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叶绿体遗传转化

生物技术通报 1997年第3期13卷 16-20页

作者：邹竹荣沈桂芳范云六中国农业科学院生物技术研究中心北京100081

植物细胞遗传物质存在于细胞核和细胞器(线粒体和叶绿体)中。外源基因对细胞核转化研究开展得很早,而且已经建立了许多植物的稳定核转化体系。而以叶绿体为代表的细胞器转化起步较晚,但发展很快。叶绿体转化要考虑到两个因素:1.高等植... 详细信息

植物细胞遗传物质存在于细胞核和细胞器(线粒体和叶绿体)中。外源基因对细胞核转化研究开展得很早,而且已经建立了许多植物的稳定核转化体系。而以叶绿体为代表的细胞器转化起步较晚,但发展很快。叶绿体转化要考虑到两个因素:1.高等植物细胞内叶绿体基因组拷贝数很高,需要建立高效选择系统(如抗生素筛选)使转基因植株完全同质化;2.外源DNA必须通过叶绿体内外膜屏障才能进入到叶绿体中,这需要建立一种行之有效的转化方法。这里主要对已发展的叶绿体转化方法作一下回顾。植物叶绿体转化大致可分为三大类:1.农杆菌T-DNA介导的遗传转化法:2.

关键词：叶绿体遗传转化植物转基因技术

脂联素——一种新的影响血管功能的脂肪细胞因子

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生命科学仪器 2006年第2期4卷 7-11页

作者：封淑颖邹竹荣华东师范大学生命科学学院上海200062

肥胖、Ⅱ型糖尿病等与心血管疾病密切相关。现在越来越多的研究聚焦于由脂肪组织分泌产生的血浆蛋白即脂肪细胞因子对血管的直接作用,其中最引人注目的是脂联素表现出显著的抗炎症和抗动脉粥样硬化的功效。本综述主要总结了脂联素对血... 详细信息

肥胖、Ⅱ型糖尿病等与心血管疾病密切相关。现在越来越多的研究聚焦于由脂肪组织分泌产生的血浆蛋白即脂肪细胞因子对血管的直接作用,其中最引人注目的是脂联素表现出显著的抗炎症和抗动脉粥样硬化的功效。本综述主要总结了脂联素对血管功能影响的研究进展,并从几方面诸如对血管结构、内皮细胞炎症反应、一氧化氮(NO)产生及血管生成的影响进行详细阐述。

关键词：脂联素内皮细胞血管功能

Bt毒蛋白基因叶绿体转化载体的构建及其生物杀虫试验

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农业生物技术学报 1996年第1期4卷 23-27页

作者：任延国张中林邹竹荣于小兰倪丕冲沈桂芳中国农业科学院生物技术研究中心中国农业科学院生物技术研究中心北京 100081

本工作设计和构建了全长3.5 kb Bt 毒蛋白基因和2.1 kb、1.8 kb 两种3’端缺失 Bt 毒蛋白基因并分别包含烟草叶绿体同源片段 RTP 和 TO 的叶绿体转化载体 pTRS1、pTRS2和pTRS3,对它们菌体总蛋白进行生物杀虫试验表明所有载体的 Bt 毒蛋... 详细信息

本工作设计和构建了全长3.5 kb Bt 毒蛋白基因和2.1 kb、1.8 kb 两种3’端缺失 Bt 毒蛋白基因并分别包含烟草叶绿体同源片段 RTP 和 TO 的叶绿体转化载体 pTRS1、pTRS2和pTRS3,对它们菌体总蛋白进行生物杀虫试验表明所有载体的 Bt 毒蛋白基因都得到了表达,并且对二龄棉铃虫有100%的毒杀作用,对三龄棉铃虫的致死率也很高,尤其是含全长 Bt 毒蛋白基因的pTRS1可高达95%以上。因而它们都可以进一步用来进行叶绿体转化获得 Bt 转基因植物的研究。

关键词： Bt 毒蛋白基因叶绿体转化载体生物杀虫试验

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植物细胞质APX1的研究进展

中国农业科技导报 2015年第3期17卷 8-18页

作者：张梦如龚明杨玉梅罗刘畅邹竹荣云南师范大学生命科学学院教育部生物质能源持续发展和应用工程研究中心云南省生物质能源和环境生物技术重点实验室昆明650500

活性氧(ROS)在植物生长发育和对各种逆境适应过程中扮演双面角色:高浓度下引起氧化损伤、低浓度下发挥第二信使作用,其角色转换取决于其产生和清除之间的平衡状态,并严格受控于体内一套由酶和非酶组分构成的双元抗氧化系统。在抗氧化酶... 详细信息

活性氧(ROS)在植物生长发育和对各种逆境适应过程中扮演双面角色:高浓度下引起氧化损伤、低浓度下发挥第二信使作用,其角色转换取决于其产生和清除之间的平衡状态,并严格受控于体内一套由酶和非酶组分构成的双元抗氧化系统。在抗氧化酶类中,位居细胞质的抗坏血酸过氧化物酶1(APX1)在胞内氧化还原态水平调控中起到关键作用,在ROS清除网络中居于核心地位,已被视作ROS功能的重要杠杆,并因而获得相对最广泛的研究关注。着重介绍了其酶学特性、基因表达和调控、生物学作用及目前主要在植物抗逆基因工程中的应用研究进展,以期为日后植物ROS和抗逆性研究提供有用信息和思路。

关键词：植物活性氧 APX1 抗逆性基因工程

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人脂联素蛋白与血管功能调控

生命科学 2006年第5期18卷 497-501页

作者：封淑颖邹竹荣华东师范大学生命科学学院上海200062

当前,越来越多的研究聚焦于由脂肪组织分泌产生的血浆蛋白,即脂肪细胞因子对血管的直接作用,其中最引人注目的是脂联素表现出显著的抗炎症和抗动脉粥样硬化的功效。本综述主要总结了脂联素对血管功能影响的研究进展,并从几方面,诸如对... 详细信息

当前,越来越多的研究聚焦于由脂肪组织分泌产生的血浆蛋白,即脂肪细胞因子对血管的直接作用,其中最引人注目的是脂联素表现出显著的抗炎症和抗动脉粥样硬化的功效。本综述主要总结了脂联素对血管功能影响的研究进展,并从几方面,诸如对血管结构、内皮细胞炎症反应、一氧化氮(NO)产生及血管生成的影响进行详细阐述。

关键词：脂联素内皮细胞血管功能

融合酰基载体蛋白可增强大肠杆菌重组蛋白的可溶性和热稳定性

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中国生物工程杂志 2017年第7期37卷 115-123页

作者：刘延娟李旭娟袁航刘娴高艳秀龚明邹竹荣云南师范大学生命科学学院教育部生物质能源持续发展和应用工程研究中心昆明650500 云南省农业科学院甘蔗研究所开远661600

目前,蛋白质可溶性和热稳定性已成为重组蛋白高效生产、功能应用和长久保存不可回避的问题,而使用酸性蛋白融合标签可能是其有效解决策略。酰基载体蛋白(ACP)是脂肪酸生物合成途径的必要组分,在大肠杆菌中为一个高度酸性的小分子多肽。... 详细信息

目前,蛋白质可溶性和热稳定性已成为重组蛋白高效生产、功能应用和长久保存不可回避的问题,而使用酸性蛋白融合标签可能是其有效解决策略。酰基载体蛋白(ACP)是脂肪酸生物合成途径的必要组分,在大肠杆菌中为一个高度酸性的小分子多肽。将大肠杆菌ACP与几个热不稳定的靶蛋白[如小桐子抗坏血酸过氧化物酶1(Jc APX1)、大豆核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶的活化酶2(GmRCA2)、大肠杆菌高丝氨酸O-转琥珀酰酶(EcMetA)]进行基因融合并使其在大肠杆菌中诱导表达,发现ACP融合能显著增强这些重组靶蛋白的可溶性。另外,对重组蛋白的热处理和酶活性分析发现,融合ACP还能极大提高这三个靶蛋白的热稳定性,并有效保护JcAPX1酶活免遭热失活,使其耐热性提高了至少2℃。ACP的这种效果推测可能与其高酸度特性有关,可以作为一个新的功能酸性融合标签。

关键词：酰基载体蛋白酸性融合标签重组蛋白可溶性热稳定性

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人脂联素在大肠杆菌中的可溶性表达

四川大学学报（自然科学版） 2010年第1期47卷 161-166页

作者：周培封淑颖邹竹荣李雪娇詹晓莹曹丽娟华东师范大学生命科学学院上海200062 云南师范大学生命科学学院昆明650092

为了提高重组人脂联素在大肠杆菌中的可溶性,构建和表达了增溶标签与人脂联素的融合表达载体.这些标签包括大肠杆菌硫氧还蛋白和NusA蛋白、酿酒酵母SUMO蛋白和噬热海洋菌Thermotoga maritime的红素氧还蛋白.结果显示,所有的人脂联素融... 详细信息

为了提高重组人脂联素在大肠杆菌中的可溶性,构建和表达了增溶标签与人脂联素的融合表达载体.这些标签包括大肠杆菌硫氧还蛋白和NusA蛋白、酿酒酵母SUMO蛋白和噬热海洋菌Thermotoga maritime的红素氧还蛋白.结果显示,所有的人脂联素融合蛋白在大肠杆菌中都获得了高水平的表达,但可溶性存在很大差异,说明不同融合标签对人脂联素可溶性表达的促进作用不同.其中,红素氧还蛋白与SUMO蛋白组合一起对人脂联素可溶性的增强作用最为显著,其相应的融合蛋白几乎全部可溶.另外,通过酵母SUMO/Ulp1反应,经His标签亲和层析纯化得到的人脂联素融合蛋白能被有效酶切,加工为人脂联素成熟肽产物.

关键词：人脂联素大肠杆菌增溶标签可溶性表达

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植物活性氧的产生及其作用和危害

西北植物学报 2014年第9期34卷 1916-1926页

作者：张梦如杨玉梅成蕴秀周滔段晓艳龚明邹竹荣云南师范大学生命科学学院教育部生物质能源持续发展和应用工程研究中心云南省生物质能源和环境生物技术重点实验室昆明650500

活性氧(ROS)是一类由O2转化而来的自由基或具有高反应活性的离子或分子。植物消耗的O2约有1%在叶绿体、线粒体、过氧化物酶体等多种亚细胞单位中被转化成了ROS。ROS有益或有害取决于它在植物体内的浓度。低浓度的ROS作为第二信使能在植... 详细信息

活性氧(ROS)是一类由O2转化而来的自由基或具有高反应活性的离子或分子。植物消耗的O2约有1%在叶绿体、线粒体、过氧化物酶体等多种亚细胞单位中被转化成了ROS。ROS有益或有害取决于它在植物体内的浓度。低浓度的ROS作为第二信使能在植物细胞信号转导途径中介导多种应答反应,高浓度的ROS则引起生物大分子的氧化损伤甚至细胞死亡。植物体内ROS产生和清除之间的平衡十分重要,并由一套有效的酶促和非酶促抗氧化系统来监控。该文主要系统介绍了植物ROS的种类、产生部位、在信号转导中的作用及其对植物细胞造成的主要伤害等方面的研究进展,为利用基因工程手段来提高植物对环境胁迫的抗性提供信息和思路。

关键词：植物活性氧种类产生第二信使氧化损伤

甲基戊糖梭菌膜整合焦磷酸酶提高转基因烟草的抗旱性

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生物技术通报 2017年第6期33卷 81-88页

作者：刘延娟杨玉梅刘娴高艳秀袁航龚明邹竹荣云南师范大学生命科学学院云南省生物质能源和环境生物技术重点实验室教育部生物质能源持续发展和应用工程研究中心昆明650500

由焦磷酸(PPi)驱动的膜整合焦磷酸酶(PPase)在生物适应逆境方面可能起着重要作用,包括H^+-PPase、Na^+-PPase和Na^+,H^+-PPase三个亚家族。相比于H^+-PPase,其它两个亚家族PPase近年来才在原核生物(特别是动物肠道菌)中被发现,有关它们... 详细信息

由焦磷酸(PPi)驱动的膜整合焦磷酸酶(PPase)在生物适应逆境方面可能起着重要作用,包括H^+-PPase、Na^+-PPase和Na^+,H^+-PPase三个亚家族。相比于H^+-PPase,其它两个亚家族PPase近年来才在原核生物(特别是动物肠道菌)中被发现,有关它们的应用研究更是匮乏。通过两轮巢式PCR从人肠道宏基因组中扩增得到甲基戊糖梭菌膜整合焦磷酸酶(CmPP)全长基因。序列分析表明该基因含有一个完整的ORF(长2 100 bp,编码一个699 aa的蛋白质,G+C含量为59.9%,碱基分布均衡)。膜拓扑学结构预测CmPP是一个由16个跨膜α螺旋组成的膜蛋白,与目前已鉴定过的膜PPase跨膜结构相符。序列比对分析推测CmPP属于K+依赖型Na^+,H^+-PPase亚家族成员。另外,通过农杆菌转化获得了CmPP转基因烟草。对其子一代植株的抗旱分析发现,在干旱胁迫条件下CmPP转基因株系的干物质含量、总叶绿素含量和根系活力均下降,而其叶片MDA含量和电解质渗透率均升高,但相同胁迫下的变化程度都显著低于野生型烟草。这些结果表明CmPP基因的导入能够有效提高烟草的抗旱能力。

关键词：甲基戊糖梭菌膜整合焦磷酸酶基因克隆转基因烟草抗旱性