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壳聚糖/纤维素球珠在组氨酸标签蛋白分离纯化的应用研究

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壳聚糖/纤维素球珠在组氨酸标签蛋白分离纯化的应用研究

作者：邵明聪浙江工商大学

学位级别：硕士

随着基因工程技术的快速发展,大量的重组蛋白通过基因重组技术所生产,然而从复杂的混合体系中将目标蛋白分离纯化出来是一项复杂而艰巨的任务。研究和开发新型的蛋白分离纯化介质以及经济、快速、简便的分离纯化体系,对于实现蛋白质的... 详细信息

随着基因工程技术的快速发展,大量的重组蛋白通过基因重组技术所生产,然而从复杂的混合体系中将目标蛋白分离纯化出来是一项复杂而艰巨的任务。研究和开发新型的蛋白分离纯化介质以及经济、快速、简便的分离纯化体系,对于实现蛋白质的工业化生产和商业化应用具有重要理论和实践意义。本论文以壳聚糖和纤维素为起始原料,利用绿色溶剂离子液体（1-丁基-3-甲基咪唑）氯盐（[BMIM]Cl）作为溶解体系,制备得到蛋白分离纯化介质壳聚糖/纤维素球珠（CCB）,弥补了壳聚糖粉末颗粒微小、刚性不足、不易回收利用等缺点;随后对其进行各项结构、特征进行表征,在固定化金属离子亲和层析（IMAC）原理的基础上进一步将其应用于组氨酸标签蛋白分离纯化。主要研究内容和结果如下:（1）考察了不同壳聚糖和纤维素比例对球珠成球性的影响,结果表明:当壳聚糖与纤维素的比例为4:1时,得到直径为3 mm的形状规则的球珠。随后利用傅里叶红外变换光谱（FT-IR）对其进行官能团分析,结果显示CCB在成型的过程中,壳聚糖和纤维素主要以分子链上的羟基通过氢键的形式进行交联;透射电镜（TEM）显示壳聚糖和纤维素分别呈现的是球状、针状形态,而CCB为两者的中间形态;利用热重分析（TGA）对其进行热稳定性分析,结果显示在260℃内,CCB表现出良好的热稳定性。（2）考察了三种不同金属离子（Ni2+,Cu2+,Zn2+）与CCB在不同初始金属离子浓度的螯合情况,结果表明:在金属离子初始浓度为2.4mg/mL时,CCB对于不同金属离子（Ni2+,Cu2+,Zn2+）的吸附量达到最大值,分别为 2.38±0.05mg/g,3.50±0.08mg/g,2.56±0.02mg/g。（3）考察了固定化金属离子后的介质M2+-CCB（M=Ni,Cu,Zn）对组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白（his-taggedEGFP）的分离纯化效果。研究结果表明:对于一定量的his-taggedEGFP粗蛋白与250 mg的介质M2+-CCB（M=Ni,Cu,Zn）在冰浴下混合振荡吸附30 min便达到了蛋白吸附平衡;以及缓冲液体系中离子强度为1.0 mol/L,pH 7.2和咪唑浓度为500 mmol/L时,介质对于目的蛋白的亲和吸附效果最好。其中介质（Zn2+-CCB）具有最好的分离纯化专一性效果,最终可以得到纯度约为90%的目的蛋白（1.84 mg/g）。（4）在优化后的分离纯化体系下,进一步考察了介质M2+-CCB（M=Ni,Cu,Zn）的重复利用能力。结果表明:随着利用次数的增多,介质对于目的蛋白的亲和量急剧下降;与第一次相比,第三次的结合量分别低至 58.7%（Ni2+-CCB）,53.6%（Cu2+-CCB）,46.9%（Zn2+-CCB）。此纯化介质经EDTA解吸金属离子后,再重新螯合,用于目的蛋白的分离纯化,其结合量分别可以恢复到97%（Ni2+-CCB）,96.4%（Cu2+-CCB）,97.3%（Zn2+-CCB）。（5）将组氨酸标签蛋白分离纯化体系分别应用于拓展牛血清白蛋白（BSA）和食品中大豆分离蛋白（SPI）分离纯化中。结果表明:此纯化体系可以较好地用于BSA的分离纯化中,而不适合高通量地适用于SPI;另一个方面说明了介质（Zn2+-CCB）对于组氨酸具有特异性吸附效果。

关键词：壳聚糖/纤维素离子液体组氨酸标签蛋白亲和吸附分离纯化重复利用

含分布式电源的配电网多目标无功优化运行研究

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含分布式电源的配电网多目标无功优化运行研究

作者：邵明聪青岛大学

学位级别：硕士

可持续发展及环境保护理念在全球范围的快速普及,加速了能源转型,加大了可再生能源的开发力度。清洁型能源(主要是太阳能、风能等分布式电源)的快速发展及其并网渗透率的不断提高,有效缓解了能源危机,但其出力的不确定性和难预测性给电... 详细信息

可持续发展及环境保护理念在全球范围的快速普及,加速了能源转型,加大了可再生能源的开发力度。清洁型能源(主要是太阳能、风能等分布式电源)的快速发展及其并网渗透率的不断提高,有效缓解了能源危机,但其出力的不确定性和难预测性给电网的运行带来了影响。因此,合理处理配电网中的不确定性问题、有效解决分布式电源并网造成的影响,是电网稳定运行的前提,也是影响分布式电源今后发展的重要因素和研究重点,而采用无功补偿装置进行无功补偿可有效解决分布式电源并网造成的影响。因此,本文针对分布式电源并网造成的影响展开研究,通过无功补偿来优化含分布式电源配电网的运行。首先,对风力发电、太阳能发电和燃料电池发电的结构和发电原理进行分析介绍,通过定量计算和定性分析,对分布式电源并网给系统网损、潮流和电压带来的影响展开研究。其次,通过分析环境对分布式电源出力的影响,结合实际运行工况,建立风电、光伏出力及负荷的数学模型。为更好处理相关性问题并得到输出变量的概率密度函数,采用Nataf变换和Gram-Charlier级数展开对三点估计法进行改进,并通过系统仿真对改进算法进行验证分析。然后,为使分布式电源并网后配电网的拓扑结构更加符合实际运行工况,对配电系统进行网络重构。结合分布式电源和负荷的不确定性及概率约束,从系统有功网损期望、电压稳定指标和无功补偿设备投资等角度出发,建立含分布式电源配电网的静态无功优化模型;采用通过交叉操作和禁忌表改进的蜂群算法,并结合Pareto最优解理论,提出基于Pareto最优解的改进蜂群算法,以更好地处理多目标优化问题,并通过IEEE33节点系统进行仿真验证。最后,为更准确的模拟系统实际运行工况,结合设备的动作次数约束和相关性问题,建立动态无功优化模型,并采用分时段的方式对其解耦,通过仿真计算对所建模型和改进算法进行分析验证。

关键词：分布式电源三点估计法无功优化 Pareto最优解改进蜂群算法

组氨酸标签蛋白纯化介质——EDTA-壳聚糖的制备与应用

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中国食品学报 2018年第12期18卷 144-149页

作者：邵明聪华伟伟邱金丹黄建颖浙江工商大学食品与生物工程学院杭州310018

以离子液体为溶剂,溶解具有较强金属螯合能力的EDTA-壳聚糖,能够保持较强的稳定性。将其用于涂膜处理,螯合两种金属离子(Ni2+,Zn2+),形成M2+-EDTA-壳聚糖(M=Ni,Zn),并对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化。结果表明:EDTA-壳聚糖经过涂... 详细信息

以离子液体为溶剂,溶解具有较强金属螯合能力的EDTA-壳聚糖,能够保持较强的稳定性。将其用于涂膜处理,螯合两种金属离子(Ni2+,Zn2+),形成M2+-EDTA-壳聚糖(M=Ni,Zn),并对组氨酸标签蛋白进行特异性亲和纯化。结果表明:EDTA-壳聚糖经过涂膜处理后,形成坚韧而富有弹性的膜,用于组氨酸蛋白分离取得良好的效果,相比直接用于EGFP-(His)6-NH2蛋白纯化分离表现很大的优势,得到目的蛋白的纯度约为95%,与涂膜前相比,缩短了10 min的分离时间,且能更好地特异性吸附目的蛋白,在一定程度上节约了时间和成本。

关键词：离子液体 EDTA-壳聚糖组氨酸标签分离纯化

壳聚糖/氧化石墨烯复合涂膜食品包装纸的研究

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中国食品学报 2019年第7期19卷 192-200页

作者：施昌谷邵明聪李文娟黄建颖方嫱浙江工商大学食品与生物工程学院浙江省食品安全重点实验室

为改良壳聚糖在食品包装中应用存在的机械性能不强,溶解性较差等缺陷,通过流延涂膜法,将壳聚糖/氧化石墨烯复配涂膜至食品包装纸,经抗氧化性、拉伸强度及水蒸气、油脂透过率等指标,对复合涂膜食品包装纸性质进行评估,结果发现采用酸溶... 详细信息

为改良壳聚糖在食品包装中应用存在的机械性能不强,溶解性较差等缺陷,通过流延涂膜法,将壳聚糖/氧化石墨烯复配涂膜至食品包装纸,经抗氧化性、拉伸强度及水蒸气、油脂透过率等指标,对复合涂膜食品包装纸性质进行评估,结果发现采用酸溶性壳聚糖(18mL,10mg/mL)与氧化石墨烯(1mL,1mg/mL)再加入氧化剂(1mL,1mg/mL)制备得到的涂膜液复合涂膜食品包装纸,具有良好的保鲜功能,并初步探索壳聚糖/氧化石墨烯复合涂膜食品包装纸对生鲜猪肉贮藏保鲜过程中颜色、弹性、球蛋白沉淀、汁液流失率、蒸煮损失率的影响。与仅用壳聚糖处理的食品包装纸保鲜功能比较,壳聚糖/氧化石墨烯复合涂膜食品包装纸具有较好的保鲜效果。本研究结果为开发来源丰富、天然、无毒,具有优良性能的高效天然生物保鲜剂和保鲜材料提供理论依据。

关键词：壳聚糖氧化石墨烯食品包装纸生鲜猪肉贮藏

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上池养殖珍珠龙胆无公害技术

当代水产 2016年第5期41卷 79-79,82页

作者：邵明聪徐闻县水产技术推广站

珍珠龙胆石斑鱼又称龙虎斑或珍珠斑,是龙胆石斑鱼父本与老虎斑母本培育出来的杂交新种,因其体表布满黑褐色形似珍珠的斑点而得名。其肉质细嫩、成长快速、抗病力强,有虎斑头、龙胆尾的外型,显现杂交优势,商品鱼市场价格好,也可以做为观... 详细信息

珍珠龙胆石斑鱼又称龙虎斑或珍珠斑,是龙胆石斑鱼父本与老虎斑母本培育出来的杂交新种,因其体表布满黑褐色形似珍珠的斑点而得名。其肉质细嫩、成长快速、抗病力强,有虎斑头、龙胆尾的外型,显现杂交优势,商品鱼市场价格好,也可以做为观赏鱼,市场前景广阔。

关键词：龙胆石斑鱼老虎斑杂交优势商品鱼增氧机上池投喂量巡塘鱼市场配合饲料

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机械老厂的标准化建设

劳动保护 2014年第5期 96-98页

作者：胡云泽邵明聪

江苏无锡威孚马山油泵油嘴有限公司（以下简称“威孚马山”）成立于1991年,前身为无锡马山油泵油嘴厂,2004年成为无锡威孚高科技集团股份有限公司的全资子公司,专业生产用于柴油发动机的精密柱塞偶件。威孚马山从2011年四季度开始开展... 详细信息

江苏无锡威孚马山油泵油嘴有限公司（以下简称“威孚马山”）成立于1991年,前身为无锡马山油泵油嘴厂,2004年成为无锡威孚高科技集团股份有限公司的全资子公司,专业生产用于柴油发动机的精密柱塞偶件。威孚马山从2011年四季度开始开展安全生产标准化建设,坚持安全生产“三管理”——全方位的安全管理、全过程的安全管理、全员参与的安全管理,并于2012年11月通过了安全生产标准化三级企业评审。

关键词：生产标准化安全管理老厂机械油泵油嘴柴油发动机柱塞偶件安全生产

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鱼虾混养生态养殖技术

海洋与渔业 2016年第9期 60-61页

作者：邵明聪陈忠国徐闻县水产技术推广站

近年来,随着南美白对虾养殖业的快速发展,养殖户追求高产盲目开发,造资源极大浪费,也使海水富营养化加剧,病害越来越严重。在单一的南美白对虾或者单一的鱼的养殖过程中,对虾或者鱼苗种日益退化,病害多,一旦发病就全池感染,给养殖户造... 详细信息

近年来,随着南美白对虾养殖业的快速发展,养殖户追求高产盲目开发,造资源极大浪费,也使海水富营养化加剧,病害越来越严重。在单一的南美白对虾或者单一的鱼的养殖过程中,对虾或者鱼苗种日益退化,病害多,一旦发病就全池感染,给养殖户造成极大经济损失。

关键词：南美白对虾水富营养化生态养殖技术高密度养殖增氧机野杂鱼草虾苗种放养饲料利用率投饵量

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浅谈碳源和氮源在水质调节中的作用

水产养殖 2021年第10期42卷 51-52页

作者：邵明聪丁树军陈忠国徐闻县水产技术推广站广东湛江524100

随着养殖技术水平的不断提高,传统粗放型养殖模式已被集约化高密度养殖模式所取代。在高密度养殖过程中,人工配合饲料的大量投喂及养殖动物代谢产生的氨氮和亚硝酸盐会引起养殖水质的恶化,积累有毒有害物质,滋生大量致病菌,影响养殖动... 详细信息

随着养殖技术水平的不断提高,传统粗放型养殖模式已被集约化高密度养殖模式所取代。在高密度养殖过程中,人工配合饲料的大量投喂及养殖动物代谢产生的氨氮和亚硝酸盐会引起养殖水质的恶化,积累有毒有害物质,滋生大量致病菌,影响养殖动物的健康生长。目前,养殖水质恶化与水生动物病害频发已经成为阻碍水产养殖业可持续发展的主要因素。因此,水质调控是养殖过程中的关键技术。现简述如何通过碳源和氮源调节水质,促进养殖水体生态系统物质循环和有机物质分解,更好地维持水质的稳定,为养殖对象提供良好的生存环境。

关键词：传统粗放型技术水平高密度养殖养殖对象有毒有害物质水体生态系统物质循环养殖模式

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对虾偷死综合症的处理方法

当代水产 2017年第9期42卷 87-87,89页

作者：刘上志丁树军邵明聪广东省徐闻县水产技术推广站

2017年是对虾养殖最艰难的一年，上半年天气比往年异常，低温雨水多。对虾普遍生长较慢，病害来得早，来得猛，死亡率特高。有的放苗十来天就不见虾了，甚至养了1个月，一个晚上就死亡一塘虾。

关键词：对虾养殖综合症死亡率病害放苗