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共表达IBDV VP2蛋白和AIV HA蛋白的重组NDV的构建

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中国兽医科学 2025年

作者：王晓晓司凯新尚珂陈松彪余祖华丁轲陈建李日顺郁川何雷洛阳市活载体生物材料与动物疫病防控重点实验室河南科技大学动物科技学院功能微生物与畜禽健康实验室洛阳职业技术学院

为构建共表达新变异型传染性法氏囊病毒（nVarIBDV）VP2蛋白和H9亚型禽流感病毒（AIV）HA蛋白的耐热型重组NDV，将nVarIBDV VP2基因和AIV HA基因经2A肽连接后插入重组质粒pNDV-Ⅶ-F中; 然后，重组质粒与辅助质粒pTM-N/P/L共转染BHK-21... 详细信息

为构建共表达新变异型传染性法氏囊病毒（nVarIBDV）VP2蛋白和H9亚型禽流感病毒（AIV）HA蛋白的耐热型重组NDV，将nVarIBDV VP2基因和AIV HA基因经2A肽连接后插入重组质粒pNDV-Ⅶ-F中; 然后，重组质粒与辅助质粒pTM-N/P/L共转染BHK-21细胞，拯救出共表达VP2蛋白和HA蛋白的重组病毒rNDV-Ⅶ-F-VP2-HA和rNDV-Ⅶ-F-HA-VP2并鉴定。RT-PCR鉴定表明目的基因成功插入至重组NDV的P、M基因之间；IFA检测结果表明，重组病毒rNDV-Ⅶ-F-HA-VP2感染细胞可稳定表达VP2蛋白和HA蛋白，而重组病毒rNDV-Ⅶ-F-VP2-HA感染细胞后仅检测到VP2蛋白表达。生物学特性检测表明两株重组病毒均具有亲本毒株的高增殖效价、低毒力和良好耐热性特点。综上所述，本研究成功地构建了共表达nVarIBDV VP2蛋白和H9N2 AIV HA蛋白的重组病毒rNDV-Ⅶ-F-VP2-HA和rNDV-Ⅶ-F-HA-VP2，为nVarIBDV、H9N2及基因Ⅶ型NDV的综合防控提供了一种新的策略。

关键词：新城疫病毒传染性法氏囊病毒 VP2蛋白禽流感病毒 HA蛋白

高效液相色谱法同时测定葵花盘粉提取物中的东莨菪素、芦丁、槲皮素和木樨草素

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化学试剂 2025年

作者：巩润梓吴大刚邢小霞李平亮青岛农业大学植物医学学院山东牧香生物科技有限公司

选择东莨菪素、芦丁、槲皮素和木樨草素作为葵花盘粉提取物抗痛风活性成分的代表，通过优化QuEChERS前处理方法的提取液、净化剂组成，以及色谱流动相组成、梯度洗脱程序、检测定量波长，建立了同时测定葵花盘粉提取物样品中4种成分的... 详细信息

选择东莨菪素、芦丁、槲皮素和木樨草素作为葵花盘粉提取物抗痛风活性成分的代表，通过优化QuEChERS前处理方法的提取液、净化剂组成，以及色谱流动相组成、梯度洗脱程序、检测定量波长，建立了同时测定葵花盘粉提取物样品中4种成分的高效液相色谱分析方法。4种化合物的定量限和检出限范围分别为0.08～0.15 mg/L和0.02～0.06 mg/L，添加回收率范围为87%～97%，相对标准偏差范围1.1%～5.2%。采用该方法检测了3种葵花盘粉样品，结果表明东莨菪素、芦丁、槲皮素和木樨草素的含量范围分别为68.71～179.41、48.52～232.35、20.45～32.47和0.34～1.10 mg/kg。本研究为葵花盘粉相关产品的活性成分检测与质量控制提供了方法学参考。

关键词：葵花盘粉高效液相色谱东莨菪素芦丁槲皮素木樨草素

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白酒装盒机的防伪书自动供给系统的设计

天津理工大学学报 2025年第2期41卷 65-72页

作者：吴琦侯津博邢恩宏天津理工大学天津市先进机电系统设计与智能控制重点实验室天津理工大学机电工程国家级实验教学示范中心

针对目前国内许多企业在酒类包装过程中说明书的自动供给系统的研究较少、缺少核心部件理论研究，其生产线通常采用机械与人工配合工作，对人工依赖性很强。设计了一种白酒装盒机中防伪说明书的自动供给系统。该装置基于行星轮系取盒机... 详细信息

针对目前国内许多企业在酒类包装过程中说明书的自动供给系统的研究较少、缺少核心部件理论研究，其生产线通常采用机械与人工配合工作，对人工依赖性很强。设计了一种白酒装盒机中防伪说明书的自动供给系统。该装置基于行星轮系取盒机构进行改进，通过增加中间轮改变行星轮转向，完成规定的内摆线运动轨迹。并对其夹具和相关传动装置进行选型设计；通过SolidWorks软件建立机构三维模型，对旋转装置进行动平衡重心优化，保证了机构的工作准确性；利用软件进行仿真得出真空吸盘的相关运动曲线，确定了机构的运动稳定性；对行星轮系和轴进行有限元分析，确保了机构的设计合理性。使得在这一领域的研究有很大的市场前景，可以为同类应用提供思路。

关键词：装盒机器人行星轮系结构运动学分析有限元仿真

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超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定土壤中氯氟吡氧乙酸、烟嘧磺隆及阿特拉津残留

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分析科学学报 2025年

作者：毕建玲辜洋建于小翠刘丙顺陈萍田兴磊山东省物化探勘查院山东省地质勘查工程技术研究中心地下资源环境高精度探测山东省工程研究中心山东省地质科学研究院

采用石墨化碳黑(Graphitized Carbo n Blac ks,GCB)净化柱对样品进行前处理,建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱法检测土壤中氯氟吡氧乙酸、烟嘧磺隆及阿特拉津残留的方法。以2%甲酸-乙腈溶液对样品中目标物进行涡旋振荡提取,经加入1... 详细信息

采用石墨化碳黑(Graphitized Carbo n Blac ks,GCB)净化柱对样品进行前处理,建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱法检测土壤中氯氟吡氧乙酸、烟嘧磺隆及阿特拉津残留的方法。以2%甲酸-乙腈溶液对样品中目标物进行涡旋振荡提取,经加入1g无水硫酸镁GCB净化柱净化,采用Acquity UPLCBEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)进行洗脱分离,质谱分析采用电喷雾离子源正离子模式,多反应离子监测,外标法定量。结果表明,氯氟吡氧乙酸、烟嘧磺隆、阿特拉津3种目标物在0.50～500μg/L浓度范围内线性关系良好(R2≥0.9973),检出限分别为0.6、0.4、0.2μg/kg,加标回收率为83.7%～90.9%,相对标准偏差为1.42%～5.67%。实际土壤样品测试中,基体加标回收率为82.1%～92.2%,平行样品测定满足要求。本方法操作简单、准确性和灵敏度高,适用于土壤样品中氯氟吡氧乙酸、烟嘧磺隆及阿特拉津残留的测定。

关键词：土壤超高效液相色谱-三重四极杆质谱法氯氟吡氧乙酸烟嘧磺隆阿特拉津

马尾神经冗余在腰椎管狭窄症中的临床意义:系统的文献回顾和Meta分析

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颈腰痛杂志 2025年 1067-1078页

作者：邢可刘怡张梦瑶余世林郭庆功南阳市中心医院南阳市第二人民医院洛阳正骨医院信阳市中心医院河南大学第一附属医院

目的评估马尾神经根冗余（RNR）对腰椎管狭窄症（LSS）患者临床评分和康复的影响。方法 2022年3月,在PubMed、Embase、cochrane及知网、万方、维普数据库进行了系统的文献检索。选择前瞻性和回顾性队列研究来评估LSS患者在有RNR证据和... 详细信息

目的评估马尾神经根冗余（RNR）对腰椎管狭窄症（LSS）患者临床评分和康复的影响。方法 2022年3月,在PubMed、Embase、cochrane及知网、万方、维普数据库进行了系统的文献检索。选择前瞻性和回顾性队列研究来评估LSS患者在有RNR证据和没有RNR证据时的临床结果差异。连续型变量计算加权平均差异（WMD）)、二分类变量计算比值比（OR）。结果该研究共纳入了17项研究,2 721例LSS患者。MRI上有RNR证据的LSS患者与RNR-的LSS患者比较,其男、女发生RNR的概率并无差异（P=0.97,OR=1.00,95%CI=[0.85,1.19]）。RNR+的LSS患者年龄较大（P<0.001,MD=4.53,95%CI=2.87,6.19]）、最狭窄处横截面积较小（P<0.001,MD=-20.79,95%CI=-25.48,-16.11]）且上腰段（L1-L4）比例较RNR-的LSS患者高（P=0.002,OR=5.59,95%CI=[1.85,16.95]）、术中出血量较多（P <0.00001,MID=75.45,95%CI=[64.40,86.50]）、术后临床评分（CS）较低（P<0.00001,MD=-3.50,95%CI=[-4.17,-2.83]）、术后恢复率较低（P=0.0001,MD=-9.74,95%CI=[-14.75,-4.74]）;CSA小于100 mm2的狭窄节段数比例较RNR-的LSS患者高（P=0.02,OR=1.51,95%CI=[1.07,2.14]）,症状持续时间更长（P=0.03,MD=13.65,95%CI=1.31,25.99]）。RNR+患者术前腰背部疼痛程度更严重（VAS评分更高）(P=0.08,MD=1.03,95%CI=[-0.11,2.17])、术前ODI评分更高（P=0.07,MD=2.13,95%CI=-0.15,4.41]）,手术时间更长（P=0.05,MD=20.75,95%CI=-0.17,41.67]）,但差异无明显统计学意义。结论与RNR-的LSS患者相比,RNR+的LSS患者年龄较大、最狭窄处狭窄程度更高且上腰段狭窄比例高、术中出血量较多、术后CS评分较低、术后恢复率较低、CSA小于100 mm2的狭窄节段数比例高,症状持续时间更长。因此,马尾神经冗余征现象的出现可以作为LSS患者预后较差的指标。

关键词：马尾神经冗余脊柱腰椎椎管狭窄神经源性跛行腰椎减压术队列研究不良事件 Meta分析

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呼伦湖浮游植物演变特征及影响因素

湖泊科学 2025年第1期37卷 50-60页

作者：兴月张生刘禹卢宗福史小红杨朝霞王殿飞赵耘溪内蒙古农业大学水利与土木建筑工程学院呼和浩特010018 内蒙古自治区水资源保护与利用重点实验室呼和浩特010018 内蒙古宁城县纪检监察工作保障中心赤峰024200

湖泊中浮游植物过度生长繁殖引起的水华现象日益频繁,严重威胁湖泊生态环境的健康与安全。近年来呼伦湖蓝藻水华覆盖面积有扩大的趋势,2022年呼伦湖蓝藻水华最严重时几乎覆盖了整个湖面,本文分别在春、夏和秋季调查了湖泊表、中、底层... 详细信息

湖泊中浮游植物过度生长繁殖引起的水华现象日益频繁,严重威胁湖泊生态环境的健康与安全。近年来呼伦湖蓝藻水华覆盖面积有扩大的趋势,2022年呼伦湖蓝藻水华最严重时几乎覆盖了整个湖面,本文分别在春、夏和秋季调查了湖泊表、中、底层水体的浮游植物种类、细胞密度、生物量和相关水质指标,共鉴定出浮游植物193种,隶属于8门113属,优势种共14种,物种组成表现为绿藻硅藻蓝藻型,其中春、秋季浮游植物种类数基本相当,夏季最少,但夏季的细胞密度最高,春、夏、秋季的浮游植物生物量分别为686、510和166 mg/L。春季浮游植物Shannon-Wiener多样性指数最高,夏季Margalef丰富度指数最高,春季Pielou均匀度指数最高,呼伦湖浮游植物群落特征及其季节性差异是湖泊水环境条件和气象因素共同作用的结果,相关性分析结果表明,主要影响因素依次为水温、总氮、总磷、pH、溶解氧、气温、蒸发量和风速等。

关键词：呼伦湖浮游植物群落特征水华影响因素

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大口黑鲈双RNA病毒VP2蛋白原核表达及多克隆抗体制备

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西北农林科技大学学报(自然科学版) 2025年 1-8页

作者：张秋爽马宝福郑果林强梁红茹牛银杰罗霞李宁求付小哲中国水产科学研究院珠江水产研究所农业农村部渔用药物创制重点实验室广东省水产动物免疫与绿色养殖重点实验室

【目的】研究大口黑鲈双RNA病毒(largemouth bass birnavirus,LBBV)VP2蛋白的抗原性,为后续LBBV疫苗研究提供基础材料。【方法】PCR扩增LBBV VP2基因,构建重组质粒p ET-VP2,PCR和测序鉴定后转入大肠杆菌中进行诱导表达和纯化。以纯化的... 详细信息

【目的】研究大口黑鲈双RNA病毒(largemouth bass birnavirus,LBBV)VP2蛋白的抗原性,为后续LBBV疫苗研究提供基础材料。【方法】PCR扩增LBBV VP2基因,构建重组质粒p ET-VP2,PCR和测序鉴定后转入大肠杆菌中进行诱导表达和纯化。以纯化的重组VP2蛋白为抗原,皮下多点注射免疫新西兰大白兔,耳中央动脉采血并分离血清,通过间接ELISA方法测定多克隆抗体效价;利用Ni-NTA镍离子亲和层析纯化抗体,用BCA法测定纯化后抗体的浓度。通过Western blot和间接免疫荧光鉴定VP2多克隆抗体特异性;采用固定病毒-稀释血清法测定血清的中和效价。【结果】PCR扩增获得了1 266 bp的VP2基因片段。PCR和测序鉴定结果表明,重组质粒p ETVP2构建成功。VP2重组蛋白的诱导表达和纯化试验结果获得了64 ku的重组蛋白,符合预期大小。成功制备了VP2蛋白的多克隆抗体,其质量浓度为10 mg/m L,效价为1∶1 024 000,可特异性识别LBBV VP2蛋白;血清中和试验结果显示,VP2多抗中和抗体效价为1∶64。【结论】成功获得了大肠杆菌表达的LBBV重组VP2蛋白,制备了抗VP2蛋白的多克隆抗体,该多抗对LBBV具有中和作用。

关键词：大口黑鲈大口黑鲈双RNA病毒 VP2蛋白多克隆抗体

成熟度和温度对芙蓉李贮藏期间生理生化特性及蜡质结构的影响

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核农学报 2025年第1期39卷 128-139页

作者：周丹蓉叶新福方智振林炎娟福建省农业科学院果树研究所福建福州350013

为研究成熟度和温度对芙蓉李贮藏期间生理生化特性和果皮蜡质结构的影响,本研究选择2个成熟度(F:约六成熟;S:约八成熟)的芙蓉李,于4、25℃条件下进行试验,分析16个生理生化指标的差异,采用正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)筛选不同成熟度... 详细信息

为研究成熟度和温度对芙蓉李贮藏期间生理生化特性和果皮蜡质结构的影响,本研究选择2个成熟度(F:约六成熟;S:约八成熟)的芙蓉李,于4、25℃条件下进行试验,分析16个生理生化指标的差异,采用正交偏最小二乘判别法(OPLS-DA)筛选不同成熟度芙蓉李在不同温度贮藏期间的主要差异性指标,检测芙蓉李贮藏前后蜡质结构的变化并分析其贮藏效应。结果表明,4℃条件下F与S之间的主要差异性指标为可溶性固形物含量(SS)、果肉硬度(FF)、果皮色度值a^(*)(PC-a^(*))、花色苷(AC)含量、可滴定酸(TA)含量、果皮硬度(PF),25℃时为SS、超氧化物歧化酶(SOD)活性、PC-a^(*)、果皮色度值b*(PC-b*)。不同成熟度果实的SS含量、PC-a^(*)、AC含量均随贮藏天数增加而逐渐上升(S贮藏28 d除外),同一贮藏天数下AC含量在25℃时显著高于4℃时,同一温度同一贮藏天数时S中的SS含量、PC-a^(*)显著高于F;PF、FF和TA含量随贮藏天数的延长而逐渐下降,4℃和F有利于FF和PF的保持,而25℃下TA含量下降更快;SOD活性随贮藏天数的延长先升高后下降,且在25℃和S中下降更显著。芙蓉李蜡质主要以直立片状晶体和颗粒状结晶的形式存在;两种晶体数量和形态的变化可能影响水分的流失,从而影响细胞壁结构的稳定性,进而影响贮藏性。本研究可为芙蓉李的采收和贮藏保鲜提供技术参考。

关键词：芙蓉李成熟度贮藏温度生理生化特性蜡质结构

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铁死亡与骨质疏松症

中国组织工程研究 2025年第3期29卷 554-562页

作者：杨城李玮民冉栋成许嘉木吴王祥胥家福陈晶晶蒋光福王春庆贵州医科大学临床医学院贵州省贵阳市550004 贵州省人民医院骨科贵州省贵阳市550004 贵州医科大学附属医院急诊外科贵州省贵阳市550004

背景:已证实铁死亡与多种骨骼肌肉疾病密切相关,例如类风湿关节炎、骨肉瘤、骨质疏松症等。而铁死亡和骨质疏松症的病理生理机制有待进一步研究和阐明,以拓宽对铁代谢和骨质疏松症的认识,为今后阐明骨质疏松的新机制、开发治疗骨质疏松... 详细信息

背景:已证实铁死亡与多种骨骼肌肉疾病密切相关,例如类风湿关节炎、骨肉瘤、骨质疏松症等。而铁死亡和骨质疏松症的病理生理机制有待进一步研究和阐明,以拓宽对铁代谢和骨质疏松症的认识,为今后阐明骨质疏松的新机制、开发治疗骨质疏松的新技术和新药提供研究思路。目的:对铁死亡在骨质疏松症中的研究现状展开综述,为未来研究骨质疏松症的具体分子机制提供一条新方向,为骨质疏松症的治疗策略提供更有效、更好的选择。方法:由第一作者应用计算机检索2000-2024年出版的文献,以“铁死亡,铁代谢,骨质疏松,成骨细胞,破骨细胞,骨代谢,信号通路,肌肉骨骼,综述”等为中文检索词检索中国知网、万方和维普数据库;以“ferroptosis,iron metabolism,osteoporosis,osteoblast,osteoclast,bone metabolism,signal pathway,musculoskeletal,review”等为英文检索词检索PubMed数据库,按照入选标准最终共纳入68篇文献。结果与结论:①铁死亡是近年来发现的一种新的细胞死亡类型,通常伴随着细胞死亡过程中的大量铁积累和脂质过氧化,其发生具有铁依赖性,这与目前研究较热的几种细胞死亡方式(例如细胞焦亡、坏死性凋亡、铜死亡、自噬)有明显的区别。②细胞内铁稳态表现为铁的吸收、输出、利用和储存之间的平衡。人体的铁调节系统包括全身调节和细胞内调节,系统调节的主要因子是肝分泌产生的铁调节激素,细胞调节依赖于铁调节蛋白/铁反应元件系统;当然,细胞内铁稳态还可以由其他因素控制,例如缺氧、细胞因子和激素等。③脂质过氧化反应会对生物膜(质膜和内部细胞器膜)、脂蛋白和其他含脂质的分子造成氧化损伤。多不饱和脂肪酸磷脂是脂质过氧化的重要靶点,游离多不饱和脂肪酸是脂质氧化的重要底物,可与磷脂双分子层结合,导致过度氧化,从而引发脂质凋亡。④多项研究表明,通过不同的方式使成骨细胞铁超载,致细胞内不稳定的亚铁不断积累并产生活性氧和脂质过氧化物,造成成骨细胞铁死亡,最终引起骨形成减少影响骨稳态发生骨质疏松。⑤破骨细胞是由单核巨噬细胞系或骨髓间充质干细胞在核因子κB配体受体激活因子诱导下融合形成的大型多核细胞,具有骨吸收功能。铁离子可通过产生细胞内脂质活性氧促进破骨细胞分化和骨吸收,而铁螯合剂在体外可以抑制破骨细胞形成进而影响骨质疏松症的发生发展。

关键词：铁死亡铁代谢骨质疏松成骨细胞破骨细胞骨代谢信号通路综述

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