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ATG9A对口蹄疫病毒内化和复制的调控作用研究

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ATG9A对口蹄疫病毒内化和复制的调控作用研究

作者：邓欣雨中国农业科学院

学位级别：硕士

口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的一种烈性动物传染病。FMDV复制周期对宿主细胞内膜转运系统有强烈的依赖性。自噬相关蛋白ATG9A具有六次跨膜区域,定位于多种膜结构,在病毒... 详细信息

口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的一种烈性动物传染病。FMDV复制周期对宿主细胞内膜转运系统有强烈的依赖性。自噬相关蛋白ATG9A具有六次跨膜区域,定位于多种膜结构,在病毒感染和复制中发挥着重要的调节作用,但其在FMDV复制过程中作用及机制迄今未见报道。本论文通过研究FMDV与ATG9A的相互调控作用,并进一步探究其作用机制。研究取得以下结果:1.FMDV感染影响ATG9A的定位和表达。透射电镜观察结果显示FMDV感染导致细胞内囊泡数量增多。通过激光共聚焦观察FMDV感染细胞中囊泡转运蛋白ATG9A在细胞内中的分布,发现FMDV感染增强ATG9A在早期内体(Early endosome,EE)、晚期内体(Late endosome,LE)、溶酶体(Lysosome,Lys)的共定位,减弱ATG9A在反式高尔基体(Trans golgi network,TGN)的共定位。此外,通过Western blot和RT-qPCR发现FMDV极显著降低ATG9A核酸和蛋白的表达水平。2.ATG9A调控FMDV的复制周期。通过RT-qPCR和间接免疫荧光(Indirect immunofluorescence,IF)发现ATG9A不影响FMDV的吸附,而显著抑制FMDV内化,且ATG9A与FMDV均以Clathrin-AP2依赖的方式进入BHK-21细胞。进一步探究ATG9A对FMDV复制周期的调控,结果显示ATG9A下调FMDV的复制水平及病毒滴度。3.囊泡蛋白分选35(Vacuolar protein sorting 35,VPS35)通过调控ATG9A的定位和表达影响FMDV复制。通过siRNA抑制VPS35的表达,发现ATG9A与TGN的定位减弱,而与EE、LE、Lys的定位增强,进一步发现VPS35低表达抑制ATG9A mRNA表达水平,说明VPS35调控ATG9A表达并参与ATG9A从内体系统到TGN的转运。进一步探究VPS35介导的ATG9A抑制对FMDV复制的影响,发现低表达VPS35极显著增强FMDV的复制水平。4.FMDV的3C蛋白与ATG9A相互作用并降解ATG9A。通过免疫共沉淀发现ATG9A与FMDV 3C蛋白在细胞内相互作用。共聚焦显微镜观察显示3C蛋白表达细胞中ATG9A分布的变化与FMDV感染细胞中一致,即ATG9A与EE、LE、Lys的共定位增强且与TGN的共定位减弱,说明FMDV通过3C蛋白影响ATG9A的分布。进一步发现3C蛋白以剂量依赖性下调ATG9A蛋白表达。最后通过Western blot检测蛋白降解途径抑制剂对ATG9A的影响,发现溶酶体抑制剂氯喹(Chloroquine,CQ)和凋亡抑制剂Z-VAD-FMK能中和3C对ATG9A的降解作用。综上所述,本研究发现ATG9A抑制FMDV的内化和复制,而FMDV通过3C蛋白与ATG9A相互作用并降解ATG9A,研究结果有利于深入了解FMDV在宿主细胞内的复制机制,为发展新的抗FMDV策略提供参考。

关键词：口蹄疫病毒 ATG9A 内膜转运系统囊泡蛋白分选

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基于遥感时序分析的黑龙江省撂荒地时空监测

基于遥感时序分析的黑龙江省撂荒地时空监测

作者：邓欣雨中国地质大学(北京)

学位级别：硕士

耕地的数量和质量与国家粮食安全息息相关,撂荒作为一个可能导致生态学、经济学、社会学问题的现象,引起了不同领域的学者的广泛关注。量化土地覆盖的时空变化对可持续发展有重要的意义,与以往研究耕地撂荒从社会经济学层面和基于遥感... 详细信息

耕地的数量和质量与国家粮食安全息息相关,撂荒作为一个可能导致生态学、经济学、社会学问题的现象,引起了不同领域的学者的广泛关注。量化土地覆盖的时空变化对可持续发展有重要的意义,与以往研究耕地撂荒从社会经济学层面和基于遥感的双时相图像变化检测分析层面入手不同,本研究以时间轨迹变化检测为核心,分析黑龙江省的耕地撂荒的时空分布,旨在探讨省级尺度下撂荒的驱动因子。论文的主要工作与结果如下:1,不同于目前遥感提取省级土地利用变化的方法,本研究依托于新兴的Google Earth Engine（GEE）遥感云计算平台,对landsat1984-2018年的多光谱影像采用随机森林分类,通过逐年选取样本生成耕地类别的概率图。2,基于任意时间分割的LandTrendr算法提取出耕地概率降低也就是撂荒和休耕的时空特征。提取的撂荒的时空分布与获取的年鉴吻合,结果体现了利用GEE进行大面积撂荒休耕提取的有效性,未来有利于土地复耕计划的实施。3,基于计量经济学中面板回归对驱动因素进行的分析中,得到影响撂荒的主要因素:自然条件的适宜度影响撂荒,自然条件越适宜,撂荒的可能性越大;每个市的第一二三产业产值越高,撂荒的可能性越高。

关键词：撂荒遥感时序分析黑龙江省 Google Earth Engine LandTrendr

活动教学法在高中思想政治课堂教学中的运用策略研究

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活动教学法在高中思想政治课堂教学中的运用策略研究

作者：邓欣雨华中师范大学

学位级别：硕士

《普通高中思想政治课程标准(2017版)》认为高中思想政治课成为一门综合性、活动型学科课程,强调学生的活动体验,鼓励活动设计成为教学设计的重要形式,利用活动来承载学科内容,提倡利用活动进行思想政治课的教学。在思想政治课堂教学中... 详细信息

《普通高中思想政治课程标准(2017版)》认为高中思想政治课成为一门综合性、活动型学科课程,强调学生的活动体验,鼓励活动设计成为教学设计的重要形式,利用活动来承载学科内容,提倡利用活动进行思想政治课的教学。在思想政治课堂教学中采用活动教学法,寓学科知识于活动中,学生在活动中体会思想政治的学科内容,充分体现思想政治学科是活动型的课程。但是思想政治课堂教学中,由于课程本身的实践性和教学环境的制约使得活动教学法在思想政治课堂教学使用中面临一些困难,为了进一步落实活动型学科课程,就需要对思想政治课堂的活动教学法进行研究。本文主要分为三个部分:第一部分是研究活动教学法的概念及其在思想政治课堂教学的意义,主要从四个方面进行研究,一是活动教学法的内涵界定,明确活动、活动教学法和高中思想政治课堂活动教学法的内涵;二是活动教学法的类型;三是活动教学法的特点;四是活动教学法在高中思想政治课堂教学中对学生、教师和思想政治课程的意义。第二部分是探索活动教学法在高中思想政治课堂教学中的运用策略,一是活动教学法的准备策略,在充分理解课程标准、教材和学生的基础上,精心设计思想政治课堂活动,然后编写成活动教学方案;二是活动教学法在高中思想政治课教学中的课堂运用策略,首先要创设活动情景,让学生明确活动的内容,然后进入活动体验阶段,学生进行活动,最后进行课堂交流,培养学生的学科核心素养;三是活动教学法在高中思想政治课教学中的课后反思策略,分别反思教学活动设计和反思教学活动课堂开展。第三部分是提出了活动教学法在高中思想课堂教学中运用应注意的问题,主要有三个方面:一把握正确原则,坚持价值导向;二坚持师生平等,创造活动环境;三重视评价活动,强化活动效果。

关键词：活动教学法高中思想政治课堂教学策略研究

血浆KRT-14对ARDS患者的临床指导意义

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血浆KRT-14对ARDS患者的临床指导意义

作者：邓欣雨重庆医科大学

学位级别：硕士

目的:ARDS是一种严重的ICU常见合并症,致死致残率高,目前还没有发现价值较高的生物学标志物,该研究旨在探讨血浆中的KRT-14表达水平对急型呼吸窘迫综合征（ARDS）患者的临床意义。方法:采用前瞻性观察性临床研究方法,选择临床诊断的52例... 详细信息

目的:ARDS是一种严重的ICU常见合并症,致死致残率高,目前还没有发现价值较高的生物学标志物,该研究旨在探讨血浆中的KRT-14表达水平对急型呼吸窘迫综合征（ARDS）患者的临床意义。方法:采用前瞻性观察性临床研究方法,选择临床诊断的52例ARDS患者,以同期20例非ARDS患者为对照组。于患者入院后24h内记录APACHE II评分和Pa O2/Fi O2,测定血KRT-14、TNF-α、IL-6、PCT、CRP水平,入院后第7天测定随机抽取的18例患者的血浆KRT-14。用单因素和多因素logistic回归分析ARDS患者的死亡危险因素;t检验对比不同预后患者入院后血浆KRT-14水平的变化;ROC曲线评价KRT-14对ARDS的预测价值;t检验比较健康人与患者之间、普通肺炎患者和肺炎合并ARDS患者之间的血浆KRT-14水平。结果:与非ARDS组比较,ARDS组APACHE II评分和病死率增高,Pa O2/Fi O2降低,血浆各血清学指标水平升高。血浆KRT-14、IL-6、CRP随病情的加重升高。血浆KRT-14与Pa O2/Fi O2呈负相关（r=-0.548,P=0.00）,入院24h内血浆KRT-14水平升高（OR=0.007,95%CI=0.000~0.319,P=0.011）是患者死亡的独立危险因素,死亡患者入院后的血浆KRT-14水平明显高于生存患者。KRT-14预测ARDS的ROC曲线下面积为0.97,在最佳临界值为3.52μg/L时,其特异性90%,敏感性96.2%。ARDS患者的血浆KRT-14水平高于普通肺炎患者及健康人。结论:血浆KRT-14是肺损伤程度的重要标志物,可作为临床预测和评估ARDS的辅助指标。

关键词：急性呼吸窘迫综合征角蛋白-14 诊断预后

千米深矿井多断层发育综放工作面防冲技术研究

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内蒙古煤炭经济 2022年第1期 9-11页

作者：邓欣雨柳东明铁法煤业〔集团〕大强煤矿有限责任公司辽宁沈阳110514 中煤科工集团沈阳研究院有限公司辽宁抚顺113122

大强煤矿开采深度大,断层构造发育,主采的1&1-1煤层经鉴定为弱冲击危险性煤层,矿井冲击地压灾害严重制约着矿井安全生产。针对大强煤矿0908工作面煤岩赋存特点,分析了工作面冲击危险主要影响因素和类型,划分了冲击危险区域,从冲击地压... 详细信息

大强煤矿开采深度大,断层构造发育,主采的1&1-1煤层经鉴定为弱冲击危险性煤层,矿井冲击地压灾害严重制约着矿井安全生产。针对大强煤矿0908工作面煤岩赋存特点,分析了工作面冲击危险主要影响因素和类型,划分了冲击危险区域,从冲击地压监测预警、评价得到的冲击危险区域预卸压、超前支护监测分析确定的冲击危险区域解危及超前支护等方面入手,对工作面防冲工作进行了科学的设计和研究,切实保证了工作面回采安全。

关键词：大采深断层发育冲击地压超前支护

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借道ETF上车可转债

理财 2020年第12期 22-23页

作者：邓欣雨博时基金

近期,可转债市场的表现非常疯狂,暴涨、暴跌、熔断、天量成交额、超高换手率频现。Wind数据显示,近期可转债创多项历史纪录,全市场成交额超过6500亿元,多只可转债成交额达到其正股成交额的百倍以上,其中单日可转债成交额便超过1900亿元...

近期,可转债市场的表现非常疯狂,暴涨、暴跌、熔断、天量成交额、超高换手率频现。Wind数据显示,近期可转债创多项历史纪录,全市场成交额超过6500亿元,多只可转债成交额达到其正股成交额的百倍以上,其中单日可转债成交额便超过1900亿元,与当日沪深300成交额相当。甚至多只可转债出现暴涨暴跌行情,频现熔断,还有个券单日换手率超7000%。

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可转债基金再迎投资良机

理财 2020年第9期 46-47页

作者：邓欣雨博时基金

作为专业度较高的复杂衍生工具,投资者跑赢转债指数有一定难度,而可转债基金却弥补了这一遗憾。自2017年可转债信用申购发行以来,可转债二级市场迅速井喷,存量市场从过去的数十只产品扩容到数百只,规模从百亿元扩大到千亿元。

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脱离实际价值的可转债炒作

理财 2020年第6期 46-47页

作者：邓欣雨

今年以来,可转债市场持续受关注,部分个券的成交量和收益率大幅攀升,吸引了大量投资者参与的同时,也引发了个券过度"炒作"的质疑。海外新冠肺炎疫情扩散,为宏观经济走势增加了新的不确定性。而近两年来经济下行导致的信用债市场违约风...

今年以来,可转债市场持续受关注,部分个券的成交量和收益率大幅攀升,吸引了大量投资者参与的同时,也引发了个券过度"炒作"的质疑。海外新冠肺炎疫情扩散,为宏观经济走势增加了新的不确定性。而近两年来经济下行导致的信用债市场违约风险高发,个券的风险事件影响到了基金等参与债券投资的金融产品收益,这种

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胰岛素调控丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-1信号通路对急性肺损伤小鼠肺水肿的清除作用

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中国生物制品学杂志 2023年第7期36卷 805-809,814页

作者：邓欣雨罗晓庆童瑾王导新邓旺重庆医科大学附属第二医院呼吸内科重庆400010

目的探讨胰岛素通过丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-1(serine/threonine protein kinase-1,SGK1)减轻急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠肺水肿的机制。方法将32只雄性成年C3H/HeN小鼠随机分为对照组(仅泵入与治疗组等量的生理盐水)、ALI... 详细信息

目的探讨胰岛素通过丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-1(serine/threonine protein kinase-1,SGK1)减轻急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠肺水肿的机制。方法将32只雄性成年C3H/HeN小鼠随机分为对照组(仅泵入与治疗组等量的生理盐水)、ALI组(建模后持续泵入与治疗组等量的生理盐水)、治疗组[建立ALI模型后,持续经颈静脉泵入胰岛素0.1 U/(kg·h)]和SGK1 siRNA组[建立ALI模型后,持续泵入胰岛素0.1 U/(kg·h)的同时,给予SGK1 siRNA(75μg SGK1 siRNA稀释于100μL生理盐水中)],每组8只。8 h后处死小鼠,进行动脉血气分析(模型建立1 h后),并检测血糖变化情况(0、1、4、8 h);收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),检测其中总蛋白含量,并测定肺泡上皮通透性和肺水含量;观察肺组织病理学改变和肺上皮细胞凋亡情况;Western blot法测定肺泡上皮钠通道(epithelial sodium channel,ENaC)和α_(1)-钠/钾ATP酶(α_(1)-Na^(+),K^(+)-ATPase)蛋白表达以及SGK1磷酸化水平。结果泵入胰岛素后0、1、4、8 h,ALI与治疗组小鼠血糖水平差异均无统计学意义(t分别为1.330 0、0.986 0、0.565 7和0.724 3,P分别为0.204 7、0.340 7、0.580 6和0.480 8)。与ALI组比较,治疗组小鼠动脉血氧分压显著升高(t=6.026,P <0.000 1),BALF蛋白含量、肺泡上皮通透性、肺水含量和肺上皮细胞凋亡显著减少(t分别为7.39、5.286、5.651和3.312,P分别为<0.000 1、0.000 4、0.000 2和0.007 8),肺组织中α-ENaC和α_(1)-Na^(+),K^(+)-ATPase蛋白表达及SGK1磷酸化水平显著升高(t分别为26、18.67和8.547,P分别为<0.000 1、<0.000 1和0.000 1);与治疗组比较,SGK1 siRNA组小鼠BALF蛋白含量、肺泡上皮通透性、肺水含量和肺上皮细胞凋亡显著增加(t分别为5.964、3.449、3.148和3.520,P分别为0.000 2、0.006 2、0.010 4和0.016 9),α-ENaC和α_(1)-Na^(+),K^(+)-ATPase蛋白表达及SGK1磷酸化水平显著降低(t分别为13、9.874和7.741,P分别为<0.000 1、<0.000 1和0.001 5)。结论外源性胰岛素能减轻ALI小鼠的肺水肿,其机制可能是通过SGK1上调α-ENaC和α_(1)-Na^(+),K^(+)-ATPase的表达实现。

关键词：丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-1 急性肺损伤胰岛素上皮钠通道 α_(1)-钠/钾ATP酶

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