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SH-6联合CHKA基因沉默对胶质瘤细胞增殖及侵袭的影响

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中国免疫学杂志 2022年第8期38卷 897-902页

作者：黄灵邹有瑞李琢琦岳芳倩马辉(指导) 宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学总医院神经外科银川750004

目的:探讨特异性AKT抑制剂SH-6联合慢病毒沉默CHKA基因在体内外对胶质瘤细胞系U87增殖、侵袭的影响及机制。方法:构建CHKA短发夹CHKA(shCHKA)慢病毒及对照慢病毒(shNC)感染U87细胞系并设置分组。分别采用CCK-8法检测胶质瘤细胞的增殖,... 详细信息

目的:探讨特异性AKT抑制剂SH-6联合慢病毒沉默CHKA基因在体内外对胶质瘤细胞系U87增殖、侵袭的影响及机制。方法:构建CHKA短发夹CHKA(shCHKA)慢病毒及对照慢病毒(shNC)感染U87细胞系并设置分组。分别采用CCK-8法检测胶质瘤细胞的增殖,流式细胞术检测胶质瘤细胞的周期、凋亡,Transwell实验观察胶质瘤细胞侵袭。胶质瘤动物模型实验评估联合治疗效果并记录肿瘤体积变化,采用免疫组化及Western blot检测胶质瘤细胞及肿瘤组织中CHKA、PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达。结果:联合治疗能显著抑制胶质瘤细胞的增殖及侵袭,细胞周期主要停滞在G2期,细胞凋亡率显著增加,联合治疗能够使CHKA、PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达量降低。结论:SH-6联合慢病毒沉默CHKA在体内外能够显著抑制U87细胞的增殖及侵袭。本研究可能为脑胶质瘤的联合治疗提供新的抗肿瘤策略。

关键词：胆碱激酶α(CHKA) 裸鼠 U87 SH-6 增殖侵袭

术区应用罂粟碱与尼莫地平对动脉瘤手术后脑血管痉挛疗效的对比分析

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术区应用罂粟碱与尼莫地平对动脉瘤手术后脑血管痉挛疗效的对比分...

作者：邹有瑞宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的通过对144例前交通及98例大脑中动脉动脉瘤手术患者的回顾性分析，旨在对比术区应用罂粟碱与尼莫地平防治动脉瘤夹闭术后脑血管痉挛(CVS)的疗效差异。材料和方法选取宁夏医科大学总医院神经外科2004年-2011年期间收治的符合纳入标... 详细信息

目的通过对144例前交通及98例大脑中动脉动脉瘤手术患者的回顾性分析，旨在对比术区应用罂粟碱与尼莫地平防治动脉瘤夹闭术后脑血管痉挛(CVS)的疗效差异。材料和方法选取宁夏医科大学总医院神经外科2004年-2011年期间收治的符合纳入标准的242例颅内动脉瘤患者，其中144例为前交通动脉瘤及98例为大脑中动脉动脉瘤，均在我院行显微手术治疗，前交通动脉瘤患者中分为术区应用罂粟碱灌洗组(N=78)，术区应用尼莫地平灌洗组(N=66)，大脑中动脉动脉瘤患者中分为术区应用罂粟碱灌洗组(N=56)，术区应用尼莫地平组(N=42)，两组间通过术前、术后严格控制影响CVS的因素，术后CVS的诊断通过临床诊断标准及复查颅脑CTA、CT、TCD影像学检查，比较术后第1d、3d、7d CVS的发生率及出院时(<4周)神经功能状态(GOS评分)。结果术区应用罂粟碱组与术区应用尼莫地平组，通过对术前各种术前影响因素的控制，两组具有可比性;前交通动脉瘤夹闭术中应用罂粟碱组术后CVS总的发生率为48.72%，术后第1d、3d、7d CVS的发生率分别为53.85%、48.72%、43.59%，术中应用尼莫地平组术后CVS总的发生率为28.28%，术后第1d、3d、7d CVS的发生率分别为34.58%、30.30%、18.18%，两组比较采用卡方检验，术后第1d χ=5.210，P=0.022，术后第3d，χ=4.222，P=0.040，术后第7d χ=10.616, P=0.001;大脑中动脉动脉瘤夹闭术中应用罂粟碱组术后CVS总的发生率为48.81%，术后第1d、3d、7d CVS的发生率分别为57.14%、60.71%、51.79%;术中应用尼莫地平组术后CVS总的发生率为27.78%，术后第1d、3d、7d CVS的发生率分别为35.71%、38.10%、26.20%，两组比较采用卡方检验，术后第1d χ=4.416, P=0.036，术后第3d χ=4.914，P=0.027，术后第7d χ2=0.05=6.509，P=0.011;前交通动脉及大脑前动脉动脉瘤夹闭术后1d，3d，7d两组CVS的比较均有显著性差异(P<0.05)，即罂粟碱组CVS的发生率明显高于尼莫地平组。两组患者出院时(<4周)GOS评分比较，前交通动脉及大脑中动脉动脉瘤夹闭术后秩和检验测得结果分别为：Z=-2.168P=0.03，Z=-2.058P=0.040，出院时患者神经功能状态有显著性差异，尼莫地平组术后神经功能恢复明显好于罂粟碱组(P<0.05)。结论(1)尼莫地平与罂粟碱术区灌洗安全、有效，可以显著缓解术后脑血管痉挛的发生;(2)术区应用尼莫地平局部灌洗组比术区应用罂粟碱局部灌洗组术后脑血管痉挛的发生率明显降低，能明显改善患者出院时神经功能状态，改善患者预后，值得在临床上应用和推广。

关键词：脑血管痉挛动脉瘤夹闭术罂粟碱尼莫地平

儿童髓母细胞瘤分子病理学分型与诊断及预后的研究进展

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中国实验诊断学 2022年第1期26卷 108-112页

作者：高鑫义邹有瑞黄灵马辉宁夏医科大学宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院神经外科宁夏银川750004

髓母细胞瘤(MB)的预后与该肿瘤的分子分型和危险分层密切相关。根据术前影像学检查和术后病理学及基因检测结果可以明确MB的分子病理,进一步确定分型,并依据危险分层制定个体化的治疗策略,同时判断预后。本文从MB的遗传(分子)群入手,根... 详细信息

髓母细胞瘤(MB)的预后与该肿瘤的分子分型和危险分层密切相关。根据术前影像学检查和术后病理学及基因检测结果可以明确MB的分子病理,进一步确定分型,并依据危险分层制定个体化的治疗策略,同时判断预后。本文从MB的遗传(分子)群入手,根据MB发生发展中的细胞、基因、分子变化,综述MB的分子分型、危险分层及预后的研究进展。

关键词：髓母细胞瘤分子病理分子分型危险分层预后

SH-6联合LY294002对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及机制探究

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宁夏医学杂志 2022年第12期44卷 1057-1060页

作者：邹有瑞李嘉麟黄灵马悦马辉宁夏医科大学总医院神经外科宁夏银川750004 宁夏医科大学宁夏银川750004

目的探究磷脂酰肌醇磷酸类似物SH-6联合PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法使用SH-6及LY294002处理胶质瘤细胞,并设置分组,分为对照组、DMSO组、联合组,使用Western-Blot检测p-PI3K、PI3K、... 详细信息

目的探究磷脂酰肌醇磷酸类似物SH-6联合PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法使用SH-6及LY294002处理胶质瘤细胞,并设置分组,分为对照组、DMSO组、联合组,使用Western-Blot检测p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT蛋白的表达水平。分别运用流式细胞实验、CCK-8实验、划痕实验、Transwell等方法观察在不同实验条件下胶质瘤细胞周期、增殖、凋亡、侵袭及转移功能变化情况。结果 Western-Blot检测到联合组的胶质瘤细胞中p-PI3K、p-AKT蛋白的表达量均降低(P<0.05),PI3K、AKT总蛋白的表达量无明显变化。联合组处于G0/G1期的胶质瘤细胞比例明显高于对照组、DMSO组(P<0.05),胶质瘤细胞增殖、侵袭和转移能力明显减弱,凋亡率显著增加(P<0.05)。结论 SH-6联合LY294002能够调节PI3K/AKT信号通路中PI3K和AKT蛋白修饰的磷酸化,进而影响胶质瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和转移等生物学功能。

关键词：胶质瘤 SH-6 LY294002 侵袭 PI3K AKT

大鼠增殖抑制基因过表达对C6胶质瘤细胞侵袭的抑制作用及其机制探讨

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肿瘤 2017年第2期37卷 126-134,162页

作者：王军成邹有瑞吴桥霍国进蒋树财高鹏夏明沈冰宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川750004 宁夏医科大学宁夏颅脑疾病重点实验室宁夏回族自治区银川750004 宁夏医科大学总医院神经外科宁夏回族自治区银川750004 榆林市第一医院神经外科陕西榆林719000 滨州市人民医院神经外科山东滨州256600 徐州市肿瘤医院神经外科江苏徐州221005

目的 :研究大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,r HSG)过表达对胶质瘤C6细胞侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :用携带r HSG基因的重组腺病毒Adv-r HSG-GFP感染胶质瘤C6细胞,同时设置Adv-GFP感染的阴性对照组以... 详细信息

目的 :研究大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,r HSG)过表达对胶质瘤C6细胞侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :用携带r HSG基因的重组腺病毒Adv-r HSG-GFP感染胶质瘤C6细胞,同时设置Adv-GFP感染的阴性对照组以及仅PBS处理的空白对照组。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞中r HSG的表达变化。然后,采用细胞划痕愈合实验和Transwell迁移及侵袭实验分别检测r HSG过表达对胶质瘤C6细胞迁移和侵袭的影响,细胞免疫荧光法和细胞黏附实验分别分析r HSG过表达后C6细胞骨架形成和黏附能力的变化,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法测定各组细胞中Rho/Rock信号通路关键分子Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family,member A,RhoA)、Ras相关的C3肉毒底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)、细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rho associated coiled-coil forming protein kinase 1,Rock1)和Rock2的表达水平。结果 :重组腺病毒Adv-r HSG-GFP感染48和72 h后,胶质瘤C6细胞中r HSG的表达水平明显升高(P值均<0.01)。与2个对照组相比,Advr HSG-GFP组细胞的划痕愈合率明显降低(P值均<0.01),迁移、侵袭和黏附细胞数均明显减少(P值均<0.05)。r HSG过表达后C6细胞形态发生变化,丝状伪足缩短,部分呈片状;而且细胞中Rho A、Rac1、Cdc42、Rock1和Rock2的m RNA及蛋白表达水平均明显降低(P值均<0.05)。结论 :r HSG过表达可以抑制胶质瘤C6细胞的侵袭,其作用机制可能与阻滞Rho/Rock信号通路有关。

关键词：神经胶质瘤基因表达调控,肿瘤细胞运动 Rho相关激酶类增殖抑制基因

敲低胆碱激酶α(CHKA)抑制U87MG人胶质瘤细胞增殖和侵袭及迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第8期36卷 724-728页

作者：岳芳倩邹有瑞孙胜玉王哲黄灵马辉宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院神经外科宁夏银川750004

目的检测胶质瘤组织胆碱激酶α(CHKA)的表达并进一步探讨敲低CHKA对U87MG人胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用实时定量PCR检测高级别胶质瘤组织和外伤脑组织CHKA的mRNA表达,Western blot法检测肿瘤组织和外伤组织CHKA蛋... 详细信息

目的检测胶质瘤组织胆碱激酶α(CHKA)的表达并进一步探讨敲低CHKA对U87MG人胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法采用实时定量PCR检测高级别胶质瘤组织和外伤脑组织CHKA的mRNA表达,Western blot法检测肿瘤组织和外伤组织CHKA蛋白表达。构建CHKA短发夹RNA(shCHKA)慢病毒及其对照慢病毒(shNC)并感染U87MG胶质瘤细胞,分为shCHKA组、载体对照组和空白对照组。CCK-8法检测U87MG细胞增殖,TranswellTM侵袭实验检测胶质瘤细胞侵袭能力,划痕愈合实验检测其迁移能力。结果胶质瘤组织中CHKA mRNA和蛋白高表达。敲低CHKA基因后,抑制U87MG胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移。结论CHKA在胶质瘤组织中的表达量明显高于正常脑组织且下调CHKA可抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力,CHKA可能是一种促癌基因与胶质瘤的发生发展有关。

关键词：胆碱激酶α(CHKA) U87MG细胞细胞增殖细胞侵袭细胞迁移

CHKA基因沉默对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其机制

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中国癌症杂志 2021年第11期31卷 1041-1049页

作者：黄灵邹有瑞李琢琦马悦高鑫义马辉宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院神经外科宁夏银川750004

背景与目的:胶质瘤是颅内常见的原发性恶性肿瘤之一,但发病机制不明,胆碱激酶A(choline kinase A,CHKA)与胶质瘤的恶性程度呈正相关,但具体作用途径尚不清楚。探讨下调CHKA基因的表达对胶质瘤细胞系U87和U251增殖、凋亡和迁移的影响及... 详细信息

背景与目的:胶质瘤是颅内常见的原发性恶性肿瘤之一,但发病机制不明,胆碱激酶A(choline kinase A,CHKA)与胶质瘤的恶性程度呈正相关,但具体作用途径尚不清楚。探讨下调CHKA基因的表达对胶质瘤细胞系U87和U251增殖、凋亡和迁移的影响及其作用机制。方法:使用慢病毒感染胶质瘤细胞系U87和U251,同时设置阴性对照组(shNC组)和空白对照组(control组)。为研究磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号转导通路与CHKA的相互作用,另设DMSO组和LY294002组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测CHKA基因mRNA的表达水平,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,采用transwell实验检测细胞侵袭能力,采用划痕实验检测细胞迁移能力,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测胶质瘤细胞中CHKA、PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT蛋白的水平。结果:Western blot结果显示,与control组和shNC组相比,shCHKA组胶质瘤细胞中p-PI3K、p-AKT和CHKA蛋白水平同步降低(P0.05)。与此同时,shCHKA组胶质瘤细胞的侵袭、迁移能力均弱于control组和shNC组(P<0.05),细胞凋亡率明显增加,细胞周期主要停滞于G_(2)期,细胞增殖明显降低(P<0.05)。结论:CHKA基因可能是通过调控PI3K/AKT信号转导通路,从而影响胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为,且CHKA对PI3K/AKT信号转导通路的调控是单向的,PI3K/AKT信号转导通路中蛋白水平的降低对CHKA的表达无反馈作用。

关键词：胶质瘤胆碱激酶A 侵袭磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B

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RGS5表达变化和大鼠胶质瘤生长的关系

实用肿瘤杂志 2017年第5期32卷 406-410页

作者：郝文炯王占伟郭晖邹有瑞蒋树财孙涛沈冰延安大学附属医院神经外科陕西延安716000 郑州市第七人民医院神经外科河南郑州450000 潍坊市人民医院神经外科山东潍坊261041 宁夏医科大学总医院神经外科宁夏回族自治区银川750004 滨州市人民医院神经外科山东滨州256600

目的探讨G蛋白信号调节因子5(regulator of G protein signaling 5,RGS5)表达变化与大鼠胶质瘤生长之间的关系。方法 72只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机平均分为胶质瘤组、生理盐水组、健康对照组、腺病毒-大鼠增殖抑制基因-绿色荧光蛋白... 详细信息

目的探讨G蛋白信号调节因子5(regulator of G protein signaling 5,RGS5)表达变化与大鼠胶质瘤生长之间的关系。方法 72只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机平均分为胶质瘤组、生理盐水组、健康对照组、腺病毒-大鼠增殖抑制基因-绿色荧光蛋白重组复合物(adenovirus-rat hyperplasia suppressor gene-green fluorescent protein,Adv-r HSG-GFP)组。胶质瘤组和Adv-r HSG-GFP组建立大鼠C6胶质瘤动物模型,生理盐水组颅内注射10μL生理盐水,健康对照组为健康大鼠。Adv-r HSG-GFP组在接种C6胶质瘤细胞后第4和11天,于肿瘤原位注射重组腺病毒Adv-r HSG-GFP。接种C6胶质瘤细胞后第9、15和21天取脑胶质瘤观察肿瘤的生长情况,免疫组织化学法检测RGS5蛋白的表达。结果 Adv-r HSG-GFP组肿瘤体积小于胶质瘤组(P<0.01)。生理盐水组和健康对照组无肿瘤生长。接种后第15和21天胶质瘤组RGS5蛋白表达均高于生理盐水组、健康对照组和Adv-r HSG-GFP组(均P<0.01)。结论 RGS5高表达与大鼠胶质瘤生长密切相关。

关键词：神经胶质瘤/病理学信号传导 GTP结合蛋白质类基因表达大鼠,Sprague-Dawley 疾病模型,动物

胆碱激酶α在不同级别胶质瘤中的表达差异及临床意义

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中国癌症杂志 2021年第10期31卷 892-898页

作者：黄灵邹有瑞马悦李琢琦高鑫义阿布拉古马辉宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院神经外科宁夏银川750004

背景与目的:胶质瘤是颅内中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,常规治疗效果往往不理想。胆碱激酶α(choline kinase alpha,CHKα)与肿瘤的发生、发展密切相关。探讨CHKα在胶质瘤中的表达及与患者预后的关系。方法:回顾并分析宁夏医科大学总... 详细信息

背景与目的:胶质瘤是颅内中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,常规治疗效果往往不理想。胆碱激酶α(choline kinase alpha,CHKα)与肿瘤的发生、发展密切相关。探讨CHKα在胶质瘤中的表达及与患者预后的关系。方法:回顾并分析宁夏医科大学总医院神经外科2017年1月—2019年12月收治的120例胶质瘤患者的临床病理学资料。患者根据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)分级标准分为Ⅰ~Ⅳ级。采用免疫组织化学染色法检测CHKα在不同级别胶质瘤中的表达,分析CHKα的表达与患者的临床病理学特征之间的关系。采用Kaplan-Meier法对患者的生存情况进行分析。采用生物信息学数据库中的相关临床数据对CHKα表达与脑胶质瘤患者的生存关系进行进一步验证。结果:脑胶质瘤患者120例中,男性62例,女性58例。病理学类型包括毛细胞型星形细胞瘤32例,弥漫性星形细胞瘤26例,间变型星形细胞瘤30例,多形性胶质母细胞瘤32例。CHKα表达阳性率分别为9.77%、7.81%、95.03%和92.90%。CHKα蛋白在不同级别的胶质瘤组织中表达差异有统计学意义(P<0.01)。截至2021年6月30日,有60例患者死亡,10例失访,随访率为91.67%。采用KaplanMeier法分析CHKα蛋白在不同级别胶质瘤中的表达差异与患者预后的关系,结果发现,CHKα低表达患者的总生存期比高表达者长,预后佳,并发症发生率显著低于CHKα高表达组,差异有统计学意义(P<0.01)。这一结果与生物信息学分析结果相符(P<0.05)。结论:CHKα在不同级别胶质瘤中的表达差异显著,且与患者预后密切相关。CHKα的表达情况可作为胶质瘤患者的诊断和判断患者预后的指标。

关键词：胶质瘤胆碱激酶α 免疫组织化学预后