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羊膜上皮细胞促进糖尿病创面愈合的作用及初步机制研究

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羊膜上皮细胞促进糖尿病创面愈合的作用及初步机制研究

作者：郑仕清中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

在过去的三十年中,糖尿病在全世界范围内已成为一种新型“流行病”,目前我国的糖尿病患者已超过1亿,居全球第一位。对于糖尿病患者而言,任何创面均有可能发展形成严重感染的慢性创面,甚至造成截肢,严重影响愈合及患者生存质量。在控制... 详细信息

在过去的三十年中,糖尿病在全世界范围内已成为一种新型“流行病”,目前我国的糖尿病患者已超过1亿,居全球第一位。对于糖尿病患者而言,任何创面均有可能发展形成严重感染的慢性创面,甚至造成截肢,严重影响愈合及患者生存质量。在控制血糖的前提下,对于创面彻底清创、避免感染,促进创面愈合是糖尿病创面主要的治疗方式。但是传统方法存在治疗时间长、次数多、复发率高的问题,临床对于新型有效的治疗方法需求极大。羊膜位于胎盘最内层,厚度约为8-12um,不含神经及血管。研究表明羊膜具有促进细胞迁移及扩增、免疫源性低、减轻炎症、含有大量的生长因子和细胞因子等特点。自1910年羊膜首次作为敷料用以创面治疗以来,随着保存技术的发展,使羊膜在眼科疾病、烧伤救治、整形修复、口腔疾病及神经外科等领域都有广泛的应用。羊膜上皮层是由单层立方上皮细胞构成,称之为羊膜上皮细胞。多项研究表明,人羊膜上皮细胞表达多种干细胞标志物,并具有向三个胚层分化的能力,而且能够分泌多种生长因子。同时因其来源广泛和便于分离,无免疫源性和致瘤性,使羊膜上皮细胞成为移植和再生医学潜在的细胞来源。羊膜上皮细胞在组织修复中的应用已有诸多报道,目前羊膜上皮细胞已在肝、神经、肺、心肌甚至肿瘤治疗中都有一定的优势,但是尚少有羊膜上皮细胞应用于糖尿病创面的研究。因此在本课题中,我们通过提取培养羊膜上皮细胞,应用于糖尿病创面中以观察其对于创面愈合的作用并对其机制进行初步探索。第一部分人羊膜上皮细胞体外分离培养鉴定及生物学特性检测目的:分离培养人原代羊膜上皮细胞并检测鉴定。方法:收集剖宫产胎盘分离羊膜,通过酶消化法提取羊膜上皮细胞体外培养。流式细胞计数检测羊膜上皮细胞表型,免疫荧光法及RT-PCR法检测羊膜上皮细胞干性标志物,最后对其进行三胚层诱导检测其分化潜能。结果:体外人羊膜上皮细胞镜下观察可见细胞成鹅卵石样成团生长,核圆,居中,细胞呈多边形,边界清楚,轮廓分明。通过流式细胞仪检测显示培养细胞表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105,但是不表达CD45、CD34。通过免疫荧光检测发现,羊膜上皮细胞表达SSEA-3、SSEA-4、OCT4。RT-PCR结果显示羊膜上皮细胞表达OCT-4、Sox-2、NANOG等干性基因。诱导分化实验证明羊膜上皮细胞具有向三胚层分化潜能。结论:采用酶消化法成功分离培养羊膜上皮细胞,其可以表达多种干细胞标志物,并能够向三胚层分化,在组织修复中具有很大的潜力。第二部分羊膜上皮细胞促进糖尿病创面愈合作用的研究目的:研究羊膜上皮细胞对于糖尿病创面愈合的作用。方法:将原代提取的羊膜上皮细胞局部注射糖尿病创面,观察创面愈合情况。收集创面标本行病理学以观察创面愈合情况;行CD31免疫组化检测创面血管化;行CD68、iNOS、CD206免疫荧光检测巨噬细胞极化;行促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)和促进愈合因子(VEGF、TGF-β1、IGF-1)的ELISA检测炎症反应的改变。通过标记羊膜上皮细胞,观察羊膜上皮细胞在创面的转归情况。结果:(1)与空白组相比,羊膜上皮细胞组在创面第10、14天创面愈合率明显升高(P清的DMEM培养基+IFN-γTNF-α阳性对照组,含10%胎牛血清的DMEM培养基+羊膜上皮细胞条件培养基+IFN-γTNF-α组,含10%胎牛血清的DMEM培养基空白对照组。(2)体外培养人脐静脉内皮细

关键词：人羊膜上皮细胞糖尿病创面愈合巨噬细胞血管化

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独立式桥墩防撞结构防撞性能研究

桥梁建设 2024年第1期54卷 82-87页

作者：赵健郑仕豪孙建鹏安路明西安建筑科技大学土木工程学院陕西西安710055 中铁建大桥工程局集团南方工程有限公司广东广州511458

为了解独立式桥墩防撞结构(由钢管混凝土立柱、钢横梁等结构组成)抵御船舶撞击的能力,并选取合适的结构方案,以广州明珠湾大桥为背景进行研究。采用显式动力软件LS-DYNA建立船舶与独立式桥墩防撞结构计算模型,分析立柱间距4.8 m且不设... 详细信息

为了解独立式桥墩防撞结构(由钢管混凝土立柱、钢横梁等结构组成)抵御船舶撞击的能力,并选取合适的结构方案,以广州明珠湾大桥为背景进行研究。采用显式动力软件LS-DYNA建立船舶与独立式桥墩防撞结构计算模型,分析立柱间距4.8 m且不设防撞套箱(方案1)、立柱间距6.7 m且不设防撞套箱(方案2)、立柱间距6.7 m且设防撞套箱(方案3)3种独立式桥墩防撞结构方案在3000 DWT船舶中心碰撞和偏心碰撞下的结构动力响应和船舶损伤。结果表明:在中心碰撞下,方案2较方案1能有效减少撞击时迎撞立柱的位移和轴向拉力峰值,提高了独立式桥墩防撞结构的防护性能和承载能力,方案3的防撞套箱能起到缓冲消能的作用;在偏心碰撞下,方案3防撞套箱的旋转能够使船舶远离桥墩,保护桥墩和拱脚下弦杆不受船舶的撞击作用,具有良好的导向能力。设防撞套箱的独立式桥墩防撞结构已在广州明珠湾大桥中应用。

关键词：独立式桥墩防撞结构防撞套箱船桥碰撞撞击力有限元法

农村物流与电商协同发展对新质生产力的影响及空间溢出效应

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商业经济研究 2024年第12期 21-25页

作者：马潇野郑仕勇吴俊桂林电子科技大学商学院广西桂林541004 海南大学国际商学院海南海口570228

随着技术进步和市场需求的变化,农村物流和电商领域迅速发展,成为现代经济中不可或缺的一部分。农村物流与电商的协同发展通过提升供应链效率、优化资源配置、加速市场响应和推动创新等方式,对新质生产力产生重要影响。同时这种协同发... 详细信息

随着技术进步和市场需求的变化,农村物流和电商领域迅速发展,成为现代经济中不可或缺的一部分。农村物流与电商的协同发展通过提升供应链效率、优化资源配置、加速市场响应和推动创新等方式,对新质生产力产生重要影响。同时这种协同发展是否能够对周边地区的新质生产力产生空间溢出效应,仍需要进一步研究。基于此,本文实证研究农村物流与电商协同发展对新质生产力的影响以及空间溢出效应,旨在助力政府和企业制定更科学、有效的政策,以促进农村物流与电商的协同发展,进而推动新质生产力的全面提升。研究结果表明:农村物流与电商协同发展显著促进本地新质生产力发展,而未能通过空间溢出效应促进周边新质生产力发展。

关键词：农村物流电商产业产业协同新质生产力空间溢出效应

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光催化有机反应中的共价有机框架材料

化学进展 2024年第5期36卷 645-666页

作者：王静怡许昕郑仕佳魏丕峰安万凯临沂大学化学化工学院临沂276000 河南农业大学理学院郑州450002

共价有机框架(COFs)由于其优异的光催化活性成为多孔材料领域的研究热点。与其他多相光催化剂相比,COFs具有规整且可控的结构、大的比表面积、均匀的孔道、良好的稳定性、可回收利用性、合适的能带结构、可调节的吸光范围和易于功能化... 详细信息

共价有机框架(COFs)由于其优异的光催化活性成为多孔材料领域的研究热点。与其他多相光催化剂相比,COFs具有规整且可控的结构、大的比表面积、均匀的孔道、良好的稳定性、可回收利用性、合适的能带结构、可调节的吸光范围和易于功能化等优点,使其具有更高的研究潜力和工业化应用价值。近年来COFs在光催化领域的应用突飞猛进,尤其是在光催化有机反应方向取得了巨大进展,极大地促进了COFs的发展。本综述简单介绍一些光功能化COFs的合成策略,如:自下而上(bottom-up)的策略、后修饰方法和复合法,然后总结了COFs光催化反应机理分为能量转移和电子转移两种途径,而后重点总结和讨论COFs作为光催化剂在光催化选择性氧化反应、还原反应、偶联反应、环化反应、聚合反应和不对称有机合成等反应中的最新研究进展,最后对COFs在光催化有机反应中的应用进行总结和展望。

关键词：共价有机框架光催化氧化反应还原反应偶联反应环化反应不对称有机合成

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羊膜移植物的制备及临床应用研究进展

中华烧伤杂志 2017年第8期33卷 514-516页

作者：郑仕清陈甜胜纪世召罗鹏飞肖仕初第二军医大学长海医院烧伤外科、全军烧伤研究所上海200433

羊膜是位于胎盘最内层的一层无血管膜，由上皮层、基底层、致密层、纤维层和海绵层构成。羊膜最内层的上皮层与羊水接触，最外层的海绵层与血管绒毛膜相连。上皮层由单层立方上皮细胞组成，其羊水侧富含囊泡，囊泡内含微绒毛和气泡，基... 详细信息

羊膜是位于胎盘最内层的一层无血管膜，由上皮层、基底层、致密层、纤维层和海绵层构成。羊膜最内层的上皮层与羊水接触，最外层的海绵层与血管绒毛膜相连。上皮层由单层立方上皮细胞组成，其羊水侧富含囊泡，囊泡内含微绒毛和气泡，基底侧主要是足突状的细胞结构。基底层位于上皮层外侧，是羊膜能够应用于创面治疗最重要的结构。由ECM构成的基底层富含胶原蛋白、蛋白聚糖、葡糖氨基葡聚糖、层粘连蛋白、高分子透明质酸等多种可溶性大分子物质。

关键词：烧伤羊膜生物敷料伤口愈合制备临床应用

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1抑制剂VX765对冷束缚诱导小鼠急性胃溃疡的作用

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中华烧伤杂志 2017年第11期33卷 688-693页

作者：郑仕清洪旭东陈甜胜罗鹏飞肖仕初海军军医大学长海医院烧伤外科全军烧伤研究所上海200433

目的观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1抑制剂VX765对冷束缚诱导小鼠急性胃溃疡胃黏膜的保护效应。方法将24只无特殊病原体级雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、冷束缚组、VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组... 详细信息

目的观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1抑制剂VX765对冷束缚诱导小鼠急性胃溃疡胃黏膜的保护效应。方法将24只无特殊病原体级雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、冷束缚组、VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组，每组6只。正常对照组小鼠仅在腹腔内注射10 mL/kg二甲基亚砜（DMSO）和PBS混合液。冷束缚组小鼠在腹腔内注射DMSO和PBS混合液，30 min后行冷束缚实验诱导急性胃溃疡。VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组小鼠同前造成急性胃溃疡，实验前30 min分别腹腔注射含10 mg VX765的DMSO、PBS混合液（12.5 μmol/kg）及含20 mg雷贝拉唑的PBS、DMSO混合液（40 mg/kg）。冷束缚实验结束后4 h，采用ELISA法测定血清TNF－α、IL－6含量，观察胃组织的大体情况、评估溃疡指数、行HE染色观察胃组织的病理学变化，采用蛋白质印迹法检测胃组织中IL－1β、IL－18及剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的相对表达量。正常对照组小鼠于相同时相点同前检测。对数据行单因素方差分析、Bonferroni检验。结果正常对照组小鼠血清中TNF－α和IL－6含量和胃组织中剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1、IL－1β、IL－18含量均明显低于冷束缚组（P值均小于0.01）。VX765预处理＋冷束缚组小鼠血清和胃组织中的前述炎性指标含量均明显低于冷束缚组（P值均小于0.01）。雷贝拉唑预处理＋冷束缚组与冷束缚组小鼠血清和胃组织中的前述炎性指标含量比较，差异均无统计学意义（P值均大于0.05）。VX765预处理＋冷束缚组小鼠血清和胃组织中的前述炎性指标含量均明显低于雷贝拉唑预处理＋冷束缚组（P值均小于0.01）。正常对照组小鼠胃黏膜表面光滑平整，黏膜细胞形态正常、结构清晰。冷束缚组小鼠多发性胃黏膜出血，黏膜细胞排列混乱，坏死组织周围有大量炎性细胞浸润。VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组小鼠胃黏膜出血数目显著减少、黏膜结构尚完整，坏死组织周围有少量炎性细胞浸润。正常对照组、冷束缚组、VX765预处理＋冷束缚组、雷贝拉唑预处理＋冷束缚组小鼠的溃疡指数分别为0、18.7±1.1、6.3±1.5、8.2±1.3；其中正常对照组明显低于其余3组（P值均小于0.05），VX765预处理＋冷束缚组与雷贝拉唑预处理＋冷束缚组相近（P〉0.05），该2组均明显低于冷束缚组（P值均小于0.05）。结论VX765可以有效阻断半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1的活化、减少炎症因子的生成、减轻炎症反应，对冷束缚诱导小鼠急性胃溃疡胃黏膜有一定的保护作用。

关键词：胃溃疡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 冷束缚应激 VX765

丙酮盐酸混合液提取土壤腐殖质组分的光谱学特征

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光谱学与光谱分析 2024年第2期44卷 474-479页

作者：宋鸽孔祥仕黑龙江大学中俄学院黑龙江哈尔滨150080 Institute of Earth Sciences St.Petersburg State UniversitySt.Petersburg 199034Russia 吉首大学旅游学院湖南吉首416000

采用丙酮盐酸混合液提取土壤胡敏酸(HA)和胡敏素(HU)组分,利用元素分析、紫外-可见漫反射光谱和红外光谱进行结构表征。元素分析表明,HA中C、H、N和S含量均高于HU,O含量低于HU。原子比分析表明HA的缩合度相对较高,分子结构相对复杂,HU... 详细信息

采用丙酮盐酸混合液提取土壤胡敏酸(HA)和胡敏素(HU)组分,利用元素分析、紫外-可见漫反射光谱和红外光谱进行结构表征。元素分析表明,HA中C、H、N和S含量均高于HU,O含量低于HU。原子比分析表明HA的缩合度相对较高,分子结构相对复杂,HU的缩合度相对较低,分子结构相对简单。紫外-可见漫反射光谱分析表明,由于腐殖质(HS)的组成复杂,多种官能团互相干扰,HA和HU紫外-可见漫反射光谱无明显特征峰,吸光度值随着波长的增加呈下降趋势,且HA包含的吸光有机成分较多,化学组成较复杂。HA和HU紫外特征参数SUV254和E4/E6比较分析表明,与HU相比,HA芳香性较大,腐殖化程度较高。红外光谱分析表明,HA和HU具有相似的红外光谱,各研究对象特征吸收峰的吸收强度不同,其中开垦黑土20~40 cm和未开垦灰土18~37 cm土层HA的振动幅度较大,说明其包含的酚类化合物、含羟基化合物、脂肪族化合物和羧酸,以及含羰基的醛、酮、醚等化合物的含量较多。开垦黑土10~20 cm土层和未开垦灰土18~37 cm土层HU在各特征吸收峰振动幅度较大,说明其包含的酚类化合物、羧酸、脂肪烃和糖类化合物含量较多。红外光谱各吸收峰强度比较分析表明,开垦后黑土HA和HU酚类化合物、羟基官能团和脂肪族化合物等含量增加,而开垦后灰土HA和HU酚类化合物、羧酸和脂肪族化合物含量下降,表明开垦对黑土土壤有机质影响相对较小,并且在一定程度上增加了土壤有机质含量,而促进了灰土土壤有机质的分解。综上所述,丙酮盐酸混合液提取法为HS生物化学和生理活性的研究提供了新的技术手段,为合理利用土壤资源提供理论依据。

关键词：胡敏酸胡敏素元素分析紫外-可见漫反射光谱近红外光谱

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国有企业投融资管理困境与优化建议研究

财会学习 2024年第14期 155-157页

作者：郑仕科温州市瓯飞开发建设投资集团有限公司

在我国经济由高速增长转向高质量发展的大背景下,国有企业面临着新的机遇与挑战。投融资管理作为提高国有企业核心竞争力与运营效率的关键手段,决定着国有资产的稳定性和安全性,逐渐受到各企业的高度关注。本文旨对国有企业投融资管理... 详细信息

在我国经济由高速增长转向高质量发展的大背景下,国有企业面临着新的机遇与挑战。投融资管理作为提高国有企业核心竞争力与运营效率的关键手段,决定着国有资产的稳定性和安全性,逐渐受到各企业的高度关注。本文旨对国有企业投融资管理困境与优化建议展开研究。首先,分析了国有企业投融资管理工作的重要性,接着研究了国有企业投融资管理面临的困境,最后提出了一系列针对性的优化措施,旨在提高国有企业在投融资领域的效率和风险控制能力,促进其可持续发展。这一研究对于完善国有企业的投融资管理体系,提升其竞争力和经营绩效具有一定的参考价值。

关键词：国有企业投融资管理国有资产

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"幂函数"教学设计

中学数学教学参考 2024年第9期 41-43页

作者：郑仕福福建省厦门集美中学

幂函数是函数教学的最后一个内容,既是对本章内容的一个总结,也是对本章学习方法的运用情况的一个检验.

关键词：自主探究幂函数教学设计