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基于化学标记法筛选2,6-二氯苯醌的生物毒性标志物

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基于化学标记法筛选2,6-二氯苯醌的生物毒性标志物

作者：邹伦妃江汉大学

学位级别：硕士

水是生命之源,承载着人类的生命活动,而饮水安全与民生健康息息相关;饮用水消毒能够有效地消灭病原体,控制和预防流行病的传染,是20世纪以来最伟大的公共健康安全措施之一。然而在消毒过程中,常用的消毒剂与水中的一部分物质,如氨基酸... 详细信息

水是生命之源,承载着人类的生命活动,而饮水安全与民生健康息息相关;饮用水消毒能够有效地消灭病原体,控制和预防流行病的传染,是20世纪以来最伟大的公共健康安全措施之一。然而在消毒过程中,常用的消毒剂与水中的一部分物质,如氨基酸、腐殖质等物质,发生多种化学反应,从而产生多种消毒副产物(disinfection by-products,DBPs)。2,6-二氯-1,4-苯醌(2,6-dichloro-1,4-benzoquinone,2,6-DCBQ)是一种在饮用水中检出率最高且毒性高的典型卤代醌类消毒副产物,国内外已有不少研究发现其存在细胞毒性、发育毒性、器官毒性等。不过,目前尚没有合适的生物标志物用于评估2,6-DCBQ的器官毒性与健康风险等。筛选特征性磷酸化蛋白质是鉴定生物标志物的有效途径之一。蛋白质是生命活动的主要执行者,许多蛋白质的活性经过翻译后修饰激活,其中磷酸化修饰是蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTMs)的主要形式之一,也是数量最多的。无论是正常生命活动还是个体疾病的产生,都经常受到磷酸化蛋白的调控,因此,通过深入研究翻译后修饰的发生过程,定量分析磷酸化蛋白的变化等方式,可以揭示正常生命活动机理、筛选疾病和环境生物标志物、鉴定药物靶点等。目前而言,用于高通量分析磷酸化蛋白的技术主要是基于“自下而上”的蛋白质组学方法。不过,现有定量方法或多或少存在一些缺陷。针对这些问题,本课题计划建立一种新的适用性广、能减少磷酰基中性丢失、成本低廉,且同时提高正离子模式下离子化效率的磷酸化蛋白相对定量方法,然后应用该方法筛选和鉴定2,6-DCBQ的器官毒性标志物,有望用于环境风险评估以及潜在的药物靶点筛查等。主要研究内容及结论:1.以二甲胺衍生赖氨酰基内切酶(Lys-C)+胰蛋白酶(Trypsin)混合酶切的磷酸化蛋白。基于羧基酰胺化的标记方法具有高特异性,通常仅发生于羧基上而对磷酸基无显著影响;通过二甲胺与氘代二甲胺分别对多肽进行轻重标记,实现了同时对磷酸化多肽的定性与相对定量分析。该方法不仅具有较好的可靠性与重复性,而且在一定程度上增强了磷酸化多肽的鉴定效率。2.以二甲胺衍生Lys-C+谷氨酰基内切酶(Glu-C)混合酶切的磷酸化蛋白。较Lys-C+Trypsin混合酶切,在酸性缓冲体系下的Glu-C酶切可减少产生末端为赖氨酸的多肽,大大降低肽段自缩合比例;减少碱性环境下脱酰胺化的发生,脱酰胺化比例低于2%;同时降低肽段长度和适当减少肽段中磷酸化位点数目。羧基酰胺化衍生后肽段的特异性富集和质谱响应信号均显著增强;二级碎裂中产生更具特征性的碎片离子、更加丰富的离子种类和更少的中性丢失,有助于多肽序列的测定和定量。3.双衍生化-MicroLC-MS测定磷酸化蛋白。使用甲胺酰胺化羧基后,进一步使用二甲胺在碱性条件下取代磷酰基。在双衍生化作用下,一方面,被中性化的羧基增强了富集材料对磷酸化肽的吸附特异性,另一方面,负电性的羧基和磷酰基被同时衍生化,可极大增强肽段的质谱响应,最终提高了对磷酸化肽,尤其是多磷酸化肽的鉴定效率。4.低浓度2,6-DCBQ暴露对鱼肠组织中磷酸化蛋白的影响。提取对照组和实验组金鱼的肠道组织中的磷酸化蛋白,在采取Lys-C+Glu-C混合酶切并进行甲胺酰胺化羧基后,分别使用二甲胺盐和氘代二甲胺在碱性条件下取代磷酰基,然后基于蛋白质组学方法筛选2,6-DCBQ暴露前后差异化表达的蛋白,进一步选择特征性强的磷酸化蛋白作为潜在的生物标志物。

关键词：磷酸化酰胺化去磷酸基稳定同位素标记液相色谱-质谱(LC-MS)

基于酰胺化的化学标记技术在磷酸化多肽分析中的应用

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质谱学报 2022年第4期43卷 463-472,I0003页

作者：邹伦妃张启伟肖琛熊淼郑琦江汉大学光电化学材料与器件教育部重点实验室湖北武汉430054

蛋白质的翻译后修饰复杂多样,通过激酶与磷酸酶调控的磷酸化是最广泛、最重要的翻译后修饰之一。定量分析磷酸化蛋白质的动态变化,有利于阐明磷酸化修饰调控生命活动的机理,了解其在实现生物功能过程中的作用。以质谱为核心的分析方法... 详细信息

蛋白质的翻译后修饰复杂多样,通过激酶与磷酸酶调控的磷酸化是最广泛、最重要的翻译后修饰之一。定量分析磷酸化蛋白质的动态变化,有利于阐明磷酸化修饰调控生命活动的机理,了解其在实现生物功能过程中的作用。以质谱为核心的分析方法是当前蛋白质翻译后修饰研究中最常用的定量技术,主要包括无标记定量、内标绝对定量、化学标记等。本文将一种用于蛋白质糖基化分析的标记方法应用于磷酸化多肽的研究。使用二甲胺标记蛋白质的所有酶解肽段,被酰胺化的羧基可提高TiO 2对磷酸化多肽的富集特异性以及液相色谱-质谱(LC-MS)检测的灵敏度。稳定同位素标记实验表明,该方法适用于高通量磷酸化多肽的相对定量分析。基于二甲胺衍生的化学标记法在磷酸化多肽的质谱分析中具有优势,有望成为生物组织中磷酸化蛋白质研究的有力工具。

关键词：磷酸化酰胺化稳定同位素标记液相色谱-质谱(LC-MS)

碰撞诱导解离下二甲胺衍生多肽的碎裂特征研究

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质谱学报 2023年第4期44卷 486-495,I0002页

作者：邹伦妃肖琛熊淼张启伟郑琦江汉大学光电化学材料与器件教育部重点实验室湖北武汉430056

串联质谱技术可以测定蛋白质酶解产物的分子质量、定位修饰位点、获取氨基酸序列信息等,已成为蛋白质组学领域的重要分析手段。鉴于酸性氨基酸能够在串联质谱分析中对多肽的裂解过程产生重要影响,本文通过二甲胺将多肽的羧基酰胺化,从... 详细信息

串联质谱技术可以测定蛋白质酶解产物的分子质量、定位修饰位点、获取氨基酸序列信息等,已成为蛋白质组学领域的重要分析手段。鉴于酸性氨基酸能够在串联质谱分析中对多肽的裂解过程产生重要影响,本文通过二甲胺将多肽的羧基酰胺化,从而改变肽段在碰撞诱导解离模式下的碎裂特征。较未衍生多肽而言,被衍生多肽既可以产生特征性碎片离子,例如m/z 129.10/135.14,也易于产生种类更丰富的a、b、y、z离子。此外,羧基的中性化可在一定程度上抑制磷酸化多肽的中性丢失。这些特点使得基于羧基酰胺化的衍生方法有望展现在肽段表征分析方面的应用价值。

关键词：多肽酰胺化碰撞诱导解离串联质谱

关于减少武汉市饮用水中藻源类消毒副产物的举措探讨

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江汉大学学报:自然科学版 2023年第5期51卷 41-46页

作者：邹伦妃肖琛张启伟郑琦江汉大学光电化学材料与器件教育部重点实验室湖北武汉430056

因受到各种因素影响,武汉市饮用水原水的含藻类情况已较为严重。藻类的主要危害之一在于增加了饮用水中消毒副产物的含量。文章分析了武汉市饮用水原水中藻类的分布情况,通过总结除藻技术与消毒技术的发展,探讨了一些减少藻类相关消毒... 详细信息

因受到各种因素影响,武汉市饮用水原水的含藻类情况已较为严重。藻类的主要危害之一在于增加了饮用水中消毒副产物的含量。文章分析了武汉市饮用水原水中藻类的分布情况,通过总结除藻技术与消毒技术的发展,探讨了一些减少藻类相关消毒副产物的举措。就当前状况而言,物理除藻技术结合氯胺或二氧化氯消毒应该有助于抑制藻类消毒副产物的生成。

关键词：饮用水消毒副产物藻类氯胺消毒

核壳结构ZIF-67@ZIF-8的制备及其超级电容性能研究

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电源技术 2021年第4期45卷 512-515,557页

作者：邹伦妃马振超王苏龙白宇森王亚珍江汉大学化学与环境工程学院工业烟尘污染控制湖北省重点实验室湖北武汉430056

采用胶体化学合成法,在室温下使六水硝酸钴[Co(NO_(3))_(2)·6 H_(2)O]与2-甲基咪唑(MeIm)反应制备出ZIF-67,并将其作为湿种子,再通过原位生长法将二水乙酸锌(C4H_(6)O_(4)Zn·2 H_(2)O)与2-甲基咪唑(MeIm)生成的ZIF-8包裹在ZIF-67外,... 详细信息

采用胶体化学合成法,在室温下使六水硝酸钴[Co(NO_(3))_(2)·6 H_(2)O]与2-甲基咪唑(MeIm)反应制备出ZIF-67,并将其作为湿种子,再通过原位生长法将二水乙酸锌(C4H_(6)O_(4)Zn·2 H_(2)O)与2-甲基咪唑(MeIm)生成的ZIF-8包裹在ZIF-67外,制备出核壳结构ZIF-67@ZIF-8材料,并用场发射扫描电镜(FE-SEM)、透射电镜(TEM)、X射线衍射(XRD)等方法对材料的形貌和结构进行表征。实验通过控制变量法改变原料金属离子的摩尔配比,得到不同配比下的样品,并将其制备成工作电极,在三电极体系下进行循环伏安法、恒流充放电法等电化学测试,结果表明,在原料金属离子(Co^(2+)与Zn^(2+))的摩尔比为1∶1时,制备出的材料在恒流充放电测试中电流密度为1 A/g时比电容为1144.4 F/g,具有较高的比电容以及较好的循环稳定性。

关键词：类沸石咪唑酯骨架材料(ZIFs) 核壳结构电极材料比电容

基于镍-对苯二甲酸的金属有机框架化合物制备及电容性能研究

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江汉大学学报（自然科学版） 2019年第2期47卷 115-123页

作者：胡传正邹伦妃徐俊晖鲁珍王亚珍江汉大学光电化学材料与器件教育部重点实验室化学与环境工程学院湖北武汉430056

以六水合硝酸镍和对苯二甲酸为原材料,以水热反应法制备了一种镍基金属有机框架化合物(MOFs)。用X射线衍射技术、循环伏安法和恒流充放电法对合成产物的结构和性能进行了表征,考察了水热反应温度和反应物的摩尔比对合成产物的结构和电... 详细信息

以六水合硝酸镍和对苯二甲酸为原材料,以水热反应法制备了一种镍基金属有机框架化合物(MOFs)。用X射线衍射技术、循环伏安法和恒流充放电法对合成产物的结构和性能进行了表征,考察了水热反应温度和反应物的摩尔比对合成产物的结构和电容性能的影响。测试结果表明,在反应温度为180℃,硝酸镍与对苯二甲酸的摩尔比为1∶1时,合成得到的MOFs材料具有高比电容。在1 A/g的电流密度下,放电时间长达477 s,比电容高达1 403 F/g。在10 A/g的电流密度下恒流充放电1 000次后,保持了初始电容值的45%。

关键词：金属有机框架化合物电极材料比电容反应温度摩尔比

科学实践中的身体在场——以微量液体移取为例

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科学学研究 2024年第6期42卷 1129-1135页

作者：张毓芳妃河海大学马克思主义学院江苏南京211100

身体在科学实践的过程中,从未离场。通过对微量液体移取技术的发展历程剖析,我们可以看到无论是依赖默会技能进行手工实验的过去,还是有精密仪器辅助操作的现在,抑或是自动化设备普及于实践的将来,身体始终扮演着重要的角色。现象学视... 详细信息

身体在科学实践的过程中,从未离场。通过对微量液体移取技术的发展历程剖析,我们可以看到无论是依赖默会技能进行手工实验的过去,还是有精密仪器辅助操作的现在,抑或是自动化设备普及于实践的将来,身体始终扮演着重要的角色。现象学视域下的具身性剖析,将为我们揭开藏匿于科学实践之中现象身体的神秘面纱。从而帮助我们更好地理解身体图式与默会技能、意向弧与身体的自动调试、凝结着生命力的身体感知。进而更好地激发沉默身体的实践力量,并与日益智能化的设备实现互促式发展。

关键词：科学实践具身微量液体移取

操作融贯性理论：复兴古典实用主义的实用主义实在论路径

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自然辩证法通讯 2024年第8期 34-42页

作者：张毓芳妃河海大学马克思主义学院

古典实用主义让我们开始关注“实践”的意义，以布兰顿为代表的新实用主义为实践性的路线铺设了得以概念化论证的轨道，却与真实世界拉开了距离。张夏硕新近提出的实用主义实在论有助于我们复兴古典实用主义的有益主张，重审科学的客观... 详细信息

古典实用主义让我们开始关注“实践”的意义，以布兰顿为代表的新实用主义为实践性的路线铺设了得以概念化论证的轨道，却与真实世界拉开了距离。张夏硕新近提出的实用主义实在论有助于我们复兴古典实用主义的有益主张，重审科学的客观性维度。其核心主张是用操作融贯性理论取代真理符合论，将哲学辩论与科学探究从符合真理转向操作实践，带我们重回生活世界。但对于操作融贯性理论的现有阐释还不充分，科学实践哲学与现象学等均可有益地拓宽实用主义实在论发展路径，为其赋予规范性的约束与具体细节的补充。

关键词：操作融贯性实用主义实用主义实在论

系统观念视域下新发展阶段意识形态建设的多维探析

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系统科学学报 2024年 1-5页

作者：庞妃白杨大连海事大学马克思主义学院大连理工大学马克思主义学院

新发展阶段意识形态建设是一项系统工程,具有深厚的系统论意蕴。加强新发展阶段意识形态建设的系统性是统筹国际国内大局的现实要求,也是全面开启社会主义现代化强国新征程的必然要求。系统观念视域下,新发展阶段意识形态建设具有鲜明... 详细信息

新发展阶段意识形态建设是一项系统工程,具有深厚的系统论意蕴。加强新发展阶段意识形态建设的系统性是统筹国际国内大局的现实要求,也是全面开启社会主义现代化强国新征程的必然要求。系统观念视域下,新发展阶段意识形态建设具有鲜明的系统特质,主要表现为顶层设计的整体性、内在结构的层次性、系统边界的开放性以及推进过程的动态性。随着我国意识形态建设向纵深方向发展,将系统科学理论和系统思维运用到新发展阶段意识形态建设之中,明确其目标指向、过程协同、要素耦合和效果集成,实现其系统规划、结构优化、功能跃升和整体合力,已成为加强新发展阶段意识形态建设系统性和实效性的迫切需要。

关键词：系统观念新发展阶段意识形态建设系统性