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LHCGR胞外结构域蛋白的生信分析、原核表达及纯化

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石河子大学学报（自然科学版） 2024年第2期42卷 150-158页

作者：王蒙蒙刘雨然杨慧莹张梦圆王燕朱晓庆罗燕邵永斌连科迅谷新利石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

目的为获得小鼠LHCGR胞外结构域蛋白(LHCGR-1),分析其结构及理化性质,为今后研究该蛋白功能及筛选与之相互作用的小分子化合物奠定基础。方法根据NCBI中小鼠LHCGR氨基酸序列合成目的基因Lhcgr-1,经生物信息学分析后,将该基因插入至表达... 详细信息

目的为获得小鼠LHCGR胞外结构域蛋白(LHCGR-1),分析其结构及理化性质,为今后研究该蛋白功能及筛选与之相互作用的小分子化合物奠定基础。方法根据NCBI中小鼠LHCGR氨基酸序列合成目的基因Lhcgr-1,经生物信息学分析后,将该基因插入至表达载体pET-28a(+),并转化至BL21(DE3)感受态细胞中;经IPTG诱导,表达重组蛋白pET-28a-LHCGR-1,利用SDS-PAGE和Western Blot进行鉴定,之后对该蛋白进行纯化,并通过分子对接技术预测该蛋白与LH、CG的相互作用。结果预测LHCGR-1蛋白分子量为40749.08,由367个氨基酸组成,等电点理论值为5.47;氨基酸序列中有29个丝氨酸位点、10个苏氨酸位点和5个酪氨酸位点;成功构建了表达载体pET-28a-LHCGR-1并获得纯化的目的蛋白;分子对接结果表明目的蛋白可以与LH、CG通过多种相互作用,形成稳定的复合物,有利于其发挥原有的生物学功能。结论成功构建了小鼠胞外结构域蛋白LHCGR-1在大肠杆菌内的原核表达体系并获得了纯化蛋白,分子对接预测该蛋白具有生物学功能,提示该蛋白可以用于后续研究。

关键词： LHCGR 原核表达蛋白质纯化生信分析分子对接

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奶牛围产期常见代谢病及防控

畜牧业环境 2022年第23期 49-50页

作者：李效振罗燕邵永斌乌鲁木齐海关技术中心新疆乌鲁木齐830018 石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

奶牛围产期是指怀孕母牛产前产后各15d的时期,其中产前15d叫围产期,产后15d为围产后期。处于围产期的奶牛由于临近生产或者生产之后,机体的生理状态会发生一系列的变化,免疫力低下,抗病能力低,是奶牛各种疾病高发时期,一旦发病,将会对... 详细信息

奶牛围产期是指怀孕母牛产前产后各15d的时期,其中产前15d叫围产期,产后15d为围产后期。处于围产期的奶牛由于临近生产或者生产之后,机体的生理状态会发生一系列的变化,免疫力低下,抗病能力低,是奶牛各种疾病高发时期,一旦发病,将会对牛场造成严重的经济损失。本文重点讲解奶牛围产期的代谢病和生产瘫痪病及防控措施,希望对养牛人员在奶牛围产期对奶牛的生产管理有所帮助。

关键词：奶牛围产期常见代谢病防控

甘草酸对脂多糖应激黄羽肉仔鸡免疫性能的影响

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中国畜牧兽医 2022年第9期49卷 3419-3427页

作者：高嘉豪乔彦杰连科迅王蒙蒙谷新利邵永斌石河子大学动物科技学院石河子832003

【目的】本试验旨在研究甘草酸(GA)对黄羽肉仔鸡免疫性能的影响。【方法】选取300只体重接近的1日龄健康黄羽肉仔鸡,随机分为6组,每组5个重复,每个重复10只,分别为空白对照组、脂多糖处理组(LPS组)、黄芪多糖组(APS组)、高剂量甘草酸组(... 详细信息

【目的】本试验旨在研究甘草酸(GA)对黄羽肉仔鸡免疫性能的影响。【方法】选取300只体重接近的1日龄健康黄羽肉仔鸡,随机分为6组,每组5个重复,每个重复10只,分别为空白对照组、脂多糖处理组(LPS组)、黄芪多糖组(APS组)、高剂量甘草酸组(GA_(H)组)、中剂量甘草酸组(GA_(M)组)和低剂量甘草酸组(GA_(L)组)。空白对照组于14、16、18、20日龄早上腹腔注射0.9%无菌生理盐水2 mL,其余各组同时间注射等量的LPS溶液(1.5 mg/kg BW)建立体内免疫应激模型。空白对照组和LPS组饲喂基础饲粮,APS组、GA_(H)、GA_(M)和GA_(L)组于应激模型建立阶段及前后3 d(即11~23 d)分别在基础饲粮基础上添加400 mg/kg黄芪多糖(APS)和120、100、80 mg/kg的GA;试验期49 d。在21、28、35、42、49日龄每个重复随机选取2只鸡采集翅静脉血,用酶联免疫法(ELISA)测定血清中CD4、CD8分子含量及免疫活性物质IgA、IgG、IgM含量。【结果】与空白对照组相比,21~49日龄时,其余5组肉仔鸡血清CD4分子含量均极显著下降(P0.05),且均极显著或显著高于LPS组(P0.05),且在35和49日龄时,GA_(H)组肉仔鸡CD8分子含量与空白对照组差异不显著(P>0.05);在IgA含量方面,除35日龄外,其他日龄时GA_(H)组与APS组间均无显著差异(P>0.05),在21和49日龄时,GA_(H)组与空白对照组差异均不显著(P>0.05);在IgG含量方面,除28日龄外,其他日龄时GA_(H)组与APS组间均无显著差异(P>0.05),在35日龄时,GA_(H)组与空白对照组差异不显著(P>0.05);在IgM含量方面,除42日龄外,其他日龄时GA_(H)组与APS组间均无显著差异(P>0.05),在21日龄时,GA_(H)组与空白对照组差异不显著(P>0.05)。【结论】GA能有效缓解黄羽肉仔鸡对LPS刺激引起的免疫应激反应,增强免疫调节能力,且与保护效果之间有剂量效应,由强到弱依次为GA_(H)>GA_(M)>GA_(L)。

关键词：甘草酸(GA) 黄羽肉仔鸡脂多糖免疫调节

中药G-免疫增强剂复方和单味中药多糖的免疫增强作用研究

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中药G-免疫增强剂复方和单味中药多糖的免疫增强作用研究

作者：邵永斌石河子大学

学位级别：硕士

本文中所研究的中药复方免疫增强剂,经临床应用,能显著提高畜禽成活率、降低发病率,增强机体的免疫功能。以往研究表明,从该复方中提取的复方总多糖能显著增强动物机体的免疫功能,但其作用的机制尚不清楚,本研究欲对该复方总多糖及方中... 详细信息

本文中所研究的中药复方免疫增强剂,经临床应用,能显著提高畜禽成活率、降低发病率,增强机体的免疫功能。以往研究表明,从该复方中提取的复方总多糖能显著增强动物机体的免疫功能,但其作用的机制尚不清楚,本研究欲对该复方总多糖及方中各单味中药多糖的免疫作用及其作用机理作一初步探讨。分别给小鼠灌服药物（复方总多糖、复方水煎剂、11味单味中药多糖、生理盐水）后制备含药血清,用MTT法测定小鼠淋巴细胞增殖程度,用酶法一氧化氮试剂盒测定腹腔巨噬细胞一氧化氮的生成量,同时与各种药物的体外实验相比较。分别提取各组灌药小鼠脾脏RNA,应用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测IL-2 mRNA的表达水平,凝胶图象光密度分析系统进行相对定量。结果: 1 复方总多糖、复方水煎剂和11味单味中药的多糖均具有不同程度的促进小鼠淋巴细胞增殖的作用,说明这些药物都具有促进免疫细胞免疫功能的作用。 2 在13个药物血清组中有10组能不同程度地增强淋巴细胞增殖反应,而麦冬多糖药物血清、熟地多糖药物血清、山楂多糖药物血清对小鼠淋巴细胞增殖反应没有增强作用,这可能与有些有效成分未能从消化道吸收,或因其有效成分经消化道或肝脏代谢失活所致。 3 淫羊藿多糖、茯苓多糖、复方多糖、复方水煎剂和黄芪多糖的药物组和药物血清组都能显著增加小鼠腹腔巨噬细胞NO的生成量,说明这些多糖均能显著改善巨噬细胞的功能,增强腹膜的防御功能,对小鼠的非特异性免疫功能有明显的提高作用。 4 复方总多糖、复方水煎剂以及组成复方的11味单味中药多糖均能显著促进小鼠IL-2 mRNA的表达,增强机体的细胞免疫水平,从而说明本实验所采用的中药多糖及水煎剂所产生的免疫增强作用的基础是与其在转录水平增强IL-2 mRNA的表达有关。 5 综合三个实验的结果,发现复方总多糖的免疫增强效果最好,优于复方水煎剂和单一多糖,这可能是因为几种多糖配伍具有协同作用,能更好的发挥细胞免疫增强作用。总体实验结果说明增强淋巴细胞增殖,促进腹腔巨噬细胞NO和脾脏细胞因子的分泌是复方总多糖增强机体免疫功能的部分机制。

关键词：多糖药物血清免疫功能

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大型发电机定子绕组常见故障的分析及处理

大电机技术 2014年第6期 27-31页

作者：邵永斌哈尔滨电机厂有限责任公司哈尔滨150040

根据多年处理定子绕组故障的经历,总结了一些常见的大型发电机定子绕组故障分析及处理方法。最常见故障的原因是定子线棒下线时没有按照安装工艺操作,在耐压试验时出现放电现象或在试运行试验时出现损伤线棒绝缘层的事故。其次是定子绕... 详细信息

根据多年处理定子绕组故障的经历,总结了一些常见的大型发电机定子绕组故障分析及处理方法。最常见故障的原因是定子线棒下线时没有按照安装工艺操作,在耐压试验时出现放电现象或在试运行试验时出现损伤线棒绝缘层的事故。其次是定子绕组击穿,机组的一些附属设备超过使用年限,运行过程中会引起绕组击穿事故;安装或大修时金属异物遗留机组内,也会导致出现定子绕组击穿的事故。最后介绍绕组内部故障原理,利用多回路理论结合有限元计算方法诊断单相接地故障位置;利用泄漏电流与端部绕组绝缘缺陷的关系,诊断绕组绝缘存在缺陷的部位。

关键词：定子绕组击穿安装工艺附属设备多回路理论

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水轮发电机组振动分析及处理

电站系统工程 2010年第4期26卷 71-72页

作者：邵永斌哈尔滨电机厂有限责任公司

机组运行的稳定性是水轮发电机组工作性能中的重要指标,克服机组运行的不稳定,就成了机组设计、制造、安装、运行和检修中突出要解决的问题之一。

关键词：水轮发电机组振动分析机组运行工作性能机组设计稳定性不稳定

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水轮发电机转子振动问题的研究与处理

电站系统工程 2014年第4期30卷 79-80页

作者：邵永斌哈尔滨电机厂有限责任公司

水轮发电机转子引起的振动是水电厂最为常见的问题，它危及机组的安全运行，一直来受到制造厂的重视和发电厂的关注。水口水电站一号机自1993年8月投运后，存在上机架径向振动超标，上导摆度偏大的振动问题。

关键词：水轮发电机转子振动问题水口水电站安全运行振动超标水电厂发电厂制造厂

益母草碱对LPS诱导小鼠子宫内膜炎的抗炎作用研究

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中国畜牧兽医 2023年第5期50卷 2149-2155页

作者：邵永斌郑一闯张竞怡魏琳颖田勇孙国结刘雨然罗燕谷新利石河子大学动物科技学院石河子832003

【目的】探究益母草碱对脂多糖(LPS)诱导小鼠子宫内膜炎的抗炎作用。【方法】将60只6~8周龄雌性C57小鼠随机分为6组:空白对照组,模型组,益母草碱低、中、高剂量组及地塞米松阳性对照组,每组10只。空白对照组经阴道灌注50μL PBS缓冲液,... 详细信息

【目的】探究益母草碱对脂多糖(LPS)诱导小鼠子宫内膜炎的抗炎作用。【方法】将60只6~8周龄雌性C57小鼠随机分为6组:空白对照组,模型组,益母草碱低、中、高剂量组及地塞米松阳性对照组,每组10只。空白对照组经阴道灌注50μL PBS缓冲液,其余组经阴道灌注50μL LPS(1 mg/mL)建立小鼠子宫内膜炎疾病模型。造模后,益母草碱低、中、高剂量组分别腹腔注射7.5、15.0、30.0 mg/kg益母草碱,阳性对照组腹腔注射5.0 mg/kg地塞米松,每6 h 1次,连续3次。造模24 h后处死小鼠,测定各组小鼠子宫指数;通过HE染色观察子宫组织病理变化;采用ELISA法检测子宫组织白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等相关炎症因子含量及髓过氧化物酶(MPO)活性。【结果】与空白对照组相比,模型组小鼠子宫指数、子宫组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量与MPO活性均极显著升高(P<0.01);与模型组相比,不同剂量益母草碱能不同程度降低LPS诱导子宫内膜炎小鼠的子宫指数、子宫组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量与MPO活性(P<0.01),并呈剂量依赖性;与模型组相比,阳性对照组小鼠子宫指数、子宫组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量与MPO活性极显著降低(P<0.01)。【结论】益母草碱可降低LPS诱导子宫内膜炎小鼠子宫指数、TNF-α、IL-1β、IL-6炎性因子含量及MPO活性,减轻炎症症状,显示出良好的抗炎效果。

关键词：益母草碱小鼠脂多糖(LPS) 子宫内膜炎炎性细胞因子

不同组分及不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫功能的影响

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西北农业学报 2012年第9期21卷 15-18页

作者：李赞阳刘红罗燕邵永斌谷新利石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 石河子大学化学化工学院新疆石河子832003

旨在观察不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫功能的影响。用环磷酰胺(60mg/kg)作免疫抑制剂建立免疫功能低下动物模型,进行小鼠EA花环形成率、T淋巴细胞酯酶染色率检测。结果表明,多糖组分A2(每只12.5mg)和中间纯度的多糖B2(每只... 详细信息

旨在观察不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫功能的影响。用环磷酰胺(60mg/kg)作免疫抑制剂建立免疫功能低下动物模型,进行小鼠EA花环形成率、T淋巴细胞酯酶染色率检测。结果表明,多糖组分A2(每只12.5mg)和中间纯度的多糖B2(每只12.5mg)能够显著提高正常小鼠和免疫抑制小鼠EA花环形成率和T淋巴细胞酯酶染色率,能够使环磷酰胺造成的免疫抑制逆转至正常水平。因此,具有合适分子质量的多糖组分和合适纯度的多糖能显著增强小鼠的免疫功能。

关键词：不同组分多糖不同纯度多糖免疫抑制模型免疫功能