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三个棉花MYB转录因子的表达特性及GhMYB4a的功能验证

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三个棉花MYB转录因子的表达特性及GhMYB4a的功能验证

作者：邱迎风新疆农业大学

学位级别：硕士

棉花作为我国纺织工业中的重要原料,与许多产业的健康发展息息相关。然而,最近几年,我国棉花的质量现状令人担忧。因此,许多棉花工作者已经将提高棉花纤维品质作为首要任务。次生壁增厚期在棉纤维发育过程中至关重要,棉花纤维次生壁与... 详细信息

棉花作为我国纺织工业中的重要原料,与许多产业的健康发展息息相关。然而,最近几年,我国棉花的质量现状令人担忧。因此,许多棉花工作者已经将提高棉花纤维品质作为首要任务。次生壁增厚期在棉纤维发育过程中至关重要,棉花纤维次生壁与其他植物细胞不同,主要由含量高达95%的纤维素组成,以及含量较低的木质素和木聚糖。然而,对棉花次生细胞壁生物合成的转录调控研究仍不深入。本研究从棉花中分离到一个R2R3-MYB转录因子GhMYB9,并在前期实验的基础上研究了GhMYB4a和GhMYB146两个基因,这三个基因在纤维发育过程中表达量较高,并且都具有与苯丙烷代谢通路启动子区结合的能力。为研究GhMYB4a基因是否参与纤维次生壁的生物合成,本研究特别对GhMYB4a在拟南芥中进行了超表达,通过对转基因植株的观察,发现转基因植株根毛和叶表皮毛密度都发生相应的增多。从转基因植株q PCR结果来看,许多次生细胞壁合成相关基因表达量都较野生型植株显著上升。全文主要结果如下:(1)克隆得到GhMYB9基因其cDNA全长1145 bp,开放阅读框长795 bp,编码264个氨基酸,预测分子量约为29.624 kDa,等电点为9.13。推测的氨基酸序列中含有2个高度保守的SANT结构域,基因组包含2个外显子和1个内含子。进化树分析发现,GhMYB9和GhMYB(HQ234875.1)属于同一个分支。(2)利用qPCR方法分析了GhMYB4a、GhMYB9、GhMYB146三个基因在棉花纤维发育不同时期及不同组织中的表达模式。结果表明三个基因在棉纤维不同的发育时期均有表达,其中在纤维伸长期的表达量较高;分析不同组织中三个基因的表达情况,认为三个基因均具有一定程度的表达特异性,其中GhMYB9组织表达特异性较为明显,花瓣中的表达量最高,根和真叶中表达量最低;GhMYB146组织表达特异性不明显。(3)本研究利用酵母单杂交的方法初步验证了陆地棉三个R2R3-MYB基因GhMYB36、GhMYB9和GhMYB146的结合特异性,结果表明GhMYB4a基因与ACⅠ结合特异性较高,GhMYB9与ACⅢ结合特异性较高,GhMYB146与三个元件都能结合。(4)将GhMYB4a基因转入模式植物拟南芥中。对T2代转基因拟南芥植株进行表型观察,发现GhMYB4a在拟南芥中的过表达使得根毛和叶表皮毛密度都有不同程度的增加。分析荧光定量结果发现,转基因植株中许多纤维次生细胞壁生物合成相关的纤维素合成基因(Ces1、Ces3、CesA4、Ces6、CesA7 and CesA8)和木质素合成相关基因(4CL1、CCOMT1、PAL1、COMT1、CCR1 and CAD5)表达量比野生型植株增大。

关键词：棉花 MYB转录因子纤维发育转基因拟南芥 qPCR

不同加工方式下5个棉花品种纤维品质比对分析

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中国纤检 2021年第3期 62-64页

作者：邱迎风阿克苏地区纤维检验所、国家棉纺织品质量监督检验中心新疆

统计并简要分析了本地区5个棉花栽培品种的主要物理指标,通过对比企业生产车间锯齿轧花机轧出的皮棉公证检验数据和抽检籽棉大垛样品经锯齿衣分试轧机轧出的皮棉进行HVI检验的数据,分析不同加工方式对棉纤维品质的影响,督促棉花加工企... 详细信息

统计并简要分析了本地区5个棉花栽培品种的主要物理指标,通过对比企业生产车间锯齿轧花机轧出的皮棉公证检验数据和抽检籽棉大垛样品经锯齿衣分试轧机轧出的皮棉进行HVI检验的数据,分析不同加工方式对棉纤维品质的影响,督促棉花加工企业改进加工工艺,提升棉花质量。

关键词：棉花加工方式公证检验籽棉大垛棉花品质

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陆地棉GhMYB9基因克隆及结合特性分析

核农学报 2017年第3期31卷 440-446页

作者：邱迎风倪志勇刘娜陈全家曲延英新疆农业大学农学院/新疆农业大学农业生物技术重点实验室新疆乌鲁木齐830052 中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室河南安阳455000

MYB转录因子蛋白普遍存在于植物中,广泛参与植物的生长发育和代谢调控。为研究GhMYB9基因对棉纤维的调控机制,使用PCR方法,从棉花中克隆1个R2R3-MYB基因GhMYB9(Gen Bank登录号:AF336286.1);利用生物信息学方法分析其氨基酸序列;构建酵... 详细信息

MYB转录因子蛋白普遍存在于植物中,广泛参与植物的生长发育和代谢调控。为研究GhMYB9基因对棉纤维的调控机制,使用PCR方法,从棉花中克隆1个R2R3-MYB基因GhMYB9(Gen Bank登录号:AF336286.1);利用生物信息学方法分析其氨基酸序列;构建酵母表达载体。结果表明,该基因c DNA全长1 145 bp,开放阅读框长795 bp,编码264个氨基酸,预测其蛋白分子量约为29.624 k D,等电点为9.13。推测的氨基酸序列中含有2个高度保守的SANT结构域。GhMYB9基因组包含2个外显子和1个内含子。进化树分析表明,GhMYB9和Gh MYB聚在同一分支(HQ234875.1)。酵母单杂交试验结果表明,GhMYB9转录因子能够特异结合AC顺式作用元件。本研究结果为进一步阐明GhMYB9的生物学功能奠定了基础。

关键词：棉花 GhMYB9 克隆酵母单杂交

棉花GhMYB146基因克隆及亚细胞定位分析

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核农学报 2016年第11期30卷 2119-2126页

作者：倪志勇邱迎风加得拉.吐留汗于月华陈全家曲延英新疆农业大学农学院/新疆农业大学农业生物技术重点实验室新疆乌鲁木齐830052 中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室河南安阳455000

MYB转录因子是发育、代谢、生物和非生物胁迫应答调控网络中的关键因子。为了分析棉花Gh MYB146转录因子的亚细胞定位,通过RT-PCR和RACE方法从棉花纤维中克隆了1个棉花MYB转录因子Gh MYB146的c DNA序列,采用生物信息学方法分析了Gh MYB... 详细信息

MYB转录因子是发育、代谢、生物和非生物胁迫应答调控网络中的关键因子。为了分析棉花Gh MYB146转录因子的亚细胞定位,通过RT-PCR和RACE方法从棉花纤维中克隆了1个棉花MYB转录因子Gh MYB146的c DNA序列,采用生物信息学方法分析了Gh MYB146的氨基酸序列,构建了Gh MYB146基因的亚细胞定位载体并进行了亚细胞定位分析。结果表明,克隆的R2R3-MYB基因Gh MYB146的c DNA全长1 027 bp,开放阅读框长879 bp,编码292个氨基酸,蛋白质预测分子量约为33.151 k D,等电点为7.9;推测的氨基酸序列中含有2个高度保守的SANT结构域;Gh MYB146基因组包含3个外显子和2个内含子。进化树分析表明,Gh MYB146和Gh MYB5分为一个分支;亚细胞定位结果表明,Gh MYB146:GFP融合蛋白定位于细胞核中。本试验结果为进一步研究Gh MYB146基因的生物学功能奠定了基础。

关键词：棉花 GhMYB146 克隆亚细胞定位

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海岛棉GbHCT基因的表达分析

西北农业学报 2017年第6期26卷 849-854页

作者：加得拉.吐留汗倪志勇邱迎风曲延英陈全家新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室乌鲁木齐830052

通过海岛棉基因组数据库和GSDS 2.0在线生物信息学软件,分析GbHCT基因的结构,利用实时荧光定量PCR技术,检测GbHCT基因在海岛棉不同组织和棉纤维不同发育时间的表达量。结果表明,该基因DNA序列长度为1 953bp,开放阅读框长度为1 311bp,编... 详细信息

通过海岛棉基因组数据库和GSDS 2.0在线生物信息学软件,分析GbHCT基因的结构,利用实时荧光定量PCR技术,检测GbHCT基因在海岛棉不同组织和棉纤维不同发育时间的表达量。结果表明,该基因DNA序列长度为1 953bp,开放阅读框长度为1 311bp,编码436个氨基酸,在海岛棉基因组中对应scaffold3453序列,含有1个内含子和2个外显子。GbHCT基因在不同组织和纤维发育不同时期中均有表达,在各个组织中,苞叶和花中表达量最高,在棉纤维不同发育时期开花后5d和25d表达量最强。该基因可能参与棉纤维发育伸长期和次生壁增厚期。为深入研究该基因的功能,构建植物表达载体pEGAD-GbHCT并转入根癌农杆菌,为下一步研究奠定试验基础。

关键词：海岛棉 GbHCT 棉花纤维基因表达植物表达载体

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阿克苏地区5个品种棉花品质分析

棉纺织技术 2019年第10期47卷 40-42页

作者：王娟潘江贵王晓辉邱迎风路超阿克苏地区纤维检验所

探讨阿克苏地区5个品种棉花品质的差异。对阿克苏地区5个品种细绒棉的衣分率、颜色级、马克隆值、长度、长度整齐度、断裂比强度等指标进行综合检测。通过数据分析得知,J206-5棉花纤维颜色级、衣分率、马克隆值、长度几个指标表现最好,... 详细信息

探讨阿克苏地区5个品种棉花品质的差异。对阿克苏地区5个品种细绒棉的衣分率、颜色级、马克隆值、长度、长度整齐度、断裂比强度等指标进行综合检测。通过数据分析得知,J206-5棉花纤维颜色级、衣分率、马克隆值、长度几个指标表现最好,满足“衣分率高,纤维长度长,强度高,细度适中,长度整齐度高”的要求。认为:J206-5是纺织行业需求的优良品种。

关键词：细绒棉衣分率马克隆值颜色级长度长度整齐度

海岛棉GbWRKY32基因的克隆及特性分析

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分子植物育种 2016年第6期14卷 1361-1368页

作者：加得拉.吐留汗倪志勇邱迎风曲延英陈全家新疆农业大学农学院农业生物技术重点实验室乌鲁木齐830052

利用RT-PCR技术从海岛棉品种新海21中克隆了1个WRKY基因,在GenBank数据库中比对发现其与陆地棉GhWRKY32的序列高度同源,因此命名为GbWRKY32。该基因ORF为1 077 bp,编码358氨基酸,预测分子量为39.288 k D,等电点为5.02。序列分析表明该... 详细信息

利用RT-PCR技术从海岛棉品种新海21中克隆了1个WRKY基因,在GenBank数据库中比对发现其与陆地棉GhWRKY32的序列高度同源,因此命名为GbWRKY32。该基因ORF为1 077 bp,编码358氨基酸,预测分子量为39.288 k D,等电点为5.02。序列分析表明该基因含有一个WRKY保守结构域,锌指结构为:C-X5-C-X23-H-X1-H,属于WRKY转录因子家族Ⅱ类D组成员。GbWRKY32蛋白为疏水性蛋白,不具有跨膜区和信号肽结构。GbWRKY32转录因子不具有转录自激活活性。本研究成功构建GbWRKY32基因的植物表达载体并转入根癌农杆菌EHA105菌株中,这有助于该基因功能的后续研究。

关键词：海岛棉 GbWRKY32 转录自激活活性植物表达载体

海岛棉GbWRKY40基因的克隆及特征分析

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棉花学报 2017年第4期29卷 393-400页

作者：倪志勇加得拉.吐留汗邱迎风曲延英陈全家新疆农业大学农学院/新疆农业大学农业生物技术重点实验室乌鲁木齐830052

【目的】WRKY转录因子调控多种生物学进程,包括植物生长发育和应答多种环境胁迫。本研究旨在分析WRKY转录因子在海岛棉纤维发育中的功能。【方法】从海岛棉中克隆了1个WRKY转录因子基因GbWRKY40,进行同源性分析、多序列比对,利用荧光定... 详细信息

【目的】WRKY转录因子调控多种生物学进程,包括植物生长发育和应答多种环境胁迫。本研究旨在分析WRKY转录因子在海岛棉纤维发育中的功能。【方法】从海岛棉中克隆了1个WRKY转录因子基因GbWRKY40,进行同源性分析、多序列比对,利用荧光定量聚合酶链式反应分析其表达模式,通过构建酵母表达载体并转化酵母菌株AH109研究其转录激活活性。【结果】该基因c DNA全长1713 bp,5'非编码区长261 bp,3'非编码区长510 bp;开放阅读框长942 bp,编码313个氨基酸,预测相对分子质量约为34.138×103,等电点为8.46,包含5个外显子和4个内含子;其编码蛋白含有1个WRKY保守区(WRKYGQK)和1个锌指基序(C-X5-C-X23-H-X1-H),属于WRKY家族第Ⅱ类a组,包含3个核定位信号区,与陆地棉GhWRKY40同源性最高。GbWRKY40在根和开花后25 d纤维中表达量高,而且不具有转录激活活性。【结论】GbWRKY40可能参与调控棉纤维次生壁发育。

关键词：海岛棉 GbWRKY40 表达模式基因克隆转录激活

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中国的代际流动:多维视角下的动态比较分析

当代经济科学 2024年第2期46卷 17-29页

作者：方迎风武汉大学经济与管理学院湖北武汉430072

促进代际流动是推进共同富裕的重要手段。使用联立方程模型多维度分析当前中国代际流动的动态特征以及各维度间的相互关系,并通过代际流动系数的分解探讨不同维度代际流动的影响因素。研究发现,教育的代际流动性要显著低于职业的代际流... 详细信息

促进代际流动是推进共同富裕的重要手段。使用联立方程模型多维度分析当前中国代际流动的动态特征以及各维度间的相互关系,并通过代际流动系数的分解探讨不同维度代际流动的影响因素。研究发现,教育的代际流动性要显著低于职业的代际流动性,并且教育与职业相互之间有显著影响,教育对职业代际流动的贡献超过50%,父代职业对教育代际流动的贡献为11%左右;母亲—子代的代际流动性显著低于父亲—子代的代际流动性,但更易受外在因素的影响;2018年家庭社会地位的代际流动性相比2010年显著下降,并受个体职业选择的影响;父代—女儿的代际流动性显著低于父代—儿子的代际流动性,城镇的代际流动性低于农村的代际流动性;代际流动性与年龄之间关系总体呈现U型,20世纪70年代末出生的个体代际流动性最差。因此,需要综合多个维度评估代际流动现状,通过促进公共服务均等化以推动区域均衡发展、加强弱势群体人力资本投资以提升其从经济增长中获益的能力,改善代际流动。

关键词：代际流动教育水平职业选择社会地位社会阶层共同富裕