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正丁酸抑制脂多糖诱导肺纤维化的作用及机制

中华危重病急救医学 2016年第1期28卷 8-14页

作者：朱平邢顺鹏徐侨翌谢婷婷皋源何征宇上海交通大学医学院附属仁济医院重症医学科 200127

目的观察组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂正丁酸（BA）抑制脂多糖（LPS）诱导小鼠肺纤维化过程的作用，并探讨其作用机制。方法将30只C57／BL6小鼠按随机数字表法分为LPS刺激组（腹腔注射10mg／kgLPs）、BA预处理＋LPS刺激组（BA10mg／k... 详细信息

目的观察组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂正丁酸（BA）抑制脂多糖（LPS）诱导小鼠肺纤维化过程的作用，并探讨其作用机制。方法将30只C57／BL6小鼠按随机数字表法分为LPS刺激组（腹腔注射10mg／kgLPs）、BA预处理＋LPS刺激组（BA10mg／kg灌胃后腹腔注射LPS10mg／kg）和阴性对照组（经口灌注和腹腔注射等量生理盐水），每组10只。制模后2周及4周每组各无痛处死5只小鼠取肺组织，用HDAC活性荧光分析试剂盒检测肺组织HDAC活性；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织乙酰化组蛋白H3、H4（Ace—H3、Ace—H4）和胸腺细胞分化抗原-1（Thy-1）蛋白表达；采用实时定量反转录-聚合酶链反应（real—timeRT—PCR）检测肺组织Thy-1mRNA表达；用苏木素-伊红（HE）染色和Masson胶原蛋白染色光镜下观察肺组织炎症和纤维化情况；用羟脯氨酸检测试剂盒测定肺组织羟脯氨酸含量。结果与阴性对照组相比：腹腔注射LPS后肺组织出现明显的炎症反应和纤维化加重；羟脯氨酸含量增加（μg／mg：2周为8．384±0．632比4．388±0．334，4周为8．308±0．244比4．370±0．342，均P〈0．01）；HDAC活化程度增加（1amol／L：2周为7．243±0．384比3．628±0．641，4周为6．479±0．202比3．238±0．524，均P〈0．01）；组蛋白H3、H4去乙酰化程度增加[Ace—H3相对表达量（灰度值）：2周为0．516±0．115比1．005±0．359，4周为0．633±0．143比1．092±0．193，均P〈0．05；Ace—H4相对表达量（灰度值）：2周为0．402±0．164比0．759±0．187，P〉0．05；4周为0．426±0．098比0．858±0．177，P〈0．01]；Thy-1基因及蛋白表达量降低（Thy-1mRNA（2-act）：2周为0．606±0．066比1．005±0．109，P〈0．01，4周为0．824±0．101比1．210±0．400，P〉0．05；Thy-1蛋白相对表达量（灰度值）：2周为0．725±0．284比1．249±0．297，4周为0．589±0．139比1．372±0．343，均P〈0．05]。使用BA后能抑制上述过程，在2周和4周羟脯氨酸含量、HDAC活化，2周Thy-1mRNA表达，4周Ace—H4、Thy-1蛋白表达与LPS刺激组相比，表现出统计学意义[羟脯氨酸含量（μg／mg）：2周为5．943±0．726比8．384±0．632，4周为4．938±0．209比8．308±0．244；HDAC活性（μmol／L）：2周为4．386±0．117比7．243±0．384，4周为4．863±0．096比6．479±0．202；2周Thy-1mRNA（2-act）：0．884±0．216比0．606±0．066；4周Ace—H4相对表达量（灰度值）：0．715±0．145比0．426±0．098；4周Thy-1蛋白相对表达量（灰度值）：0．939±0．098比0．589±0．139；P〈0．05或P〈0．01]。结论LPS诱导小鼠肺组织纤维化过程与肺组织HDAC活化、组蛋白H3和H4去乙酰化以及Thy-1基因表达降低相关。HDAC抑制剂BA预处理能通过抑制HDAC活化以及组蛋白H4去乙酰化过程，从而抑制由LPS诱导的Thy-1基因表达降低及肺纤维化过程。

关键词：肺纤维化脂多糖组蛋白去乙酰化酶正丁酸表观遗传学调控

案例教学法联合情景模拟教学法在住院医师规范化培训中的应用

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临床麻醉学杂志 2020年第8期36卷 813-814页

作者：何征宇徐侨翌李尹娇枝李雯谢婷婷邢顺鹏皋源上海交通大学医学院附属仁济医院重症医学科 200127

住院医师规范化培训是临床医学专业学生毕业后继续教育的重要组成部分,目前已成为提升医师队伍职业素养、提升医疗质量的重要举措[1]。重症医学是研究危重病发生、发展规律及诊治方法的临床二级学科,涉及各临床专科危重患者的救治工作,... 详细信息

住院医师规范化培训是临床医学专业学生毕业后继续教育的重要组成部分,目前已成为提升医师队伍职业素养、提升医疗质量的重要举措[1]。重症医学是研究危重病发生、发展规律及诊治方法的临床二级学科,涉及各临床专科危重患者的救治工作,是住院医师规范化培训阶段的重要轮转科室之一。重症患者病情变化复杂,并且可先后累及不同器官和系统,诊治过程中需使用到多种先进的监测和操作技术。

关键词：情景模拟教学法医师队伍重症医学救治工作临床专科病情变化危重患者危重病

迷你临床演练评估用于人口老龄化时代重症医学科住院医师轮转培训的教学效果评价

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上海医学 2020年第12期43卷 754-756页

作者：何征宇李雯胡晓婷李尹娇枝徐侨翌邢顺鹏皋源上海交通大学医学院附属仁济医院重症医学科上海200127

目的探讨迷你临床演练评估(mini-CEX)应用于人口老龄化时代重症医学科住院医师轮转培训教学效果评价的应用价值。方法以2019年1—9月在上海交通大学医学院附属仁济医院重症医学科轮转培训的24名住院医师为研究对象,其中本科学历7人,研... 详细信息

目的探讨迷你临床演练评估(mini-CEX)应用于人口老龄化时代重症医学科住院医师轮转培训教学效果评价的应用价值。方法以2019年1—9月在上海交通大学医学院附属仁济医院重症医学科轮转培训的24名住院医师为研究对象,其中本科学历7人,研究生学历17人。在入科第1周内和培训结束时由带教老师对每位学员采用mini-CEX测评量表分别测评1次。比较全体学员培训前后,以及不同学历学员之间mini-CEX测试评分的差异。结果全体住院医师轮转培训后的测试评分均显著高于培训前[57.00(55.00,58.00)分比30.00(25.25,35.00)分,P<0.001]。轮转培训前研究生学历的住院医师测试评分显著高于本科学历[(32.41±3.97)分比(24.57±2.51)分,P<0.001],轮转培训后研究生与本科学历住院医师测试评分的差异无统计学意义[(56.76±1.99)分比(56.00±2.52)分,P=0.435]。结论在重症医学科住院医师轮转培训中应用mini-CEX可以有效评价住院医师轮转培训的教学效果,并促进住院医师提升临床实践能力。

关键词：重症医学教育,医学住院医师教学效果评估

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磁铁引导法在锁骨下静脉置管中的临床应用

临床麻醉学杂志 2013年第6期29卷 573-575页

作者：邢顺鹏闻大翔皋源何征宇杭燕南上海交通大学医学院附属仁济医院麻醉科 200127

目的研究磁铁引导法在锁骨下静脉置管中的效果。方法需行锁骨下静脉置管的患者160例,随机均分为磁铁组和对照组,分别采用磁铁引导(4500Oe)或常规操作对患者实施锁骨下静脉置管,置管后采用X线胸片检查客观评估导管头端位置,探讨导管误入... 详细信息

目的研究磁铁引导法在锁骨下静脉置管中的效果。方法需行锁骨下静脉置管的患者160例,随机均分为磁铁组和对照组,分别采用磁铁引导(4500Oe)或常规操作对患者实施锁骨下静脉置管,置管后采用X线胸片检查客观评估导管头端位置,探讨导管误入同侧颈内静脉的发生率和置管时主要并发症的发生情况。结果磁铁组有5例(6.25%)误入同侧颈内静脉,明显低于对照组的15例(18.75%)(P<0.05)。两组患者锁骨下静脉穿刺置管的一次成功率、置管时间和穿刺置管时的主要并发症差异无统计学意义。结论磁铁引导法可显著降低锁骨下静脉置管过程中导管误入同侧颈内静脉的机率。

关键词：锁骨下静脉置管颈内静脉磁铁引导法

机械通气诱导内质网应激促进机械通气相关性肺纤维化的机制研究

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中华危重病急救医学 2023年第11期35卷 1171-1176页

作者：汤日冯金华梅舒雅徐侨翌周洋邢顺鹏皋源何征宇张志贇上海交通大学医学院附属仁济医院重症医学科上海200127

目的通过动物实验探讨机械通气(MV)诱导内质网应激(ERS)促进机械通气相关性肺纤维化(MVPF)的机制,明确血管紧张素受体1(AT1R)通路在该过程中的重要作用。方法将C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组(Sham组)、MV组、AT1R敲减组(AT1R-sh... 详细信息

目的通过动物实验探讨机械通气(MV)诱导内质网应激(ERS)促进机械通气相关性肺纤维化(MVPF)的机制,明确血管紧张素受体1(AT1R)通路在该过程中的重要作用。方法将C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组(Sham组)、MV组、AT1R敲减组(AT1R-shRNA组)、AT1R敲减+MV组(MV+AT1R-shRNA组),每组6只。MV组和MV+AT1R-shRNA组小鼠气管插管后MV 2 h(参数设置:呼吸频率70次/min,潮气量20 mL/kg,吸入氧浓度0.21)以建立MVPF动物模型;Sham组和AT1R-shRNA组小鼠气管插管后自主呼吸。AT1R-shRNA组和MV+AT1R-shRNA组小鼠于制模前1个月经气管注射AT1R-shRNA-腺相关病毒悬液以抑制肺组织内AT1R基因表达。分别用免疫荧光和蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测肺组织AT1R、ERS标志性蛋白免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)、蛋白质二硫键异构酶(PDI),以及纤维化标志性蛋白Ⅰ型胶原蛋白(COL1A1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;苏木素-伊红(HE)染色评估肺损伤情况,Masson染色评估肺纤维化程度。结果与Sham组相比,MV组小鼠肺纤维化程度和肺损伤情况显著,肺组织AT1R、BIP、PDI、COL1A1、α-SMA蛋白表达水平明显升高(AT1R/β-actin:1.40±0.02比1,BIP/β-actin:2.79±0.07比1,PDI/β-actin:2.07±0.02比1,COL1A1/α-Tubulin:2.60±0.15比1,α-SMA/α-Tubulin:2.80±0.25比1,均P<0.01),肺组织内E-cad^(+)/AT1R+和E-cad^(+)/BIP^(+)细胞数量增加,COL1A1和α-SMA荧光强度增强。与MV组相比,MV+AT1R-shRNA组小鼠肺纤维化程度和肺损伤情况显著缓解,肺组织AT1R、BIP、PDI、COL1A1、α-SMA蛋白表达水平明显下降(AT1R/β-actin:0.53±0.03比1.40±0.02,BIP/β-actin:1.73±0.15比2.79±0.07,PDI/β-actin:1.04±0.07比2.07±0.02,COL1A1/α-Tubulin:1.29±0.11比2.60±0.15,α-SMA/α-Tubulin:1.27±0.10比2.80±0.25,均P<0.01),肺组织内E-cad^(+)/AT1R^(+)和E-cad^(+)/BIP^(+)细胞数量减少,COL1A1和α-SMA荧光强度减低。AT1R-shRNA组各指标与Sham组比较差异均无统计学意义。结论MV可上调肺泡上皮细胞AT1R表达,活化AT1R通路而诱导ERS,促进MVPF进程。

关键词：机械通气肺纤维化内质网应激血管紧张素受体1

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B型脑钠肽在围术期心力衰竭的应用

国际麻醉学与复苏杂志 2011年第2期32卷 236-239页

作者：邢顺鹏皋源杭燕南上海交通大学医学院附属仁济医院麻醉科SICU 200127

背景严重心力衰竭时,可能存在内源性脑钠肽相对不足和/或脑钠肽的抵抗.B型脑钠肽（B-type natriuretic peptide,BNP）因在心力衰竭的诊断、治疗及预后判断的特殊价值而备受关注.奈西立肽是重组人脑钠肽,已成为治疗心力衰竭的一种新药.... 详细信息

背景严重心力衰竭时,可能存在内源性脑钠肽相对不足和/或脑钠肽的抵抗.B型脑钠肽（B-type natriuretic peptide,BNP）因在心力衰竭的诊断、治疗及预后判断的特殊价值而备受关注.奈西立肽是重组人脑钠肽,已成为治疗心力衰竭的一种新药.目的了解BNP与围术期心力衰竭的关系及其重组体--奈西立肽临床应用.内容 BNP与围术期心力衰竭的关系及其重组体--奈西立肽临床应用的研究现状.趋向围术期BNP水平与心衰的严重程度呈正相关,可用于心力衰竭的诊断、治疗及预后的判断.奈西立肽对围术期心力衰竭的患者具有很好的疗效,必将逐步应用于临床.

关键词： B型脑钠肽心力衰竭奈西立肽围术期

脉波轮廓温度稀释连续心排量测量技术在重症急性胰腺炎合并急性呼吸道窘迫综合征患者液体管理中的应用

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中华危重症医学杂志（电子版） 2016年第2期9卷 96-100页

作者：曹关义李泉朱红岩邢顺鹏江苏省宿迁市第一人民医院普外科江苏宿迁223800 江苏省宿迁市第一人民医院重症医学科江苏宿迁223800 上海交通大学医学院附属仁济医院外科监护室上海200120

目的探讨脉波轮廓温度稀释连续心排量测量技术（PICCO）应用于重症胰腺炎（SAP）合并急性呼吸道窘迫综合征（ARDS）患者液体管理的指导意义。方法选择SAP并发ARDS的患者57例,分成实验组和对照组。治疗组为29例,采用PICCO监测下的液体输... 详细信息

目的探讨脉波轮廓温度稀释连续心排量测量技术（PICCO）应用于重症胰腺炎（SAP）合并急性呼吸道窘迫综合征（ARDS）患者液体管理的指导意义。方法选择SAP并发ARDS的患者57例,分成实验组和对照组。治疗组为29例,采用PICCO监测下的液体输注;对照组为28例,采用传统液体输注。对两组患者ARDS的发生率、应用血管药物的比例、气管插管率、有创机械通气时间、治疗0~〈6 h、6~〈24 h、24~〈48 h和48~72 h复苏液体量及病死率进行比较分析。结果与对照组相比,实验组患者ARDS发生率[17.24%（5/29）vs.42.85%（12/28）,χ2=4.47,P=0.045]、气管插管率均较低[6.90%（2/29）vs.28.57%（8/28）,χ2=4.63,P=0.041],有创机械通气时间较短[（5.8±2.7）d vs.（9.1±3.7）d,t=4.01,P〈0.001];实验组与对照组须应用血管活性药物的例数（4/29 vs.7/28,χ2=1.15,P=0.330）及病死率[10.34%（3/29）vs.17.86%（5/28）,χ2=0.47,P=0.670]比较,差异均无统计学意义;实验组治疗0~〈6 h复苏液体量较对照组明显增多（P〈0.05）,治疗6~〈24 h、24~〈48 h和48~72 h复苏液体量较对照组明显减少（P均〈0.05）。结论 PICCO可对SAP合并ARDS患者的早期液体复苏进行快速准确的指导,能充分扩容以避免其肺损伤。

关键词：脉波轮廓温度稀释连续心排量测量技术重症胰腺炎急性呼吸道窘迫综合征液体管理

锁骨下静脉置管误入同侧颈内静脉的危险因素分析

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国际麻醉学与复苏杂志 2014年第3期35卷 233-237页

作者：邢顺鹏皋源闻大翔何征宇杭燕南上海交通大学医学院附属仁济医院重症医学科 200127

目的探讨锁骨下静脉置管误入同侧颈内静脉的危险因素。方法收集2011年1月至2012年12月间上海交通大学医学院附属仁济医院外科监护室行锁骨下静脉置管成功的患者178例，均采用Seldinger技术进行置管。记录患者性别、年龄、穿刺部位、穿... 详细信息

目的探讨锁骨下静脉置管误入同侧颈内静脉的危险因素。方法收集2011年1月至2012年12月间上海交通大学医学院附属仁济医院外科监护室行锁骨下静脉置管成功的患者178例，均采用Seldinger技术进行置管。记录患者性别、年龄、穿刺部位、穿刺位点、进针方向、穿刺针针尖斜面方向、导引钢丝J型头方向、穿刺时头部位置，先以单因素分析筛选出有统计学意义的危险因素，再应用多因素非条件logistic回归分析患者在锁骨下静脉置管进入颈内同侧颈内静脉的独立危险因素。结果单因素分析表明：锁骨下静脉置管是否进入同侧颈内静脉与患者的性别（P=0．504）、年龄（P=0．200）、进针方向（P=0。370）、穿刺针针尖斜面方向（P=0．670）无关，与穿刺部位（P=0．012）、穿刺位点（P=0．012）、穿刺时导引钢丝J型头方向（P=0．000）、穿刺时患者头部位置（P=0．030）有关。多因素回归分析显示：锁骨下静脉置管时穿刺部位在右侧[危险度比值比（oddsratio，OR）=55．573，95％可信区间（confidenceinterval，CI）：5．145。595．845，X2=10．965，P=0．001]、导引钢丝J型头朝向颈内静脉（OR=24．116，95％CI：6．848～84．918，x^2=24．558，P=0．000）和穿刺时头部偏向穿刺对侧（OR=3．681，95％CI：1．210—11．199，x^2=5．268，P=0．022），为锁骨下静脉置管误人同侧颈内静脉的独立危险因素。共29例（16．29％）患者锁骨下静脉置管时进入同侧颈内静脉。结论锁骨下静脉置管误入同侧颈内静脉是其常见的并发症，影响锁骨下静脉置管误人同侧颈内静脉的主要因素有穿刺部位选择右侧、导引钢丝J型头朝向颈内静脉、穿刺时头部偏向穿刺对侧。

关键词：锁骨下静脉置管颈内静脉危险因素 Logistic回归分析

脂多糖对小鼠肺成纤维细胞增殖和P27蛋白表达的影响

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上海医学 2018年第8期41卷 477-482页

作者：顾楠楠邢顺鹏陈思涵周雨曦蒋涛焦英甫皋源俞卫峰何征宇杭燕南闻大翔上海交通大学医学院附属仁济医院麻醉科上海200127 上海交通大学医学院附属仁济医院重症医学科上海200127

目的观察原代培养的小鼠肺成纤维细胞在不同质量浓度的脂多糖(LPS)刺激下的增殖情况并检测P27蛋白的表达情况,以明确LPS对肺成纤维细胞增殖和P27蛋白表达的调控作用。方法将培养至4～7代的小鼠肺成纤维细胞分为对照组、100μg/L LPS组(L... 详细信息

目的观察原代培养的小鼠肺成纤维细胞在不同质量浓度的脂多糖(LPS)刺激下的增殖情况并检测P27蛋白的表达情况,以明确LPS对肺成纤维细胞增殖和P27蛋白表达的调控作用。方法将培养至4～7代的小鼠肺成纤维细胞分为对照组、100μg/L LPS组(LPS_(100)组)、500μg/L LPS组(LPS_(500)组)和1 000μg/L LPS组(LPS_(1000)组)。对照组加入PBS,各质量浓度LPS组加入相应终质量浓度的LPS。在LPS刺激后0、24、48、72h采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组小鼠肺成纤维细胞的增殖情况。在LPS刺激后24h采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠肺成纤维细胞P27的mRNA表达水平,并通过Western印迹法和免疫荧光技术比较小鼠肺成纤维细胞经不同质量浓度LPS刺激48h后P27的蛋白质表达情况。结果不同质量浓度的LPS刺激小鼠肺成纤维细胞后能引起细胞增殖,LPS刺激后24h,LPS1000组细胞增殖速率显著高于对照组(P<0.01);刺激后48h,LPS_(100)组、LPS_(500)组和LPS_(1000)组肺成纤维细胞的增殖速率均显著高于对照组(P值均<0.01);刺激后72h,LPS_(500)组和LPS_(1000)组肺成纤维细胞的增殖速率均显著高于对照组(P值均<0.01)。LPS刺激后24h,LPS_(500)组和LPS_(1000)组P27的mRNA表达水平均显著低于对照组(P值分别<0.05、0.01)。LPS刺激后48h,Western印迹法和免疫荧光实验结果显示,LPS_(100)组、LPS_(500)组和LPS_(1000)组的P27的蛋白质表达量和绿色荧光强度均显著低于对照组(P值分别<0.05、0.01、0.01)。结论肺成纤维细胞的增殖可能是LPS诱导的脓毒症相关性肺纤维化发生的机制之一,该过程可能与P27蛋白表达下调有关。

关键词：脂多糖类肺纤维化脓毒症肺成纤维细胞增殖