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作者：那婧婧湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:探讨麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药体内、外抗A型流感病毒的效应及机理,为中西医结合治疗流感的临床应用提供实验支持。方法:1.应用血清药理学方法制备麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测麻杏石甘... 详细信息

目的:探讨麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药体内、外抗A型流感病毒的效应及机理,为中西医结合治疗流感的临床应用提供实验支持。方法:1.应用血清药理学方法制备麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药的含药血清对狗肾传代细胞（MDCK）的最大无毒浓度范围,同步设麻杏石甘汤含药血清对照组、奥司他韦含药血清对照组、空白血清对照组。2.以MTT法检测麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药的含药血清在直接灭活病毒给药方式、预防感染给药方式、治疗感染给药方式中,对A型流感病毒感染的MDCK细胞活性的影响,并以2-（4-methylumbellifery1）-α-D-N-acetylneuraminic acid（MUNANA）为底物,检测这三种给药方式下,A型流感病毒神经氨酸酶的活性。3.小鼠经鼻腔接种A型流感病毒,建立动物感染模型,经药物或生理盐水灌胃后,检测麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药对A型流感病毒小鼠的治疗作用。结果:1.浓度为25%.125%的大鼠空白血清对MDCK细胞无明显毒性,与大鼠空白血清组比较,浓度为6.25%5%的麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药含药血清组（联合用药含药血清组）的MDCK细胞活性OD值无明显差异（P>0.05）。2.麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药的含药血清体外抗A型流感病毒的作用:（1）直接灭活病毒给药方式下,麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药的含药血清体外抗A型流感病毒效应:1)对流感病毒感染MDCK细胞活性的影响:与正常对照组比较,病毒对照组细胞活性OD值显著降低（P<0.01）。与病毒对照组比较,浓度为6.25%、12.5%、25%的麻杏石甘汤含药血清组、奥司他韦含药血清组、麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药含药血清组（联合用药含药血清组）MDCK细胞活性显著提高,OD值升高（P<0.01）且药物组存在一定量效关系;与麻杏石甘汤含药血清组相比较,联合用药含药血清组OD值显著升高（P<0.05）。2)对流感病毒神经氨酸酶活性的影响:与正常对照组相比,病毒对照组NA活性的荧光值显著升高（P<0.01）。与病毒对照组相比,空白血清组及各含药血清组NA活性的荧光值显著降低（P<0.01）。与麻杏石甘汤含药血清组相比,联合用药含药血清组NA活性的荧光值显著降低（P<0.01）。（2）预防感染给药方式下,麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药的含药血清体外抗A型流感病毒效应:1)对流感病毒感染MDCK细胞活性的影响:与正常对照组比较,病毒对照组细胞活性OD值显著降低（P<0.01）。与病毒对照组比较,浓度为6.25%、12.5%、25%的麻杏石甘汤含药血清组、奥司他韦含药血清组、联合用药含药血清组MDCK细胞活性显著提高,OD值升高（P<0.01）,且药物组存在一定量效关系;与麻杏石甘汤含药血清组比较,联合用药含药血清组OD值显著升高（P<0.05）。2)对流感病毒神经氨酸酶活性的影响:与正常对照组相比,病毒对照组NA活性的荧光值显著升高（P<0.01）。与病毒对照组相比,空白血清组及各含药血清组NA活性的荧光值显著降低（P<0.01）。与麻杏石甘汤含药血清组相比,联合用药含药血清组NA活性的荧光值显著降低（P<0.01）。（3）治疗感染给药方式下,麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药的含药血清体外抗A型流感病毒效应:1)对流感病毒感染MDCK细胞活性的影响:与正常对照组比较,病毒对照组细胞活性OD值显著降低（P<0.01）。与病毒对照组比较,浓度为6.25%、12.5%、25%的麻杏石甘汤含药血清组、奥司他韦含药血清组、联合用药含药血清组MDCK细胞活性显著提高,OD值升高（P<0.01）,且药物组存在一定量效关系;与麻杏石甘汤含药血清组比较,联合用药含药血清组OD值显著升高（P<0.05）。2)对流感病毒神经氨酸酶活性的影响:与正常对照组相比,病毒对照组NA活性的荧光值显著升高（P<0.01）。与病毒对照组相比,空白血清组及各含药血清组NA活性的荧光值显著降低（P<0.01）。与麻杏石甘汤含药血清组相比,联合用药含药血清组NA活性的荧光值显著降低（P<0.01）。3.麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药体内对A型流感病毒感染小鼠的治疗作用:（1）麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药对流感病毒感染小鼠体重的影响:与正常对照组相比,模型对照组体重显著降低（P<0.01）。与模型对照组相比,麻杏石甘汤组、奥司他韦组、麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药组（联合用药组）小鼠体重明显增加（P<0.01）,体重下降抑制率分别为27.08%、29.32%、29.41%。与麻杏石甘汤组相比,联合用药组小鼠体重明显增加（P<0.01）。（2）麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药对流感病毒感染小鼠肺指数的影响:与正常对照组相比,模型对照组肺指数明显增加（P

关键词：麻杏石甘汤奥司他韦含药血清 A型流感病毒 MDCK细胞神经氨酸酶肺指数

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流行性感冒病证结合动物模型的思考

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中成药 2016年第7期38卷 1618-1620页

作者：卢芳国张世鹰李玲邹莉那婧婧何清湖湖南中医药大学湖南长沙410208

病证结合是目前中医药领域中正在积极探索的研究模式之一,也是构建中西医结合医学理论体系的重要组成之一,病证结合的临床研究模式是"以人为本"的诊疗思想的具体体现,是较高层次中西医结合的表现形式。将此理论其用于流感动物模型建立... 详细信息

病证结合是目前中医药领域中正在积极探索的研究模式之一,也是构建中西医结合医学理论体系的重要组成之一,病证结合的临床研究模式是"以人为本"的诊疗思想的具体体现,是较高层次中西医结合的表现形式。将此理论其用于流感动物模型建立能更好地服务临床。本文分析流感动物模型建立的思路与方法,并结合流感的病因病机等对流感动物病证结合模型的建立与评价提出自己思考,为建立操作性强、重复性好、具有代表性的流感病证动物模型提供一定理论参考。

关键词：流感中西医结合病证结合动物模型思考

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足癣治疗的现况与思考

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中国民康医学 2015年第17期27卷 68-70页

作者：邹莉那婧婧卢芳国湖南中医药大学研究生学院湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208

"足癣"又俗称为脚气,是一种由真菌在脚趾间感染而引起的皮肤传染病。中医认为本病系湿热下注或因久居湿地染毒所致,表现为趾间或足底皮肤瘙痒、有鳞屑、丘疹或水疱,严重者可出现糜烂、渗液,甚至细菌感染。近年来脚气的治疗取得了一定进... 详细信息

"足癣"又俗称为脚气,是一种由真菌在脚趾间感染而引起的皮肤传染病。中医认为本病系湿热下注或因久居湿地染毒所致,表现为趾间或足底皮肤瘙痒、有鳞屑、丘疹或水疱,严重者可出现糜烂、渗液,甚至细菌感染。近年来脚气的治疗取得了一定进展,本文对其治疗的现况进行综述与分析。

关键词：脚气足癣治疗研究进展

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不同煎煮方法的麻杏石甘汤及其含药血清对A型流感病毒神经氨酸酶活性的影响

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中国中西医结合杂志 2016年第9期36卷 1119-1123页

作者：葛资宇童骄那婧婧邹莉卢芳国湖南中医药大学医学院长沙410208 湖南省常德市第一中医医院神经内科湖南415000

目的探讨不同煎煮方法的麻杏石甘汤及其含药血清对A型流感病毒神经氨酸酶（NA）活性的影响。方法以2-（4-methylumbellifery1）-α-D-N-acetyl neuraminic acid（MUNANA）为底物,检测不同煎煮方法的麻杏石甘汤药液、相应含药血清以及抑... 详细信息

目的探讨不同煎煮方法的麻杏石甘汤及其含药血清对A型流感病毒神经氨酸酶（NA）活性的影响。方法以2-（4-methylumbellifery1）-α-D-N-acetyl neuraminic acid（MUNANA）为底物,检测不同煎煮方法的麻杏石甘汤药液、相应含药血清以及抑制病毒增殖作用中含药血清对流感病毒NA活性的影响。结果（1）药液对流感病毒NA活性的影响：麻黄先煎25 min组和麻黄先煎30 min组的病毒NA荧光值低于4药同煎组（P〈0.05,P〈0.01）;（2）含药血清对流感病毒NA活性的影响：麻黄先煎30 min组、麻黄先煎40 min组的NA荧光值低于4药同煎组（P〈0.05,P〈0.01）;（3）抑制病毒增殖作用中,含药血清对流感病毒NA活性的影响：麻黄先煎5-20 min组、麻黄先煎30 min组、麻黄先煎35 min组病毒NA荧光值低于4药同煎组（P〈0.05,P〈0.01）。药物浓度方面,与25%的浓度比较,6.25%及12.5%浓度的含药血清对应的病毒NA荧光值降低（P〈0.01）。结论麻杏石甘汤煎煮方法的不同可以导致其抗流感病毒效果的差异。

关键词：不同煎煮方法麻杏石甘汤含药血清 A型流感病毒神经氨酸酶

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麻杏石甘汤对A型流感病毒感染小鼠肺组织炎症与TLR7/8 mRNA、蛋白表达水平影响的研究

麻杏石甘汤对A型流感病毒感染小鼠肺组织炎症与TLR7/8 mRNA、蛋白...

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第九届全国免疫学学术大会

作者：卢芳国谭露张世鹰李玲葛资宇那婧婧邹丽湖南中医药大学病原菌生物学教研室

研究背景:A型流感病毒是人和动物流感的主要病原体。麻杏石甘汤是治疗外感发热肺热证的常用方,更是治疗热毒袭肺证和热毒壅肺证流感的基本方,也是治疗"人感染H7N9禽流感"成药"连花清瘟胶囊"的主要组成。研究该方治疗流感的效应机制,可...

研究背景:A型流感病毒是人和动物流感的主要病原体。麻杏石甘汤是治疗外感发热肺热证的常用方,更是治疗热毒袭肺证和热毒壅肺证流感的基本方,也是治疗"人感染H7N9禽流感"成药"连花清瘟胶囊"的主要组成。研究该方治疗流感的效应机制,可以进一步丰富该方科学内涵,拓展其临床应用。目的:探讨麻杏石甘汤对A型流感病毒感染小鼠肺组织炎症和TLR7/8 mRNA、蛋白表达水平的影响,为阐明该方抗流感病毒作用机制提供实验依据。

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麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药抗A型流感病毒效应研究

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中华中医药杂志 2017年第9期32卷 4163-4167页

作者：那婧婧李玲卢芳国魏科杨胜辉蔡锐张波高强张世鹰邹莉湖南中医药大学第一附属医院长沙410007 湖南中医药大学中医学院长沙410208 湖南中医药大学医学院长沙410208

目的:探讨麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药抗A型流感病毒的实验效应。方法:(1)以血清药理学实验技术检测联合用药的含药血清体外对流感病毒感染MDCK细胞活性和流感病毒神经氨酸酶(NA)活性的影响。(2)以整体动物实验技术检测联合用药体内... 详细信息

目的:探讨麻杏石甘汤与奥司他韦联合用药抗A型流感病毒的实验效应。方法:(1)以血清药理学实验技术检测联合用药的含药血清体外对流感病毒感染MDCK细胞活性和流感病毒神经氨酸酶(NA)活性的影响。(2)以整体动物实验技术检测联合用药体内对流感病毒感染小鼠体质量、肺指数、肺组织病理变化的影响。结果:(1)各含药血清组MDCK细胞活性OD值较病毒对照组显著升高(P<0.01),流感病毒NA活性较病毒对照组显著下降(P<0.01)。联合用药组体外抗A型流感病毒效应显著优于麻杏石甘汤组(P<0.01)。(2)各治疗组小鼠肺指数较病毒对照组显著降低(P<0.01),肺组织病理变化损伤得到不同程度改善,其中联合用药组肺组织病理变化改善程度显著优于麻杏石甘汤组。结论:麻杏石甘汤与奥司他韦联合应用,具有较明显的协同增效作用。

关键词：麻杏石甘汤奥司他韦流感病毒中西医结合

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MYOC基因C1009del突变对人小梁网细胞功能的影响

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检验医学 2017年第10期32卷 73-79页

作者：李萍许涛谢小兵张贞胡燕苏敏那婧婧湖南中医药大学第一附属医院医学检验与病理中心湖南长沙410007 湖南中医药大学第一附属医院急诊科湖南长沙410007

目的探讨小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白(MYOC)基因C1009缺失突变(MYOC-C1009del)对体外人小梁网细胞(HTMC)功能及核因子κB(NF-κB)通路的影响。方法针对MYOC基因野生型及C1009del突变型分别构建慢病毒质粒载体pLVX-3FLAG-MYOC-EGFP(简... 详细信息

目的探讨小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白(MYOC)基因C1009缺失突变(MYOC-C1009del)对体外人小梁网细胞(HTMC)功能及核因子κB(NF-κB)通路的影响。方法针对MYOC基因野生型及C1009del突变型分别构建慢病毒质粒载体pLVX-3FLAG-MYOC-EGFP(简称rLV-MYOC)和pLVX-3FLAGMYOC-mut-EGFP(简称rLV-MYOC-mut)。慢病毒质粒经包装和纯化后体外感染HTMC,以空白HTMC及感染空质粒病毒的HTMC作为2组空白对照,感染48 h后用于后续功能实验。采用流式细胞术检测HTMC的凋亡率及细胞周期;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测细胞存活情况;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测NF-κB及其抑制因子(IκB)的mRNA表达情况;采用免疫印迹法检测NF-κB和IκB的蛋白质表达水平。结果与感染rLV-MYOC的HTMC相比,感染rLV-MYOC-mut的HTMC呈现细胞G1期缩短、S期延长(P0.05)。感染rLV-MYOC-mut的HTMC的NF-κB mRNA和IκB mRNA表达水平均明显低于感染rLV-MYOC的HTMC(P<0.05),而在蛋白质表达水平上,感染rLV-MYOC-mut的HTMC的NF-κB表达水平与感染rLV-MYOC的HTMC持平,而IκB的表达水平在感染rLV-MYOC-mut的HTMC中呈下降趋势(P<0.05)。结论 MYOC基因C1009del突变可通过影响HTMC周期,使细胞阻滞于S期,进而影响HTMC的正常功能。C1009del突变尽管可使IκB表达下调,但并不是通过活化NF-κB通路这个途径导致原发性开角型青光眼的发生。

关键词： MYOC基因核因子κB 核因子κB抑制因子原发性开角型青光眼

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Survivin、Bcl-2在胃癌组织中的表达及临床意义

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肿瘤药学 2021年第4期11卷 474-479页

作者：方宇王琳玲王海娟李征洋马文恺那婧婧湖南中医药大学第一附属医院医学检验与病理中心湖南长沙410007 湖南中医药大学第一附属医院超声影像科湖南长沙410007

目的探讨胃癌组织中Survivin、Bcl-2的表达及其与临床病理特征的关系。方法收集2018年5月—2019年9月间我院收治的86例胃癌患者的癌组织及对应癌旁正常组织石蜡标本,采用免疫化学染色法检测标本中Survivin与Bcl-2的表达,分析Survivin与B... 详细信息

目的探讨胃癌组织中Survivin、Bcl-2的表达及其与临床病理特征的关系。方法收集2018年5月—2019年9月间我院收治的86例胃癌患者的癌组织及对应癌旁正常组织石蜡标本,采用免疫化学染色法检测标本中Survivin与Bcl-2的表达,分析Survivin与Bcl-2与胃癌临床病理特征的关系以及胃癌组织中Survivin与Bcl-2表达的相关性。结果Survivin与Bcl-2在胃癌组织中的阳性率(80.23%、63.95%)显著高于癌旁正常组织(43.02%、20.93%),差异均有统计学意义(P0.05)。Bcl-2蛋白表达阳性与淋巴结转移有关(P0.05)。Survivin与Bcl-2共同阳性表达率为58.14%,共同阴性表达率为13.95%,二者在胃癌组织中的表达水平呈正相关(P0.05)。结论Survivin与Bcl-2在胃癌组织中均呈高表达,均与胃癌的发生发展密切相关,检测其表达水平可为胃癌的临床诊断及治疗提供一定的指导依据,从而改善患者预后。

关键词： Survivin Bcl-2 胃癌临床病理特征相关性

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油茶粕及其中药复方抗菌及去垢作用研究

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中医学报 2016年第5期31卷 704-707页

作者：那婧婧李玲邹莉卢芳国赖琼玮裴建儒张世鹰陈建松湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南大三湘油茶科技有限公司湖南衡阳421000

目的:比较研究油茶粕与油茶粕中药复方的抗菌作用和去垢作用。方法:1采用牛津杯法检测含生药质量浓度为0.5 kg·L^(-1)的油茶粕和油茶粕中药复方提取液对伤寒沙门菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、痢疾杆... 详细信息

目的:比较研究油茶粕与油茶粕中药复方的抗菌作用和去垢作用。方法:1采用牛津杯法检测含生药质量浓度为0.5 kg·L^(-1)的油茶粕和油茶粕中药复方提取液对伤寒沙门菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、痢疾杆菌和乙型溶血性链球菌抑菌环直径;同时采用试管稀释法检测其对以上各供试菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimal bactericidal conceutration,MBC);2采用国标GB9985—2000方法测定含生药质量浓度分别为0.117 kg·L^(-1)、0.235 kg·L^(-1)、0.47 kg·L^(-1)的油茶粕和油茶粕中药复方提取液对不锈钢片上污垢的去垢能力。结果:1含生药质量浓度为0.5 kg·L^(-1)的油茶粕中药复方提取液对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌的抑菌环直径明显大于相应浓度油茶粕提取液;油茶粕中药复方提取液对伤寒沙门菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、乙型溶血性链球菌的MIC值均低于油茶粕,对表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌的MBC值均低于油茶粕;2油茶粕中药复方提取液的去垢能力明显高于相应浓度油茶粕提取液,以含生药质量浓度为0.117 kg·L^(-1)时的差异最明显。结论:油茶粕中药复方对伤寒沙门菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌的抑菌与和杀菌作用优于油茶粕;油茶粕中药复方的去垢能力明显优于油茶粕。

关键词：油茶粕油茶粕中药复方抗菌作用去垢作用

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流感病毒对细胞信号转导影响的研究进展

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中华中医药学刊 2014年第10期32卷 2393-2396页

作者：葛资宇童骄王小玉那婧婧卢芳国湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208

机体识别、清除入侵病毒的机理一直是分子免疫学研究的重点。前期研究表明,病毒入侵机体可诱导大量抗病毒蛋白分子、细胞因子等以启动机体免疫。流感病毒能引起急性传染性呼吸道疾病,其表面抗原极易发生变异,往往引起较大的流行,严重危... 详细信息

机体识别、清除入侵病毒的机理一直是分子免疫学研究的重点。前期研究表明,病毒入侵机体可诱导大量抗病毒蛋白分子、细胞因子等以启动机体免疫。流感病毒能引起急性传染性呼吸道疾病,其表面抗原极易发生变异,往往引起较大的流行,严重危害人类健康。探讨其对细胞信号转导的影响一直是抗流感研究的热点。对近年来有关流感与细胞信号转导的文献进行综述,总结所取得的研究成果,并提出治疗方向,为抗流感病毒新药的设计和发展新的治疗方法提供思路和作用靶点。

关键词：流感病毒信号转导综述

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