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生命的化学 2009年第2期29卷 265-267页

作者：邵金辉许增禄中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院人体解剖与组织胚胎学系北京100005

鱼鳍被部分切除后,在正常情况下能够再生形成完整的鳍。相对简单和易获得的尾鳍成为解析骨等再生分子机制的良好体系。鱼鳍的再生一般要经历表皮细胞迁移等五个阶段,伴随有多种基因表达的改变,并发现多种药物对鳍再生有影响。本文综述... 详细信息

鱼鳍被部分切除后,在正常情况下能够再生形成完整的鳍。相对简单和易获得的尾鳍成为解析骨等再生分子机制的良好体系。鱼鳍的再生一般要经历表皮细胞迁移等五个阶段,伴随有多种基因表达的改变,并发现多种药物对鳍再生有影响。本文综述了鱼鳍再生研究进展。

关键词：再生鱼鳍基因药物

D614G突变对新型冠状病毒致病性、免疫原性的影响

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生物技术 2022年第3期32卷 366-372,349页

作者：卫紫钰邵金辉湖北文理学院基础医学院人体解剖与组织学胚胎学教研室湖北襄阳441053

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)D614G突变体的棘突蛋白中614位氨基酸的天冬酰胺(D)被甘氨酸(G)取代,这在目前流行的病毒株中已占优势。该文综述2021年以来所发表的与D614G突变密切相关文献,内容涉及D614G突变对棘突蛋白结构的影响,D614G突变... 详细信息

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)D614G突变体的棘突蛋白中614位氨基酸的天冬酰胺(D)被甘氨酸(G)取代,这在目前流行的病毒株中已占优势。该文综述2021年以来所发表的与D614G突变密切相关文献,内容涉及D614G突变对棘突蛋白结构的影响,D614G突变对新冠病毒致病性的影响,D614G突变与新冠病毒免疫原性及其疫苗的关系,D614G突变在一些国家新冠病毒中的情况,含D614G突变体新冠病毒的诊断与治疗等,以及对这些研究结果的初步分析。将有助于对含D614G突变新型冠状病毒疫情的深入了解与防控。

关键词：新型冠状病毒 D614G 棘突蛋白突变疫苗

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大枣多糖抗氧化及抗炎活性的研究

现代食品科技 2017年第12期33卷 38-43页

作者：展锐邵金辉新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所新疆农产品质量安全重点实验室新疆乌鲁木齐830091 新疆大学生命科学与技术学院新疆乌鲁木齐830046

本研究通过建立1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基、羟基自由基、还原力等4种体外模型研究大枣多糖的抗氧化活性;建立脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7模型研究大枣多糖的... 详细信息

本研究通过建立1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)自由基、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基、羟基自由基、还原力等4种体外模型研究大枣多糖的抗氧化活性;建立脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7模型研究大枣多糖的抗炎活性。实验结果表明,大枣多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基的半抑制浓度IC50分别为0.9、2.8、1.1 mg/m L;总还原力为1.0时,对应的Vc和大枣多糖浓度分别为0.08 mg/m L和2.95 mg/m L,大枣多糖的抗氧化活性呈浓度依赖性。高剂量的大枣多糖能够显著降低RAW264.7细胞中炎症因子如环氧合酶-2(COX-2),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量,表明大枣多糖具有较强的抗炎活性。大枣多糖可望作为抗氧化剂和抗炎制剂应用于功能性食品和医药工业。

关键词：大枣多糖自由基抗氧化活性抗炎活性

高尔基体基质蛋白GM130的研究现状与分析

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生理科学进展 2018年第4期49卷 253-256页

作者：汪雪飞邵金辉湖北文理学院医学院形态学部襄阳441053

GM130蛋白参与高尔基体结构的维持,并在有丝分裂过程中主导高尔基体装置的拆卸和组装。当GM130减少的细胞进入有丝分裂后,形成多极纺锤体,在中期停止并死亡。GM130还参与糖基化的控制,细胞周期变化,细胞极化和细胞定向迁移。它还参与细... 详细信息

GM130蛋白参与高尔基体结构的维持,并在有丝分裂过程中主导高尔基体装置的拆卸和组装。当GM130减少的细胞进入有丝分裂后,形成多极纺锤体,在中期停止并死亡。GM130还参与糖基化的控制,细胞周期变化,细胞极化和细胞定向迁移。它还参与细胞自噬与凋亡。GM130与肿瘤的发生有关。它的减少显著降低CVB3病毒的复制。GM130失活可以引起雄性模型小鼠的不育。可见,它是一种显著影响动物多种生命活动的重要蛋白。

关键词： GM130 高尔基体有丝分裂肿瘤

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采用紫BL与蓝B2R对组织切片染色的观察

解剖学报 2020年第1期51卷 132-134页

作者：邵金辉冯桂花湖北文理学院医学院形态学部湖北襄阳441053

目的寻找制备简单、效果良好、来源丰富的组织切片染色剂。方法应用27种直接服装染料对小鼠肝脏组织切片进行染色效果观察,发现其中的紫BL和蓝B2R染色能够清晰显示中央静脉和肝细胞核等结构,再用紫BL和蓝B2R对心脏、肾脏和睾丸组织切片... 详细信息

目的寻找制备简单、效果良好、来源丰富的组织切片染色剂。方法应用27种直接服装染料对小鼠肝脏组织切片进行染色效果观察,发现其中的紫BL和蓝B2R染色能够清晰显示中央静脉和肝细胞核等结构,再用紫BL和蓝B2R对心脏、肾脏和睾丸组织切片进行染色效果观察。结果紫BL和蓝B2R用蒸馏水溶解后即可使用,配制简单,在5 min内完成。它们对心脏、肾脏和睾丸组织切片染色后,心肌横纹、肾小囊腔、生精细胞等结构清晰可辨,与HE染色结果类似。结论紫BL与蓝B2R比苏木素制备简单,同时它们的组织切片染色效果良好,来源丰富。因此,可能部分替代苏木素。

关键词：服装染料肝心肾睾丸组织切片染色小鼠

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LRP4在肢端骨骼发育进程中的功能初探

LRP4在肢端骨骼发育进程中的功能初探

作者：邵金辉西北大学

学位级别：硕士

肢端发育是脊椎动物最复杂最精妙的调控过程之一,寻找及研究肢端发育相关基因,一直是发育生物学中的热点研究。在人类中,LRP4突变会导致三种单基因疾病,包括:CLS型并指症;先天性肌无力症和二型硬化性骨病。其中CLS型并指症是一种严重的... 详细信息

肢端发育是脊椎动物最复杂最精妙的调控过程之一,寻找及研究肢端发育相关基因,一直是发育生物学中的热点研究。在人类中,LRP4突变会导致三种单基因疾病,包括:CLS型并指症;先天性肌无力症和二型硬化性骨病。其中CLS型并指症是一种严重的肢端发育异常疾病。在小鼠中,各种Lrp4缺陷型小鼠也大多存在着并指等肢端发育异常表型。但关于LRP4是如何参与肢端调控的内在分子机制仍然不清楚,本研究结合体内外实验发现LRP4通过串联经典WNT和BMP两条信号通路,参与并维持肢端骨骼正常发育。通过siRNA干扰实验在人成骨细胞系hFOB细胞中敲低LRP4,当敲低效率接近70%时,qPCR检测发现经典WNT信号通路表达显著上调,BMP信号通路表达显著上调,成骨标志基因表达上调。通双荧光素酶实验发现过表达Lrp4会拮抗经典Wnt信号和Bmp信号。通过慢病毒介导在小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞中构建稳定过表达Lrp4的稳转细胞株,经过qPCR和Western blotting验证,证实该稳转细胞系构建成功。在Lrp4过表达稳转MC3T3-E1细胞中,发现在转录水平经典Wnt信号通路和Bmp信号通路显著下调,双荧光素酶实验进一步揭示,稳定过表达Lrp4后会导致Wnt信号和Bmp信号显著下调,并且成骨标志基因表达明显下调。在小鼠胚胎干细胞ES17中,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除Lrp4,经过筛选得到一株在2号外显子缺失88bp的单克隆细胞株Lrp4,缺失88bp会造成移码突变提前产生终止密码子,产生一个366AA的功能缺失截短蛋白。经过验证,发现Lrp4功能缺失造成经典Wnt信号通路和Bmp信号通路显著上调,双荧光素酶分析后发现经典Wnt信号和Bmp信号均显著上调。为进一步了解LRP4的功能,使用转录组分析,经过GO和KEGG初步分析数据,检测到Lrp4敲除细胞与ES17细胞相比存在1989个差异表达基因,Lrp4敲除后上调930个基因,下调1059个基因。使用Morpholino技术敲低斑马鱼lrp4基因后,morphants表型部分模拟小鼠和人类LRP4缺陷后表型和症状。进一步体内验证,在敲低lrp4的斑马鱼中,qPCR检测发现经典Wnt信号通路和Bmp信号通路上调。通过使用体内双荧光素酶实验检测发现,经典Wnt信号和Bmp信号显著上调。体内实验和体外实验得出的结论一致,LRP4串联并拮抗经典Wnt和Bmp两条信号通路。CLS并指(趾)症为常染色体隐性遗传疾病,而LRP4的功能缺失是造成CLS并指(趾)症的主要原因。我们构建Lrp4 CLS点突变,过表达Lrp4野生型和一系列CLS点突变,通过使用体外双荧光素酶实验检测发现CLS点突变可部分失去拮抗经典Wnt信号和Bmp信号通路的能力。综上所述,经过一系列siRNA干扰敲低、构建Lrp4过表达稳转细胞系、CRISPR/Cas9基因编辑以及斑马鱼体内敲低等实验,首次筛选到LRP4介导的新的信号通路Bmp信号通路,并证明LRP4很可能通过串联并拮抗经典Wnt和Bmp两条信号通路,调节成骨基因参与肢端骨骼发育进程。

关键词： LRP4 CLS并指症肢端发育经典Wnt信号通路 Bmp信号通路成骨标志基因斑马鱼 siRNA 敲低CRISPR/Cas9基因敲除 Morpholino

扣囊复膜孢酵母的β-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母中的克隆与表达

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扣囊复膜孢酵母的β-葡萄糖苷酶基因在毕赤酵母中的克隆与表达

作者：邵金辉延边大学

学位级别：硕士

为今后高效表达TNF、IFN等具有抗肿瘤作用药物打下基础, 对扣囊复膜孢酵母（Sacchromycopsis fibuligera） (-葡萄糖苷酶(（-glucosidase）基因（BGL1）进行了克隆，并在巴斯德毕赤酵母（pichia pastoris）中加以表达。根据扣囊复膜孢... 详细信息

为今后高效表达TNF、IFN等具有抗肿瘤作用药物打下基础, 对扣囊复膜孢酵母（Sacchromycopsis fibuligera） (-葡萄糖苷酶(（-glucosidase）基因（BGL1）进行了克隆，并在巴斯德毕赤酵母（pichia pastoris）中加以表达。根据扣囊复膜孢酵母(-葡萄糖苷酶基因（BGL1）序列和巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K多克隆位点（multiple cloning site）序列，设计两对PCR引物。将以SHF和SHR为引物的PCR产物连接到pGEM-T载体上，构建pSHLTV。用限制性内切酶切下目的基因，插入到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K中，使之位于(-因子信号肽下游，且与共享同一开放阅读框（ORF,open reading frame）, 构建重组质粒pSHL9K。通过电转化将重组质粒pSHL9K转入Pichia pastoris GS115菌株中，整合到染色体后，获得稳定高效表达BGL1基因的重组Pichia pastoris菌株，经过G418抗性筛选，得到含目的基因拷贝数最多的重组菌株。重组酶的最适作用温度为50℃，最适pH为5.4。通过表达条件的优化，培养液中总蛋白含量可达9 g/L以上，培养液中(-葡萄糖苷酶活性为47 IU/mL，SDS-PAGE测定目的蛋白相对分子量约为113 kDa。(-葡萄糖苷酶能够分解纤维二糖，葡萄糖苷-N-脂酰鞘氨醇, 葡萄糖亚麻苦苷等(-葡萄糖苷。人体缺乏(-葡萄糖苷酶会导致葡萄糖苷-N-脂酰鞘氨醇的积累，引起戈谢病（Gaucher disease）。(-葡萄糖苷酶可用于肿瘤的诊断和治疗。毕赤酵母能够高效表达TNF、IFN等具有抗肿瘤作用的细胞因子，本实验加深了对这种表达系统的研究，有助于表达更多的抗肿瘤药物。本研究首次将扣囊复膜孢酵母(-葡萄糖苷酶基因在巴斯德毕赤酵母中进行表达，并且实验证明已得到稳定高效表达BGL1基因的重组Pichia pastoris菌株。

关键词：扣囊复膜孢酵母 β-葡萄糖苷酶基因巴斯德毕赤酵母表达

低渗透油田微观水驱油渗流特征研究——以B油田为例

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低渗透油田微观水驱油渗流特征研究——以B油田为例

作者：邵金辉西北大学

学位级别：硕士

随着高渗透、好开采的储层不断地开发,低渗储层是未来储量接替的主要储层,因此研究和认识低渗透储层岩石的微观孔隙结构及其水驱油的微观渗流特征具有重要的意义。本文以A盆地的低渗B油田为例,对其储层岩石的孔隙结构和非均质性进行了... 详细信息

随着高渗透、好开采的储层不断地开发,低渗储层是未来储量接替的主要储层,因此研究和认识低渗透储层岩石的微观孔隙结构及其水驱油的微观渗流特征具有重要的意义。本文以A盆地的低渗B油田为例,对其储层岩石的孔隙结构和非均质性进行了全面系统的研究,同时利用真实砂岩微观模型对其流体渗流特征、残余油的形态、分布以及影响其油水渗流的主要因素进行了大量的室内实验研究,主要取得以下认识: (1)B油田长6储层整体物性较差,B1井区长6储层孔隙度平均值为13.3%,渗透率为0.62×10μm。B2井区孔隙度平均值为14.8%,渗透率为1.24×10μm。 (2)B油田长6储层孔隙喉道较小,B1井区喉道中值半径平均为0.13μm,平均孔径为30μm;B2井区喉道中值半径平均为0.22μm,平均孔径为44μm。两个井区孔隙虽然都已小孔隙为主,孔喉组合以小孔微喉型为主 (3)水驱油的形式有两种,对于物性较好的B2井区,水驱油路线多,主要以均匀的驱替方式为主,最终驱油效率较高。而相对于B1井区,由于其物性较差,水驱油主要以指状的驱替方式为主,驱油效率也较低。 (4)残余油主要有两种形式:膜状残余油,其主要存在于水驱过的孔隙壁上和孔隙角隅部位。簇状残余油,其是由注入水绕流形成,主要两种形式:小范围绕流形成的小簇状油块,水只是绕过较小的含油的孔隙喉道。大范围的绕流形成的大簇状油块,水只是经过了少数大的孔隙喉道,绕过的面积较大。绕流形成的簇状残余油是残余油的主要形式。 (5)影响最终驱油效率的因素有以下几个:储层物性、驱替压力、储层非均质性以及储层的润湿性。分析认为,对于低渗储层物性是首要的影响因素,物性好的模型即使非均质性较强,其最终驱油效率也比较高;相反,物性较差的模型,即使非均质性较弱,其最终驱油效率也比较低。本文取得的研究成果对于认识低渗透储层的水驱油特征及残余油的形态有重要意义,也对低渗透油田注水开发有着一定的意义。

关键词：低渗透储层孔隙结构非均质性微观渗流特征

喷托维林对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

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生物技术 2016年第6期26卷 602-605页

作者：熊明涛占劲松朱吉生邵金辉湖北文理学院医学院附属谷城县人民医院湖北襄阳441700 湖北文理学院医学院形态学部湖北襄阳441053

[目的]研究枸橼酸喷托维林对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。[方法]采用不同浓度(60、75和90μmol/L)的枸橼酸喷托维林处理HepG2细胞48 h,应用MTT(噻唑蓝)法测定细胞的增殖活性,再检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,Hoechst 33258染色法检测细... 详细信息

[目的]研究枸橼酸喷托维林对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。[方法]采用不同浓度(60、75和90μmol/L)的枸橼酸喷托维林处理HepG2细胞48 h,应用MTT(噻唑蓝)法测定细胞的增殖活性,再检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,Hoechst 33258染色法检测细胞的凋亡情况。[结果]枸橼酸喷托维林能以浓度依赖的方式抑制HepG2细胞的增殖。对照组与处理组之间LDH活性比较均无显著性差异(P>0.05)。而75μmol/L枸橼酸喷托维林处理48 h能够显著诱导HepG2细胞凋亡。[结论]枸橼酸喷托维林可显著抑制肝癌HepG2细胞增殖,这与其诱导细胞凋亡途径有关。

关键词：喷托维林 HepG2细胞增殖细胞凋亡

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β-葡萄糖苷酶在工农医领域的应用

生命的化学 2005年第1期25卷 22-24页

作者：邵金辉韩金祥朱有名吴围屏吴坚美山东省医药生物技术研究中心国家卫生部生物技术药物重点实验室济南250062

β-葡萄糖苷酶能够水解多种β葡萄糖苷。它与其他纤维素酶共同作用,可以将自然界中含量丰富的纤维素水解成人类可以直接利用的能源物质———葡萄糖;β葡萄糖苷酶在医学上也有重要的应用,它可用于一些肿瘤疾病的诊断和治疗。人缺乏β-... 详细信息

β-葡萄糖苷酶能够水解多种β葡萄糖苷。它与其他纤维素酶共同作用,可以将自然界中含量丰富的纤维素水解成人类可以直接利用的能源物质———葡萄糖;β葡萄糖苷酶在医学上也有重要的应用,它可用于一些肿瘤疾病的诊断和治疗。人缺乏β-葡萄糖苷酶,可以引起葡萄糖苷N脂酰鞘氨醇在巨噬细胞溶酶体内积累,引发戈谢病(Gau cherdisease)。

关键词： β-葡萄糖苷酶纤维素酶 β-葡萄糖苷