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圆红冬孢酵母自主复制序列分离和利用游离型质粒进行基因敲除

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微生物学报 2024年第3期64卷 882-892页

作者：郭霄史硕博北京化工大学生命科学与技术学院软物质科学与工程高精尖创新中心北京100029

【目的】与整合型表达载体相比,游离型表达载体通常具有更高的拷贝数以实现目标基因的高强度表达,并且对于DNA操作应用更加方便和灵活。然而,目前的研究尚未确定适用于圆红冬孢酵母的游离型质粒,该酵母外源基因的表达或者基于CRISPR/Cas... 详细信息

【目的】与整合型表达载体相比,游离型表达载体通常具有更高的拷贝数以实现目标基因的高强度表达,并且对于DNA操作应用更加方便和灵活。然而,目前的研究尚未确定适用于圆红冬孢酵母的游离型质粒,该酵母外源基因的表达或者基于CRISPR/Cas9的基因组编辑都需要通过整合方式来完成,这也是对其遗传改造进展缓慢的一个重要原因。本研究目的是构建圆红冬孢酵母的游离型质粒,使得其外源基因的表达和基因组编辑更方便省时。【方法】首先对圆红冬孢酵母苯丙氨酸氨裂解酶基因(phenylalanine ammonia-lyase gene,PAL)中可能存在的自主复制序列(autonomously replicating sequences,ARSs)进行挖掘和表征,将该基因及其上下游序列进行分段扩增,构建到带有β-异丙基苹果酸脱氢酶基因(β-isopropyl malate dehydrogenase gene,LEU2)的质粒中,通过电转化的方法导入LEU2基因缺陷的圆红冬孢酵母中,根据转化效率高低鉴定了该酵母的一个ARS。其次,以编码香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)的BTS1基因为敲除靶点,将其gRNA构建到基于ARS的游离型质粒中,通过转化子直观的颜色变化来验证该游离型质粒是否成功应用于圆红冬孢酵母的CRISPR/Cas9体系。【结果】本工作鉴定了圆红冬孢酵母的ARS,构建了基于ARS元件的游离型质粒,并将该质粒应用于圆红冬孢酵母CRISPR/Cas9体系,成功实现了基于游离型质粒的基因敲除。【结论】本研究丰富了圆红冬孢酵母现有的工具库,为圆红冬孢酵母的合成生物学应用提供了良好的研究基础和技术支持。

关键词：圆红冬孢酵母自主复制序列游离型质粒

FIRS早产儿脐血维生素A、D和IL-6水平与早发型败血症的关系及预测价值

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FIRS早产儿脐血维生素A、D和IL-6水平与早发型败血症的关系及预测...

作者：邹争承德医学院

学位级别：硕士

目的:探讨胎儿炎症反应综合征（Fetal inflammatory response syndrome,FIRS）早产儿脐血中维生素A、D及IL-6水平与早发型败血症（Early-onset sepsis,EOS）的关系及预测价值,为新生儿EOS的预防及早期诊断提供新的思路。方法:选取2017... 详细信息

目的:探讨胎儿炎症反应综合征（Fetal inflammatory response syndrome,FIRS）早产儿脐血中维生素A、D及IL-6水平与早发型败血症（Early-onset sepsis,EOS）的关系及预测价值,为新生儿EOS的预防及早期诊断提供新的思路。方法:选取2017年06月至2022年10月在某院新生儿重症监护病房住院且完成脐血维生素A、D及IL-6检测的FIRS早产儿（胎龄0.05）;两组早产儿在胎膜早破≥18h方面,差异有统计学意义（P=0.019）。***组与非EOS组脐血中维生素A水平分别为110.32±35.73ng/m L、148.11±46.25ng/m L,差异有统计学意义（P=0.0001）;两组患儿脐血维生素D水平分别为11.58±4.90ng/m L、17.18±8.76ng/m L,差异有统计学意义（P=0.0001）;两组患儿脐血IL-6水平分别为29.37（17.70,61.18）pg/m L、15.30（12.03,20.29）pg/m L,差异有统计学意义（P=0.0001）。3.相关性分析结果显示:EOS组脐血中维生素A水平和IL-6水平呈负相关（rs=-0.502,P=0.001）,差异有统计学意义;非EOS组脐血中维生素A水平和IL-6水平无相关（rs=-0.178,P=0.217）,差异无统计学意义。EOS组脐血中维生素D水平和IL-6水平呈负相关（rs=-0.471,P=0.002）,差异有统计学意义;非EOS组脐血中维生素D水平和IL-6水平无相关（rs=-0.120,P=0.406）,差异无统计学意义。4.以发生EOS的FIRS早产儿为阳性样本,以未发生EOS的FIRS早产儿为阴性样本绘制ROC曲线。结果显示:维生素A的曲线下面积（AUC）为0.749（95%CI 0.647～0.833）,最佳截断值为114.37ng/m L,灵敏度为66.67%,特异度为74%;维生素D的AUC为0.703（95%CI0.599～0.794）,最佳截断值为16.16ng/m L,灵敏度为90.48%,特异度为50%;IL-6的AUC为0.839（95%CI 0.747～0.907）,最佳截断值为25.55pg/m L,灵敏度为59.52%,特异度为96%;提示脐血中维生素A、D、IL-6水平均具有早期预测早产儿EOS的价值,其中IL-6特异度最高,维生素D的灵敏度最高。结论:***早产儿发生EOS时其脐血中维生素A、D水平低于非EOS组、IL-6水平高于非EOS组,且EOS组脐血中维生素A、D水平与IL-6水平呈负相关。***早产儿脐血中维生素A、D和IL-6水平对EOS的发生均有早期预测价值,其中IL-6的特异度最高,维生素D的灵敏度最高。

关键词：早发型败血症胎儿炎症反应综合征维生素A 维生素D 白介素-6

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H新城绿色低碳产业发展战略研究

H新城绿色低碳产业发展战略研究

作者：邹改电子科技大学

学位级别：硕士

《1844年经济学哲学手稿》中人与自然关系思想研究

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《1844年经济学哲学手稿》中人与自然关系思想研究

作者：邹宝鑫吉林大学

学位级别：硕士

马克思在19世纪40年代对人与自然关系的思考主要集中于《1844年经济学哲学手稿》这一文本中。这一时期,马克思对德国古典哲学和英国古典政治经济学进行了大量的考察,为其思考人与自然关系这一问题提供了丰富的思想资源。与此同时,资本... 详细信息

马克思在19世纪40年代对人与自然关系的思考主要集中于《1844年经济学哲学手稿》这一文本中。这一时期,马克思对德国古典哲学和英国古典政治经济学进行了大量的考察,为其思考人与自然关系这一问题提供了丰富的思想资源。与此同时,资本主义私有财产语境主导下人与自然关系的恶劣现状也进一步激发了马克思对于人与自然关系的深刻思考。首先,马克思关于人与自然关系的思考有着深刻的时代背景。就理论背景而言,虽渊源于古希腊自然哲学尤其是原子论哲学,但对其影响最为直接的莫过于黑格尔的自然哲学和费尔巴哈直观唯物主义中关于人与自然的观点。此外,国民经济学对待人与自然的态度尤其是人口论问题也深深刺激了马克思对于人与自然关系异化的现实土壤的思考。就现实背景而言,马克思关于人与自然关系的观点有深刻的现实依据。那便是19世纪40年代资本主义在发展过程中造成的生态环境问题、科技的资本主义运用问题、工人的生存境遇等问题。这些都引起了马克思对人与自然关系的思考,特别是在其对异化的阐释中内蕴了人和自然关系的双重异化。其次,马克思关于人与自然关系的思考有着清晰的内在逻辑,主要涵盖了人与自然关系的本真统一的应然状态、资本异化下非现实的实然状态、扬弃私有财产后应然实然化的解放状态。马克思首先梳理了内在于人与自然之间的本真的统一状态,即作为人的身体的自然和自然的人的状态。然而这种人与自然的共生状态在资本主义物质利益面前发生了人与自然的双重异化,即人作为主体的异化和自然作为客体同人相异化。此外,马克思在人与自然的异化中也发现了变革人与自然关系现状的方向,那就是通过扬弃私有财产来实现异化逻辑向外化逻辑的回归,在全面占有自己本质的基础上通达社会状态,从而实现人的类特性的全面复归的人道主义和自然界真正复活的自然主义的真正统一,消解资本主义私有财产语境下人与自然的对立现状。最后,马克思关于人与自然关系的思考虽诞生于19世纪上半叶,但在21世纪的今天仍然具有重大的理论价值和实践价值。就理论价值而言,马克思在《1844年经济学哲学手稿》中关于人与自然关系的思考构成了其自然观不可替代的重要一环,也成了马克思主义自然观的真正诞生地和秘密,有力地回击了西方对于马克思存在生态空场的错误论断。此外,马克思关于人与自然关系的思考为当代中国生态文明建设提供了丰富的理论资源,也为西方马克思主义特别是生态学马克思主义者对于人与自然关系问题的相关思考提供了理论资源。就其现实价值而言,马克思在《1844年经济学哲学手稿》中关于人与自然关系问题的思考不仅对于突破资本逻辑以重塑人与自然关系具有重要的方法论意义,而且为以中国式现代化推动构建中华现代文明过程中处理人与自然关系的问题提供了重要的实践指引。

关键词：《1844年经济学哲学手稿》人与自然的关系私有财产异化人道主义与自然主义的统一

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框架柱托换节点抗震性能研究

振动与冲击 2024年第5期43卷 159-165,181页

作者：李书蓉张鑫岳庆霞巩善亮山东建筑大学建筑结构加固改造与地下空间工程教育部重点实验室山东济南250101 山东建筑大学土木工程学院山东济南250101 同圆设计集团有限公司山东济南250101

为了研究框架柱托换节点的抗震性能,设计了5个包裹式托换节点,进行往复加载试验,分析结合面高度和界面钢筋对托换节点破坏形态和抗震性能的影响。建立了托换节点的非线性数值计算模型,验证了数值计算模型的正确性。试验和分析结果表明:... 详细信息

为了研究框架柱托换节点的抗震性能,设计了5个包裹式托换节点,进行往复加载试验,分析结合面高度和界面钢筋对托换节点破坏形态和抗震性能的影响。建立了托换节点的非线性数值计算模型,验证了数值计算模型的正确性。试验和分析结果表明:结合面高度对托换节点的抗震性能影响显著,结合面高度为200 mm时,界面钢筋影响托换节点的破坏模式,托换节点的初始刚度随着界面钢筋数量的增加而增大;结合面高度为300 mm时,界面钢筋对托换节点的抗震性能影响较小。

关键词：框架结构托换节点拟静力试验抗震性能界面钢筋

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复杂背景下混凝土桥梁裂缝检测方法研究

复杂背景下混凝土桥梁裂缝检测方法研究

作者：邹小雪重庆交通大学

学位级别：硕士

混凝土桥梁是关键的交通基础设施,随着使用年限的增长,由于材料老化和环境因素的影响,裂缝的出现可能危及其结构安全。准确检测桥梁裂缝对于维护桥梁安全至关重要。然而,混凝土桥梁裂缝所处环境复杂多样,常受到污渍、涂鸦、人工画线及... 详细信息

混凝土桥梁是关键的交通基础设施,随着使用年限的增长,由于材料老化和环境因素的影响,裂缝的出现可能危及其结构安全。准确检测桥梁裂缝对于维护桥梁安全至关重要。然而,混凝土桥梁裂缝所处环境复杂多样,常受到污渍、涂鸦、人工画线及杂草等多种背景因素的干扰,使得裂缝检测工作面临诸多挑战,特别是对细小模糊裂缝的检测。现有公开数据集中复杂背景下的混凝土桥梁裂缝样本数据有限,适用于复杂背景下的裂缝检测算法也相对匮乏。基于此,本文基于深度学习,提出了复杂背景下混凝土桥梁裂缝检测方法。该方法解决了复杂背景下桥梁裂缝检测精度低的问题,实现桥梁裂缝的粗粒度定位,细粒度分割以及裂缝参数信息的计算。本文的主要研究内容和结论如下:1)本文从桥梁检测报告中筛选出具有复杂背景的裂缝数据,分别构建目标检测数据集(Crack CPX-Dete Dataset)和语义分割数据集(Crack CPX-Seg Dataset)。为增加数据集的广泛性和多样性,选择两个公共数据集(Crack Dataset和CrackForest Dateset)用于语义分割任务。对上述数据集进行数据标注处理,并采用数据增强技术对数据集进行样本扩充以丰富数据的多样性,从而加强模型对不同场景和条件下裂缝识别的泛化能力。2)提出了一种复杂背景下基于YOLO v8s-WOMA的混凝土桥梁裂缝检测方法,旨在解决因污渍、阴影、杂草和人工画线等干扰因素导致裂缝检测精度低的问题,实现对桥梁裂缝的高精度定位。首先,引入全维度动态卷积模块和改进的C2fMA模块,通过增强裂缝特征的提取能力和语义信息,有效提高复杂背景下的裂缝检测效果;其次,采用WIo U损失函数来优化低质量样本的识别问题,提高模型的检测速度和准确率;最后,在自制的混凝土桥梁裂缝数据集上进行实验评估,并与现有的Faster R-CNN、Deformable DETR、DINO和YOLOv8-GAM-Wise-Io U等多种目标检测算法进行对比。实验结果显示,该方法在复杂背景下具有高精度、少参数、速度快的特点,较基准网络提高了3.6%的检测精度。这表明所提的YOLO v8sWOMA算法可以有效地解决复杂背景下混凝土桥梁裂缝检测精度低的问题,并具有实际应用的潜力。3)提出了一种复杂背景下基于高分辨率网络的混凝土桥梁裂缝分割方法,旨在解决复杂背景下裂缝分割精度低的问题,准确获取裂缝的形状大小和位置信息,实现裂缝长度和宽度的计算。首先,引入特征信息关注模块和全局上下文信息模块,用于增强特征融合和特征关注能力以及提升特征的语义信息,有效抑制复杂背景的干扰,解决了因复杂背景导致裂缝分割精度低的问题;其次,为验证所提方法的有效性,在一个自制数据集和两个公共数据集上进行实验验证,并与现有的PSPNet、Deeplab v3+和U-Net等多种语义分割算法进行对比。实验结果表明,所提HEG-Net网络在多个模型评价指标上优于其他语义分割方法。充分证明HEGNet网络在应对复杂背景下混凝土桥梁裂缝检测的有效性,其提取像素能力优于其他对比网络;最后,在获得高精度裂缝分割结果的基础上,实现裂缝长度和宽度的像素级计算。

关键词：目标检测语义分割裂缝检测 YOLO v8s-WOMA 高分辨率网络

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钢轨打磨车专用EHA非线性反演控制

北京航空航天大学学报 2024年第8期50卷 2439-2448页

作者：王海波何欢邹怀静聂勇西南交通大学机械工程学院成都610031 轨道交通运维技术与装备四川省重点实验室成都610031 浙江大学流体传动及控制国家重点实验室杭州310027

为提高钢轨打磨车打磨钢轨的平顺性及稳定性,提出以电动静液作动器(EHA)代替传统液压作动系统作为钢轨打磨车的专用执行器,考虑柱塞泵的总效率波动和液压缸动静摩擦差异大2个非线性因素,建立非线性数学模型;建立EHA的MATLAB、AMESim联... 详细信息

为提高钢轨打磨车打磨钢轨的平顺性及稳定性,提出以电动静液作动器(EHA)代替传统液压作动系统作为钢轨打磨车的专用执行器,考虑柱塞泵的总效率波动和液压缸动静摩擦差异大2个非线性因素,建立非线性数学模型;建立EHA的MATLAB、AMESim联合仿真模型,对PID控制、滑模变结构控制、反演控制进行控制策略对比研究,仿真分析验证反演控制在响应快速性及稳定性方面具有良好的表现。搭建四象限平台对EHA进行反演控制负载试验,结果表明:其位移控制精度达0.21 mm,具有较好的控制性能。

关键词：钢轨打磨车电动静液作动器非线性因素联合仿真反演控制

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照明车

长江文艺 2024年第15期 76-85页

作者：刘益善不详

1998年元月,湖北消防系统进口了一辆大型消防照明车,总队长金达文把这辆消防车分配到武汉消防支队。当这辆牛高马大的家伙停在支队的院子里时,立即吸引了从办公室和消防车库里跑出来的围观者。这是个重武器,这个家伙到了武汉支队,谁来... 详细信息

1998年元月,湖北消防系统进口了一辆大型消防照明车,总队长金达文把这辆消防车分配到武汉消防支队。当这辆牛高马大的家伙停在支队的院子里时,立即吸引了从办公室和消防车库里跑出来的围观者。这是个重武器,这个家伙到了武汉支队,谁来使用它?看的人个个摩拳擦掌,巴不得立刻爬上去,操纵起这个大家伙。

关键词：消防系统围观者消防支队消防车照明车办公室武汉

基于生活空间的喀斯特山区乡村聚落重构研究 ——以七星关区为例

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基于生活空间的喀斯特山区乡村聚落重构研究 ——以七星关区为例

作者：邹秋雨贵州师范大学

学位级别：硕士

乡村聚落是乡村居民以地缘、血缘和业缘为纽带形成生活空间的核心,其空间演化、功能转型与布局优化映射乡村人地关系互动过程和耦合机制,是实现乡村振兴的重要载体。乡村生活空间结构直接反映乡村经济社会转型阶段及其对乡村聚落空间与... 详细信息

乡村聚落是乡村居民以地缘、血缘和业缘为纽带形成生活空间的核心,其空间演化、功能转型与布局优化映射乡村人地关系互动过程和耦合机制,是实现乡村振兴的重要载体。乡村生活空间结构直接反映乡村经济社会转型阶段及其对乡村聚落空间与功能的需求。在快速城镇化背景下,生活空间公共服务设施在聚落发展中起着十分重要的作用。乡村居民的生活与服务消费呈现出逐年递增的趋势,同时就业空间也在逐步扩大,其结构逐渐展现出异质性特征,农户的兼业经营以及非农就业现象对乡村生活空间的边界产生了深远影响。聚落与居住空间构成了乡村生活空间的核心基础,而生产与消费空间则为其提供了主要支撑。党的十九大提出实施乡村振兴战略,明确建立健全城乡融合发展体制机制,是当前乡村经济、社会、空间为一体的乡村重构的政策导向,乡村发展迎来前所未有的历史机遇期,而乡村重构正是实施推进乡村振兴战略的重要手段。本文以毕节市七星关区为研究区,基于乡村聚落斑块尺度,运用最邻近指数、核密度分析法定量分析了乡村聚落的空间分布特征,采用高斯两步移动搜索法、极值标准化法、熵值法、Moran’s I指数等方法测算乡村生活空间指数并运用反距离权重法、自然段点法进行空间可视化表达,在此基础上,基于七星关区乡村聚落生活空间指数和近邻乡镇中心距离,划分出城镇化村、中心村、保留村和搬迁村4种乡村聚落重构类型,并对不同类型乡村聚落提出发展策略。最后,根据适宜性评价结果,借助遗传算法对乡村聚落的空间布局进行优化调整,得到优化重构结果。主要内容为:(1)七星关区乡村聚落空间分布呈现显著的集聚特征。七星关区共有75178个聚落斑块,除了中心城区的市东街道、市西街道、麻园街道及洪山街道乡村聚落数量分布较少,其他乡镇(街道)乡村聚落分布较多;同时,七星关区乡村聚落的最邻近指数R为0.37,R值小于1,表明七星关区乡村聚落整体呈现集聚型分布状态,且乡村聚落图斑数量和乡村聚落面积高值区主要集中在中心城区周围及西南地区;进一步分析发现,七星关区乡村聚落在海拔1357～1574 m、坡度6°～15°、距河流0～718 m、距道路0～785 m、距乡镇中心3481～5007 m等条件下分布较为集聚,具有较强的河流指向性和道路指向性。(2)七星关区教育、医疗、购物设施主要分布在城区和人口密集区域。教育、医疗、购物可达性好的区域主要环状分布于中心城区周围,但空间分布格局不同,随着时间阻抗增加,可达性值降低,其空间差异也越来越小;从空间集聚特征来看,各可达性Moran's I指数值均为正,其中教育可达性的空间聚集特征最明显,且整体表现为热点“多核”集聚、冷点间隙连片的空间分布特征,医疗可达性整体表现为热点团状集聚、冷点间隙连片的空间分布特征,而购物可达性整体上呈现出由七星关中心城区周围向外逐渐递减的“阶梯式”格局。(3)生活空间指数空间差异较大,表现出较强的七星关区中心城区指向性,且生活空间呈现出冷热点区域交错、热点“多核”集聚、冷点间隙连片的空间分布格局。热点区集聚分布于七星关区中心城区附近的三板桥街道、鸭池镇中北部、西南地区撒拉溪镇、杨家湾镇以及北部生机镇,城区及周边公共基础服务设施建设较为完备,居民上学、就医、购物等生活便利程度较高;冷点区则零散分布于西北部野角乡、中部八寨镇等地区以及七星关边缘地区,该区域内居民生活便利程度不高。(4)七星关区乡村聚落空间重构类型划分及重构策略。根据七星关区乡村聚落生活空间指数和近邻乡镇中心距离,划分出城镇化村、中心村、保留村和搬迁村4种乡村聚落重构类型。并借助Arc GIS 10.7平台统计出有35.07%的乡村聚落处于生活空间较好区域,55.62%的乡村聚落处于生活空间较差区域,7.67%的乡村聚落处于生活空间差区域。然后结合七星关区自然社会经济条件和居民生活实际情况,分别对4种类型村落提出了重构策略。在此基础上,根据适宜性评价结果,借助遗传算法对乡村聚落的空间布局进行优化调整,搬迁村搬至中西部城镇化村附近和龙凤村、永丰村及昌营村等中心村附近,并且呈集聚式的布局。

关键词：乡村聚落生活空间乡村聚落重构喀斯特山区