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bFGF、EGF和NGF对人角膜内皮细胞生长调控的实验研究

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眼科学报 2008年第1期24卷 9-12页

作者：邵应峰胡诞宁陈家祺中山大学中山眼科中心中山大学眼科学国家重点实验室广州510060 纽约眼耳医院组织培养研究中心纽约医学院纽约10003

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(Basicfibroblastgrowthfacfor,bFGF)、表皮细胞生长因子(Epidermalgrowthfactor,EGF)和神经细胞生长因子(Nervegrowthfactor,NGF)对体外培养的人角膜内皮细胞的生长调控作用。方法:将相同数量的人角膜内皮细胞接种于96孔板。加入浓度分别为0ng/ml、1ng/ml、3ng/ml、10ng/ml、30ng/ml、100ng/ml的EGF、bFGF和NGF进行培养。5天后MTT法用检测增殖情况。结果:在0ng/ml、1ng/ml、3ng/ml、10ng/ml、30ng/ml、100ng/ml浓度下bFGF组的平均OD值分别为:0.224±0.045、0.239±0.040、0.262±0.0342、0.278±0.0319、0.281±0.0324、0.260±0.0310。EGF组的平均OD值分别为:0.228±0.0304、0.245±0.0418、0.267±0.0454、0.275±0.0347、0.271±0.0449、0.250±0.0253。NGF组的平均OD值分别为:0.216±0.0187、0.228±0.0226、0.231±0.0225、0.242±0.0279、0.245±0.0294、0.247±0.0349。结论:bFGF在30ng/ml范围内对内皮细胞生长有促进作用,并具有剂量依赖性。高于100ng/ml时促生长作用降低。EGF在10ng/ml范围内对内皮细胞生长有促进作用,并具有剂量依赖性。高于30ng/ml时促生长作用降低。NGF本次实验剂量范围内对角膜内皮细胞生长无明显作用。

关键词：角膜内皮细胞生长因子调控

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角膜深板层内皮移植术伤口愈合机制的研究

眼科研究 2004年第3期22卷 282-285页

作者：邵应峰陈家祺王铮周世有中山大学中山眼科中心广州510060

目的　探讨用微型角膜刀行角膜深板层内皮移植术 (DLEK)与穿透角膜移植术 (PK)术后排斥反应的差异及机制 ;研究DLEK术后创面的愈合过程、特点和机制。方法　对两组新西兰白兔分别行DLEK和PK ,对比术后的排斥反应指数 ;术后不同时间取角... 详细信息

目的　探讨用微型角膜刀行角膜深板层内皮移植术 (DLEK)与穿透角膜移植术 (PK)术后排斥反应的差异及机制 ;研究DLEK术后创面的愈合过程、特点和机制。方法　对两组新西兰白兔分别行DLEK和PK ,对比术后的排斥反应指数 ;术后不同时间取角膜标本进行光镜、电镜和免疫组化检查。结果　实验组排斥反应指数较对照组降低 ;术后 2周角膜基质细胞开始增殖 ,分泌胶原 ;术后植片中央区瘢痕极少 ;Ⅰ、Ⅴ型胶原持续表达 ,Ⅲ型胶原术后 1周于伤口附近表达 ,1～ 2个月时最强。结论　DLEK术后排斥反应少 ,植片中央界面瘢痕轻微 ,优于手剖界面。

关键词：微型角膜刀内皮移植排斥反应创面愈合

羊膜移植联合绷带式角膜接触镜治疗老年患者翼状胬肉的疗效观察

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武汉大学学报（医学版） 2014年第4期35卷 603-605,650页

作者：曾朝霞邵应峰陈海波海南省眼科医院海南海口570311 中山大学中山眼科中心广东广州510110

目的:探讨绷带式角膜接触镜在老年患者的胬肉切除联合羊膜移植术治疗中的效果。方法:将胬肉切除联合羊膜移植术的患者,随机分配为两组:戴镜组(术后第1天配戴绷带式角膜接触镜)及对照组(单纯纱布加压包扎)。对照组44例44眼,戴镜组40例40... 详细信息

目的:探讨绷带式角膜接触镜在老年患者的胬肉切除联合羊膜移植术治疗中的效果。方法:将胬肉切除联合羊膜移植术的患者,随机分配为两组:戴镜组(术后第1天配戴绷带式角膜接触镜)及对照组(单纯纱布加压包扎)。对照组44例44眼,戴镜组40例40眼。观察两组患者术后1,3,7d的眼部刺激症状,角膜上皮愈合情况及6月后胬肉复发率。将两组数据进行对比并进行统计学分析。结果:①两组患者的眼部刺激症状在术后1d相比无差异。配镜组的眼部刺激症状在术后3d及7d明显减轻,差异具有显著性(P<0.05);②配镜组在术后3,7d的上皮愈合率高于对照组,差异具有显著性(P<0.05)。③两组6个月后胬肉复发率比较,差异无统计学意义。结论:老年患者翼状胬肉术后戴绷带式角膜接触镜对角膜面恢复及缓减刺激症状安全有效。

关键词：绷带式角膜接触镜翼状胬肉羊膜移植

干扰素抗瘢痕增殖预防青光眼滤过泡纤维化的疗效观察

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国际医药卫生导报 2002年第12B期8卷 15-16页

作者：邵应峰李小敏中山大学第二附属医院眼科，广东广州510120 第一军医大学珠江医院，广东广州510280

目的：观察干扰素α－2b抗瘢痕增殖对青光眼滤过术后患者的疗效。方法；原发性开角型青光眼病人分成3组：干扰素治疗组（25眼）、MMC治疗组（27眼）和对照组（30眼），每组各20例。MMC治疗组用蘸有1mg/4mL MMC的湿棉片置于巩膜瓣间3分... 详细信息

目的：观察干扰素α－2b抗瘢痕增殖对青光眼滤过术后患者的疗效。方法；原发性开角型青光眼病人分成3组：干扰素治疗组（25眼）、MMC治疗组（27眼）和对照组（30眼），每组各20例。MMC治疗组用蘸有1mg/4mL MMC的湿棉片置于巩膜瓣间3分钟，而后用大量生理盐水冲洗；干扰素治疗组分别在术中和术后2、4、6、8天采用干扰素α-2b 10万单位结膜下注射；对照组以等量生理盐水进行注射。结果：术后一年3组病人的眼压均值分别为：干扰素治疗组：1．89±0．33Kpa;MMC治疗组：1．76±0．41Kpa；对照组：2．45±0．58Kpa。两个治疗组的眼压均值显著低于对照组（P＜0．05）；各组具功能性滤过泡者眼数分别为：干扰素治疗组23眼（占92．0％）；MMC治疗组25眼（占92．6％）；对照组21眼（占70．0％）；MMC治疗组27只眼中有3眼出现滤过泡渗漏，2眼持续性低眼压，而干扰素治疗组和对照组中无一例上述并发症。结论：干扰素α-2b作为青少眼滤过术后的辅助用药无明显毒副作用，在疗效方面与抗代谢药物MMC相近。

关键词：干扰素抗瘢痕增殖预防青光眼滤过泡纤维化疗效观察小梁切除术

靶向CⅡTA基因siRNA对大鼠角膜基质细胞MHCⅡ基因表达影响的研究

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中国病理生理杂志 2006年第4期22卷 642-646页

作者：张雪菲陈家祺邵应峰中山大学中山眼科中心广东广州510060

目的:探讨靶向主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类抗原转录激活因子(MHCⅡtransactivator CⅡTA)的化学合成小干扰RNA(small interfering RNA)抑制大鼠角膜基质细胞表面的MHCⅡ类抗原表达的可行性。方法:设计并合成靶向CⅡTA基因的5条siRNA... 详细信息

目的:探讨靶向主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类抗原转录激活因子(MHCⅡtransactivator CⅡTA)的化学合成小干扰RNA(small interfering RNA)抑制大鼠角膜基质细胞表面的MHCⅡ类抗原表达的可行性。方法:设计并合成靶向CⅡTA基因的5条siRNA,分离并培养大鼠角膜基质细胞,经重组大鼠IFN-γ刺激后,在阳离子脂质体的介导下,将siRNA转染大鼠角膜基质细胞。于转染后24h收集细胞,用荧光定量PCR方法检测CⅡTA和MHCⅡmRNA水平的变化;流式细胞仪检测MHCⅡ抗原表达的变化。结果:大鼠角膜基质细胞经重组大鼠IFN-γ刺激后,CⅡTA和MHCⅡ的表达大幅增强。荧光定量PCR检测显示化学合成的5条siRNA通过脂质体转染大鼠角膜基质细胞后,均能不同程度地抑制CⅡTA和MHCⅡ的表达,与对照组具有显著差异(P<0·01)。其中siRNA-4组的抑制作用最明显,对CⅡTA、MHCⅡ基因的mRNA抑制率分别为95·10%±1·25%、82·70%±1·95%。流式细胞仪检测显示siR-NA-4组对MHCⅡ抗原分子表达抑制率为81·90%±1·23%。结论:在大鼠角膜基质细胞中,靶向CⅡTAsiRNA抑制了自身mRNA表达,并阻止其调控的MHCⅡ类分子的相应表达。从而为进一步研究利用siRNA技术抑制MHCⅡ的表达防治角膜缘移植排斥反应提供了实验依据。

关键词：基因,CⅡTA 基因,MHCⅡ siRNA 角膜

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角膜深板层内皮移植的三年临床观察

眼科学报 2006年第2期22卷 65-67,97页

作者：邵应峰陈家祺王铮周世有中山大学中山眼科中心广州510060

目的:探讨用微型自动角膜板层刀进行深板层角膜内皮移植术(microkeratomeassociateddeeplamellarendothelialkeratoplasty,MDLEK)的临床效果和不良反应。方法:对于2002年1月～2002年3月期间,用MDLEK治疗的6例大泡性角膜病变患者进行随访观察。结果:术后3个月5例患者最佳校正视力较术前明显提高,最高者可达0.7,并在以后的随访中保持稳定;术后3个月患者平均散光为(2.04±1.19)D,以后进一步减退;角膜中央厚度于术后3个月已接近正常水平,此后无显著变化;术后角膜内皮密度逐步下降,其下降速率与穿透性角膜移植相仿;共焦显微镜观察发现术后1a,创面附近的角膜基质细胞已趋于正常,且角膜中央视轴区无明显瘢痕。随访期内未发现角膜深层缝线导致新生血管或引起排异反应。结论:MDLEK用以治疗角膜内皮失代偿安全、实用;术后恢复视力时间短;术后散光小;术后板层创面愈合快,光学性能满意。

关键词：角膜移植角膜内皮治疗

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PCR检测眼部沙眼衣原体感染的初步报告

中山大学学报（医学科学版） 1995年第S1期15卷 90-92页

作者：黄湖明邵应峰梁晓文汪玉麦美琪中山医科大学孙逸仙纪念医院眼科

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和直接免疲荧光法（ＤＩＦ）对６７例睑结膜进行沙眼衣原体检测，其中沙眼７例、疑似沙眼３７例、正常睑结膜２３；例。结果发现。沙眼和疑似沙眼与正常组比较。ＰＣＲ检出阳性率有非常显著性差异（Ｐ＜０．０... 详细信息

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和直接免疲荧光法（ＤＩＦ）对６７例睑结膜进行沙眼衣原体检测，其中沙眼７例、疑似沙眼３７例、正常睑结膜２３；例。结果发现。沙眼和疑似沙眼与正常组比较。ＰＣＲ检出阳性率有非常显著性差异（Ｐ＜０．００１），ＤＩＦ差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。疑似沙眼组中，ＰＣＲ与ＤＩＦ阳性检出率比较差异有显著性（０．０２＜Ｐ＜０．０５）。

关键词：聚合酶链反应衣原体,沙眼沙眼/诊断荧光抗体技术

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人工角膜植入术的临床效果及并发症处理

中华显微外科杂志 2008年第1期31卷 72-73页

作者：袁进陈家祺周世有王智崇黄挺顾建军邵应峰中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室广州市510060

目的探讨钛支架复合型人工角膜移植治疗重度角膜盲的疗效，以及并发症的处理。方法手术分两阶段：一期手术显微镜下行钛支架复合型人工角膜植入联合自体耳软骨移植加固，二期行人工角膜前膜剪开。术后评价视功能，分析并发症的发生种类... 详细信息

目的探讨钛支架复合型人工角膜移植治疗重度角膜盲的疗效，以及并发症的处理。方法手术分两阶段：一期手术显微镜下行钛支架复合型人工角膜植入联合自体耳软骨移植加固，二期行人工角膜前膜剪开。术后评价视功能，分析并发症的发生种类及处理对策。结果手术施行9例，术后并发症为人工角膜前膜、后膜，角膜融解，经处理均得到控制。随访期内所有人工角膜均保持原位，术后7例裸眼视力大于0．1，达到脱盲标准。结论人工角膜移植是使严重角膜盲患者复明的有效手段，联合自体耳软骨加固可减少并发症的发生。

关键词：人工角膜移植并发症

影响中期保存的角膜供体内皮细胞活力的相关因素分析

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眼科研究 2008年第8期26卷 564-567页

作者：邵应峰胡诞宁刘雪花陈家祺眼科学国家重点实验室中山大学中山眼科中心广州510060 10003 美国纽约眼耳医院组织培养研究中心

目的探讨影响中期保存的供体角膜内皮细胞活性的相关因素。方法对保存液中的角膜内皮细胞进行培养和评分,并与供体年龄、供体保存与死亡时间间隔、供体采集与死亡间隔、是否曾在常温下长时间暴露等因素进行相关分析。结果细胞培养评分... 详细信息

目的探讨影响中期保存的供体角膜内皮细胞活性的相关因素。方法对保存液中的角膜内皮细胞进行培养和评分,并与供体年龄、供体保存与死亡时间间隔、供体采集与死亡间隔、是否曾在常温下长时间暴露等因素进行相关分析。结果细胞培养评分与供体年龄呈负相关,与供体保存时间呈负相关,与是否在常温下过夜呈负相关。结论供体的年龄、植片的保存时间及是否在常温下长时间暴露均是影响供体角膜内皮细胞活力和功能的关键因素。

关键词：角膜保存角膜内皮细胞细胞培养