检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

大肠杆菌转座因子在遗传分析中的应用

生物工程进展 1991年第4期11卷 13-17页

作者：郑兆鑫复旦大学遗传研究所

转座因子是一种不能独立完成自我复制,但是却能在细胞内,由一种复制子移动到另一种复制子的遗传因子。在原核生物中常见的转座因子有:插入顺序、转座子和噬菌体μ。除了它们本身在分子遗传学基础研究中具有极为重大的意义外。

关键词：转座因子大肠杆菌遗传学

中国脑型疟患者恶性疟原虫分离株裂殖子表面蛋白2基因的分子克隆及序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 1998年第5期78卷 375-378页

作者：边中启宋关鸿郑兆鑫第二军医大学寄生虫学教研室复旦大学遗传学研究所

目的为设计研制安全有效的人脑型疟疫苗提供科学依据。方法应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）对５例中国脑型疟患者恶性疟原虫云南省勐腊县勐罕（ＣＭＨ／ＹＮ）分离株和云南省盈江县农场（ＣＹＪ／ＹＮ）分离株基因组裂殖子表面蛋白２（ＭＳ... 详细信息

目的为设计研制安全有效的人脑型疟疫苗提供科学依据。方法应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）对５例中国脑型疟患者恶性疟原虫云南省勐腊县勐罕（ＣＭＨ／ＹＮ）分离株和云南省盈江县农场（ＣＹＪ／ＹＮ）分离株基因组裂殖子表面蛋白２（ＭＳＰ２）基因进行扩增，将扩增产物分别经ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切后，回收的ＭＳＰ２基因分子定向克隆Ｍ１３ｍｐ１８和Ｍ１３ｍｐ１９载体，按Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终止法进行ＤＮＡ序列测定，并与恶性疟原虫株ＦＣ２７、Ｋ１、ＩＣ１和ＣＡＭＰ株进行同源性分析比较。结果５例中国脑型疟患者恶性疟原虫ＣＭＨ／ＹＮ和ＣＹＪ／ＹＮ分离株ＭＳＰ２基因之间序列完全相同，全长为８００ｂｐ，编码２６４个氨基酸，中央的串联重复序列含２×３２肽序列，与ＦＣ２７、Ｋ１株之间核苷酸同源性为９８８％，而与ＩＣ１、ＣＡＭＰ株之间核苷酸同源性为２８２％。

关键词：疟疾脑型疟疾恶性疟 MSP2 分子克隆序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

棒状杆菌发酵基因工程研究进展

工业微生物 1995年第4期25卷 32-38页

作者：雷呈祥严维耀郑兆鑫复旦大学遗传工程国家重点实验室

传统的育种方法由于本身的缺陷受到了基因工程育种的强有力挑战,基因工程技术应用于发酵工业创立了全新的发酵基因工程。传统发酵菌种棒状杆菌的分子生物学研究欣欣向荣,棒状杆菌的受体系统、载体系统以及DNA转移技术都已取得长足进展... 详细信息

传统的育种方法由于本身的缺陷受到了基因工程育种的强有力挑战,基因工程技术应用于发酵工业创立了全新的发酵基因工程。传统发酵菌种棒状杆菌的分子生物学研究欣欣向荣,棒状杆菌的受体系统、载体系统以及DNA转移技术都已取得长足进展。对棒状杆菌的分子遗传机制的阐明使得构建表达载体并表达目的基因成为现实。利用基因突变和基因重组技术选育优良的棒状杆菌发酵菌种,业已取得明显成效。

关键词：基因工程发酵基因工程棒状杆菌发酵工程

鼠心钠素基因在大肠杆菌中的融合表达及产物的分离纯化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复旦学报（自然科学版） 1998年第4期37卷 428-432页

作者：罗红良严维耀郑兆鑫复旦大学遗传工程国家重点实验室

将克隆有化学合成的鼠心钠素基因的质粒pXZ－α－ANP－590改建成质粒pLH280，转化大肠杆菌表达融合蛋白LacZ＇－280－α－ANP．当带有此质粒的最适宿主菌JM101在37℃，270r／min摇床培养14h，融合蛋白表达量可达最高值．利用超声波破碎... 详细信息

将克隆有化学合成的鼠心钠素基因的质粒pXZ－α－ANP－590改建成质粒pLH280，转化大肠杆菌表达融合蛋白LacZ＇－280－α－ANP．当带有此质粒的最适宿主菌JM101在37℃，270r／min摇床培养14h，融合蛋白表达量可达最高值．利用超声波破碎菌体；通过盐酸胍抽提融合蛋白；透析除去盐酸胍后用溴化氰裂解融合蛋白；SephadexG－25柱层析后收集样品；各峰样品冷冻干燥后进行放免活性测定．结果说明第一峰样品具有放免活性．HPLC分析和生物活性测定均证明此分离样品与标准心钠素样品基本一致．处理1L携带质粒pLH280的发酵液（D（600）＝2．0）可得1．2mg有活性的α－ANP，较之携带质粒pXZ－α－ANP－590的发酵液（D（600）＝2．0）的α－ANP产量提高了4倍．

关键词：鼠心钠素 LacZ基因融合蛋白表达大肠杆菌

降钙素基因相关肽衍生物的制备及降血压功能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复旦学报（自然科学版） 2004年第2期43卷 190-194页

作者：邱媛媛严维耀郑兆鑫复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200433

用PCR法将人的降钙素基因相关肽 (calcitoningenerelated peptide ,CGRP)基因克隆到表达载体 pGEX 4T 2的GST基因后 ,构建成一个新的表达质粒pGEX CGRP .另外分别将 2个有降压功能的小肽HHL和RPLKPW的基因克隆到CGRP基因后 ,构建成 2个... 详细信息

用PCR法将人的降钙素基因相关肽 (calcitoningenerelated peptide ,CGRP)基因克隆到表达载体 pGEX 4T 2的GST基因后 ,构建成一个新的表达质粒pGEX CGRP .另外分别将 2个有降压功能的小肽HHL和RPLKPW的基因克隆到CGRP基因后 ,构建成 2个表达质粒 pGEX CGRP 3AA和 pGEX CGRP 6AA .将此 3个表达质粒转化到大肠杆菌TG1中 ,获得 3个高表达的融合蛋白 :GST CGRP ,GST CGRP HHL ,GST CGRP RPLKPW ;通过GlutathioneSepharose 4B亲和层析纯化融合蛋白 ,测定蛋白浓度 ,利用自发性高血压大鼠 (spon taneouslyhypertensiverat,SHR)来检测蛋白的降血压功能 ,发现融合蛋白GST CGRP HHL具有显著的降压效果 ,能使舒张压下降 8.0kPa ,且降压维持时间延长 ,达到 70min以上 .

关键词：降钙素基因相关肽衍生物降血压 HHL RPLKPW

抗口蹄疫蛋白疫苗与DNA疫苗混合物的免疫原性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病杂志 2001年第5期17卷 5-8页

作者：赵凯张震宇卢永干郑兆鑫复旦大学遗传工程国家重点实验室上海200433 农业部兰州畜牧兽医研究所

目的　研究抗口蹄疫蛋白及DNA疫苗混合物免疫原性。方法　以O型口蹄疫病毒 (FMDV)VP1免疫活性肽基因串连片段取代猪IgGH链基因可变区的CDR3区构成融合基因。然后分别与原核表达载体pET2 8b及真核表达载体pCDM- 8构建抗口蹄疫蛋白疫苗pET... 详细信息

目的　研究抗口蹄疫蛋白及DNA疫苗混合物免疫原性。方法　以O型口蹄疫病毒 (FMDV)VP1免疫活性肽基因串连片段取代猪IgGH链基因可变区的CDR3区构成融合基因。然后分别与原核表达载体pET2 8b及真核表达载体pCDM- 8构建抗口蹄疫蛋白疫苗pET2 8b -FH及DNA疫苗PCDM -FH。用蛋白疫苗 pET2 8b -FH和DNA疫苗 pCDM -FH及其混合物免疫猪后 ,用攻毒实验检测其效果。结果　攻毒后 ,抗口蹄疫蛋白疫苗 pET2 8b -FH及DNA疫苗pCDM -FH单独免疫能分别使猪发病推迟 10天和 1天 ,症状减轻 ;而混合疫苗免疫效果比阴性对照好而不及这两个疫苗单独免疫效果。结论　抗口蹄疫蛋白疫苗 pET2 8b -FH及DNA疫苗pCDM -FH单独免疫能使猪发病推迟 ,症状减轻 ;而混合疫苗免疫效果较差 ,免疫方法仍需改进。

关键词： FMDV 蛋白疫苗 DNA疫苗口蹄疫病毒 FMD

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

吗啡耐受大鼠心房心钠素的释放及其基因转录

生理学报 1989年第6期41卷 562-566页

作者：胡章志崔宏安松柱严维耀郑兆鑫汤健北京医科大学心肺内分泌研究室复旦大学遗传所基因工程研究室

本工作应用心钠素放射免疫测定和分子杂交技术首次发现,吗啡耐受大鼠血浆心钠素水平显著降低,心房内心钠素含量明显升高,同时心房内心钠素特异性mRNA水平也相应提高,提示在吗啡耐受时大鼠心房内心钠素的合成和贮存增加,释放减少。

关键词：吗啡耐受心钠素 mRNA

以猪IgG重链恒定区为抗原载体的抗口蹄疫病毒DNA疫苗的研制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物工程学报 2001年第3期17卷 322-324页

作者：李光金严维耀徐泉兴盛祖恬郑兆鑫复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室上海200433 上海农业科学研究院兽医研究所上海201106 浙江省农业科学研究院病毒研究所杭州310021

The peptide of amino acids 141～160 of VP1 protein of foot\|and\|mouth disease virus (FMDV) is a major B cell epitope and the peptide of amino acids 21～40 is an important T cell *** this study,the DNA fragments of 141～160 and 21～40 peptide epitopes of a strain of type O FMDV was chemically synthesized and arranged into a tandem repeat 141～160 (20AA)\|21～40 (20AA)\|141～160 (20AA).This tandem sequence was fused to the 3′ end of the heavy chain constant region gene of swine immunoglobulin G and was then cloned into mammalian expression vector pCDM8 to form a recombinant plasmid *** pCDM8FZ3 was inoculated intramuscularly into guinea pigs,it elicited a neutralizing antibody response and a specific spleen T cell proliferative response,and 66% of the vaccinated animals were protected from viral *** study indicated that the heavy chain constant region of swine IgG can act as the carrier protein for FMDV peptide epitopes,and pCDM8FZ3 is a potential DNA vaccine candidate to prevent FMDV infection.

关键词：口蹄疫病毒 DNA疫苗免疫球蛋白G 抗原猪

猪Mx1和牛Mx1蛋白在PK-15细胞中的表达及其对伪狂犬病病毒的抑制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物工程杂志 2015年第3期35卷 1-7页

作者：王鹏郑兆鑫刘明秋复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心上海200433

目的:研究猪Mx1和牛Mx1蛋白在PK-15细胞中的表达并检测其是否对伪狂犬病病毒(PRV)具有抑制作用。方法:从IBRS-2细胞和MDBK细胞中分别调取猪Mx1和牛Mx1基因,并克隆到pc DNA3.1/myc-His(-)B,构建得到真核重组表达质粒,以脂质体转染的方法... 详细信息

目的:研究猪Mx1和牛Mx1蛋白在PK-15细胞中的表达并检测其是否对伪狂犬病病毒(PRV)具有抑制作用。方法:从IBRS-2细胞和MDBK细胞中分别调取猪Mx1和牛Mx1基因,并克隆到pc DNA3.1/myc-His(-)B,构建得到真核重组表达质粒,以脂质体转染的方法将其分别导入到PK-15细胞,从mRNA水平和蛋白质水平鉴定重组质粒在细胞内的表达情况,然后用细胞毒性试剂盒检测这两种蛋白是否对PK-15细胞具有毒性。之后,通过荧光定量PCR检测猪Mx1和牛Mx1在攻毒后不同时间、不同攻毒剂量的条件下对PRV的抑制情况,并观察100TCID50病毒攻击细胞72h后的病变程度。结果:成功克隆了猪Mx1和牛Mx1基因,经mRNA水平和蛋白质水平证实,两种重组质粒在PK-15细胞内能够正常表达。从荧光定量PCR和细胞病变的角度来看,细胞内表达的Mx1蛋白对PRV具有显著性的抑制(P<0.001)。结论:猪Mx1和牛Mx1基因在PK-15细胞中表达的Mx1蛋白能够抑制PRV在胞内的复制。

关键词：猪Mx1 牛Mx1 PK-15细胞伪狂犬病病毒