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基于CRISPR序列分型的鸭疫里默氏杆菌疫苗菌株筛选方法的建立及应用

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基于CRISPR序列分型的鸭疫里默氏杆菌疫苗菌株筛选方法的建立及应...

作者：邢娟娟河北科技师范学院

学位级别：硕士

鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)属接触类传染性疾病,感染多数禽类,发病后造成纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎和脑膜炎等症状。侵害1-8周龄鸭,对养鸭业造成极大威胁。本研究旨在建立一种高效疫苗菌株筛选方法,和传统疫苗... 详细信息

鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)属接触类传染性疾病,感染多数禽类,发病后造成纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎和脑膜炎等症状。侵害1-8周龄鸭,对养鸭业造成极大威胁。本研究旨在建立一种高效疫苗菌株筛选方法,和传统疫苗菌株筛选方法相比大幅度降低了工作量和成本,为疫苗研制工作提供有力的技术手段。具有强致病力的菌株通常免疫保护效果较好,在某种细菌研究背景知识模糊,毒力因子尚不明确时,疫苗菌株的筛选方法通常的是,依次对各个分离株进行毒力的测定,常用不同剂量的细菌感染动物,通过测定最小致死量(MLD)或半数致死量(LD),还可以用最小感染量(MID)或半数感染量(EID)来评价。这些方法都需要将临床分离的细菌一一测定,工作量较大,比较费时费力,限制了对比菌株的数量。因此建立一种高效疫苗菌株筛选方法对疫苗研制工作有举足轻重的影响。本研究方法以鸭疫里默氏杆菌为例,以某集团实验室保存的若干RA菌株为样本,利用鸭疫里默氏杆菌的CRISPR序列作为识别标签,设计引物RAC2-F/RAC2-R并能够成功扩增不同血清型RA的CRISPR序列,效率达94.74%;在此基础上建立了混合菌株感染的攻毒模型;为确定优势菌种突破鸭血脑屏障的最快速时间,混合感染后梯度设置从鸭脑部分离RA时间,分别为3h、6h、9h、12h,综合评价平板上分离RA效率和RA生长情况,攻毒后分离RA的时间确定为6h;利用3个不同血清型的4个RA菌株进行预试验,筛选优势菌种效率达100%。随后以1型RA菌株为例,进行了A-D 4组平行试验,各组最优势菌种为FJ-HJH、FJ-LYP、GD-DCR、R9,最优势菌种在各组分离RA的占比分别为83.3%、75%、100%、77.8%,筛选效率理想。为探究筛选出的优势菌种与毒力间是否存在对应关系,分别对四组最优势菌种进行LD测定,FJ-HJH、FJ-LYP、GD-DCR、R9的LD值分别为3.40×10、1.15×10、1.91×10、1.43×10 CFU/只;并将四株最优势菌种再次混合感染鸭,结果显示分离RA菌株序列与GD-DCR序列一致性达77.8%,与R9一致的序列占比11.1%,与FY-HJH一致的序列占比11.1%。筛选效率与菌株毒力呈现对应关系,可得出结论,优势菌株毒力较强;为探究菌株毒力与耐药性间关系,选取优势菌种与组内随机挑选出的其他菌种进行药敏试验,结果显示并无显著差异,从本研究结果显示毒力强弱与耐药性间可能无关联。综上所述,本研究成功建立起基于CRISPR序列分型的鸭疫里默氏杆菌疫苗菌株筛选方法,筛选效率较理想,为高效筛选疫苗菌株提供有力的技术手段;本试验所筛选的优势菌株可应用到鸭疫里默氏杆菌疫苗研发制备工作中;验证了优势菌种为强毒力菌株,在鸭的免疫反应中,优先突破血脑屏障;并且探究了菌株毒力与耐药性之间的联系。

关键词： CRISPR序列混合感染优势菌种筛选效率 LD50测定药敏试验

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学校突发事件应急管理与预案模式探讨

中国安全生产科学技术 2010年第1期6卷 139-143页

作者：杨力邢娟娟中国安全生产科学研究院北京100029

学校应急管理是国家公共危机管理的组成部分,关系到家庭和社会的和谐和稳定。本文介绍了国内外学校应急管理现状,提出目前我国学校应急管理中存在的问题,借鉴国外发达国家应急管理的模式与经验,针对我国学校应急救援管理工作与预案模式... 详细信息

学校应急管理是国家公共危机管理的组成部分,关系到家庭和社会的和谐和稳定。本文介绍了国内外学校应急管理现状,提出目前我国学校应急管理中存在的问题,借鉴国外发达国家应急管理的模式与经验,针对我国学校应急救援管理工作与预案模式提出建议和模式示例。

关键词：学校应急管理突发事件应急预案

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突发职业危害事故应急响应关键技术

中国安全生产科学技术 2010年第2期6卷 77-81页

作者：邢娟娟中国安全生产科学研究院北京100029

针对职业中毒突发事件的特点,如突发事故带来的人员伤亡和现场的不确定因素可能带来的连锁反应,甚至伴随公共事件的发生,提出应急响应关键技术。应急管理中强调应急准备的重要性,职业危害事故识别和分类分级,关注职业中毒危机处理与社... 详细信息

针对职业中毒突发事件的特点,如突发事故带来的人员伤亡和现场的不确定因素可能带来的连锁反应,甚至伴随公共事件的发生,提出应急响应关键技术。应急管理中强调应急准备的重要性,职业危害事故识别和分类分级,关注职业中毒危机处理与社会公共安全影响,与职业中毒有关的应急资源配备与管理,以及在应急响应中的实时监测、报告与预警的能力。特别提出在应急培训与演练方面,强调对于重要岗位和可能成为第一目击者的作业人员处理急性中毒等情况时的能力培养和训练。

关键词：突发职业危害事故应急响应职业中毒

Ga掺杂对Cu_3SbSe_4热电性能的影响

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物理学报 2017年第16期66卷 231-238页

作者：陈萝娜刘叶烽张继业杨炯邢娟娟骆军张文清上海大学材料科学与工程学院上海200444

采用熔融-淬火方法制备了Cu_(2.95)Ga_xSb_(1-x)Se_4(x=0,0.01,0.02和0.04)样品,系统地研究了Ga在Sb位掺杂对Cu_3SbSe_4热电性能的影响.研究结果表明,少量的Ga掺杂(x=0.01)可以有效提高空穴浓度,抑制本征激发,改善样品的电输运性能.掺G... 详细信息

采用熔融-淬火方法制备了Cu_(2.95)Ga_xSb_(1-x)Se_4(x=0,0.01,0.02和0.04)样品,系统地研究了Ga在Sb位掺杂对Cu_3SbSe_4热电性能的影响.研究结果表明,少量的Ga掺杂(x=0.01)可以有效提高空穴浓度,抑制本征激发,改善样品的电输运性能.掺Ga样品在625 K时功率因子达到最大值10μW/cm·K^2,比未掺Ga的Cu_(2.95)SbSe_4样品提高了约一倍.但是随着Ga掺杂浓度的进一步提高,缺陷对载流子的散射增强,同时载流子有效质量增大,导致载流子迁移率急剧下降.因此Ga含量增加反而使样品的电性能恶化.在热输运方面,Ga掺杂可以有效降低双极扩散对热导率的贡献,同时掺杂引入的点缺陷对高频声子有较强的散射作用,因此高温区的热导率明显降低.最终该体系在664 K时获得最大ZT值0.53,比未掺Ga的样品提高了近50%.

关键词： Ga掺杂 Cu3SbSe4 热电性能

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应急准备文化体系结构与核心要素研究

中国安全生产科学技术 2010年第5期6卷 82-86页

作者：邢娟娟中国安全生产科学研究院北京100029

该文介绍了作为一种特殊文化形态——应急准备文化的产生与背景。论述了应急准备文化的基本概念及其理论与实践意义,提出有应急知识、应急意识和应急行为作为三个核心要素组成的应急准备文化体系结构,叙述了应急准备文化建设基本原则和... 详细信息

该文介绍了作为一种特殊文化形态——应急准备文化的产生与背景。论述了应急准备文化的基本概念及其理论与实践意义,提出有应急知识、应急意识和应急行为作为三个核心要素组成的应急准备文化体系结构,叙述了应急准备文化建设基本原则和主要内容,并展望了应急准备文化的发展前景。

关键词：应急准备应急准备文化应急管理

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药物中毒性聋听性脑干反应

中华耳鼻咽喉科杂志 1989年第4期24卷 199-200页

作者：邢娟娟胡黎立等煤炭工业部职业医学研究所辽宁省人民医院神经科

报道了56例药物毒聋和对照组20名健康儿童ABR测定结果，发现药聋以以波Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ消失及其潜伏期延长为主要特点，并讨论了ABR对药物中毒性聋的诊断。

关键词：听性脑干反应诊断药物中毒性聋

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基于DSP的新型图像处理系统研究与实现

微计算机信息 2008年第21期24卷 294-295,285页

作者：邢娟娟刘泉武汉理工大学信息工程学院湖北武汉430070

本文研究了一种基于TMS320C5402芯片的数字图像处理硬件系统,并使用VB进行可视化的处理。在该图像处理系统中,利用DSP上的键盘模块将各种图像处理方法结合起来,利用DSP串口和PC机进行图像数据的传输,并且利用VB显示处理前后的图像。该... 详细信息

本文研究了一种基于TMS320C5402芯片的数字图像处理硬件系统,并使用VB进行可视化的处理。在该图像处理系统中,利用DSP上的键盘模块将各种图像处理方法结合起来,利用DSP串口和PC机进行图像数据的传输,并且利用VB显示处理前后的图像。该系统的设计与实现,为以后进行基于DSP的数字图像处理独立系统的设计提供了一种新思路。

关键词：数字信号处理 TMS320VC5402芯片图像处理 VisualBasic

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企业重大事故应急管理与预案编制

空间差分方法在钛酸锶基陶瓷晶界的X射线能量色散谱分析中的应用

2005年

作者：邢娟娟郑双忠郝秀清等

国家“十五”科技攻关计划(滚动)课题国家自然科学基金项目(编号：70473018)资助:本书阐述了企业应急管理的基本内容、应急预案的基本结构和编制步骤，阐述了企业如何进行危险分析，介绍了基本预案与应急功能的设置，分行业给出了特殊... 详细信息

ISBN: (数字)780183609X

ISBN: (纸本)780183609X

国家“十五”科技攻关计划(滚动)课题国家自然科学基金项目(编号：70473018)资助:本书阐述了企业应急管理的基本内容、应急预案的基本结构和编制步骤，阐述了企业如何进行危险分析，介绍了基本预案与应急功能的设置，分行业给出了特殊风险应急过程的内容，介绍了标准化的操作程序及应急演习。

关键词：企业事故处理

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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电子显微学报 2008年第1期27卷 5-9页

作者：邢娟娟王贤浩顾辉中国科学院上海硅酸盐研究所高性能陶瓷和超微结构国家重点实验室

X射线能量色散谱(EDS)分析方法在材料领域得到了广泛的应用。将空间差分方法应用到EDS分析中,能够突破电子束斑的限制,大大扩展其分析材料微小区域组分的能力。本文以钛酸锶基陶瓷材料中晶界纳米颗粒和晶界偏析为例,简要介绍了与EDS分... 详细信息

X射线能量色散谱(EDS)分析方法在材料领域得到了广泛的应用。将空间差分方法应用到EDS分析中,能够突破电子束斑的限制,大大扩展其分析材料微小区域组分的能力。本文以钛酸锶基陶瓷材料中晶界纳米颗粒和晶界偏析为例,简要介绍了与EDS分析相关的空间差分方法,并进行了进一步的分析和讨论。

关键词： X射线能量色散谱(EDS) 空间差分 SrTiO3 晶界偏析纳米颗粒