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色氨酸代谢调控肠道应激损伤作用的研究进展

中国实验动物学报 2024年第4期32卷 539-546页

作者：陈菁青郑建华董巧燕张文盛马连素邱业峰军事医学研究院实验动物中心北京100071 北京医药健康科技发展中心北京100035

肠道是动物体内最大的免疫器官,也是机体主要的消化、吸收、代谢场所,维持肠道稳态健康是维护动物机体健康的重要保障。研究表明应激易使肠屏障受损、通透性增加、肠道功能紊乱,引发肠道应激损伤。色氨酸是哺乳动物的一种必需氨基酸,具... 详细信息

肠道是动物体内最大的免疫器官,也是机体主要的消化、吸收、代谢场所,维持肠道稳态健康是维护动物机体健康的重要保障。研究表明应激易使肠屏障受损、通透性增加、肠道功能紊乱,引发肠道应激损伤。色氨酸是哺乳动物的一种必需氨基酸,具有改变肠道菌群组成与代谢,提高肠道黏膜屏障的功能,在维持肠道稳态方面发挥着重要作用。应激状态下大脑和肠道组织色氨酸及其代谢产物含量的异常,提示色氨酸可能在应激反应中具有重要作用。因此,深入探究应激因素的致病机制,揭示色氨酸及其代谢产物对应激动物肠道功能紊乱的调节作用,可为肠道应激损伤提供安全便捷有效的营养防治措施。本文主要就目前应激机制研究进展、肠道应激损伤与色氨酸代谢对肠应激损伤调控作用的研究现状及最新研究进展进行综述。

关键词：应激肠道微生物肠-脑轴色氨酸代谢肠应激损伤

基于CRISPR/Cas9系统构建重组人丁酰胆碱酯酶定向整合的山羊胎儿成纤维细胞株

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军事医学 2024年第6期48卷 421-428页

作者：毋云鹏邱业峰唐玉玲孙天奇秦佟童张睿法云智军事科学院军事医学研究院

目的利用CRISPR/Cas9介导的同源定向修复机制构建重组人丁酰胆碱酯酶（rhBChE）基因敲入山羊胎儿成纤维细胞株（GFF），为后续制备表达rhBChE的山羊提供细胞株。方法针对山羊β-酪蛋白（CSN2）基因设计并筛选有效sgRNA靶点，通过电转... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9介导的同源定向修复机制构建重组人丁酰胆碱酯酶（rhBChE）基因敲入山羊胎儿成纤维细胞株（GFF），为后续制备表达rhBChE的山羊提供细胞株。方法针对山羊β-酪蛋白（CSN2）基因设计并筛选有效sgRNA靶点，通过电转染、流式分选和PCR产物测序，在山羊乳腺上皮细胞（GMEC）中确认CSN2基因有效sgRNA；构建靶向有效靶点的红色荧光报告基因同源修复载体（P2A-mCherry），利用流式细胞术检测该靶点的定向整合及表达效率；构建靶向山羊胎儿成纤维细胞CSN2基因有效靶点的rhBChE同源修复载体（P2A-rhBChE），通过电转染和流式分选rhBChE阳性细胞克隆，经PCR产物测序鉴定rhBChE定向整合的阳性细胞株。结果确定sgRNA4为山羊CSN2基因的有效靶点，该靶点可用于目的基因的定向整合；成功构建3株rhBChE定向整合的阳性细胞株。结论靶向山羊CSN2基因的rhBChE阳性细胞株可为应用体细胞克隆技术制备乳腺表达rhBChE的山羊奠定基础。

关键词：丁酰胆碱酯酶 CRISPR/Cas9 CSN2基因同源定向修复山羊胎儿成纤维细胞

高原急性缺氧肠道应激损伤小鼠模型的构建与评价

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实验动物与比较医学 2024年第1期44卷 31-41页

作者：郑建华法云智董巧燕邱业峰陈菁青军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的通过模拟急性缺氧环境,建立实验性高原小鼠肠道应激损伤模型,为探讨高原急性胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法根据体重按随机数字表法,将36只SPF级成年雄性BALB/c小鼠分为常氧24 h组、常氧72 h组、低氧24 h组和低氧72 h... 详细信息

目的通过模拟急性缺氧环境,建立实验性高原小鼠肠道应激损伤模型,为探讨高原急性胃肠病的致病机制以及防治措施奠定基础。方法根据体重按随机数字表法,将36只SPF级成年雄性BALB/c小鼠分为常氧24 h组、常氧72 h组、低氧24 h组和低氧72 h组,每组9只。常氧对照组小鼠饲养于常规屏障环境中,低氧应激组饲养于屏障环境中的低氧舱内,氧气浓度设定为10%以模拟高原环境,分别应激24 h和72 h,建立急性缺氧所致肠道损伤模型。造模结束后,称量小鼠体重,用1%戊巴比妥钠麻醉后断颈处死各组小鼠,采集十二指肠和结肠组织并进行HE染色后观察肠道组织病理形态,通过蛋白质印迹和免疫组织化学法检测肠道组织中紧密连接相关蛋白表达水平,应用实时荧光定量PCR检测炎性细胞因子和趋化因子的mRNA表达水平,采用TUNEL染色法检测肠上皮细胞凋亡活性等指标,从而对该模型的肠道损伤相关表型进行评价。结果与常氧组相比,低氧24 h组和低氧72 h组的小鼠表现为体重减轻,十二指肠绒毛长度变短、隐窝结构异常、绒毛/隐窝比下降,结肠黏膜炎性细胞浸润、隐窝结构不规则。低氧24 h组和低氧72 h组小鼠的十二指肠和结肠组织中闭锁蛋白(Occludin)及闭锁小带蛋白(zonula occludens-1,ZO-1)表达水平明显下降(P0.05),但缺氧应激72 h后,小鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1以及抗炎因子IL-10 mRNA水平显著增高(P<0.05)。结论利用低氧舱模拟高原急性缺氧环境可导致应激小鼠肠道组织结构异常、肠屏障功能障碍,并诱导肠上皮细胞凋亡,引发肠道炎性反应。这些结果表明急性缺氧应激肠道损伤小鼠模型构建成功。

关键词：高原急性缺氧肠道应激损伤细胞凋亡炎性反应小鼠

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睾丸巨噬细胞的研究进展

生命科学 2023年第4期35卷 480-485页

作者：李斯特唐玉玲张依量王进武文卿邱业峰军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071

睾丸作为重要的男性生殖器官,具有复杂的生殖-内分泌-免疫调控网路。睾丸巨噬细胞在血管形成、精子发生、类固醇激素生成、免疫抑制和细菌病毒感染等方面有着非常重要的作用。本文通过综述睾丸巨噬细胞的定位、分类、发育来源以及功能... 详细信息

睾丸作为重要的男性生殖器官,具有复杂的生殖-内分泌-免疫调控网路。睾丸巨噬细胞在血管形成、精子发生、类固醇激素生成、免疫抑制和细菌病毒感染等方面有着非常重要的作用。本文通过综述睾丸巨噬细胞的定位、分类、发育来源以及功能等来说明其在睾丸中的地位及意义,以期为研究睾丸巨噬细胞的功能和治疗男性不育症、睾丸炎症等提供理论依据。

关键词：睾丸巨噬细胞组织稳态巨噬细胞亚群

单核苷酸多态性在近交系小鼠遗传检测方面的研究进展

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实验动物科学 2022年第4期39卷 69-73页

作者：尚艳姣周小军袁征邱业峰军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071

随着分子生物学技术的迅速发展,单核苷酸多态性(SNP)检测技术也得以不断的完善和发展。SNP作为第三代遗传标记,已经成为小鼠遗传检测的重要手段。SNP检测是在DNA水平进行的检测,依赖于完整的基因组信息注释。本文概述了小鼠基因组学的发... 详细信息

随着分子生物学技术的迅速发展,单核苷酸多态性(SNP)检测技术也得以不断的完善和发展。SNP作为第三代遗传标记,已经成为小鼠遗传检测的重要手段。SNP检测是在DNA水平进行的检测,依赖于完整的基因组信息注释。本文概述了小鼠基因组学的发展,以及SNP在近交系小鼠遗传检测方面的研究进展。

关键词：小鼠基因组 SNP 遗传检测

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动物乳汁“人源化”的研究进展

实验动物科学 2023年第5期40卷 95-100页

作者：张睿毋云鹏武文卿孙天奇邱业峰陈菁青军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071

动物乳腺生物反应器通过转基因技术将外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺,进而利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力,在动物乳汁中生产具有重要价值的产品,尤其是一些人源化蛋白。这项技术具有成本低、质量高、生物... 详细信息

动物乳腺生物反应器通过转基因技术将外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺,进而利用动物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力,在动物乳汁中生产具有重要价值的产品,尤其是一些人源化蛋白。这项技术具有成本低、质量高、生物活性高、无污染、产量高等优点,开创了生物制药的新途径,发展前景广阔。本文主要对动物乳汁“人源化”在生物制药领域和改善乳成分方面的研究进展及应用前景进行综述和展望。

关键词：乳腺生物反应器转基因动物生物制药改善乳成分

嗜黏蛋白阿克曼氏菌在肠道疾病和代谢紊乱中的关键作用

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实验动物科学 2023年第5期40卷 80-85页

作者：陈菁青郑建华董巧燕武文卿孙天奇邱业峰张睿军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071

肠道微生物群在宿主代谢和炎性反应调节中发挥重要作用,许多疾病的发生与肠道菌群失衡密切相关。Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)是疣微菌门中第一个被成功分离鉴定和培养的肠道共生菌,最初从人类粪便样本中被分离出来,因具备... 详细信息

肠道微生物群在宿主代谢和炎性反应调节中发挥重要作用,许多疾病的发生与肠道菌群失衡密切相关。Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)是疣微菌门中第一个被成功分离鉴定和培养的肠道共生菌,最初从人类粪便样本中被分离出来,因具备黏蛋白的降解特性,使其成为肠道黏膜中的关键菌种之一。不断有研究表明A.muciniphila的丰度与动物和人体的健康密切相关,使其成为近年来肠道微生态和益生菌的研究热点。此外,A.muciniphila的丰度在炎症性肠病(主要是溃疡性结肠炎)和代谢紊乱患者中降低,这表明它可能具有潜在的抗炎特性。本文将系统阐述A.muciniphila与肠道免疫和系统代谢疾病之间的关联,重点探讨其在改善肠道屏障、免疫应答及宿主代谢方面的功能和可能作用机制,为以A.muciniphila为基础开发疾病治疗新方法提供证据和思路。

关键词：嗜黏蛋白阿克曼菌 Amuc_1100 代谢疾病肠道菌群炎性肠炎病

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遗传性脐疝大鼠生物学特性的初步研究

实验动物科学 2022年第1期39卷 38-43页

作者：孙天奇秦佟童张睿陈菁青唐玉玲任延玲邱业峰军事科学院军事医学研究院实验动物中心北京100071

目的观察脐疝(umbilical hernia,UH)大鼠模型表型及部分生物学特性。方法采用全同胞交配法对自发UH大鼠进行近交繁育,建立遗传性UH大鼠模型,观察表型特征、生长曲线、脏器系数、血常规、血液生化指标等生物学特征。结果所培育的UH大鼠... 详细信息

目的观察脐疝(umbilical hernia,UH)大鼠模型表型及部分生物学特性。方法采用全同胞交配法对自发UH大鼠进行近交繁育,建立遗传性UH大鼠模型,观察表型特征、生长曲线、脏器系数、血常规、血液生化指标等生物学特征。结果所培育的UH大鼠脐疝发病率保持100%,外观、解剖、病理等特征明显;雄性个体体质量自第4周起较同龄SD大鼠低,雌性无显著差异;脾脏较同龄SD大鼠偏大;部分血液常规指标及血液生化指标与SD大鼠有显著差异。结论遗传性UH大鼠模型表型特征明确,生物学特性有别于SD大鼠,可作为研究UH致病机制及易感基因的良好动物模型。

关键词：脐疝动物模型表型特征生长曲线脏器系数血常规血液生化指标

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产IMP酶4种病原细菌的检测及其耐药性

中国兽医学报 2015年第5期35卷 722-726页

作者：冯娇殷喆邱业峰杨慧盈杨文慧王洁周冬生高英杰吉林大学动物医学学院军事医学科学院微生物流行病研究所军事医学科学院实验动物中心

采用16SrRNA和种特异基因的聚合酶链反应(polymerase chainreaction,PCR)鉴定菌株;用VITEK-AMS 60全自动微生物分析仪测定最小抑菌浓度(minimum inhibition concentration,MIC);PCR测序检测已知的超广谱β-内酰胺酶基因(extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)和碳青霉烯酶基因;改良型Carba NP法检测碳青霉烯酶类型。对来自4家医院的6株高水平耐碳青霉烯类抗生素临床分离菌株的检测和耐药性研究。结果显示,6株分别为阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、产酸克雷伯菌各1株,肺炎克雷伯菌3株,且均为blaIMP扩增阳性,并携带1个或多个blaTEM、blaCTX-M-1group、blaSHV、blaVIM、blaOXA-1基因。6株菌均产B型碳青霉烯酶,且对头孢菌素类和碳青霉烯类抗菌药物高水平耐药。结果表明,6株菌对头孢菌素类和碳青霉烯类抗菌药物多重耐药的主要决定因子是产B型碳青霉烯酶IMP,且和携带ESBLs基因也相关。

关键词：多重耐药菌碳青霉烯酶 IMP