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RNA干扰FUT6对人肝癌细胞HepG2侵袭迁移的影响

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广东医学 2014年第15期35卷 2327-2330页

作者：邓武坚向广阳程林于琨陈德广州医科大学附属第二医院普通外科广州510260 广东省惠州市惠东县人民医院普通外科 516300

目的初步探讨α1,3岩藻糖基转移酶-Ⅵ(FUT6)基因在肝癌细胞侵袭和转移中的作用,为肝癌FUT6基因治疗的可行性提供初步依据。方法靶向FUT6的siRNA转染肝癌细胞株HepG2后,分为3组:空白对照组、阴性对照组和实验组,分别予等体积无RNase水、s... 详细信息

目的初步探讨α1,3岩藻糖基转移酶-Ⅵ(FUT6)基因在肝癌细胞侵袭和转移中的作用,为肝癌FUT6基因治疗的可行性提供初步依据。方法靶向FUT6的siRNA转染肝癌细胞株HepG2后,分为3组:空白对照组、阴性对照组和实验组,分别予等体积无RNase水、scrambled-siRNA和iRNA-FUT6,通过Western blot检测FUT6蛋白的表达,Transwell小室方法进行细胞迁移和侵袭实验检测肝癌细胞株HepG2转移和侵袭能力的变化。结果空白对照组、阴性对照组及实验组FUT6蛋白的表达分别为1.24±0.07、1.09±0.04和0.30±0.06,实验组FUT6蛋白比空白对照组降低75.8%,差异有统计学意义(P0.05)。与空白对照组比较,实验组HepG2细胞迁移能力降低了73.3%,侵袭能力降低了73.7%。结论通过siRNA靶向沉默HepG2细胞的FUT6蛋白表达能削弱HepG2细胞在体外的迁移和侵袭能力。

关键词： α1,3岩藻糖基转移酶Ⅵ 肝细胞癌 siRNA干扰

TGFβR Ⅱ基因对肝癌细胞MHCC97H体外增殖和侵袭能力的影响

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实用医学杂志 2015年第5期31卷 719-722页

作者：于琨蒋小峰邓武坚程林黄启顺陈德广州医科大学附属第二医院肝胆外科 510260

目的:研究慢病毒介导TGFβRⅡ基因对肝癌细胞MHCC97H体外增殖和侵袭能力的影响。方法:构建TGFβRⅡ慢病毒载体Lenti-TGFβRⅡ-puromycin-e GFP并转染至人肝癌细胞MHCC97H。qPCR和Western Blot检测TGFβRⅡ的表达。应用MTS和Transwell观... 详细信息

目的:研究慢病毒介导TGFβRⅡ基因对肝癌细胞MHCC97H体外增殖和侵袭能力的影响。方法:构建TGFβRⅡ慢病毒载体Lenti-TGFβRⅡ-puromycin-e GFP并转染至人肝癌细胞MHCC97H。qPCR和Western Blot检测TGFβRⅡ的表达。应用MTS和Transwell观察97H细胞增殖和侵袭能力的改变。结果 :97H细胞成功转入TGFβRⅡ,与对照组相比,qPCR和Western Blot提示TGFβRⅡ表达明显升高。MTS和Transwell实验结果显示在高表达TGFβRⅡ后其增殖和侵袭能力下降。结论:过表达TGFβRⅡ基因抑制肝癌细胞生长,提示该基因有望成为肝癌治疗的一个新方法。

关键词：肝肿瘤增殖侵袭 TGFβ1 TGFβRⅡ MHCC97H

α1,3-FucT各亚型及SLeX在肝癌中的表达及意义

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实用医学杂志 2013年第11期29卷 1724-1726页

作者：邓武坚向广阳程林陈德广州医学院第二附属医院普通外科 510260

目的:检测α1,3-岩藻糖基转移酶(α1,3-FucT)各亚型及其修饰的糖链唾液酸路易斯糖X(SLeX)在肝癌细胞中的表达情况和相互关系。方法:采用Real-time PCR测定肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721、HuH-7中α1,3-FucT各基因亚型的表达,流式细胞仪测... 详细信息

目的:检测α1,3-岩藻糖基转移酶(α1,3-FucT)各亚型及其修饰的糖链唾液酸路易斯糖X(SLeX)在肝癌细胞中的表达情况和相互关系。方法:采用Real-time PCR测定肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721、HuH-7中α1,3-FucT各基因亚型的表达,流式细胞仪测定细胞表面总SLeX和核心2唾液酸路易糖X(core-2 SLeX)的表达情况。以正常肝细胞系HL-7702作为对照。结果:以正常肝细胞系HL-7702作为对照,肝癌细胞系中FUT6的表达升高是排他性的。各肝癌细胞系中,细胞表面总SLeX的表达无明显区别,但是core-2 SLeX在各细胞系之间区别明显。结论:α1,3-FucT在肝癌细胞系中以FUT6表达为主。不同细胞系表面SLeX抗原表达的差异可能为进一步研究肝癌转移复发提供有益思路。

关键词：肝肿瘤 SLeX 岩藻糖基转移酶

siRNA沉默TGFBR2基因对HepG2细胞增殖的影响

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实用医学杂志 2014年第14期30卷 2200-2203页

作者：程林邓武坚蒋小峰于琨陈德广州医科大学附属第二医院肝胆外科 510260

目的:通过siRNA干扰技术研究TGFBR2基因沉默对HepG2细胞增殖的影响。方法:设计3种针对TGFBR2基因的siRNA片段,瞬时转染进HepG2细胞中;挑选出沉默效率最高的siRNA片段,并将对应的DNA序列插入到pEGFP-N3质粒中,再将质粒转染到HepG2细胞中... 详细信息

目的:通过siRNA干扰技术研究TGFBR2基因沉默对HepG2细胞增殖的影响。方法:设计3种针对TGFBR2基因的siRNA片段,瞬时转染进HepG2细胞中;挑选出沉默效率最高的siRNA片段,并将对应的DNA序列插入到pEGFP-N3质粒中,再将质粒转染到HepG2细胞中,检测TGFBR2蛋白表达水平。用TGF-β1刺激siRNA干扰后的HepG2细胞,对比干扰前后细胞增殖的变化。结果:在3种siRNA片段中,siRNA-1的沉默效率最高。用5 ng/mL的TGF-β1刺激HepG2细胞,与blank组和siRNA-NC组比较,siRNA-1组细胞增殖加快(P<0.05),但仍低于未加TGF-β1因子的正常HepG2细胞(P<0.05)。结论:通过siRNA技术沉默TGFBR2基因后,可减弱TGF-β1信号传导通路对HepG2肝癌细胞株的抑制作用,导致肿瘤细胞的增殖加快。

关键词：癌,干细胞 Ⅱ型转化生长因子-β受体 HepG2细胞 HepG2

肝癌组织中E-selectin、sLeX、sLeA和CD44v6的表达及其临床意义

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广东医学 2011年第7期32卷 891-894页

作者：邓武坚陈德钱世鹍林航胡海李强肖骏琦陈松伟广州医学院第二附属医院普外科广州510260

目的研究原发性肝细胞癌组织中E-selectin、sLeX(sialyl Lewis X)、sLeA(sialyl Lewis A)、CD44v6的表达,探讨其与患者临床特征的关系。方法采用免疫组化法检测78例肝癌组织中E-selectin、sLeX、sLeA、CD44v6的表达情况,收集统计患者的... 详细信息

目的研究原发性肝细胞癌组织中E-selectin、sLeX(sialyl Lewis X)、sLeA(sialyl Lewis A)、CD44v6的表达,探讨其与患者临床特征的关系。方法采用免疫组化法检测78例肝癌组织中E-selectin、sLeX、sLeA、CD44v6的表达情况,收集统计患者的临床特征资料,分别比较在各种临床特征中E-selectin、sLeX、sLeA、CD44v6的表达差异。结果 E-selectin在癌灶边缘血管内皮细胞中的阳性率为70.51%,与病理分级、门脉癌栓、肝外转移、卫星灶、术后3个月内复发相关,与患者生存期、肿瘤大小、血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)水平无明显相关。sLeX和sLeA在肝细胞癌肿瘤细胞中的表达阳性率分别为64.10%和69.23%,与患者生存期、门脉癌栓、肝外转移、卫星灶、术后3个月内复发相关,与病理分级、肿瘤大小、AFP无明显相关。CD44v6在肿瘤细胞中的表达阳性率为62.90%,与患者生存期、病理分级、术后3个月内复发相关,与门脉癌栓、肝外转移、卫星灶、肿瘤大小、AFP无明显相关。结论 E-selectin、sLeX、sLeA、CD44v6与患者的预后、门脉癌栓等临床特征密切相关。

关键词：黏附分子肝细胞癌预后

沐舒坦对长时间气管插管全麻上腹部手术老年人呼吸道的保护作用

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中华老年医学杂志 2013年第5期32卷 516-517页

作者：邓武坚林景泰吴伟京禤文海梁显亮广州医学院第二附属医院普通外科 510260

目的探讨沐舒坦（盐酸氨溴素）对气管插管全麻＞3 h的上腹部手术老年患者呼吸道的保护作用. 方法 88例老年上腹部手术患者随机分为2组,剔除气管导管留置≤3h的病例,治疗组（41例）应用抗生素＋沐舒坦（90 mg,静脉滴注,2次/d,连续7 d）... 详细信息

目的探讨沐舒坦（盐酸氨溴素）对气管插管全麻＞3 h的上腹部手术老年患者呼吸道的保护作用. 方法 88例老年上腹部手术患者随机分为2组,剔除气管导管留置≤3h的病例,治疗组（41例）应用抗生素＋沐舒坦（90 mg,静脉滴注,2次/d,连续7 d）；对照组（39例）应用相同抗生素,不用沐舒坦.比较两组手术前后肺功能,血气分析以及肺部情况的变化. 结果术后第3天开始,治疗组血气分析与同期对照组数据相比差异有统计学意义（P＜0.05）,术后第5天起,两组1s用力呼气容积和1 s用力呼气容积占用力肺活量比值差异有统计学意义（P＜0.05）,肺活量手术前后未见明显变化.治疗组肺部感染2例（4.9％）,肺不张0例；对照组肺部感染者9例（23.1％）,肺不张4例（10.3％）,差异有统计学意义（P＜0.05）. 结论沐舒坦在老年患者接受上腹部手术后对呼吸系统有很好的保护作用,与抗生素合用可达到协同增效的目的.

关键词：外科手术呼吸道感染氨溴素

大隐静脉高位结扎抽剥联合曲张静脉泡沫硬化剂注射及TriVex旋切术治疗下肢静脉曲张

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现代诊断与治疗 2013年第9期24卷 2081-2082页

作者：邓武坚李强颜斐斐林少芒广州医学院第二附属医院广东广州510260 广东省妇幼保健院广东广州511400

回顾性分析我院血管外科2012年2～11月126例下肢静脉曲张患者(156条患肢)临床资料。结果 156条患肢采用大隐静脉高位结扎抽剥联合曲张静脉泡沫硬化剂注射TriVex旋切术均成功治疗,术后下肢明显的曲张畸形静脉均消失。除1例并发下肢深静... 详细信息

回顾性分析我院血管外科2012年2～11月126例下肢静脉曲张患者(156条患肢)临床资料。结果 156条患肢采用大隐静脉高位结扎抽剥联合曲张静脉泡沫硬化剂注射TriVex旋切术均成功治疗,术后下肢明显的曲张畸形静脉均消失。除1例并发下肢深静脉血栓形成外,其余患者无其他严重并发症发生。大隐静脉高位结扎抽剥联合曲张静脉泡沫硬化剂注射TriVex旋切术治疗下肢静脉曲张疗效确切,且术中出血少,术后美观,并发症少,值得临床推广。

关键词：大隐静脉抽剥泡沫硬化疗法 TriVex 下肢静脉曲张

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2例严重十二指肠横断伤的手术治疗

消化外科 2004年第2期3卷 89-89,96页

作者：杨六成黄宝裕邓武坚广东省顺德市容奇医院 528303

治疗十二指肠横断性损伤,手术难度大,作者收治2例,分别采用保留胰头的乳头上方十二指肠切除术、胰十二指肠切除术,效果较好,报告如下.

关键词：十二指肠损伤手术治疗

改良kugel腹股沟疝修补术的近远期临床效果

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河南外科学杂志 2013年第3期19卷 20-21页

作者：邓武坚陈松伟林航洪楚原广州医学院第二附属医院普外科广州510260 广州医学院第四附属医院普外科广州511447

目的总结评价改良kugel腹股沟疝修补术的近远期临床效果。方法采用美国巴德公司的kugel补片对217例237侧腹股沟疝患者施行改良kugel腹股沟疝修补术,观察手术时间及术后并发症,并通过定期门诊或电话随访观察患者术后至少5年是否有复发、... 详细信息

目的总结评价改良kugel腹股沟疝修补术的近远期临床效果。方法采用美国巴德公司的kugel补片对217例237侧腹股沟疝患者施行改良kugel腹股沟疝修补术,观察手术时间及术后并发症,并通过定期门诊或电话随访观察患者术后至少5年是否有复发、睾丸萎缩、髂腹股区域异物感、持续性疼痛感及腹股沟相关神经支配区域的皮肤迟钝感觉。结果每例侧手术时间20～35 min,平均25 min,术后6～18 h下床活动,平均9 h;术后4～9 d恢复正常日常活动,平均7 d;无伤口感染、伤口血肿,出现阴囊血肿,阴囊积液6例;随访至少5年,复发1例,无睾丸萎缩,腹股沟区无异物感、持续性疼痛(VAS>40)及腹股沟神经支配区皮肤感觉迟钝。结论改良kugel微创腹股沟疝修补术具有良好近远期临床效果,且操作简单,不受器械限制,学习曲线短,易于推广。

关键词：改良kugel 腹股沟疝临床效果