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红色荧光蛋白核迁移蛋白shRNA干扰载体的构建

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细胞与分子免疫学杂志 2011年第7期27卷 740-743页

作者：廖霞庞实锋张强杨芳郑克勤周汝滨曹定国邹宇光广东医学院生物学教研室广东湛江524023 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司广东深圳518057 广州市禺山高级中学广东广州511400

目的:利用红色荧光蛋白(RFP),建立一种直观、快速筛选有效RNA干扰片段的方法。方法:通过分子克隆技术将核迁移蛋白(NUDC)与RFP构建成融合基因,克隆至真核表达载体pDs中,以实现其融合表达;同时,将人U6启动子及9个NUDC的发夹结构分别克隆... 详细信息

目的:利用红色荧光蛋白(RFP),建立一种直观、快速筛选有效RNA干扰片段的方法。方法:通过分子克隆技术将核迁移蛋白(NUDC)与RFP构建成融合基因,克隆至真核表达载体pDs中,以实现其融合表达;同时,将人U6启动子及9个NUDC的发夹结构分别克隆至上述同一真核载体中,构建成一系列针对NUDC不同干扰位点的RNA干扰载体,通过采用酶切及DNA序列鉴定,然后转染293T细胞,通过荧光显微镜观察293T细胞的荧光发光强度及荧光细胞数。结果:酶切及测序结果证实质粒为所需的序列;荧光显微镜观察结果显示,shNUDC-A的干扰效果最好。结论:成功构建了含RFP的NUDC真核shRNA干扰载体。

关键词：融合基因 RNA干扰 shRNA

Mpl基因RNA干扰载体的构建及荧光显微镜筛选

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贵阳医学院学报 2012年第6期37卷 587-592页

作者：邹宇光莫玉叶庞实锋张强杨芳易文君何国锋喻巍巍郑克勤广东医学院生物学教研室广东湛江524023 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司广东深圳518057 广州市禺山高级中学广东广州511400

目的:建立荧光显微镜快速筛选对血小板生成素受体(Mpl)基因RNA干扰片段的方法。方法:通过体外重组技术将Mpl与绿色荧光蛋白(GFP)构建成融合基因,克隆进pDs载体中产生pDs-Mpl-GFP载体,将人U6启动子及5个Mpl shRNA发夹结构(shMpl-A,shMpl-... 详细信息

目的:建立荧光显微镜快速筛选对血小板生成素受体(Mpl)基因RNA干扰片段的方法。方法:通过体外重组技术将Mpl与绿色荧光蛋白(GFP)构建成融合基因,克隆进pDs载体中产生pDs-Mpl-GFP载体,将人U6启动子及5个Mpl shRNA发夹结构(shMpl-A,shMpl-B,shMpl-C,shMpl-D,shMpl-E)分别克隆至pDs-Mpl-GFP真核载体中,构建出针对Mpl 5个不同位点的RNA干扰载体,然后将获得的上述干扰载体通过脂质体方法转染至293T细胞中,用荧光显微镜观察293T细胞的荧光发光强度及荧光细胞数,判定构建的RNA干扰载体对靶基因RNA的干扰效果。结果:构建的5个干扰载体都能对转染的293T细胞中的Mpl-GFP融合基因进行有效的基因敲减作用,在pDs-Mpl-GFP-TK-U6-shMpl-A、pDs-Mpl-GFP-TK-U6-shMpl-B与pDs-Mpl-GFP-TK-U6-shMpl-E的干扰作用下,293T细胞中的荧光强度及发荧光细胞数目变得更少和更弱,干扰效果较好,而其它两个效果较差;在这三个较好的干扰载体中,pDs-Mpl-GFP-TK-U6-shMpl-A的干扰效果最好。结论:成功构建Mpl基因的真核RNA干扰载体,并筛选出有效的RNA干扰片段。

关键词：绿色荧光蛋白 RNA干扰基因融合

用流式细胞仪进行人核迁移蛋白shRNA有效干扰片段的分析和筛选

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南昌大学学报（医学版） 2012年第8期52卷 1-5,9页

作者：廖霞邹宇光庞实锋郑克勤周汝滨曹定国梁朋胡传银广东医学院基础医学院生物学教研室广东湛江524023

目的为了更好地利用流式细胞仪筛选出有效的RNA干扰片段,构建了一系列真核表达载体pDs-NUDC-RFP-TK-U6-shNUDC-A、B、C、D、E、F、H。方法将NUDC-RFP融合基因克隆至pDs载体中,构建出pDs-NUDC-RFP.载体;将人U6启动子克隆至pDs-NUDC-RFP.... 详细信息

目的为了更好地利用流式细胞仪筛选出有效的RNA干扰片段,构建了一系列真核表达载体pDs-NUDC-RFP-TK-U6-shNUDC-A、B、C、D、E、F、H。方法将NUDC-RFP融合基因克隆至pDs载体中,构建出pDs-NUDC-RFP.载体;将人U6启动子克隆至pDs-NUDC-RFP.载体中;将shNUDC-A、B、C、D、E、F、H各个片段分别克隆至含有U6启动子的载体中,形成一系列RNA干扰载体pDs-NUDC-RFP-TK-U6-shNUDC-A、B、C、D、E、F、H;将提取高质量的质粒通过脂质体方法转染293T细胞。用流式细胞仪分析转染的293T细胞的荧光强度和荧光细胞数量,用实时荧光相对定量RT-PCR(real-time PCR)检测NUDC-RFP mRNA的转录情况,用Western Blot法检测NUDC-RFP融合蛋白的表达水平。结果流式细胞仪检测结果显示:空白对照组的293T细胞无发光细胞;阴性对照组的293T细胞能正常发光,且发光细胞数量较多;实验组的293T细胞发光细胞数量少,荧光强度低,说明其能有效干扰NUDC-RFP融合基因的表达,pDs-NUDC-RFP-TK-U6-shNUDC-F干扰下调效果约90%左右;pDs-NUDC-RFP-TK-U6-shNUDC-A可干扰hNUDC-RFP融合基因的表达,下调效果约85%左右;其他干扰片段pDs-NUDC-RFP-TK-U6-shNUDC-B、C、D、E、H下调效果在62%～75%;阴性对照组对融合基因无干扰效果;流式细胞仪检测结果与real-time PCR检测结果一致,也与Western Blot法的鉴定结果基本符合,并确定了shNUDC-F为RNA干扰效果最佳的干扰片段。结论流式细胞仪分析方法是一种有效的带荧光标记的RNA干扰载体的筛选方法,为后期研究打下了基础。

关键词：人核迁移蛋白红色荧光蛋白融合基因流式细胞仪

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融合光学椭率判据的自由曲面望远镜设计方法

光子学报 2024年第3期53卷 74-90页

作者：黄静许宁晏邹宇通乔文佑伦旭磊孔梅梅陆辰熙高志山袁群南京理工大学电子工程与光电技术学院南京210094 南京邮电大学电子与光学工程学院、柔性电子(未来技术)学院南京210023

光学椭率是联系天文望远镜光学设计与暗物质探测科学目标的一项核心性能指标,然而目前还没有将椭率作为指标融入光学系统优化设计过程的完整方法。提出了一种融合光学椭率判据的自由曲面望远镜光学设计方法,依据椭率与彗差、像散等非旋... 详细信息

光学椭率是联系天文望远镜光学设计与暗物质探测科学目标的一项核心性能指标,然而目前还没有将椭率作为指标融入光学系统优化设计过程的完整方法。提出了一种融合光学椭率判据的自由曲面望远镜光学设计方法,依据椭率与彗差、像散等非旋转对称像差的关系,提出了椭率关联性较强的像差分量优先校正原则,开拓了主要离轴像差校正后通过MZDDE在评价函数中融入椭率判据的设计思想,结合离轴三反系统中像差节点与椭率节点在优化过程中的演变规律,建立了自由曲面面型Zernike项的优化策略。据此设计了离轴三反自由曲面天文望远镜,系统有效焦距为600 mm,口径为200 mm,视场为4°×4°。通过波像差和椭率的联合优化,成像像质及光学椭率得到了同步有效控制,波像差近衍射极限,椭率最大值为0.030 3,平均值为0.015 6。与从低阶项到高阶项的传统像差校正优化方法相比,该方法采用相对较小的自由曲面偏差,设计的自由曲面望远镜成像质量和椭率性能得到了同步控制,充分发挥了自由曲面的效能,设计效率优势明显。

关键词：光学设计自由曲面光学椭率节点像差 Zernike多项式

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荧光碳点的制备及应用

化学进展 2014年第1期26卷 61-74页

作者：颜范勇邹宇王猛代林枫周旭光陈莉天津工业大学环境与化学工程学院中空纤维膜材料与膜过程国家重点实验室天津300387 天津工业大学材料科学与工程学院改性与功能纤维天津市重点实验室天津300387

荧光碳点是继富勒烯、碳纳米管及石墨烯之后最热门的碳纳米材料之一。这种纳米材料克服了传统量子点的某些缺点,不仅具有优良的光学性能与小尺寸特性,而且具有良好的生物相容性,易于实现表面功能化,在生化传感、成像分析、环境检测、光... 详细信息

荧光碳点是继富勒烯、碳纳米管及石墨烯之后最热门的碳纳米材料之一。这种纳米材料克服了传统量子点的某些缺点,不仅具有优良的光学性能与小尺寸特性,而且具有良好的生物相容性,易于实现表面功能化,在生化传感、成像分析、环境检测、光催化技术及药物载体等领域具有很好的应用潜力。本文就近年来人们对荧光碳点的研究进行了综述,简述了碳点的特性,重点介绍了荧光碳点应用的最新进展,对碳点发展过程中尚待解决的问题进行总结并对未来发展方向进行了展望。

关键词：碳点荧光光学特性制备应用

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室内高速率LED紫外光通信系统技术研究

室内高速率LED紫外光通信系统技术研究

作者：邹宇重庆大学

学位级别：硕士

紫外光无线通信系统是一种新兴的通信方式，具有非视距通信、全天候全方位工作、抗干扰能力强和保密性好等多种优势，具有应用于军事战场的潜力，受到广泛的关注和重视。本文详细分析了瑞利散射和米氏散射对紫外通信系统的影响，奠... 详细信息

紫外光无线通信系统是一种新兴的通信方式，具有非视距通信、全天候全方位工作、抗干扰能力强和保密性好等多种优势，具有应用于军事战场的潜力，受到广泛的关注和重视。本文详细分析了瑞利散射和米氏散射对紫外通信系统的影响，奠定了紫外光通信系统能够实现有限区域范围内的非视距通信的理论基础。此外，分析了三种不同实用范围的信道传输数学模型：直视通信链路、基于椭球坐标系的单散射模型和基于蒙特卡罗算法的多散射模型。系统采用单脉冲位置调制方式，平均辐射率低，在综合考虑传输效率和传输速率下，调制长度为16时隙。为了提高系统可靠性，信道编码方式采用循环冗余校验编码，能够实现单比特纠错和多比特检错功能，采用的是欧洲国家所普遍使用的CRC-CCITT生成多项式。调制解调和信道编码的硬件平台均采用现场可编程逻辑阵列，在QuartusⅡ中用Verilog HDL语言编程实现，相比于单片机技术，FPGA资源丰富，调试简单，可移植性好。本文设计了系统的外围硬件电路：光源恒流驱动电路、光电倍增管读出电路和信号处理电路等。整个通信系统的流程为：发射端调制编码后的信号接入光源驱动电路的使能端，控制LED的开关状态来传递不同的信息;接收端光电倍增管探测到发送光子，经过读出电路转换为电压信号，经过滤波、级联放大和成形后，恢复出原始的发送信号，进行信道解码解调，送入PC串口，数据通信完成。本文成功搭建基于LED的紫外无线通信样机，并进行了多次的试验，结果表明：系统能够完成5m以内的低误码率数据通信，传输速率高达115.2Kbit/s，体积小，功耗低，能够达到预期的设计要求，为高速率紫外光通信系统的实用化奠定了良好的基础。文章最后总结了实验室两代通信系统的区别，并指出了下一步的工作展望。

关键词：无线通信紫外LED 脉冲位置调制循环冗余校验码

骨旁脂肪瘤临床影像学表现与病理分析(文献综述附14例报告)

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中国矫形外科杂志 2007年第15期15卷 1135-1138页

作者：杨新明石蔚杜雅坤孟宪勇邹宇纬刘肃李化光河北北方学院附属第一医院骨科河北张家口075000 河北北方学院附属第一医院儿科河北张家口075000 河北省儿童医院石家庄050031 河北北方学院附属第一医院骨科儿科河北张家口075000

[目的]结合文献探讨骨旁脂肪瘤的命名、病因、临床病理表现和影像学特点。[方法]将国内文献的20例一起列入临床资料分析,包括作者14例共34例术前均行X线摄片,18例行CT检查,4例行MRI检查。[结果]本病发生于任何年龄,成人多见,以四肢长管... 详细信息

[目的]结合文献探讨骨旁脂肪瘤的命名、病因、临床病理表现和影像学特点。[方法]将国内文献的20例一起列入临床资料分析,包括作者14例共34例术前均行X线摄片,18例行CT检查,4例行MRI检查。[结果]本病发生于任何年龄,成人多见,以四肢长管状骨为好发,其次发生于扁平骨（骨盆、肩岬骨、髌骨、肋骨）、不规则骨（胸椎、腰椎、骶尾椎）、短管状骨和跗骨;本病临床误诊率为41.17%,X线误诊率26.47%,CT及MRI诊断率100%;34例均手术切除,病理报告为脂肪瘤,3例低度恶变;随访2~10年,仅1例复发并恶变。[结论]骨旁脂肪瘤是最佳的命名,病因未明,但与遗传和先天因素及创伤和炎症因素有关;病理表现为带骨蒂的脂肪瘤,细胞学形态为脂肪组织;影像学具有特征性表现。

关键词：骨肿瘤骨旁脂肪瘤诊断影像学病理学临床

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布氏杆菌性脊柱炎临床影像学表现及外科治疗

中国矫形外科杂志 2007年第19期15卷 1463-1466页

作者：杨新明石蔚杜雅坤孟宪勇邹宇纬杨峰刘肃李化光河北北方学院附属第一医院骨科河北张家口075000 河北北方学院附属第一医院儿科河北张家口075000 河北省儿童医院石家庄050031 内蒙古正蓝旗医院正蓝旗027200

[目的]探讨布氏杆菌性脊椎炎的临床表现、影像学特点与外科治疗,以便提高该病的临床诊断和治疗水平。[方法]本组16例均行X线摄片并行CT检查,病灶分布腰椎多于胸椎,其中L4发病率最高,其中7例行MRI检查;16例血清试管凝集法滴度均大于1∶1... 详细信息

[目的]探讨布氏杆菌性脊椎炎的临床表现、影像学特点与外科治疗,以便提高该病的临床诊断和治疗水平。[方法]本组16例均行X线摄片并行CT检查,病灶分布腰椎多于胸椎,其中L4发病率最高,其中7例行MRI检查;16例血清试管凝集法滴度均大于1∶160,虎红平板凝集试验阳性,酶联免疫吸附试验检查特异性抗体IgM、IgG阳性,11例作病原学检查。[结果]14例入院前临床、X线及CT误诊为脊柱结核,误诊率87.5%;经MRI扫描误诊5例,误诊率71.43%;本组16例入院确诊后,在药物治疗基础上,2例采取介入方法,7例采取手术病灶清除,病理符合布氏杆菌性脊椎炎的细胞学表现。本组仅12例(包括手术8例)进行随访1～2年,痊愈10例,好转2例,愈后无复发。[结论]布氏杆菌性脊椎炎临床与影像学具有特征性表现;正确选择微创术和手术病灶清除术可以缩短疗程,减少并发症,提高治愈率;无论手术还是非手术治疗,长期、足量、联合、多途径敏感抗生素的应用是治疗和防止本病复发的最主要和最可靠方法。

关键词：布鲁氏菌病脊柱炎诊断影像学临床

双频掺钕微片激光器的光谱和模式仿真及实验研究

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双频掺钕微片激光器的光谱和模式仿真及实验研究

作者：邹宇玲杭州电子科技大学

学位级别：硕士

掺钕(Nd)激光增益介质具有高转换率并有着优良的热学性质,因此特别适用于微片激光器的工作场景。在各种实用场景中,双频微片激光器的频差是影响应用的关键参数之一,而其中激光增益介质材料、温度与谐振腔腔长等参数对双频微片激光器的... 详细信息

掺钕(Nd)激光增益介质具有高转换率并有着优良的热学性质,因此特别适用于微片激光器的工作场景。在各种实用场景中,双频微片激光器的频差是影响应用的关键参数之一,而其中激光增益介质材料、温度与谐振腔腔长等参数对双频微片激光器的频差有重要的影响。本文在此基础上,搭建了不同参数的Nd:Gd VO和Nd:YVO作为增益介质晶体的双频微片激光器,研究其频差温度特性及机理,然后针对Nd:YVO双频微片激光器,研究其光束质量和模式特性。全文大致如下:(1)阐述了微片激光器的现实意义及应用前景,然后概述了微片激光器国内外的研究现状与发展趋势,最后介绍了论文的结构内容。(2)先简单描述了激光器的基本原理,并介绍了本实验中涉及的激光掺钕增益介质的参数和光学谐振腔。由于本文基于掺钕双频微片激光器进行实验,针对实验分析了纵模选频、四能级系统的速率方程组和模式竞争的相关原理。最后推导研究了振荡阈值和输出功率,并着重推导分析了腔内单程光子损耗和高斯光束的基本公式。(3)对不同参数的Nd:Gd VO和Nd:YVO双频微片激光器进行频差温度特性研究。首先探究了在不同腔长的掺钕双频微片激光器中,晶体温控温度对双频信号频差的影响。实验中腔长为0.5 mm、0.8 mm和1 mm的Nd:YVO双频微片激光器频差随晶体温控温度的变化率分别为0.34 GHz/℃、0.12 GHz/℃和0.044 GHz/℃,且同腔长的Nd:YVO和Nd:Gd VO双频微片激光器频差随晶体温度的变化率相近。结果表明,对于不同腔长、不同材料的双频微片激光器,晶体温控温度与双频信号频差呈正相关,且腔长越小晶体温控温度对频差的影响更大。然后从晶体增益系数曲线的温度特性角度对上述问题进行了仿真,仿真与实验结果符合较好。结果表明,对于相同腔长的不同增益介质材料的双频微片激光器,增益系数曲线半高全宽Δv随温度变宽越剧烈,双频信号频差随晶体温控温度变化斜率也更大。(4)对1 mm腔长的Nd:YVO双频微片激光器测量光强分布,对其光束质量进行计算分析,并研究其模式特性。先用光束分析仪采集Nd:YVO双频微片激光器不同距离的光强分布图,计算出其束腰宽度和远场散射角,通过M的计算公式计算光束质量并分析结果。计算出在X轴方向上的M是3.06,Y轴方向上的M是4.30,其平均光束质量因子M为3.73,光束质量良好。接着用光束分析仪采集抽运光的光强分布图并分析,最后由平行平面腔模的迭代原理,利用抽运光实验数据,对形成自再现模的过程进行迭代仿真,分析仿真得到的抽运光在平面腔中模的形成图,并与实验数据对比,结果表明此为高阶模激光器。

关键词：双频微片激光器掺钕晶体光束质量因子频差调谐机制模式特性