齐敏曹雪琦王宗华郑华坤福建农林大学植物保护学院闽台作物有害生物生态防控国家重点实验室福州350002 闽江学院海洋研究院福州350108

为探究小RNA生物合成途径主要蛋白在稻瘟病菌Magnaporthe oryzae生长发育、胁迫响应和致病过程中的作用,在野生型菌株Guy11背景下,分别构建其单基因敲除突变体ΔMoago3、ΔModcl2、ΔMordrp2和双基因敲除突变体ΔMoago3ΔModcl2、ΔMoa... 详细信息

为探究小RNA生物合成途径主要蛋白在稻瘟病菌Magnaporthe oryzae生长发育、胁迫响应和致病过程中的作用,在野生型菌株Guy11背景下,分别构建其单基因敲除突变体ΔMoago3、ΔModcl2、ΔMordrp2和双基因敲除突变体ΔMoago3ΔModcl2、ΔMoago3ΔMordrp2、ΔModcl2ΔMordrp2,并测定不同突变体的营养生长、产孢过程、对不同胁迫的响应、致病性及侵染菌丝类型。结果显示,仅双基因敲除突变体ΔMoago3ΔModcl2和ΔMoago3ΔMordrp2的菌落直径较野生型菌株Guy11显著减少;突变体ΔModcl2和ΔModcl2ΔMordrp2的产孢量分别显著下降至野生型菌株Guy11和突变体ΔMordrp2的66.67%;十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulfate,SDS)、NaCl、山梨醇和H2O2胁迫对各突变体的抑制率影响不显著,但在刚果红胁迫下,突变体ΔMoago3、ΔMordrp2和ΔMoago3ΔModcl2的抑制率均显著高于野生型菌株Guy11的抑制率;与野生型菌株Guy11相比,突变体ΔMoago3、ΔModcl2、ΔMordrp2和ΔModcl2ΔMordrp2的致病性略微减弱,突变体ΔMoago3ΔModcl2和ΔMoago3ΔMordrp2的致病性则明显减弱,而且ΔMoago3、ΔModcl2、ΔMoago3ΔModcl2、ΔMoago3ΔMordrp2和ΔModcl2ΔMordrp2中类型3和类型4侵染菌丝的比例也相应减少。表明小RNA生物合成途径主要元件在稻瘟病菌生长发育、胁迫响应和致病过程中均发挥着重要的调控作用。

关键词：稻瘟病菌小RNA 生长发育致病性胁迫响应

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“春风”那个吹

中国人力资源社会保障 2014年第3期 35-36页

作者：郑华坤付曙光王彪

为全面贯彻落实党的十八届三中全会精神和党的群众路线教育实践活动的要求，适应新形势下农村转移劳动力就业的新情况、新特点，推进农村转移劳动力就业创业工作，更好地满足春节前后进城务工人员就业需求和企业用工需要，2014年“春风... 详细信息

为全面贯彻落实党的十八届三中全会精神和党的群众路线教育实践活动的要求，适应新形势下农村转移劳动力就业的新情况、新特点，推进农村转移劳动力就业创业工作，更好地满足春节前后进城务工人员就业需求和企业用工需要，2014年“春风行动”如期展开。除了传统的现场招聘会的方式，今年全国各地还大力开展手机与网络送信息、送岗位活动，让务工人员一边享受难得的假期，一边足不出户就预定了来年的工作。为了更好地实现人岗对接，很多地方将劳动培训引入招聘会，务工人员主动“充电”与用工企业现场下订单培训新员工的景象也异常红火。2014，“春风”马到成功！

关键词：农村转移劳动力进城务工人员现场招聘会教育实践活动党的群众路线劳动力就业三中全会就业创业

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茶树花色素还原酶基因的克隆与原核表达

福建农林大学学报（自然科学版） 2008年第6期37卷 620-624页

作者：郑华坤黄志伟颜霜飞郑金贵福建农林大学农产品品质研究所福建福州350002

采用RACE技术,从茶树新品系"1005"的嫩芽中克隆出ANR基因的全长cDNA(1260 bp),其推导的氨基酸序列与茶树、葡萄花色素还原酶的一致性分别为99%和84%;并成功构建了ANR基因的原核表达载体pET-ANR,在大肠杆菌BL21中表达出预期大小(约45 ku... 详细信息

采用RACE技术,从茶树新品系"1005"的嫩芽中克隆出ANR基因的全长cDNA(1260 bp),其推导的氨基酸序列与茶树、葡萄花色素还原酶的一致性分别为99%和84%;并成功构建了ANR基因的原核表达载体pET-ANR,在大肠杆菌BL21中表达出预期大小(约45 ku)的融合蛋白.

关键词：茶树花色素还原酶基因克隆原核表达

巨菌草(Pennisetum giganteum)研究进展

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福建农林大学学报（自然科学版） 2019年第6期48卷 681-687页

作者：郑华坤林雄杰林辉李晶鲁国东林占熺福建农林大学国家菌草工程技术研究中心福建福州350002 福建农林大学植物与微生物相互作用福建省高校重点实验室福建福州350002 福建省农业科学院果树研究所福建福州350003

巨菌草是一种优质、高产、抗逆性强、适应性广的狼尾草属植物.巨菌草自引进、驯化成功后,已在食药用菌栽培、动物饲养和生态治理等领域获得广泛的应用.通过综述近10年来巨菌草生物学特征、生理生化特性及其应用等方面的研究进展,并对目... 详细信息

巨菌草是一种优质、高产、抗逆性强、适应性广的狼尾草属植物.巨菌草自引进、驯化成功后,已在食药用菌栽培、动物饲养和生态治理等领域获得广泛的应用.通过综述近10年来巨菌草生物学特征、生理生化特性及其应用等方面的研究进展,并对目前巨菌草研究和应用中存在的问题进行探讨,为将来巨菌草的进一步研究和利用提供参考.

关键词：巨菌草生物学特征生理生化特性生态治理